Method Article

Koku kılavuzluğunda Davranış Yüksek çözünürlüklü Niceleme Drosophila melanogaster Flywalk Paradigma

DOI:

10.3791/53394

⸱

December 11th, 2015

 ,  , 
1Department of Evolutionary Neuroethology, Max Planck Institute for Chemical Ecology

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Otomatik izleme sistemi Flywalk Drosophila melanogaster koku güdümlü davranış yüksek çözünürlüklü ölçümü için kullanılır.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kendi doğal ortamında, sirke gibi böcekler kimyasal olarak farklı koku büyük miktarda ile bombardıman edilir Drosophila melanogaster uçmak. Hatta daha da karmaşıklaştıran, böcek sinir sistemi tarafından tespit edilen kokular genellikle kimin kompozisyon ve konsantrasyon oranları değişebilir tek bileşikler ancak bunların karışımları değildir. Bu sinir sistemi tarafından değerlendirilmesi gerekir farklı koku uyaranlara neredeyse sonsuz miktarda yol açar.

Bir koku uyarıcı yönleri sinek tarafından değerlendirmesini belirleyen anlamak için, verimli birçok koku ve koku karışımları doğru koku güdümlü davranışlarını incelemek için arzu edilen bir durumdur. Doğrudan nöronal aktivitenin davranışı ilişkilendirmek için, davranış karşılaştırılabilir bir zaman dilimi içinde ve nörofizyolojik deneylerde olduğu gibi aynı uyarıcı koşullarında sayısal olmalıdır. Bununla birlikte, Drosophila neuroethology çok anda kullanılan koku biyo-specia yerine vardırverimlilik doğru veya çözünürlük doğru ya lized.

Flywalk, otomatik koku teslimat ve izleme sistemi, verimlilik ve çözünürlük arasında köprüdür. Bu koku, paket serbest yürüme sinek uyarılmış ve Hayvanların dinamik davranış etkilerini belirlemek için tam olarak ne zaman belirlenmesini sağlar.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Herhangi neuroethological araştırmanın herkesin ortak hedefi tek nöronlar veya nöronal devrelerin faaliyet devletler ve bir organizmanın davranışı arasında nedensel bir ilişki kurmaktır. Bu amaç nöronal aktivitenin elde etmek ve davranışları aynı uyarıcı koşullarında izlenmeli ve bu uyarıcı koşulları ideal olanların mantıklı gelişti inceleme altına sinir sistemi benzer olmalıdır. Davranışsal biyoanalizlere gelince, özellikle bu gereklilikler tarihsel Drosophila oldukça zorlu kanıtlanmıştır koku neuroethology melanogaster.

Kaynağından çıkan kez koku tüyleri hızla hava hareketi koku dağılımı 1 temel belirleyicis....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Flywalk inşaat ve teknik detaylar yerde 26 (MK elde edilebilir, bu kurmak daha fazla bilgi kurulması herhangi bir sorun durumunda) tarif edilmiştir. Burada güvenilir sonuçlar elde etmek için yardımcı olacak paradigmanın işleme hakkında ayrıntılı talimatlar odaklanmak.

1. Fly Taşıma

  1. 12 saat ışık: 23-25 ​​° C ve% 70 bağıl nemde karanlık rejim Arka 12 saat altında gıda ortamı 27 orta yoğunluklu kültürlerde düşük uçar. Bu amaçla, 20-30 yeni ortaya çıkan yetişkin, daha sonra 1 hafta boyunca büyük bir gıda flakon yeniden yetişkin sinekler atmak ve ortaya yavrular için beklemek uçar izin verir.
  2. 3....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sinekler sabit bir hızda cam tüpler yoluyla koku bakliyat ve koku darbe seyahatleri arasında kendi cam tüpler içinde serbestçe dağıtmak için izin Çünkü sinekler stimülasyon sırasında x-pozisyonuna bağlı farklı zamanlarda koku karşılaşıyoruz. Bunun bir sonucu olarak, etil asetat çekici 10 -3 seyreltme 500 milisaniye darbe uyandırdığı rüzgara karşı yörüngelerin başlangıç ​​ve bitiş noktalarının yakın oturmuş sinekler kişilerce kıyasla cam tüpler rüzgaraltı ucunda sinekler için yaklaşık 1 saniye gecikme bulunmak.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Flywalk sistemi ilk bakışta oldukça sofistike görünse de, bir kez kurmak ve onu çalıştıran kullanımı kolay ve çok sağlam sonuçlar üretir. Biyo-deney ile üretilen sonuçların tutarlılığını stres için burada gösterilen temsili sonuçlar neredeyse 2 yıl, yeni bir takip yazılımı ve ışık kaynağı kullanılarak modifiye kurulum ile bir önceki çalışmada 29 de gösterilen bazı sonuçları sonra elde edildi söylenebilir. Bununla birlikte, çekici cevaplardır - Daha önce kendi dinamiği ile ilgili yayınlanan çok benzer - biraz .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını var olduğunu beyan ederiz.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz talepleri için izleme yazılımı özelleştirmek için Electricidade Em po (electricidadeempo.net) teknik yardım için Daniel Veit ve Pedro Gouveia teşekkür ederiz. Biz de filme sürecinde destek için Tom Retzke teşekkür ederiz. Bu çalışma Max Planck Kurumu tarafından desteklenmiştir.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Flywalk kurulumu Özeldetaylar istek üzerine temin edilebilir
Stimulan cihazıÖzeldetaylar istek üzerine temin edilebilir
LED kümesiÖzeldetaylar istek üzerine mevcuttur
HD Pro Webcam C920Logitech, Lozan, İsviçre
2 Bilgisayar
Flywalk Reloaded v1.0 yazılımıElectricidade Em Pó (electricidadeempo.net)
Labview 11.0 yazılımıNational Instruments, Austin, TX
Standart sinek yemiÖzel
Standart sinek şişeleriGreiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Almanya
Standart sinek şişeleriGreiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Almanya
aspiratörÖzel
mineral yağSigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)
kokularıSigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)
200 ve mikro; l PCR reaksiyon tüpleriBiozym Scientific GmbH, Oldendorf, Almanya

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Murlis, J., Elkinton, J. S., Cardé, R. T. Odor plumes and how insects use them. Annu. Rev. Entomol. 37, 505-532 (1992).
  2. Kennedy, J. S., Marsh, D. Pheromone-regulated anemotaxis in flying moths. Science. 184 (4140), 999-1001 (1974).
  3. Budick, S. A., Dickinson, M. H.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Drosophila melanogasterOdor guided BehaviorFlywalk ParadigmOlfactory StimuliBehavioral TrackingAutomated Odor DeliveryHigh throughput SystemGlass Tube TrackingAirflow MonitoringOdorant Mixtures

Related Articles