Yöntem makalesi

Elektrosprey İyonizasyon kütle spektrometresi ile Dicysteinyl tetrapeptidlerle ile Merkür (II) kompleksinin Bir Çalışma

DOI:

10.3791/53536

⸱

8 Ocak 2016

 , 
1Department of Chemistry and Biochemistry, University of North Carolina at Greensboro, 2Department of Chemistry, Winston-Salem State University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cıva(II)'nin disisteinil tetrapeptitlere farklı nispi oranlarında oluşan komplekslerin elektrosprey iyonizasyon orbitrap kütle spektrometresi ile karakterizasyonu sunulmuştur.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada, cıva(II)'nin disisteinil tetrapeptide farklı nispi oranlarında oluşan komplekslerin elektrosprey iyonizasyon orbitrap kütle spektrometresi ile karakterizasyonu için bir yöntemi değerlendirdik. Bu strateji, diğer tekniklerin yanı sıra kütle spektrometresi kullanılarak tripeptitleri içeren cıva-disisteinil komplekslerinin önceki başarılı karakterizasyonuna dayanmaktadır. Cıva(II) klorür ve bir disisteinil tetrapeptit, değişen stokiyometrik oranlarda gazı alınmış tamponlu bir ortamda inkübe edildi. Oluşan kompleksler daha sonra hibrit bir doğrusal iyon ve orbi-tuzak kütle analizöründen oluşan bir elektrosprey kütle spektrometresi üzerinde analiz edildi. Elektrosprey iyonizasyon kütle spektrometresi (ESI-MS) spektrumları pozitif modda elde edildi ve gözlemlenen zirveler daha sonra farklı cıva izotopik dağılım modelleri ve ilişkili monoizotopik tepe için analiz edildi. Bu çalışma, belirtilen elektrosprey iyonizasyon koşulları altında oluşan komplekslerde cıva ve peptitin doğru bir stokiyometrisinin, farklı cıva izotopik dağılım modellerine dayalı olarak yüksek çözünürlüklü ESI MS kullanılarak belirlenebileceğini göstermektedir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cıva zehirlenmesi1'in şelasyon tedavisi için reçete edilen mevcut klinik ilaçlar, cıva iyonlarının bağlanmasından ve sekestresyonundan sorumlu olan tiyol grup(lar)ını içerir2,3. Bununla birlikte, çalışmalar, bu küçük tiyol bileşiklerinin [dimerkaptosüksinik asit (DMSA) ve dimerkaptopropan-sülfonik asit (DMPS)] cıva şelasyon tedavisi4-6 için optimal olmadığını göstermiştir. Bu nedenle, cıva şelasyonu için tiyol bileşiklerinin rasyonel ilaç tasarımını geliştirmek için cıvanın tiyollerle ilişkisini ve karmaşık oluşum eğilimlerini anlamaya ihtiyaç vardır. Son zamanlarda, dithiol gruplarına sahip n-alkil ve aril disistenil tripeptitlerin, cıva(II)'nin koordinasyon bölgelerini 1:1 cıva(II):p eptid ve 1:2 cıva(II):(peptid)2 kompleksleri oluşturmak üzere barındırmak için etkili "çift çapa" görevi görebileceğini bildirdik7. Ek olarak, artan sisteinil kalıntılarının karmaşık tip oluşumlarüzerindeki etkisini inceledik 8. Bu çalışmada, cıva(II)'nin, sisteinil kalıntılarının iki amino asit kalıntısı ile ayrıldığı iki disisteinil tetrapeptit ile ilişkisini araştırıyoruz. Cıva için yardımcı bağlanma gruplarının etkisini değerlendirmek için, araya giren amino asitler ya iki glisin (ikame edilmemiş) kalıntısı ya da iki glutamik asit (gama-karboksilat) kalıntısıdır.

Sisteinil peptidin cıva(II) ile reaksiyonu, sisteinil tiyol gruplarının disülfid bağları oluşturmak için oksidasyonunu önleyecek koşulları gerektirir9. Ayrıca, cıva(II)'nin çeşitli cıva-peptit kompleksleri oluşturmak için sisteinil peptitlerle birleşmesi, reaksiyon karışımındaki7,8 cıva(II): peptitin başlangıç oranına bağlıdır. Bu reaksiyon karışımlarında oluşan cıva-peptit komplekslerinin türleri, metal iyonları ve peptitler10-14 arasındaki tür etkileşimlerini belirlemek için hassas bir analitik araç olan yumuşak iyonizasyon kütle spektroskopisi ile analiz edilebilir. Buna göre, belirli bir elektrosprey iyonizasyon koşulu altında oluşturulan çeşitli merskürlenmiş peptit eklentilerinin bir profilini sağlayacaktır. Burada, oksidasyonu en aza indirmek için argon ile kaplanmış gazdan arındırılmış amonyum format tampon çözeltisinde sisteinil peptitlerin ve cıva(II) klorür çözeltilerinin nasıl hazırlanabileceğini göstereceğiz. Cıva(II)'nın değişen mol eşdeğerlerini disisteinil tetrapeptitlerle reaksiyona sokarak, cıva(II):p eptidin başlangıç oranının oluşan kompleks türleri üzerinde nasıl bir etkiye sahip olduğunu göstereceğiz. Ayrıca, elektrosprey iyonizasyon (ESI) kütle spektrometrisinin, oluşan komplekslerde cıvadan pepete doğru bir stokiyometri sağlamak için bir karakterizasyon aracı olarak nasıl kullanılabileceğini göstereceğiz. İlgili video protokolü, cıva komplekslerinin hazırlanması için deneysel koşulları, belirtilen elektrosprey iyonizasyon koşulları altında reaksiyon karışımlarını analiz etme prosedürünü ve cıva(II)-disisteinil tetrapeptit komplekslerinin stokiyometrilerinin karakterizasyonunu gösterecektir.. Farklı izotopik formlarda bulunan metal iyonlarının oluşturduğu çeşitli kompleksleri analiz etmek için ESI orbitrap kütle spektrometresini kullanmakla ilgilenenlere yardımcı olmayı amaçlamaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Not: Kullanmadan önce ilgili tüm malzeme güvenlik bilgi formlarını (MSDS) danışın. Cıva klorür toksik bir kimyasaldır. Onu ve ilgili tüm çözümleri teslim sırasında Kişisel koruyucu ekipmanlar (eldivenler, emniyet gözlükleri ve laboratuvar önlüğü) giyilmelidir. Ağır metaller için belirlenen açıkça etiketlenmiş kimyasal atık şişelerde çözümler atınız.

1. Hazırlık 5 mM gazı alınmış Amonyum format tamponu, pH 7.5

  1. HPLC dereceli su 450 ml amonyum format tamponu 0,1576 g çözündürülür. 1 M formik asit ve 7.5 1 M amonyum hidroksit ile, yukarıda çözeltinin pH ayarlayın. 500 ml'lik bir ölçülü balona bu çözüm aktarın ve 5 mM amonyum format çözeltisinin yapılması için bir kalibrasyon hattına HPLC su ilave edilir.
  2. Argon ile 10 dakika karıştırıldı ve tasfiye için bir vakum sistemi ile 5 mM amonyum format tamponu gaz çıkışına. İki kez tekrarlayın ve argon altında mağaza çözüm. Kullanılacağı gün, bir 0.2 mikron filtre befor ile tampon çözeltisi filtree kullanımı.

Civa (II) klorür çözeltisi 2. Hazırlık

  1. 0,2375 g cıva (II) klorür tartılır. 0.035 M cıva (II) klorid solüsyonu elde etmek için 5 mM amonyum format tamponu, 25 ml içinde çözülür.
  2. Bir 7.5 x 10 -4 M çözelti oluşturmak için 9,785 ml 5 mM amonyum format tampon 0.214 mi, 0.035 M cıva (II) klorür solüsyonu ekleyin. Argon gazı ile 7.5 x 10 -4 M cıva (II) çözeltisi battaniye.

CGGC Stok Çözeltisinin Hazırlanması 3.

  1. HPLC dereceli asetonitril 0.118 ml dicysteinyl tetrapeptid, CGGC 2.0 mg, çözülür ve daha sonra 1,0647 ml 5 mM amonyum format, pH'ı 5 mM CGGC stok çözeltisi oluşturacak şekilde argon gazı alınmış olan 7,5 tamponu ilave edin.
  2. 5 mM amonyum oluşumu pH 1275 ul bir 7.5 x 10 -4 M CGGC çözelti vermek üzere 7.5 tampon, 5 mM CGGC stok çözeltisi 225 ul ekle.

4. HazırlıkCıva '(II) ve CGGC çeşitli Reaksiyon Karışımlarının

  1. 1 Hazırlanması: civanın 0.5 oranı (II): CGGC çözeltisi
    1. 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 5 mM amonyum format, pH 7,5 tampon 255 ul koyun. Amonyum format tamponu ile bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7,5 x 10 -4 M cıva (II) klorür solüsyonu 30 ul ekle.
    2. 10 saniye için çözüm karıştırın. Sonra 1.5 ml mikrosantrifüj içine 7.5 x 10 -4 M CGGC solüsyonu 15 ul ekleyin. 10 saniye için çözüm karıştırın. Çözelti kütle spektrometresi içine enjeksiyondan önce 10 dakika boyunca bekletin.
  2. Cıva 1 oranında, (II): 1 hazırlanması CGGC çözeltisi
    1. 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 5 mM amonyum format, pH 7,5 tampon 240 ul koyun. Amonyum format tamponu ile bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7,5 x 10 -4 M cıva (II) klorür solüsyonu 30 ul ekle.
    2. 10 saniye için çözüm karıştırın. Daha sonra1,5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7.5 x 10 -4 M CGGC çözeltisi 30 ul ekle. Bölüm 4.1'de tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.
  3. Cıva 2 oranında (II): 1 hazırlanması CGGC çözeltisi
    1. 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 5 mM amonyum format, pH 7,5 tampon 210 ul koyun. Amonyum format tamponu ile bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7,5 x 10 -4 M cıva (II) klorür solüsyonu 30 ul ekle.
    2. 10 saniye için çözüm karıştırın. Daha sonra bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7.5 x 10 -4 M CGGC çözeltisi 60 ul ekle. Bölüm 4.1'de tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.

CEEC Stok Çözeltisinin Hazırlanması 5.

  1. Peptidi eritmek için HPLC dereceli asetonitril 0.145 ml dicysteinyl tetrapeptid, ODAÜ 3.5 mg, eritin. Daha sonra 13,067 mi, 5 mM amonyum format ilave pH argon gazı alınmış olan 7,5 tamponu 0.5 m üretmekM CEEC çözüm.
  2. Tüm peptid çözünene kadar çözelti vorteksleyin. Bir 7.5 x 10 5 M CEEC çözeltisi vermek üzere bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü, pH 7,5 tampon çözelti, 1.125 mi CEEC 0,5 mM ilave edin ve 0,375 mi mM 5 amonyum format. Vortex karışık kadar.

Cıva '(II) ve CEEC Çözüm çeşitli Reaksiyon karışımları 6. hazırlanması

  1. 1 preparasyonu: cıva (II) 0,5 oranı: CEEC Çözelti
    1. 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 5 mM amonyum format, pH 7,5 tampon 255 ul koyun. Amonyum format tamponu ile bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7,5 x 10 -4 M cıva (II) klorür solüsyonu 30 ul ekle.
    2. 10 saniye için çözüm karıştırın. Daha sonra bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7.5 x 10 -4 M CEEC çözeltisi 15 ul ekle. Bölüm 4.1'de tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.
  2. Civa (II): 1 oranında 1 hazırlanması CEEC çözeltisi
    1. 240 koyun81; 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 5 mM amonyum format, pH 7.5 tamponu. Amonyum format tamponu ile bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7,5 x 10 -4 M cıva (II) klorür solüsyonu 30 ul ekle.
    2. 10 saniye için çözüm karıştırın. Daha sonra bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7.5 x 10 -4 M CEEC çözeltisi 30 ul ekle. Bölüm 4.1'de tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.
  3. Civa (II) 2 oranı: 1 hazırlanması CEEC çözeltisi
    1. 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 5 mM amonyum format, pH 7,5 tampon 210 ul koyun. Amonyum format tamponu ile bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7,5 x 10 -4 M cıva (II) klorür solüsyonu 30 ul ekle.
    2. 10 saniye için çözüm karıştırın. Daha sonra bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine 7.5 x 10 -4 M CEEC çözeltisi 60 ul ekle. Bölüm 4.1'de tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.

7. AnalyOrbitrap ESI kütle spektrometresi ile cıva (II) ve CGGC Örneklerinde Reaksiyon karışımları hareketlendirmek

  1. ESI kütle spektrometresi 16 Hazırlanması
    1. 500 ul cam şırıngaya kalibrasyon standartları 100 ul çizin.
    2. MS pompa enjektör beşiği şırınga yerleştirin tüp takmak ve kitle spektrofotometre içine enjekte edilir.
    3. Dosya simgesini seçip dosya adını yazarak çalıştırmak için dosya adını ayarlayın.
    4. Veri toplama modülü acquire veri düğmesini seçin ve 150 taramaları toplamak.
    5. Yazılımın veri işleme modülü açarak kalibrasyon standartları doğrulamak için kromatogram analiz edin. Modülü açın, menü dosya gidin ve "açık" seçeneğini seçin ve iletişim kutusunda dosyayı seçin. Kromatogramda zirveleri standartları oranları şarj etmek için kitle ilişkili olduğunu doğrulayın.
    6. 500 ul HPLC dereceli metanol yukarı çizerek 500 ul cam şırınga temizleyin ve sonra m dağıtmakBir beher içine etanol.
    7. Cam şırınga içine HPLC dereceli metanol 500 ul çizin ve adım 7.1.2 başına sistemini yıkayın.
    8. Parametreleri ayarlamak için yazılım yöntemi kurulum modülünü seçin. Tarama modu menüsünü seçin ve Ftms olarak analizörü tanımlamak ve sonra "Tamam" düğmesine tıklayın. Kılıf gaz akış hızı: 10, Kaynak sıcaklığı: 0, Kılcal gerilimi: 37 V, Tüp lensi: 95 V, Sprey gerilimi: 4.20 kV Sonra gerçek zamanlı görünümü spektrum sayfasında çeşitli ikonları tıklayarak, şu parametreleri ayarlayabilirsiniz Akış 10.00 ul / dk, Analyzer oranı: Ftms, taramalar sayısı: 150.
  2. ESI kütle spektrometresi üzerinde CGGC örnekleri çalıştırma
    1. 5 mM amonyum format, pH 7,5 tampon çalıştırın.
      1. 500 ul bir cam şırınga içine 5 mM amonyum format tamponu 500 ul koyun MS pompasının şırınga tutucuya yerleştirin ve boru ekleyin.
      2. 1-2 dakika boyunca, boru içinden geçen tampon çalıştırın.
      3. Çalıştırmak için dosya adını ayarlayındosya simgesini seçip dosya adını yazarak.
      4. Modülünde acquire veri düğmesini seçin ve 150 taramaları toplamak.
      5. 150 taramalar toplandıktan sonra toplama durdurmak için çalışma düğmesine tıklayın.
      6. Veri tarayıcı modülü açın, daha sonra menüyü dosya gidin ve "açık" seçeneğini seçin ve iletişim kutusunda dosyayı seçin. 483, 683, 1.163 ve 1.363 m / z hiçbir zirveleri peptid veya civa (II) kompleksleri -peptid benzediğine mevcut olduğundan emin olun.
    2. 0,5 cıva (II): CGGC oranı çözeltisi 1 çalıştırın.
      1. 0,5 cıva (II): şırınga içine örnek CGGC oranı 1 250 ul koyun.
      2. Boru ve Başbakan aparat takın, MS pompa enjektör yuvasına şırınga yerleştirin.
      3. Dosya simgesini seçip dosya adını yazarak çalıştırmak için bir dosya adı seçin.
      4. Veri toplama modülü acquire veri düğmesine basın ve 150 tarama toplamak ve toplama durdurmak için çalışma düğmesini tıklatın.
      5. Modülü açın, menü dosya gidin ve "açık" seçeneğini seçin ve iletişim kutusunda dosyayı seçin. Kromatogram yalnız CGGC peptid için dahil olmak üzere doruklarına içerdiğini doğrulayın.
      6. 500 ul amonyum format tamponu ile aspire ve daha sonra bir kap içine amonyum format tamponu dağıtarak şırınga yıkayın.
      7. MS atık düğmesini seçin ve boru 500 ul amonyum format tamponu ile üç kez yıkayın.
      8. Bir beher içine metanol dağıtma daha sonra 500 ul metanol ile aspire edilmesiyle ve şırıngayı yıkayın.
      9. 500 ul metanol ile tüp bir kez yıkayın.
      10. MS Seç yük dedektör düğmesine basın.
      11. Şırıngaya amonyum format tamponu 500 ul ekle.
      12. Boru ve Başbakan aparat takın, MS pompa enjektör yuvasına şırınga yerleştirin.
      13. Dosya simgesini seçip dosya adını yazarak çalıştırmak tamponu için bir dosya adı seçin.
      14. Basınacquire veri düğmesi ve 150 tarama toplamak ve ardından stop çalıştırmak düğmesini tıklatın.
      15. Veri tarayıcı modülü açın, menü dosya gidin ve "açık" seçeneğini seçin ve iletişim kutusunda dosyayı seçin. CGGC run: kromatogram önceki Hg gelen zirvelerinden geçersiz olduğundan emin olun.
    3. 1 cıva (II): CGGC oranı çözeltisi 1 çalıştırın.
      1. Şırınga içine CGGC oranı örneği: 1 civa (II): 1 250 ul koyun.
      2. 7.2.2.15 Adımları 7.2.2.2 için tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.
    4. 2 cıva (II): 1 başlat CGGC oranı çözümü
      1. Şırınga içine CGGC konsantrasyonu örneği: 2 civa (II): 1 250 ul koyun.
      2. 7.2.2.15 Adımları 7.2.2.2 için tarif edildiği gibi benzer bir şekilde, tekrar edin.

8. Orbitrap ESI kütle spektrometresi ile Reaksiyon Merkür'ün karışımlar ve CEEC Örnekleri analiz

  1. ESI kütle spektrometresi üzerinde CEEC örnekleri Koşu
    1. Tekrar analiz prosedürü (Basamak 7.1 7.2) CEEC örnekleri ve çeşitli stoikiometrik oranlarda civa (II) ve ODAÜ tepkime karışımları kullanılarak.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir çalışma ESI kütle spektrometresi ile, iki tetrapeptidlerin, CGGC ve ODAÜ (Şekil 1) için olası cıva peptit kompleksi bileşimi karakterize etmek için yapıldı. CGGC ya ODAÜ ile civa (II) kompleksleri cıva karışımları reaksiyona sokulması suretiyle araştırılmıştır (II) ve üç farklı mol oranlarında Peptid çözeltileri: 1: 0.5, 1: 1, 1: 2 ((II) civa: peptid) . Civa (II) konsantrasyonu 7.5 x 10 -6 M ve peptit konsantrasyonu buna göre de değişecektir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hidrofobik dicysteinyl tetrapeptit CGGC (Cı 10H 18 N 4 O 5S 2 MW = 338) (Şekil 1), cıva kompleksler oluşturan (II), Şekil 2'de gösterilen ve Tablo 1 Ayrıca, peptit dimerler ve trimerler de oluşturmasıyla ayrılır. aşamalı olarak, reaksiyon karışımı içindeki peptit miktarı arttıkça. M / z ilişkili dimerlerin değerleri [(2M + H) + = 677] ve trimerler ile gösterildiği gibi [(...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bildirilen çalışma için herhangi bir açıklama yapılmamıştır.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MN-S Ulusal Bilim Vakfı desteği kabul RUI yazarları minnetle Thermo Fisher Scientific LTQ Orbitrap XL kütle spektrometresi kullanımına ilişkin Greensboro, Kuzey Carolina Üniversitesi'nde Triad Kütle Spektrometre Tesisi kabul Che 1011859. verin. Yazarlar bu çalışmaları ile ilgili faydalı görüş ve önerileriniz için Greensboro, Kuzey Carolina Üniversitesi'nden Daniel Todd, Vincent Sica ve Brandie Erhmann teşekkür ederiz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Cıva(II) klorürSigma-Aldrich429724Son derece toksik
Amonyum formatSigma-Aldrich516961
Formik asitSigma-AldrichF0507
Amonyum hidroksitFisherA512-P500
HPLC suFisherW5-4
HPLC AsetonitrilFisherBP2405-1
HPLC MetanolBalıkçıA452-4

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Clifton, J. C. Mercury exposure and public health. Pediatr. Clin. N. Am. 54, 237-269 (2007).
  2. Andersen, O. Principles and Recent Developments in Chelation Treatment of Metal Intoxication. Chem. Rev. 99, 2683-2710 (1999).
  3. Aposhian, H. V., Maiorino, R. M., Gonzalez-Ramirez, D., Zuniga-Charles, M., Xu, Z., Hurlbut, J. M., Junco-Munoz, P., Dart, R. C., Aposhian, M. M. Mobilization of heavy metals by newer, therapeutically useful chelating agents. Toxicology. 97, 23-38 (1995).
  4. Flora, S. J. S., Pachauri, V. Chelation in Metal Intoxication. Int. J. Environ. Res. Public Health. 7, 2745-2788 (2010).
  5. Campbell, J. R., Clarkson, T. W., Omar, M. D. The therapeutic use of 2,3-dimercaptopropane-1-sulfonate in two cases of inorganic mercury poisoning. JAMA. 256, 3127-3130 (1986).
  6. Rooney, J. P. K. The role of thiols, dithiols, nutritional factors and interacting ligands in the toxicology of mercury. Toxicology. 234, 145-156 (2007).
  7. Lin, X., Brooks, J., Bronson, M., Ngu-Schwemlein, M. Evalution of the association of mercury (II) with some dicysteinyl tripeptides. Bioorg. Chem. 44, 8-18 (2012).
  8. Ngu-Schwemlein, M., Lin, X., Rudd, B., Bronson, M. Synthesis and ESI mass spectrometric analysis of the association of mercury(II) with multi-cysteinyl peptides. J. Inorg. Biochem. 133, 8-23 (2014).
  9. Winther, J. R., Thorpe, C. Quantification of thiols and disulfides. Biochimica et. Biophysica Acta. 1840, 838-846 (2014).
  10. D'Agstino, A., Colton, R., Traeger, J. C., Cantry, A. J. An Electrospray Mass Spectrometric Study of Organomercury (II) and Mercuric Interactions with Peptides Involving Cysteinyl Ligands. Eur. Mass Spectrom. , 273-285 (1990).
  11. Hofstadler, S. A., Sannes-Lowery, K. A. Applications of ESI-MS in drug discovery: interrogation of noncovalent complexes. Nature Reviews Drug Discovery. 5, 585-595 (2006).
  12. Rubino, F. M., Verduci, C., Giampiccolo, R., Pulvirenti, S., Brambilla, G., Columbi, A. Molecular Characterization of Homo- and Heterodimeric Mercury (II)-bis-thiolates of Some Biologically Relevant Thiols by Electrospray Ionization and Triple Quadruple Tandem Mass Spectrometry. J. Am. Soc. Mass Spectrom. 15, 288-300 (2003).
  13. Krupp, E. M., Milne, B. F., Mestrot, A., Meharg, A. A., Feldmann, J. Investigation into mercury bound to biothiols: structural identification using ESI-ion-trap MS and introduction of a method for their HPLC separation with simultaneous detection by ICP-MS and and ESI-MS. Anal. Bioanal. Chem. 390, 1753-1764 (2008).
  14. Schaumlöffel, D., Tholey, A. Recent directions of electrospray mass spectrometry for elemental speciation analysis. Anal. Bioanal. Chem. 400, 1645-1652 (2011).
  15. Patiny, L., Borel, A. ChemCalc: a building block for tomorrow's chemical infrastructure. J. Chem. Inf. Model. 53, 1223-1228 (2013).
  16. Thermo Scientific. Xcaibur Versions 2.1.0-2.3.0 Data Acquisition and Processing User Guide. Revision E. United States. , Thermo Fisher Scientific Inc. (2012).
  17. Falcone, G., Foti, C., Gianguzza, A., Giuffrè, O., Napoli, A., Pettignano, A., Piazzese, D. Sequestering ability of some chelating agents towards methylmercury(II). Anal. Bioanal. Chem. 405 (2), 881-893 (2013).
  18. Mah, V., Jalilehvand, F. Glutathione Complex Formation with Mercury(II) in Aqueous Solution at Physiological pH. Chem. Res. Toxicol. 23, 1815-1823 (2010).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

C va II Kompleksle mesiOrbitrap K tle SpektrometrisiC va zotopik Da l mPeptit Kompleks AnaliziTandem K tle SpektrometrisiTampon Gaz GidermeNumune Haz rlamaY k Durumu AnaliziMetal yon elasyonu

İlgili makaleler