Bu el yazması kapsül enfarktüs bir modelleme tekniği anlatılmaktadır. Burada ön ameliyat hedef haritalama sonra ışık düşük yoğunluğu ile modifiye Fototrombotik tekniği kullanılmıştır. Bu tekniği kullanarak, biz kalıcı motorlu bozukluğu olan bir sınırlı kapsül infarkt modeli yarattı.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir FOTOTROMBOTİK Tekniği sınırlı Kapsül Enfarktüs Modelleme
Bu makalede
Özet
Özet
Beyaz cevher inme prevalansındaki son artış, bu alanda özel araştırmalar yapılmasını gerektirmektedir. Bununla birlikte, beyaz cevher inmesi için uygun bir hayvan modelinin olmaması, araştırma araştırmalarını engellemiştir. Burada, komşu gri madde yapılarına verilen zararı en aza indiren sınırlı bir kapsül enfarktüsü oluşturmak için yeni bir yöntem açıklıyoruz. İç kapsül içindeki ön ekstremite alanının somatotopik organizasyonunu belirlemek için adeno ilişkili virüs-yeşil floresan proteini (AAV-GFP) ile ameliyat öncesi nöral izleme kullandık. Gri ve beyaz maddenin farklı optik özelliklerine dayalı olarak ışık yoğunluğunun ayarlanması, gri maddenin nispi korunması ile beyaz maddenin seçici olarak yok edilmesine katkıda bulunur. Optik-nöral arayüzün doğru konumlandırılması, iç kapsüldeki tüm ön ayak alanının tahrip edilmesini sağlar, bu da belirgin ve kalıcı bir motor açığa yol açar. Bu nedenle, bu teknik, kalıcı bir motor defisit ile yüksek oranda tekrarlanabilir kapsüler enfarktüs lezyonları üretir. Model, yalnızca davranışsal, devre ve hücresel düzeylerde beyaz cevher inmesini (WMS) incelemek için değil, aynı zamanda yeni terapötik ve rehabilite edici müdahalelerin geliştirilmesi için kullanışlılığını değerlendirmek için de yardımcı olacaktır.
Giriş
Yakın zamana kadar, "gri madde inme (GMS) modeller" münhasıran inme patofizyolojisi anlamak ve yeni tedavilerin geliştirilmesine rehberlik etmek için kullanılmıştır. Tüm inmelerin 1,2% 25'ini - Ancak, 15 oluşturan yaşlı bireylerde, subkortikal beyaz cevher etkileyen inme giderek artan yaygınlık olmuştur. Çeşitli çalışmalar beyaz cevher inme (WMS) modelleri kullandık az sayıda çalışma vardır oysa GMS modellerini kullanarak ilgili inme yapılmıştır. kemirgenlerde beyaz cevher insan veya primatlarda beyaz cevher daha azdır. Sonuç olarak, seçici bir şekilde beyaz bir madde 3 hedef bölge ulaşmak ve yok etmek için daha zordur. Ayrıca, hiçbir etkin ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm işlemler Bilim ve Teknoloji (GIST) Gwangju Enstitüsü kurumsal kurallarına göre yapılmıştır ve tüm işlemler GIST Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından kabul edildi.
1. Ön lezyon Adımlar
- İç Kapsül içinde ön ayakları Alan tanımlanması AAV-GFP kullanarak
- kurumsal ve ulusal kurallara uygun olarak - (13 hafta ~ 400 gr, 11) Ev Sprague Dawley sıçanları işlemek ve.
- Uygun bir sterilizatör (Buhar veya Plazma sterilizatör) kullanarak tüm cerrahi aletleri ve elektrotları sterilize edin. Sterilizasyon, 30 dakika, kuru 30 dakika ayarı olarak 121 ° C 'de buharlı sterilizatör kullanımı.
- kas içi....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Burada sunulan yöntem kalıcı bir motorlu açığı olan bir sınırlı kapsül infarktı oluşturmak için tasarlanmıştır. Nedenle, doğru bir şekilde, operasyon öncesi aşamada, iç kapsül içinde hedef belirlemek için önemlidir. internal kapsül piramidal liflerin somatotopik haritalama bugüne kadar yerleşmiş edilmemiştir. Doğru iç kapsül içinde hedef belirlemek için, ön ayakları alanı tasvir edilmelidir. Motor korteks ön ayakları alanına AAV-GFP bir enjeksiyon, iç kapsül (Şekil 1) pi.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Burada sunulan kapsül infarkt modeli ön ayakları işlevlerinde belirgin ve kalıcı motor yetersizliği ile hedeflenen lezyona göstermektedir. Subkortikal kapsül inme Önceki Modeller motor bozukluk ve hızlı bir iyileşme süreci 6,8,9 yetersiz derecede göstermiştir. Bu anlamda, bu model uzun dönem fonksiyonel bozukluğu sergileyen klinik kapsül infarkt olgusu benzer.
Bir sınırlı kapsül enfarktüs modelinin geliştirilmesi en kritik adımlar şunlardır: 1) doğru internal kapsül içinde işlevin.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma Sağlık Sistemleri Mühendisliği Enstitüsü (IMSE) GIST gelen GIST-Caltech İşbirlikçi Fonu (K04592) bir hibe ile ve Bilim, bilgi ve iletişim teknolojileri ve gelecek Planlama Bakanlığı tarafından finanse Kore NMK vasıtasıyla Temel Bilimler Araştırma Programı tarafından desteklenen (NRF-2013R1A2A2A01067890).
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| DC Sıcaklık kontrolörü | WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC. | ||
| Dijital Stereotaksik Aletler | STOELTING CO. | 51900 | |
| Elektrik Stimülatörü | CyberMedic Corp. | EMGFES 2000 | |
| Epoksi | Hassas Elyaf Ürünleri, INC. | PFP-353ND1 | Karışım Oranı: < br / > 10 (A): 1 (B-sertleştirici) ağırlıkça Kürleme Programı: 1 dk @150 &derece; C 2 ~ 5 dk @120 &derece; C 5 ~ 10 dk @100 &derece; C 15 ~ 30 dk @80 &derece; C |
| Fiber Optik Yazıcı | THORLABS, INC | S90R | |
| Fiber patch kablo | KORE OPTRON Corp. | Dış çap: 3 mm < br / > & Oslash; 200 ve mikro; m 0.39 NA FC/PC-FC/PC 1 m | |
| Lazer Güç Kaynağı | CHANGCHUN YENİ ENDÜSTRİLER OPTOELEKTRONİK TEKNOLOJİSİ CO., LTD. | MGL-FN-532nm-200mW-14010196 | |
| Sıkma halkası ve nbsp; | DAWOOTECH CO., LTD. | Uzunluk: 19 mm < br / > İç çap: 3 mm < br / > Dış çap: 3,8 mm < br / > Malzeme: SUS | |
| Micro4-mikro şırınga pompası kontrolörü | WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC | 95100 | |
| Optik Güç Ölçer | THOLABS, INC | PM100D | |
| Elmas alıştırma (parlatma) levhası | THORLABS, INC | LF3D | Kum: 3 ve mikro; m |
| Elmas alıştırma (parlatma) levhası | THORLABS, INC | LF6D | Grit: 6 & m |
| Gül Bengal | SIGMA-ALDRICH CO., LLC. | 330000 | |
| Kalem uçlu spinal anestezi iğnesi (Spinal iğne) | B.BRAUN MELSUNGEN AG | 4502027 | Boyut: 27 G Uzunluk: 88 mm İğne: 0,40 mm |
| Su geçirmez zımpara kağıdı | DEERFOS CO., LTD | CC261 | Kum: 1.000 ve mikro; m |
| Nanofil 10 &mikro; l şırınga | DÜNYA HASSAS ALETLER, INC | NANOFIL | |
| Nanofil 33 & nbsp; G BVLD iğnesi | WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC | NF33BV-2 | |
| AAV-GFP virüsü | UNC Vektör Çekirdeği | AAV2-CamKIIa-eYFP | 2 x 1012 virüs molekülleri/ml |
| Anti-Yeşil Floresan Protein, Tavşan IgG fraksiyonu | Life Technologies, INC | A11122 | birincil antikoru (1:200) |
| Keçi Anti-Tavşan IgG (H + L) | Life Technologies, INC | A11034 | ikincil antikor (1:500) |
| Ceftezole | GUJU Pharma CO.,LTD. | A27802741 | % 0.1, 1 ml |
| Lidokain hidroklorür enjeksiyonu | JEIL PHARMACEUTICAL CO., LTD. | A04900271 | %2, 1 ml |
| El Aleti Matkap | Seshin | ||
| Dijital optik güç ve enerji ölçer | THORLABS, INC | PM100D | |
| Ketoprofen | UNIBIOTech |
Kaynaklar
- Roger, V. L., et al. Heart disease and stroke statistics--2012 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 125, 2-220 (2012).
- Debette, S., Markus, H. S. The clinical im....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
