Farelerde İletkenlik Balon Kullanımı kalp Basınç Hacim Döngüsü Analizi

Özet

Kardiyak basınç-hacim döngü analizi, sağlam kalpteki kardiyak fonksiyonu ölçmenin en kapsamlı yoludur. İletken kateterler kullanarak kardiyak basınç hacim döngülerini gerçekleştirmek ve analiz etmek için bir teknik açıklıyoruz.

Özet

Kardiyak basınç-hacim döngü analizi, ventriküler sistolik ve diyastolik fonksiyonun yüke bağlı ve yükten bağımsız ölçümlerinin değerlendirilmesinde "altın standart"tır. Ventriküler kontraktilite ve uyum ölçümleri, art yük ve ön yükteki değişikliklere kardiyak yanıtın incelenmesi yoluyla elde edilir. Bu teknikler ilk olarak yaklaşık otuz yıl önce büyük memelilerde ve insanlarda kalp fonksiyonunu ölçmek için geliştirilmiştir. Bu analizlerin fareler gibi küçük memelilere uygulanması, mikrocerrahi tekniklerin optimizasyonu ve iletkenlik kateterlerinin oluşturulması yoluyla gerçekleştirilmiştir. İletkenlik kateterleri, elektriksel iletkenlik ve hacim arasındaki ilişkiden yararlanarak kan havuzunun tahmin edilmesini sağlar. Uygun şekilde uygulandığında, bu teknikler genetik mutant fare modellerinde veya ilaç tedavisi çalışmalarında kardiyak fonksiyonun test edilmesine izin verir. Bu çalışmaların doğruluğu ve kesinliği, aletlerin kalibrasyonuna, hemodinamik ölçümlerin sistematik olarak yürütülmesine ve veri analizlerine dikkat edilmesine bağlıdır. Farelerde iletkenlik kateteri kullanarak basınç-hacim döngü deneyleri yapma yöntemlerini gözden geçireceğiz.

Giriş

Kardiyak basınç volüm analizi kalp fonksiyonu ayrıntılı bilgi sağlar ve fonksiyonel değerlendirme ¹ altın standarttır. Böyle ekokardiyografi veya kardiyak MR gibi görüntüleme teknikleri, fonksiyonel tedbirleri sağlarken, bu önlemlerin yükleme koşulları son derece bağımlıdırlar. Kalp kontraktilite ve gevşeme Yük bağımsız önlemler ön ve son yüklerin aralığında ventriküler basınç ve hacim ilişkisi dinamik ölçümlerini gerektirmektedir. Basınç-hacim ilişkisi Bu anlayış Sagawa ve arkadaşları ^2,3 çığır açan çalışmalarından kaynaklanmaktadır. Bunlar basınç-hacim döngü türetilmiş kontraktilite önlemleri yükleme koşulları ⁴ bağımsız olduğunu ex vivo olarak perfüze köpek kalplerinde gösterdi.

Bu analizlerin in vivo uygulamasında 1980'lerde iletkenliği kateter geliştirilmesi ile mümkün oldu. Ka izin Bu teknik ilerlemess ve arkadaşları insanlarda ^5,6 basınç-volüm halkası analizi gerçekleştirmek için. Geç 1990 ⁷ iletkenlik kateter ve cerrahi tekniklerdeki gelişmeler minyatürleştirilmesi yapılacak genetik ve farmakolojik çalışmalar için izin kemirgen kalp fonksiyonunun analizi mümkün yaptı. Bu peşin basınç-volüm döngü analizi yaygın kullanımı kurşun beri vardır ve memeli kalp fizyolojisi içgörü büyük bir üretti.

Iletkenlik kateter kullanımı ve ondan elde edilen verilerin yorumlanması bir anahtar kavram hacmi ve iletkenlik arasındaki ilişkidir. İletkenlik ters proksimale yerleştirilen elektrotlar, genellikle LV apeks ^8'de, aort kapak altına yerleştirilir ve distalde bir kateter kullanılarak ölçülür gerilime ile ilgilidir. Voltaj veya iletkenlikteki değişimler proksimal uzak elektrot akan akım değişiklikleri ile ölçülür. Kan havuzu katkıda rağmenönemli ölçüde iletkenliğe s, ventriküler duvar katkısı, paralel iletkenlik (V _p) olarak adlandırılan, ölçülen iletkenlik mutlak LV volüm ölçümleri elde etmek için çıkarılır olması gerekir.

Yöntemler bu düzeltme yapmak için, aşağıdaki protokolde ele alınmaktadır, tuzlu kalibrasyonu denir. Baan ve meslektaşları tarafından açıklanan iletkenlik ve hacim arasındaki matematiksel ilişki, bu hacim = 1 / α olduğunu; (ρ L ²⁾ (GG _p), burada α = üniforma alan düzeltme faktörü, ρ = kan direnç, L = elektrotlar arasındaki mesafe, G = iletkenlik ve G _{p =} olmayan kan iletkenliği ^9. Not, farelerde üniforma alan düzeltme faktörü nedeniyle küçük odacık hacimleri ¹⁰ 1.0 yaklaşır. Basınç dönüştürücüler ile birleştiğinde, iletkenlik kateter gerçek zamanlı eşzamanlı basınç ve hacim verileri sağlar.

Kardiyak pressuonlar yükleme koşulları ve kalp hızından bağımsız ventrikül fonksiyonu ölçümü için izin verdiği yeniden hacim analizi, kalp fonksiyonunun diğer tedbirler üzerinde özel avantajlar sunuyor. Sonu sistolik basınç hacim ilişkisi (ESPVR) d P / d t _max -end-diyastolik volüm ilişkisi, maksimal elastisite (E _max) ve askere almalarla inme çalışmaları (PRSW) preload: kontraktilitenin Özgül yük bağımsız kalp endeksleri içerir. Diyastolik fonksiyon bir yük bağımsız önlem diyastol sonu basınç hacim ilişkisi (EDPVR) ¹¹ olduğunu. Aşağıdaki protokol karotis ve apikal yaklaşım her ikisini de kullanarak, kardiyak basınç volüm halkası analizinin yürütülmesini açıklar. Bu çalışmaları gerçekleştirmek için metodoloji detaylı, daha önce ^8,11 olarak tarif edilmiş olmasına rağmen, biz de tuzlu ve küvet kalibrasyon düzeltme de dahil olmak üzere hassas basınç-hacim ölçümleri elde etmek önemli adımlar gözden ve thes görsel gösteri sağlayacake prosedürleri. Bu çalışma için yürütülen hayvanlarla Araştırma protokollerle ve onaylanmış Duke Üniversitesi Tıp Merkezi'nin Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu hayvan refahı düzenlemelerine göre ele alınmıştır.

Protokol

1. iletkenlik Kateter Hazırlıklar ve Basınç Kalibrasyon

1. Hemodinamik kateter modülüne iletkenlik kateteri bağlayın. Elektronik kateter modülünde ayarlanmış önceden ayarlanmış basınç ve hacim kaydederek basınç ve hacim ölçümlerini kalibre. 0 mm Hg ve 25 mm Hg (Şekil 1A) bir izleme kaydedin ve her iki basınç trasların (Şekil 1B ve 1C) ile gerilimleri atayın. Benzer şekilde, 5 RVU ve 25 RVU (Şekil 1D) bir hacim izleme kayıt ve hem hacim trasların (1E ve 1F) ile gerilimleri atayın.
2. Bir cıva sütunu sfingomanometre kullanarak, manuel basınç kalibrasyon ile elektronik basınç kalibrasyonunu onaylayın. 3-yollu ile tansiyon aleti manşet noktasını yerleştirin. Yan bağlantı noktasını kullanarak RT su ile sık sık koroner anjiyoplasti için kullanılan bir 3-port hemostaz valf sistemi, doldurun.
   1. Sıvı dolu hemostaz valfi içine iletkenlik kateterin ucunu yerleştirin ve yavaşça zekâ güvenceyehout kateter dolanması. Tansiyon aleti ile hemostaz valfini bağlayın ve 200 mmHg şişirmek ve 3-yollu stopcock kilitleyin. Ölçülen basınç tansiyon aleti üzerinde şişirilmiş basınç uygun olup olmadığını inceler.
3. Tuzlu su içinde yer kateter çalışma alanı ve ölçü basınç seviyesinde 37 ° C'ye ısıtıldı. Kaydedilen basınçlar sıfır oluncaya kadar basınç kontrolünü ayarlayın.

2. Anestezi / Entübasyon

1. Ketamin / ksilazin bir intraperitoneal olarak ^(-1 80-100 / 10 mg kg) yönetin.
   Not: Alternatif anestezik maddeler kullanılabilir. Anestezik kapsamlı bir liste bu tekniğin ^11,12 önceki incelemelerde verilmektedir. Uygun Anesthetization nazik kuyruk tutam tarafından teyit edilebilir.
2. Bir kez anestezi, ısıtmalı pad üzerinde saç kesme ve yer ile boyun ve göğüs tıraş. 36,5-37,5 ºC fare rektal ısısını korumak. Düşük vücut sıcaklıklarıdepresif kalp hızı neden olacaktır. Kuruluğunu önlemek için gözlere merhem sürün
3. Boyundaki bir orta hat kesi yapmak ve trakea maruz uzakta trakea kasları teşrih. Entübasyon sağlamak için trakea görselleştirilmesi ise, ağız yoluyla bir endotrakeal tüpü yerleştirin ve solunum bağlanın.
4. İşlem sırasında ventilatör üzerinde fare koruyun. Daha önce açıklandığı gibi ¹¹ ayarla ventilatör ayarları hayvan ağırlığına dayalı. Tidal Hacim (ml) 6.2 x (kilogram hayvan ağırlığı) ^1.01 ve Solunum hızı = 53.5 x (kilogram hayvan ağırlığı) ^-0,26 =.

LV odasında İletkenlik Kateterin 3. Yerleştirme

1. Karotis yaklaşımı
   1. Sterilite sağlamak için, steril cerrahi aletlerin iki takım ilk cilt kesi ve torakotomi faaliyet biri için used- biridir. Araçlar tek bir cerrahi seans a sırasında hayvanlar arasında kuru sterilizatör kullanılarak dekontamine edilmelidirnd her cerrahi günün sonunda otoklavlanmıştır.
   2. Cilt Klorheksidin + alkol cilt fırçalayın (% 0.5 klorheksidin /% 70 alkol solüsyonu) üç döngü ile dekontamine edildikten sonra, sternum mandibulanın sağ karotis üzerinde bir kesi yapmak. Sağ karotis maruz doku çevresindeki teşrih ve karotis bitişik çalışan vagus siniri kesti.
   3. Kravat ve güvenli (uzakta göğüs) karotid arter distal ucuna etrafında steril 6-0 ipek sütür yerleştirin. Gevşek, orta dikiş bağlama, ilk sütür (göğüs yakın) karotis proksimal altında iki ek sütür yerleştirin. Yavaşça proksimal sütür çekin ve cilde sıkma yoluyla emniyete alın. Karotis arter Devam etmeden önce hem proksimal ve distalde kenetlenmiş edilmiş olduğundan emin olun.
   4. İlk sütür küçük R. karotid arter kesi, proksimal olun ve göğse doğru uzunlamasına uzanır.
   5. Iletkenlik kateter ucu takın,Daha önce kesikten damar içine, 30 dakika boyunca ılık tuzlu su içinde ıslatılmış ve orta dikiş kullanılarak deriye tespit.
   6. Doğru yerleşimi sağlamak için izleme basınç-hacim döngü izlerken yavaşça, karotis yoluyla sol ventriküle kateter ilerlemek.
      Not: dikdörtgen görünür basınç-volüm döngüler verim gerekir kateterin Optimal yerleştirme (Bakınız Şekil 2). Kateterin geçişine herhangi dirençle karşılaşılırsa, yavaşça geri çekin ve nazik bir basınç ile tekrar ilerlemek. Kateterin Nazik rotasyon sol ventrikül içine yerleştirme ile yardımcı olabilir. Iletkenlik kateter zorlamak ciddi kardiyovasküler komplikasyon veya kateter zarar görmesine neden olabilir.
   7. Kayıt bazal basınç-hacim ~ 10 kateter yerleştirildikten sonra min ve kararlı bir duruma ulaşmak (Şekil 2) döngüler.
2. Apikal Yaklaşım
   1. Bir anestezi ve havalandırmalı fare, bir kesi yapmak from kılıç şeklinde süreci ve diyafram görünür yanal kadar göğüs duvarından kesti.
   2. Diyaframın olsa kesin ve kalbin apeks görselleştirmek.
   3. Yakın elektrot sadece ventrikül içinde kadar, (25-30 G iğne kullanarak) bir iğne bıçak yarası ile sol ventrikül apeksi içine iletkenlik kateter yerleştirin.
   4. Kayıt bazal basınç-hacim ~ 10 kateter yerleştirildikten sonra min ve kararlı bir devlet elde döngüler.

Geçici Aort Occlusion Kullanılması 4. Değişen art yük

1. Geçici aort tıkanıklığı gerçekleştirmek için, göğsün üst kısmında küçük bir yatay bir kesi yapmak ve enine aorta maruz doku çevresindeki teşrih.
2. Enine aort altında 6-0 ipek bitişik harfleri yerleştirin. Basınç-volüm eğrileri başlangıca geri döndü sonra, hafifçe ve yavaşça, bir iğne kelepçesi ile sütür iki ucunu toka 1-2 sn boyunca dikiş yükseltmek ve yavaşça serbest gerginlik.
3. Üç ayrı optimum kayıtları aynı hayvandan yapılana kadar, bu işlemi tekrarlayın.
   Not: Optimal kayıtları en az 5 basınç volüm döngüleri ve sütür (Şekil 3A ve 3C) hakkında gerginlik uygulama sırasında uç sistolik basınçlarında sürekli bir artış olmalıdır.

5. Değişen Preload Geçici İnferior Vena Kava Occlusion Kullanma (IVC)

1. Geçici inferior vena kava tıkanıklığı gerçekleştirmek için, IVC maruz diyaframın altında, kılıç şeklinde bir süreç altında yatay bir kesi yapmak.
2. IVC altında 6-0 ipek bitişik harfleri yerleştirin. Basınç-volüm eğrileri başlangıca geri döndü sonra, bir iğne kelepçesi ile sütür iki ucunu toka; ve yavaşça 1-2 saniye boyunca dikiş yükseltmek ve yavaşça serbest gerginlik. IVC oklüzyonu da çubukla uçlu pamuk kullanarak basınç hassas bir uygulama tarafından gerçekleştirilebilmektedir.
3. Üç ayrı optimum kayıtlar m kadar bu işlemi tekrarlayınAynı hayvandan ade.
   Not: Optimal kayıtları en az 5 basınç volüm döngüleri ve dikiş üzerindeki gerginlik uygulama sırasında sol ventrikül diyastol sonu basınçları sürekli bir düşüş olması gerekir (Şekil 4A ve 4B).

6. Tuzlu Kalibrasyon

1. Çalışmanın sonunda, bir paralel iletkenlik (V _p) değeri juguler ven yoluyla hayvana hipertonik salin (% 15) bir 10 ul bolus enjekte edilerek elde olması (Şekil 5A ve 5B) olabilir.
   Not: Bu, bolus basıncında herhangi bir değişiklik yapılmadan hacminde belirgin bir artışa neden olur. Bu tür bir hacim belirgin değişiklik nedeniyle hacim gerçek bir artış kan havuzu iletkenlik yerine bir değişiklik sonucudur. Hipertonik salin bir negatif inotropik etkiye sahip olduğu ¹³ dP / dt _max geçici bir düşüş, görülebilir. Hesaplanan V _p boyunca basınç volüm analizi yazılımı içine girilebilirKüvet kalibrasyon parametreleri ile ve mikrolitre RVUs dönüştürmek için.

7. Cuvette Kalibrasyon

1. Bir küvet kalibrasyonu gerçekleştirmek için, ° C 37 ° C'de ısıtıldı, bir ısıtma yastığı ya da bir su banyosu üzerinde, üretici tarafından tedarik edilen bilinen çaplar oyuklarına sahip bir küvet kullanır. Hemodinamik değerlendirmeler geçiren farelerin taze sıcak heparinize kan ilk 4-5 delik doldurun.
   Not: Bir küvet kalibrasyon fare kanı kullanılarak sol ventrikül kan havuzunun doğru değerlendirilmesi için izin verir ve mikrolitre RVUs gelen hacimli veri dönüşüm sağlar.
2. Tüm elektrotlar batık kadar, ilk kuyunun içine iletkenlik kateter yerleştirin. Yavaşça değişen RVUs üretecek olan kuyuda kateter hareket ettirin.
3. RVUs hacmi kanalında iletkenlik değişiklikleri kaydedin. Kalibrasyon için, en yüksek RVU seçin.
   Not: deliklerin hacim ya volum için bir denklem kullanılarak) 1 ile hesaplanabiliryarıçapı küvet oyuk ve uzunluk olduğu bir silindirin, e Dahili iki algılama elektrotlar veya 2), üretici talimatlarına kontrol arasındaki uzunluğuna bağlıdır. Iletkenlik çıkış mikrolitre ¹¹ içine RVUs veri dönüştüren bir kalibrasyon ifadesinin bilinen hacmi ile korele edilebilir.

8. Ötenazi

1. Protokolün sonunda, fareler anestezi altında iken servikal dislokasyon ile ötenazi.
2. Sağlamak amacıyla ölüm, uygulanan servikal dislokasyon sahip fareler ötenazi ikincil bir yöntem geçmesi gerekir. Biz anestezi altında deney için kalp dokusunun hasat veya iki taraflı torakotomi ile, anestezi altında kansız kullanın.

9. Veri Analizi kullanılarak Basınç Hacim Döngüsü Analizi Yazılımı

1. Tuzlu Kalibrasyon V _p hesaplayın
   1. Seçin basınç ve VOLUBeni hipertonik salin ejeksiyon sırasında elde edilen döngüler (Şekil 5A ve 5B)
   2. İhracat basınç hacim analiz yazılımı döngüler. Tuzlu kalibrasyon için seçeneği seçin (Şekil 5C)
   3. Hesaplanan V _p değeri (Şekil 5D) kaydedin.
      Not: V _p değeri tuzlu kalibrasyona sonu sistolik hacim vs 1) End-diyastolik hacim kesişimi belirlenmesi ve 2) sonu diyastolik hacim = Sonu sistolik hacim çizgisi ile hesaplanır. Bu satırların kesiştiği basıncı volüm analiz yazılımı tarafından hesaplanan V _s sağlar.
2. Hacmine iletkenlik girin (RVU) hacim kanal seçenekleri ilişki (Şekil 1F)
3. Temel Basınç Hacim döngü ilişkisini ölçmek
   1. Kararlı durum elde edildikten sonra basınç ve hacim kanalları 8-10 kardiyak döngülerini seçin (Şekil 2A) ve yumuşak analize ihracatware. 5-6 ekspiryum sonu döngüler (Şekil 2B) tespit
   2. Paralel iletkenlik düzeltmek için V _p değerini kullanın. "Kararlı Durum" seçeneğini seçin ve bir hemodinamik özet tablo oluşturmak (Şekil 2C)
4. Aort Konstrüksiyon sırasında Tedbir Basınç Hacim döngü İlişkisi
   1. Diyastol sonu basınçları (Şekil 3A) ve analiz yazılımları ihracat artışı öncesinde aort daralma karşılık basınç ve hacim kanalları 8-10 kalp döngüleri seçin. 5-6 ekspiryum sonu döngüler (Şekil 3C) tespit
   2. Sonu Sistolik Basınç Hacim İlişkisi hesaplar Seç "Kasılma" analizi (Şekil 3B), (ESPVR)
5. VKİ Konstrüksiyon sırasında Tedbir Basınç Hacim döngü İlişkisi
   1. (Figür IVC daralma karşılık basınç ve hacim kanalları 8-10 kardiyak döngüleri seçinanaliz yazılımı, e 4A) ve ihracat. 5-6 ekspiryum sonu döngüler (Şekil 4B) tespit
   2. "Kasılma" analizi Preload askere almalarla İnme Çalışma hesaplar (Şekil 3B), (PRSW) (Şekil 4C) seçin, EDV (Şekil 4D), yanı sıra ESPVR ve sonu diyastolik basınç hacim ilişkisi vs dt Maksimum dP / (Şekil 4E)

Sonuçlar

Basınç-hacim döngü yöntemi, ilaç çalışmaları ¹⁶ uygulanan genetik olarak tadil edilmiş fareler ^14,15 veya farelerde kalp fonksiyonu ölçmek için kullanılabilir. Temsili basınç hacim döngüler ß-arrestin etkisini araştıran daha önce yayınlanmış çalışmaları ¹⁶ sağlanmaktadır TRV120023, AT1R ligand önyargılı. TRV120023 in vivo kardiyak fonksiyonları etkiler olup olmadığını sınamak için, basınç-volüm döngü analizi konvansiyonel ve yeni anjiotensin reseptör blokörleri alan vah...

Tartışma

Biz kardiyak kontraktilite ve rahatlama hem de kapsamlı analizler elde etmek, farelerde bir iletkenlik kateter kullanılarak basınç-hacim döngü analizi perfoming için bir yöntem açıklanmaktadır. Suga, Sagawa ve arkadaşları basınç-volüm kardiyak kontraktilite önlemleri özellikle ESPVR eğimini veya sistol sonu elastans (E _es) ve E _max tanımlamak için döngüler kullanılır. Hacminin (P / V) basınç oranı ile tanımlanır elastisite, sistol süresi boyunca değişir. Her sistol sırasında, anlık elastisite kalp ...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
AnaSed (ksilazin)	Lloyd Laboratories	NADA no. 139-236	Anestezik
Ketaset (ketamin)	Pfizer	440842	Anestezik
VIP3000	Matrx Medical Inc.		Anestezi makinesi
Vantilatör	Harvard Aparatı	Model 683	Cerrahi Ekipman
Boru kiti	Harvard Aparatı	72-1049	Cerrahi Ekipman
Homeotermik Battaniye ve nbsp;	Kaz A.Ş.	5628	Cerrahi
Ekipman Stereo mikroskop	Carl Zeiss Optik A.Ş.	Stemi 2000	Cerrahi Ekipman
Aydınlatıcı	Cole– Parmer	41720	Cerrahi Ekipman
Dumont no. 55 Dumostar Forseps	Güzel Bilim Araçları A.Ş	11295-51	Cerrahi Aletler
Graefe forseps, kavisli	Güzel Bilim Araçları A.Ş	11052-10	Cerrahi Aletler
Moria MC31 forseps	Güzel Bilim Araçları A.Ş	11370-31	Cerrahi Aletler
Mayo makas & nbsp;	Güzel Bilim Araçları A.Ş	14512-15	Cerrahi Aletler
İris makası	Güzel Bilim Araçları A.Ş	14041-10	Cerrahi Aletler
Halsey iğne tutucu	Güzel Bilim Araçları A.Ş	12501-13	Cerrahi Aletler
Olsen– Hegar iğne tutucu	Güzel Bilim Araçları A.Ş	12002-12	Cerrahi Aletler
yaylı makas	Güzel Bilim Araçları A.Ş	15610-08	Cerrahi Aletler
tek kullanımlık alt pedler	Kendall/Tyco Healthcare	1038	Cerrahi Malzemeler
Steril gazlı bez süngerler, steril	Dukal	62208	Cerrahi Malzemeler
Pamuk uçlu aplikatörler, steril ve nbsp;	Solon	368	Cerrahi
Malzemeler Cerrahi sütür,  ipek, 6-0	DemeTECH	FT-639-1	Cerrahi Malzemeler
1 cc İnsülin Şırıngaları	Becton Dickenson	329412	Cerrahi Malzemeler
Access 9 Hemostaz Valf Merit	Medikal	MAP111	Hemodinamik ekipman
Tansiyon aleti	Baumanometer	320	Hemodinamik ekipman
Millar PV sistemi MPVS-300/400 veya MPVS Ultra (kalibrasyon küveti içerir)	ADInstruments Inc		Hemodinamik ekipman
1.4F iletkenlik kateteri ve nbsp;	ADInstruments Inc	SPR-839	Hemodinamik ekipman
PowerLab 4/30 Chart Pro	ile ADInstruments Inc.	ML866/P	Hemodinamik yazılım
hayvan kesme makinesi	Wahl	8787-450A	Çeşitli
İntradermik boru PE-10	Becton Dickenson	427401
İntradermik boru PE-50	Becton Dickenson	427411	Çeşitli
İğne çeşitleri (18, 25 ve 30 gauge; Thomas Scientific)			Çeşitli
0.9 (wt / vol) sodyum klorür enjeksiyonu, USP)	Hospira	NDC no. 0409-4888-50	Çeşitli
Cerrahi bant
Kateter temizliği için çeşitli Alconox (Alconox Inc.)	ADInstruments Inc.		çeşitli