Bir Biyoaktif, PCL-temelli "Kendinden uydurma" Shape Memory Polymer İskele imalatı

Summary

Osteoiletkenlik ve biyoaktivite sergilerken kraniyo-maksillofasiyal (CMF) kemik defektlerine sığabilen iskeleler ilgi çekicidir. Bu protokol, erimiş bir tuz şablonu ve bir biyoaktif polidopamin kaplamasının uygulanması kullanan bir solvent döküm partikül liçi (SCPL) yöntemi kullanılarak polikaprolakton diakrilat (PCL-DA) bazlı bir şekil hafızalı iskelenin hazırlanmasını açıklar.

Abstract

Doku mühendisliği, kritik büyüklükteki kraniyo-maksillofasiyal (CMF) kemik defektlerinin tedavisi için alternatif bir strateji olarak araştırılmıştır. Bu yaklaşımın başarısı için gerekli olan, düzensiz bir kusura uygun şekilde sığabilen ve aynı zamanda gerekli biyolojik olarak parçalanabilirliğe, gözenekler arası bağlantıya ve biyoaktiviteye sahip olan bir iskeledir. Şekil geri kazanım ve sabitlik özelliklerinin doğası gereği, şekil hafızalı polimer (SMP) iskeleleri "kendi kendine oturan" kusur elde edebilir. Bu şekilde, ılık tuzlu suya (~ 60 ºC) maruz kaldıktan sonra, SMP iskelesi dövülebilir hale gelecek ve düzensiz bir kusura elle bastırılmasına izin verecektir. Sonraki soğutma (~ 37 ºC), iskeleyi kusur içindeki nispeten sert durumuna geri döndürecektir. Bu gereksinimleri karşılamak için bu protokol, bir solvent döküm partikül liçi (SCPL) yöntemi kullanılarak biyolojik olarak parçalanabilen polikaprolakton diakrilatın (PCL-DA) fotokimyasal kürlenmesi yoluyla hazırlanan SMP iskelelerinin hazırlanmasını açıklar. Gözenek ara bağlantısını sağlamak için kaynaşmış bir tuz şablonu kullanılır. Biyoaktiviteyi gerçekleştirmek için, iskele gözenek duvarlarının yüzeyine bir polidopamin kaplama uygulanır. Kendi kendine oturan ve şekil hafıza davranışlarının, gözeneklerin birbirine bağlanması ve in vitro biyoaktivitenin karakterizasyonu da açıklanmaktadır.

Introduction

Şu anda cranio-maksillofasiyal (CMF) kemik defekti tedavilerin altın standardını kabul hasat otolog greft nakli karmaşık aşılama işlemleri, donör saha morbiditesi ve sınırlı sayıda ^{1 ile} engellenmektedir. Belirli bir zorluk şekillendirme ve osseointegrasyon elde etmek ve greft emilmesini önlemek için defekt içine sıkıca sert otogreft tamir ediyor. Doku mühendisliği bir otograftlama alternatif strateji ve sentetik kemik ikame (örneğin kemik çimentosu) ^2,3 olarak incelenmiştir. Doku mühendisliği yaklaşımının başarısı için kritik özelliklerin belirli bir set ile bir iskele olduğunu. İlk olarak, kemik entegrasyonunu elde etmek için, skafold, bitişik kemik dokusunun ⁴ ile yakın bir temasın oluşturulması gerekir. Iskele aynı zamanda hücre göçü, besin difüzyon ve neotissue birikim ^4,5 izin, osteokondüktif olmalıdır. Bu davranış genellikle biyolojik olarak parçalanabilir SCA ile elde edilirffolds oldukça birbirine bağlı gözenek morfolojisi sergileyen. Kemik dokusu ⁵ çevreleyen ile entegrasyon ve bağ teşvik edecek şekilde Son olarak, iskele biyoaktif olmalıdır.

Burada, bu özelliklere sahip olan, bir doku mühendisliği iskelesi hazırlamak için bir protokol mevcut. Önemlisi, bu iskele de şekil bellekli davranışı ⁶ nedeniyle düzensiz CMF kusurları içine "self-fit" yeteneği sergiler. Thermoresponsive Şekil belleği olan polimerler (BBOP) ^7,8 ısıya maruz kalma üzerine şekil değişimine maruz bilinmektedir. BBOPler kalıcı şekil ve geçici şeklini korumak ve kalıcı şekil kurtarmak "geçiş segmentleri" belirleyen "netpoints" (yani kimyasal veya fiziksel çapraz bağlarının) oluşur. Sviçleme bölümleri, ya cam geçiş _(T g) karşılık gelen bir ısı geçiş sıcaklığına (T _trans) sergileyen veya polimerin geçiş _(Tm) eritin. AsSonuç olarak, BBOPler ardışık T trans geçici şekli sabit T> T _trans geçici bir şekil, deforme ve T> T _trans kalıcı şekil geri kazanılabilir. ⁶ aşağıdaki gibi Böylece, bir SMP skafold CMF kusur içinde "kendi kendine bağlantı" elde edebiliriz. Temastan sonra tuzlu su (T> T _trans), bir SMP iskele şekil kurtarma kusur sınırına iskele genişleme teşvik ile, el-preslenmiş düzensiz bir defekt içine olmak için jenerik hazırlanan silindirik iskele izin, dövülebilir olacaktı ısınmak için. (T trans) Soğuduktan sonra, iskele şekil fixity defekti içinde yeni geçici şeklini muhafaza ile nispeten daha sert hale dönecekti. Bu protokol, bir SMP skafold biyolojik olarak parçalanabilir bir polimer, doku rejenerasyonu ve diğer biyomedikal uygulamalar ^9-11 için yoğun çalışmalar, polikaprolakton (PCL) hazırlanır. Şekil hafızası için, inciPCL e _Tm T _trans olarak görev yapar ve PCL ¹² arasında molekül ağırlığına bağlı olarak, 43 ve 60 ° C arasında değişir. Bu protokolde, iskele T _trans (yani T _m) 56.6 ± 0.3 ºC ^6.

Osteoconductivity elde etmek için bir protokol, çözücü döküm parçacık-liç (SCPL) yöntemine ^6,13,14 dayanan son derece birbirlerine bağlı gözenekleri PCL tabanlı SMP iskeleleri yapmak için geliştirilmiştir. Polikaprolakton diakrilat (PCL-DA) (M _{n =} ~ 10.000 g / mol), hızlı, fotokimyasal çapraz bağlanmasını izin vermek için kullanılmıştır ve tuz şablonu içinde solvent döküm izin vermek için diklorometan (DCM) içinde çözülmüştür. Fotokimyasal tedavi ve çözücü buharlaştırma sonrasında, tuz şablonu su içine damıtılması yoluyla uzaklaştırılmıştır. Ortalama tuz boyutu iskele gözenek boyutu düzenler. Önemli olarak, tuz şablonu önce gözenek interconnectivi elde etmek için döküm çözücü madde su ile kaynaştırıldıty.

Biyoaktivite delik duvarlarının ⁶ üzerine polydopamine kaplamanın in situ oluşumu ile SMP iskele kazandırılan edildi. Biyoaktivite genellikle cam ya da cam-seramik dolgu ¹⁵ dahil edilerek iskeleler sokulur. Bununla birlikte, bu istenmeyen kırılgan mekanik özellikler ortaya çıkarabilir. Dopamin alt tabakalar ^16-19 çeşitli yapışkan bir ince polydopamine tabakası oluşturmak için gösterilmiştir. Bu protokol, SMP skafold, tüm gözenekli duvar yüzeyleri ⁶ polydopamine bir nanothick kaplama oluşturmak için dopamin hafif bazik çözelti (pH = 8.5) tabi tutuldu. Geliştirilmiş hücre yapışması yüzey hidrofilikliğini arttırmak ve yayma ek olarak, polydopamine yapay vücut sıvısı (SBF) ^18,20,21 maruziyet üzerine hidroksiapatit oluşumu (HAP) açısından biyolojik olarak aktif olduğu gösterilmiştir. Son bir aşamada, kaplanmış skafold 85 ° C (T> T _trans) wh tedaviye ısıya maruz kaldığıIch yoğunlaşma scaffold yol açar. Isıl işlem, daha önce PCL kristal alanlar yakın yakınlık ¹⁴ yeniden düzenlenmesi, belki nedeniyle iskele şekil hafıza davranışı için önemli olduğu belirtilmişti.

Biz ayrıca, düzensiz bir model defekti içinde kendini uydurma davranışı karakterize açısından suş kontrollü halkalı-termal, mekanik sıkıştırma testleri bellek davranışı şekil (yani şekil kurtarma ve dinginlik şekil) yöntemlerini tarif morfoloji gözenek ve in vitro biyoetkinlikte. Iskele özelliklerini terzi Stratejiler de sunulmaktadır.

Protocol

1. sentezleme PCL-DA makromer

1. Açilleme reaksiyonu çalıştırın.
   1. Teflon kaplı manyetik karıştırma çubuğu ile donatılmış bir 250 ml'lik yuvarlak tabanlı bir şişeye PCL-diol _(Mn = ~ 10.000 g / mol) 20 g tartılır.
   2. DCM içinde PCL-diol içinde çözülür.
      1. Şişe 120 mLlof DCM ekle (yoğunluk = 0.17 g / ml).
      2. Ayrıca, DCM buharlaşmasını önler basınç artışını önlemek için şişenin boynuna gevşek bir lastik septum yerleştirin.
      3. ~ 250 rpm'de 30 dakika için karıştırın ~ Çözelti, polimerin çözünmesi için.
   3. Çözeltisine 4-dimetilaminopiridin (DMAP) ~ 6.6 mg eklenir ve karıştırılarak çözülür.
   4. Balonun boyun sıkıca lastik septum yerleştirin. Çözelti karıştırmaya devam etmesine izin.
   5. Lastik septum ile, yavaşça, bir pozitif azot basıncı ₂ iğne giriş, bir de açık bir iğne kullanılarak ~ 3 dakika _süreyle N2 ile tasfiye balonbir çıkış olarak.
   6. N ₂ giriş ve çıkışını sökün.
   7. Lastik septum içeri sokulan bir iğne ile donatılmış bir cam şırınga ile trietilamin 0.56 ml (4.0 mmol) (N Et ₃₎ damla damla ekleyin.
   8. Lastik septum içeri sokulan bir iğne ile donatılmış bir cam şırınga yoluyla, akriloil klorür damla damla 0,65 ml (8,0 mmol) ilave edilir.
   9. Şişeye _N2 girişi geri dönün ve içeriği ~ pozitif _N2 basıncı altında 30 dakika karışmaya bırakın.
   10. 55 ºC yağ banyosu önceden ısıtın.
   11. Ayrılan ~ 30 dakika sonra, _N2 girişi kaldırılır ve bir kondenser ile septum değiştirin.
   12. Önceden ısıtılmış bir yağ banyosu içine şişesi daldırın.
   13. Şişenin içindekiler, 20 saat boyunca karıştırılmaktadır.
   14. Ayrılan 20 saat sonra, yağ banyosundan çıkarın ve balon içeriği oda sıcaklığına soğumaya bırakın.
   15. Bir dönen buharlaştıncı kullanarak şişeye DCM çözücüyü çıkarın.
2. PHam PCL-DA ürünü urify.
   1. Şişeye etil asetat ~ 135 ml ekleyin ve ham PCL-DA çözülür.
   2. Yerçekimi temiz bir 250 ml'lik yuvarlak dipli bir şişeye filtre kağıdından çözelti filtre edin. (Not: Çözüm kolayca geçerek değil, filtre kağıdı üzerinde kalınlaştırmak böylece, dikkatli bir ısıtma tabancası ile hafif ısı uygulayın.).
   3. Bir dönen buharlaştıncı kullanarak, şişeden çözücü etil asetatın ayrılması.
   4. Şişeye, ~ DCM 140 ml ilave edilir ve ham PCL-DA çözülür.
   5. 500 ml'lik bir ayırma hunisine aktarın.
   6. Huni için, 2 M potasyum _karbonat (3 K ₂ CO) 13.5 ml ekleyin.
   7. Huni Cap. Yavaşça vana aracılığıyla basınç serbest bırakmak için özen huni tersini hafifçe bir veya iki kez dönen iki katmanları karıştırın. 3 kez tekrarlayın.
   8. Parafilm bir tabaka ile Kapağı yerine yerleştirin ve kanşım O / N (~ 12 saat) ayırmak için izin verir.
   9. Dip toplayın, ya da250 ml'lik bir Erlenmeyer şişesi içine Ganiç'in katmanı.
   10. Şişeye susuz magnezyum sülfat ~ 5 g (MgSO ₄₎ ekleyin ve yavaşça girdap.
   11. Yerçekimi yuvarlak tabanlı bir şişeye, nitel filtre kağıdı ile ve temiz 250 ml karışımı filtre.
   12. Bir dönen buharlaştıncı kullanarak şişeye DCM çözücüyü çıkarın.
   13. Yüksek vakum altında kuru kalıntı DCM kaldırın. (Not: PCL-DA ışıktan uzak muhafaza edilmelidir.)
   14. ^1H NMR ^22,23 ile Açilleme onaylayın.

SMP Scaffold hazırlanması 2. (Şekil 1)

1. Erimiş tuz şablonu hazırlayın.
   1. Çapı ~ 460 ± 70 um sodyum klorid (NaCl) partikülleri elde etmek için bir 425 um elek kullanın. (Not: Ortalama partikül büyüklüğü ImageJ yazılımı ile taramalı elektron mikroskobu [SEM] görüntülerden teyit edilebilir.) ¹⁴
   2. 3 ml bir cam şişe (J = 12,9 mm) için, daha önce elenmiş NaCI 1.8 g ekleyin.
   3. Yavaş yavaş şişeye dört kısım, ağırlık olarak% 7.5 (tuz ağırlığına dayalı olarak) DI su (0,146 g) içerisinde, ekleyin. Suyun her bir porsiyonunun eklenmesinden sonra metal bir spatula ile karıştırın.
   4. , Şişeyi Cap dokuda sarın ve bir santrifüj tüpüne dik yerleştirin. 3220 x g'de 15 dakika boyunca santrifüj.
   5. Kapağını çıkarın ve hava-kuru O / N (~ 12 saat) izin verin.
2. Yeni bir cam şişe içinde, DCM ml'si başına PCL-DA 0.15 g birleştirerek bir "makromer çözüm" hazırlanması. (Not:., Bir iskele için, ~ çözeltinin 1 mi hazırlanmalıdır) kap ve yaklaşık 1 dakika boyunca vorteks mikserde yüksek hızda çözelti karıştırılır.
3. Yeni 3 ml bir cam şişe içinde, ağırlık olarak% 10 2,2-dimetoksi-2-fenil asetofenon 1-vinil-2-pirolidinon (DMP) (NVP) dayalı bir "foto-başlatıcı bir çözüm" hazırlanması. NVP 1 ml DMP 0.115 g 'ını. (Işığı engellemek için) alüminyum folyo ile sarın, Cap ve vorteks mikserde yüksek hızda çözüm karıştırmak: (180 ul gereklidir ~, tek iskele için. Not)~ 1 dakika karıştırıldı. (Not: Gelişmiş hazırlanmış, çözelti soğutulmuş ve ışıktan korunmalıdır.)
4. Alüminyum folyo ile (kapak hariç) makromer çözeltisi içeren vial Wrap (ışık bloke etmek için) ve pipet ile 15 hacim% ekleme foto-başlatıcı çözeltisi (makromer solüsyonunun toplam miktarına dayalı olarak). Cap ve yaklaşık 1 dakika boyunca vorteks mikserde yüksek hızda çözelti karıştırılır.
5. Alüminyum folyo ile (kap hariç) sigortalı tuz şablonu içeren flakon sarın (ışığı engellemek için) ve pipet aracılığıyla önceden hazırlanmış makromeri / photoinitiator çözüm eklemek (~ 0.6 ml veya şablon kadar tamamen kaplıdır).
6. , Şişeyi Cap dokuda sarın ve bir santrifüj tüpüne dik yerleştirin. Şablonun boyunca makromeri çözümü dağıtmak için 1260 xg'de 10 dakika boyunca santrifüj.
7. Alüminyum folyo çıkarın şişe kapağını açmak ve 3 dakika boyunca UV ışığı (365 nm, 25 W) maruz kalmaktadır. Hava kuru O / N.
8. "Tuz içeren scaffol kaldırpuanlama ve cam şişe üst çatlatma sonra cımbız ile şişeden d ".
9. (: 1 hacim: hacim 1) 400 ml'lik bir cam kaba, ~ çözücü, su / etanol 200 ml hazırlanır.
10. Günlük solvent değişiklikler ile 4 gün için çözücü, su / etanol içine daldırılmış iskele koruyun.
11. Solvent ve hava kuru O / N iskele çıkarın.

3. SMP Scaffold için Polydopamine Kaplama Uygulanması (Şekil 1)

1. Teflon kaplı karıştırma çubuğu ile donatılmış 400 ml'lik bir cam kaba, bir dopamin hidroklorür çözeltisi ~ 200 ml (10 mM Tris tamponu içinde 2 mg / ml, pH = 8,5, 25 ° C) hazırlanır. ~ 150 rpm'de karıştırılır.
2. Yarım mesafe iskelesi ile iskele içine ~; bir tek kullanımlık iğne (gösterge = 20 uzunluk = 40 mm) yerleştirin. Iğne hub etrafında bir tel sarın.
3. Beher kenarına tel tespit tarafından karıştırma dopamin çözeltisi içine (çözüm yüzeyi üzerinde iğne hub) ile iskele Batmak.
4. Iğne hub içine şırınga yerleştirerek ve iskele dışına havayı çekmek için bunu kullanarak iskele degas. (Not: daha fazla hava çıkarılabilir ve çözüm tamamen iskele sızmış zaman gazdan arındırma tamamlandı.)
5. 16 st için karıştırmadan dopamin solüsyonunda daldırılmış iskele koruyun.
6. Çözeltiden iskele çıkarın ve iğneyi çıkartın. 24 saat boyunca oda sıcaklığında bir vakumlu fırın içinde DI su ve kuru ile durulayın.
7. 1 saat 85 ºC fırında iskele yerleştirin.
8. Iskele oda sıcaklığına soğumasını bekleyin. Nihai silindirik iskele ~ 6 mm çap x ~ 5 mm yüksekliğinde olacak.

4. Değerlendirme "Kendinden uydurma" Davranış

1. Kalınlığı ~ 5 mm sert plastik bir levha kullanarak "düzensiz CMF kusur modeli" hazırlayın. Şekil 2A'da gösterildiği gibi, ~ 6 mm'den biraz daha az bir ortalama çapa sahip plastik levha içindeki bir boşluğu oluşturmak için bir matkap kullanın.
2. Ab olarakEaker, ~ 60 ° C bir sıcaklığa kadar (tuzlu su klinik kullanımı temsil eden), ısı DI suyun.
3. Beher ~ 60 ºC su içine iskele yerleştirin. Su tüm alanları açığa, su yüzeyinin altında iskele itmek için cımbız kullanın. ~ 2 dakika boyunca veya iskele fark (Şekil 2B) yumuşayıncaya kadar devam edin.
4. Beher gelen iskele çıkarın ve hemen modeli defekt içine (elle) tuşuna basın.
5. RT (~ 5-10 dk) (Şekil 2C) soğumasını bekleyin.
6. Yeni sabit Geçici bir şekil ve nispeten daha bükülmez durumuna (Şekil 2D) dönüşünü gözlemlemek için bir kusur çıkar.

5. Test Şekil Hafıza Davranışı

1. Dinamik mekanik analizciyi kullanarak (DMA, burada kullanıldığı şekilde, örneğin bir TA Instruments Q800), iki döngü (N) şekil sabitliği _(Rf) belirlemek ve üzerinde bir platform üzerinde bir gerilme kontrollü siklik termal, mekanik sıkıştırma testiKurtarma (R _r) (Şekil 3) şekil.
   1. 5 dakika boyunca 60 ° C (T _yüksek) için dengelenmesi.
   2. % 50 / dakika maksimum gerilme (ε _m =% 50) sıkıştırır.
   3. Ε _{m (5} dk) tutun.
   4. 25 ° C (T _düşük) soğutulur ve 10 dakika Geçici bir şekil vermenin düzeltmek boyunca muhafaza edilir.
   5. Yükü alın.
   6. _(U ε) stressiz durumda nihai gerginlik ölçün.
   7. 60 ° C (T _yüksek) kadar yeniden ısıtın ve 10 dk kalıcı şekil kurtarmak için korumak.
   8. Kazanılan zorlanma (ε _p) ölçün.
   9. Hala (T _yüksek) 60 ° C'de, ^2. döngüsü başlatmak (N = 2) ^1. döngüden sonra kurtarıldı yüksekliği (N = 1)% 50 iskele sıkıştırarak iken.
   10. 5.1 Tekrar.3-5.1.8, N = 2.
   11. Aşağıdaki denklemler kullanılarak N = 1 ve 2 R ve R _{f r} hesaplayın:
       _Rf (N) = _[u ε (N) / ε _m] R _r (n) = [ε _{m -} ε _p (N)] / [ε _{m -} ε _p (N-1)]

6. görselleştirme Gözenek Boyutu ve Gözenek Bağlanırlığı bir

1. Tarama elektron mikroskobu kullanılarak (SEM; örneğin burada kullanıldığı şekliyle, bir FEI Quanta SEM), gözenek boyutu gözlemlemek ve birleştiricisi gözenek.
   1. Cımbız kullanarak, SMP iskele tutun 1 dakika boyunca _sıvı N 2 daldırın.
   2. Temiz bir jilet ile iskele ortasında boyunca sıvı _N2 ve kırık çıkarın.
   3. Karbon bandı kullanarak, numune üzerine SMP iskele yarım birini yapıştırmayınKırık yüzeyi yukarı bakacak şekilde sahneye.
   4. Au-Pt (~ 4 nm) ile ceket sputter.
   5. 10-15 kV (Şekil 4A) tavsiye edilen bir ivmelendirici gerilim SEM görüntüsünü yakalar.

In vitro biyoaktivitesi 7. Test

1. 50 ml'lik bir santrifüj tüpü içine, ~ 1X SBF ^24, 30 ilave edin.
2. Orijinal, silindirik kalıplı kalıcı şekil bir iskele edinin. Temiz bir bıçak kullanarak (dairesel kenar boyunca) devre, iskele kesin.
3. Hazırlanan santrifüj tüpüne ve kapak içine ayrı bir iskele yarısını yerleştirin.
4. Herhangi bir SBF değişikliklerle, statik koşullar altında bir su banyosu içinde 37 ° C 'de muhafaza tüpü.
5. 14 gün sonra, 24 saat süre ile SBF ve kuru hava ile ilgili iskele çıkarın.
6. Karbon bandı kullanarak, kırık yüzeyi yukarı bakacak şekilde örnek sahneye iskele yapıştırın.
7. Au-Pt (~ 4 nm) ile ceket sputter.
8. Bir yeniden at SEM görüntü yakalamak10-15 kV (Şekil 4B) hızlanan gerilimi övdü.

Results

Ortaya çıkan PCL tabanlı SMP iskele kendini saran bir model, CMF defekt içine (Şekil 2) yeteneğine sahiptir. Kısa süreli sonra tuzlu su (~ 60 ° C) ısıtmak için, silindirik bir skafold skafold elle bastırılması ve model kusur içinde genişler sağlayan yumuşatır. Oda sıcaklığına soğutulduktan sonra, skafold kusur çıkarıldıktan sonra tutulan yeni geçici şekline sokuluşu sabitlenir.

Bir SMP skafoldun şekil belleği davranışı şekil sabitliğine _(Rf) ve şekli geri (R _...

Discussion

Bu protokol, kendi kendine uyan davranışı bir polydopamine kaplı, PCL-bazlı yapı iskelesinin hazırlanmasını, hem de Osteoindüktivite kullanılabilirlik ve biyolojik aktivite tarif düzensiz CMF kemik defektlerinin tedavisinde yararlı hale getirir. Protokol Yönleri çeşitli iskele özelliklerini değiştirmek için değiştirilebilir.

Protokol UV kür izin vermek için bir PCL-diol Açilleme ile başlar. Bildirilen örnekte, PCL-diol _M n ~ 10.000 g / mol'dür. Bununla birlikte, uygun bir şeki...

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Polikaprolakton-diol (Mn ~ 10.000 g/mol)	Sigma-Aldrich	440752
Diklorometan (DCM)	Sigma-Aldrich	D65100	4A moleküler elekler üzerinde kurutulmuş
4-dimetilaminopiridin (DMAP)	Sigma-Aldrich	D5640
Trietilamin (Et3N)	Sigma-Aldrich	T0886
Akriloil klorür	Sigma-Aldrich	A24109
Etil asetat	Sigma-Aldrich	319902
Potasyum karbonat (K2CO3)	Sigma-Aldrich	209619
Susuz magnezyum sülfat (MgSO4)	Fisher	M65
Sodyum klorür (NaCl)	Sigma-Aldrich	S9888
2,2-dimetoksi-2-fenil asetofenon (DMP)	Sigma-Aldrich	196118
1-vinil-2-pirolidinon (NVP)	Sigma-Aldrich	V3409
Etanol	Sigma-Aldrich	459844
Dopamin hidroklorür	Sigma-Aldrich	H8502
Tris tamponu (2mol / L)	Fisher	BP1759	10 mM konsantrasyonda kullanılır, pH = 8.5
Elek	VWR	47729-972
UV Transilluminatör (365 nm, 25 W)	UVP	95-0426-02
Santrifüj	Eppendorf	5810 R
Dinamik Mekanik Analiz Cihazı (DMA)	TA Instruments	Q800
Yüksek Çözünürlüklü Püskürtmeli Kaplayıcı	Cressington	208HR
Taramalı Elektron Mikroskobu (SEM)	FEI	Quanta 600