Yazarlar, influenza A virüslerini tespit etmek ve izole etmek için domuz burun mendillerini toplamak için bir protokol sunuyor.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Domuz influenza A virüs Algılama ve İzolasyonu için Burun Mendil
Bu makalede
Özet
Özet
Influenza A virüs hızla domuz toplumlarda gelişir ve yeni suşlar ortaya çıkmaya devam ediyor, çünkü domuz influenza A virüsleri için Gözetleme insan ve hayvan sağlığına için çok önemlidir. Domuz onlara çıkması ve yeni influenza A virüsünün bakımı suşları için önemli ana yapım influenza A virüsünün farklı soy tarafından enfekte edilmesi mümkün bulunmaktadır. Böyle ticari domuz çiftlikleri, tarım fuarları ve canlı hayvan pazarlarında gibi çeşitli ortamlarda domuz Örnekleme halen IAV suşları dolaşan kapsamlı bir görünüm sağlamak için önemlidir. Bu domuzların fiziksel kısıtlama gerektirdiğinden güncel altın standart ante-mortem örnekleme tekniği (burun bezlerden yani toplama) emek yoğundur. Burun mendiller hayvanın hiçbir kısıtlama minimal ile domuz burnu genelinde kumaş parçasını ovuşturarak barındırır. Burun prosedürü gerçekleştirmek için basit ve profesyonel veteriner veya hayvan taşıma eğitimi ile personel gerektirmez silin. Wnazal bezlerden biraz daha az duyarlı hile, virüs algılama ve izolasyon oranları nazal düşük stres örnekleme yöntemleri gerektiğinde bireysel domuz örnekleme için bir alternatif mendil yapmak için yeterli. Işlem protokolü uygulanabilir bir nazal toplamak için gerekli adımlar tek bir domuz silin özetliyor.
Giriş
Grip A virüsleri (IAV) evcil kuşlar, domuz ve insan da dahil olmak üzere pek çok türde, solunum hastalıklarına neden olur. Nedeniyle oluşabilir parçalı IAV genom hızlı viral evrim reassortment ve yeni IAV suşları sık sık ortaya çıkar. Domuz yaygın Kuzey Amerika domuz (H1N1, H1N2, H3N2) arasında dolaşan IAV üç ana alt tipi bulunmamaktadır. 1 birden çok ana türden iAVS yeniden yapılanması için bir karıştırma kabı olarak hizmet edebilen bir türün, ancak insan çoklu IAV tanıtımlar sahip Bu alt tipleri içinde yaygın IAV çeşitliliğe yol açtı. domuz bulaşmasını iAVS 2 Hızlı evrimi, insan, kuş ve domuz virüslerinin gen segmentleri içeren üçlü reas....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Aşağıdaki veri toplanmasında kullanılan tüm domuz Ohio State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu koruma altına alınmıştır (hayvan kullanım protokol numarası 2009A0134-R1).
1. Viral Transport Orta Hazırlanması ve Numune Toplama Flakon
- Saf su 900 ml beyin kalp infüzyon 37 g eklenir ve ısıtma 70 ° C, tamamen tozu çözmek için ise, bir karıştırma çubuğu ve manyetik bir karıştırıcı ile iyice karıştırın.
- 15 dakika boyunca 121 ° C'de suyu otoklava. Suyu kadar tezgah üstünde Serin oda sıcaklığını ulaşır. 4 ° C 'de bir gece buzdolabında gerekirse.
- Bir manyetik karıştırma çubuğu, Penisilin G S....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu yöntemin başarılı kullanımı RRT-PCR herhangi bir çevresel enkaz numune alma sırasında aldı RNA ekstraksiyonu ve RRT-PCR sırasında iç kontrolün kullanımı ile birlikte, gösteri örnekleri PCR inhibitörleri içermiyordu, bu sonuçlar verir. Örnek aşılamadan sonra, virüs izolasyon kuyuları örnekten görülebilir çevre enkaz arındırılmış olmalıdır. PCR viral nükleik asit, ille canlı virüs tespit, çünkü PCR genellikle virüs izolasyonu daha yüksek IAV pozitif oranı getirir anlayışı ile RRT-PCR sonuçları ve virüs izolasyonu sonuç.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Polyester uçlu nasal swapları ile domuz örnekleri toplanması IAV gözetim yürütülmesi yararlı olduğu kanıtlanmıştır; Ancak, nazal sürüntü prosedürünün kullanılması kısıtlama için tuzak gerekli kullanımı nedeniyle gözetim çabalarını engellemektedir. Burun mendil numune toplama sırasında insanlar ve domuzlar üzerinde stresi en aza indirmek için mevcut domuz örnekleme teknikleri bir arıtma temsil etmektedir. Yöntem için geliştirilen ve sergi domuz ayarlarında valide edilmiş olsa da domuzlarda IAV ve ölüm öncesi algılama ger.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma, kısmen Grip Araştırma ve Sürveyans Mükemmeliyet Merkezleri (CEIRS), Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü, Ulusal Sağlık Enstitüleri, Sağlık ve İnsan Hizmetleri Departmanı'ndan Sözleşme No. kapsamında federal fonlarla finanse edilmiştir. HHSN272201400006C.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| BBL Beyin Kalp İnfüzyonu | Becton, Dickinson ve Şirketi | 211059 | |
| Penisilin G Sodyum Tuzu | MP Biyomedikal, LLC | 021194537 | 1500 u / mg |
| Streptomisin Sülfat | AMRESCO LLC | 0382 | |
| Gentamisin Çözeltisi | Mediatech, Inc. | 30-005-CR | 50 mg/ml |
| Amfoterisin B Çözeltisi | Fisher | S 24 25 | 250 ug/ml |
| Kanamisin Sülfat | Teknova | K2105 | 5000 ug/ml |
| TPP Hızlı Filtermax Sistemi | TPP Tekno Plastik Ürünler AG | 99150 | |
| Nalgen Tanı Şişeleri | Thermo Scientific | 342002-9025 | HDPE, beyaz PP kapaklı |
| Dermacea Gazlı Bez Sünger, 8 katlı | Covidien | 441211 | 5,08 cm ve kez; 5,08 cm (2 inç ve kez; 2 inç) |
| Nitril Muayene Eldivenleri | Emniyet Seçimi | 19-170-010 (AD) |
Kaynaklar
- Ma, W., Kahn, R. E., Richt, J. A. The pig as a mixing vessel for influenza viruses: Human and veterinary implications. J. Mol. Genet. Med. 3 (1), 158-166 (2008).
- Nelson, M. I., Vincent, A. L. Reverse zoonosis of influenza to swine: ne....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Daha fazla makale keşfet
