Bu el yazması oluşturma ve ventral karın duvarı defekti (fıtık) tamiri ile ilgili yöntemler açıklanır. Bu model onarım stratejileri implante malzemeleri kullananlar gibi çalışma için kullanılabilir. Bu makale, domuz küçük bağırsak submukoza ile deneysel fıtık tamiri örnek olarak sunulur.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Ventral karın fıtık onarımı çalışmaya bir fare modeli kullanımı
Bu makalede
Özet
Özet
Ventral karın fıtığı bazen herniorraphy (cerrahi onarım) gerektirir nispeten yaygın bir klinik durumdur. Ventral karın fıtığı tamiri genellikle karın duvarı üründe arasında mekanik bir köprü hizmet için bir malzemenin implantasyonu gerektirir. Biyomalzeme, domuz küçük bağırsak submukoza (SIS), gibi Ayrıca hücre büyüme içine implant için bir kafes olarak hizmet ve doğal olarak ana bilgisayar doku dahil edebilirsiniz. Bu tür tamir harçları gelişimi bir tekrarlanabilir biçimde onarmak için deneysel karın duvarı defektleri kolayca oluşturulur ve mükellef bulunmaktadır hayvan modelleri kullanımını yararlanır. Burada sunulan yöntem bir sıçan modelinde ventral karın fıtığı tamiri ve cerrahi oluşturma açıklar. Kardeşim bu modelde deneysel bir ventral karın fıtığı onarmak için kullanıldığında, bu hızla implantasyon 28 gün içinde ana bilgisayar doku kurulmuştur. Histolojik olarak, implante maddi ortaklığın ana bilgisayar doku içine sağlam bir fibrovascular yanıt tarafından karakterizedir. Büyük olasılıkla gelecekteki iyileştirmeler ve uygulamaları sıçan karın fıtığı modelinin daha yakından kopyalama ortak komorbiditeler bir adam için bir araç olarak diyabetik ve/veya obez hayvan içerebilir.
Giriş
Karın duvarı fıtığı Konjenital defekt, travma olabilir veya cerrahi yaralar karın duvarı içeren başarısız kapatılması sonucunda oluşabilecek bir sık karşılaşılan klinik bir konudur. Onarım yaygın bir implant indirimli bu kime karın duvarı kapalıdır sadece dikiş ile karşılaştırıldığında bir implant ile tedavi edilen hastaların kaydetti Rekürrens ile karın duvarının güçlendirmek kullanmayı gerektirir. 1
Cerrahi fıtık onarımı kez kusur yerleştirilmiş bir malzeme ile mekanik köprü oluşturma gerektirir. Bu bağlamda, sentetik ve doğal malzemeler fıtık onarımı için kullanılmaktadır. Birçok sentetik malzeme genellikle sigara absorbe ve diğer sentetik implantlar bir absorbe olmayan malzemelerin bir absorbe ile birleştirmek polipropilen, polietilen tereftalat polyester ve genişletilmiş politetrafloroetilen, yer Polimer polygalactine gibi. 1 buna ek olarak, doğal malzeme implantlar genellikle hayvan veya insan Kadavra kaynaklardan elde. Fıtık onarımı için kullanılan doğal malzemeler genellikle kollajen zengindir ve ingrowth ve ana bilgisayar doku bütünleştirilmesi için bir iskele olarak hareket.
Arzu geliştirmek ve yeni malzemeler ventral karın fıtık onarımı için en iyi duruma getirmek için aday malzemelerin değerlendirilmesi için uygun bir hayvan modeli gerektirir. Türler, koyun,2 domuz,3 tavşan,4 fareler,5,6,7,8 ve köpekler de dahil olmak üzere çeşitli çalışmalar yapılmıştır. 9 kolayca işlenmiş bir modeli doğuştan suşların genetik değişkenliği denetimi için izin çeşitli mevcuttur sundukları fareler gibi çalışmalar için kullanmanın avantajı var. Buna ek olarak, daha küçük genel vücut yüzey alanına yukarıda listelenen diğer türler ile karşılaştırıldığında sıçan izin doğada deneysel olabilir malzemeleri değerlendirilmesi ve bu nedenle, değil bol. Rat karşı diğer türler ile ilgili daha fazla, azaltılmış maliyetleri nispeten yüksek ekran aday malzemeler kullanmak ventral karın fıtığı tamiri için yeteneği sağlar. Malzemeler için konuları çoğunlukla cerrah, gücü, yeteneği ana bilgisayar doku, Biyouyumluluk ve enfeksiyona direnç içine dahil tarafından işleme kolaylığı içerir.
Örnek olarak, domuz küçük bağırsak submukoza (SIS) doku onarım endikasyonları, ventral karın, kasık ve diyafragmatik fıtığı tamiri dahil olmak üzere çok çeşitli için kullanılan doğal bir biomaterial var. 10 , 11 , 12 kardeşim hızla ana bilgisayar doku kurulmuştur ve enfeksiyon genellikle dayanıklı olduğu tespit edilmiştir ve çok malzeme kirlenmiş alanlarda belirli yarar vardır. 13 , 14 sıçan modelinde, işleme, iyi gerilme kuvveti uniaxial çekme hatası test ve doku ingrowth kollajen birikimi ve neovaskülarizasyon açısından teşviki tarafından belirlenen kolaylığı SIS göstermiştir. 6 , 7
Doğru cerrahi kusur köprüleme bir temel üretken modelleme aday tamir harçları değerlendirirken özelliğidir. Hayvan yeterince imzalat ve aseptik teknik kesinlikle takip olması gerekir. Ayrıca, standart boyutta bir karın duvarı defekti dikkatli oluşturulmalı ve yeterince malzeme defekt kenar boşluklarına güvenlik altına alır bir şekilde köprü. 8 bu iletişim kuralı, tamiri ve cerrahi oluşturma ventral karın fıtığı SIS kullanarak bir sıçan malzeme köprü oluşturma bir örnek olarak takip edilmesi gereken standart bir yöntemini sağlar.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu iletişim kuralı hayvanlarda kullanımı Üniversitesi Notre Dame kurumsal hayvan bakım ve kullanmak Komitesi tarafından kabul edildi, tüm yasal gereksinimleri ve yönergeleri takip ve tarafından akredite bir tesiste yapılmıştır Değerlendirme ve laboratuvar hayvan bakımı (AAALAC), uluslararası akreditasyon Birliği.
1. hayvan seçim
- edinme patojen-Alerjik Sprague Dawley fareler bir saygın satıcı veya damızlık koloni.
Not: Çoğu zaman, tesis veteriner veya Yöneticisi uygun kaynakları için araştırmacı yönlendirebilirsiniz. Fareler yaklaşık 250 g vücut ağırlığı bu yordam için uygun. - Bir gün önce cerrahi, klinik olarak sağlıklı olduklarından emin olmak için kullanılmak üzere hayvanlar inceleyin. Bu bağlamda, hayvan tartmak ve vücut durumunu değerlendirmek; solunum, herhangi bir açık yarası veya kitleler varlığı ve hayvan genel etkinlik düzeyini herhangi bir anormallik unutmayın. Bu tür gözlemler potansiyel dışlama ölçütü olarak düşünün ve cerrahi kayıttaki herhangi bir anormallik Not.
2. Anestezi ve aseptik cerrahi için hayvan hazırlık
- analjezi, 1.1-1.2 mg/kg sürekli yayın buprenorfin, subkutan sıçan önce ameliyat. Uygula oftalmik merhem için her iki gözde 2 h için yönetmek ve yönetmek 2 mL steril serum fizyolojik subkutan ısındı.
- Fareyi ketamin hidroklorür (90 mg/kg) ve xylazine (10 mg/kg) mayi bir doz ile anestezi. Oküler yağ küçük bir miktar her gözün kornea dessication önlemek için geçerlidir. Bir kez belgili tanımlık hayvan ’ s solunum sabit ve artık bir firma ayak çimdik için herhangi bir yanıt olduğunu, fareyi anestezi ameliyat için yeterli bir seviyeye ulaşmıştır. Anestezi kabul edilebilir bir düzeyde daha fazla derin, varlığı ile teyit edilmesi normal solunum ve normal renk göz (yetersiz kardiyovasküler perfüzyon öneren karşı solgunluk,).
- Ventral karın ile göğüs kemiği için apış arasından ve lateral kenar boşluklarına ventrum üzerinde bir ticari clippers tıraş. Nemli kağıt havlu bölgeye uygulayarak kısaltıldı tüylerden.
- % 70 etanol ile silin ve ardından traş alan bir iodophor antiseptik ile fırçalayın. Belgili tanımlık kesme için bir pencere potansiyel kirlenme ayrılmış olabilir cerrahi perdeler uygulamak.
- Steril Cerrahi önlük, bir yüz maskesi ve saç Bone don. İyice yıkayın ve eller sabun ve don steril cerrahi eldivenler ile fırçalayın.
3. Oluşturma ve Ventral karın fıtığı tamiri
- ameliyat öncesi cerrahi aletler otoklav tarafından sterilize.
- Bir neşter kullanarak, yaptığınız bir karın kas düzeyine ventral orta çizgi boyunca yaklaşık 3-4 cm dikey kesi. Karın duvarının yavaşça bir Forseps ile Asansör ve linea küçük bir açıklıktan oluşturmak alba. Temel iç organlar korumak için bir forseps delikten ve kas duvar oluşturmak için kazıma gibi koruyucu yol gösterici için karın boşluğu içine ekleyin bir yaklaşık 1 cm lateral her iki yanına kesme yaklaşık 2 cm x 2 cm tam kalınlıkta kusur, orta çizgi üzerinde her iki ucunda da linea, alba kesi.
- Lay önceden kesilmiş 2 cm x 2 cm Bölüm 4 katmanlı SIS (şekil 1), bu durumda mekanik köprüleme malzemenin kusur.
Not: Alternatif olarak, bir altlık yaklaşım malzeme bölümünü yerleştirdiği karın boşluğuna kusur iç boyutu gelen karşılamak için kullanılabilir. - Dikiş köprüleme, dört köşe 4-0 ipek ya da naylon bir basit kesintiye uğramış dikiş deseni kullanarak karın duvarı kas malzeme.
Not: Absorbe olmayan dikiş kolay tanımlanması hasat absorbe suture maddi karşı üzerine yerleştirilmiş malzemenin kullanılmasına. - Malzeme her kenarı eşit aralıklı üç ek dikiş ile güvenli. İç organlar karın duvarından geçişini sağlayan önemli boşluklar yok emin olmak için tüm çevresel kenarına incelemek; ve böyle boşluklar varsa, kenar boşluğunu güvenliğini daha da artırmak için ek dikiş yerleştirin.
- 4-0 absorbe dikiş basit kesintiye uğramış desen ile subkutan doku kapatın. Basit bir kesintiye uğramış desen uygulanan dikiş de kullanılabilir olsa cilt cerrahi zımba ile yakın.
- Bırakmayın hayvan katılımsız sternal recumbency; yeniden elde etmek için yeterli kendine geldi kadar ve tam olarak anesteziden kurtarıldı kadar diğer hayvanların şirkete cerrahi uğramıştır bir hayvan döndürmüyor. Bu süre boyunca, hayvan hipotermi önlemek için sıcak bir alanda devam. Tam kurtarma ve normal iyileşme sağlamak için bu yordamı uğramıştır
- inceleyin hayvan her gün. Deri zımba zımba sökücü ile 7-10 gün ameliyatı takiben kaldırmak.
4. Hasat implante malzeme
- tutarlı çalışma ihtiyaçları, ötenazi, yönetilen bir odasında karbon dioksit aşırı doz ile 28 gün ameliyatı takiben 10 ila 30 oranında, önceden belirlenmiş bir zamanda, genellikle 21 - hayvanlar doldurun.
- Kullanarak standart nekropsi araçlar, açık belgili tanımlık deri ve karın duvarı ve implantın alan bulaşmasına neden.
Not: Eğer absorbe olmayan dikiş implant güvenliğini sağlamak için kullanılan malzeme orijinal dikiş (Şekil 2) tarafından belirlenebilir. - Herhangi bir olumsuz tepkiler (örneğin, yara yırtılması, apse, seroma, Hematom) ve yapışma ölçüde ve azim temel iç organlar için de dahil olmak üzere brüt herhangi bir patolojik gözlem gözlemlemek.
- İmplant bölgesi doku implant içeren geniş bir bölümünü keserek çıkarın. Örnek işleme histolojik inceleme ve karakterizasyonu için hazırlanırken % 10 tarafsız tampon formalin gibi bir sabitleştirici yerleştirin.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
İmplantasyonu sonrası 28 gün tarafından SIS genellikle ana bilgisayar doku (Şekil 2) içine iyi birleşme gösterir. Çoğu durumda, orada 's kalan SIS belirgin, doku kez implante malzeme tanımlamak için keşfedilmeyi gerekir. Histolojik analizler iyi doku birleşme öncelikle fibrovascular doku ve kaydetti çok az kalıntı SIS (şekil 3) ile gösteren brüt patolojik gözlemlere doğruladı. Bu sonuçlar yardımcı programı sıçan ventral karın fıtığı modelinin gösterilmekt...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Malzemelerin ventral karın fıtık onarımı için büyük ilgi, özellikle de bir ilk mekanik köprü sağlamak ve sonra ana bilgisayar doku dahil edebiliyoruz. Bu bağlamda, malzemelerin çeşitli araştırdık, SIS, domuz acellular dermal matris ve domuz kalp zarını gibi. 6 , 7 bu malzemelerin bu dokuların ekstraselüler matrisleri temsil ve böylece doku birleşme kolaylaştırmak içine hücre göç ve çoğalırlar, iskele hareket.
Fıtık onarım malzemeleri d...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Bir yazar (CJ) Cook biyoteknoloji, Inc, Medikal dereceli SIS üreticisine istihdam edilmektedir.
Teşekkürler
Yazarlar Valerie Schroeder Bu eser teknik yönleri ile ona yardım için teşekkür etmek istiyorum. Geliştirilmesi bu model ile ilgili çalışma Cook biyoteknoloji, Inc. (West Lafayette, inç USA) destek verdi.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| İzofluran (Isoflo) | Henry Schine Hayvan Sağlığı | 17579 | gaz anestezik |
| Optixcare Göz Kayganlaştırıcı | Henry Schine Hayvan Sağlığı | OPX4240 | Oküler kayganlaştırıcı |
| Oster makası | Henry Schine Hayvan Sağlığı | 6092 | saç kesme makinesi |
| Betadine cerrahi önlük | Henry Schine Hayvan Sağlığı | 1618 | antiseptik iyodofor |
| Steril neşter | Henry Schine Hayvan Sağlığı | 329 | #10 neşter |
| 9" x 12" tek kullanımlık cerrahi örtü | Braintree Scientific, Inc. | SP-RPS | Cerrahi örtü |
| 4-0 naylon sütür | Braintree Scientific, Inc. | SUT 812 | Sütür malzemesi |
| 4-0 Emilebilir Sütür | Henry Schine Hayvan Sağlığı | 29242 | Sentetik emilebilir sütür |
| 9 mm Autoclips ve uygulayıcı | Braintree Scientific, Inc. | ACS KIT | Cilt insizyonunun kapatılması için cerrahi zımbalar |
| Torbugesik / analjezik | Henry Schein Hayvan Sağlığı | 12084 | Postoperatif analjezi için butorphanol tartarat |
| İnce bağırsak submukozası (SIS) | Cook Biotech, Inc. | Deneysel karın duvarı defektini köprülemek için implant malzemesi | |
| Rats | Harlan, Inc. | Fıtık modellemesi için | Sprague Dawley |
Kaynaklar
- Poussier, M., et al. A review of available prosthetic material for abdominal wall repair. J. Visc. Surg. 150 (1), 52-59 (2013).
- Hjort, H., Mathisen, T., Alves, A., Clermont, G., Boutrand, J. P. Three-year results from a preclinical implantation study of a long-term resorbable surgical mesh with time-dependent mechanical characteristics. Hernia. 16 (2), 191-197 (2012).
- Ko, R., Kazacos, E. A., Snyder, S., Ernst, D. M. J., Lantz, G. C. Tensile strength comparison of small intestinal submucosa body wall repair. J. Surg. Res. 135 (1), 9-17 (2006).
- Garcia-Moreno, F., et al. Comparing the host tissue response and peritoneal behavior of composite meshes used for ventral hernia repair. J. Surg. Res. 193 (1), 470-482 (2015).
- Soiderer, E. E., Lantz, G. C., Kazacos, E. A., Hodde, J. P., Wiegand, R. E. Morphologic study of three collagen materials for body wall repair. J. Surg. Res. 118 (2), 161-175 (2004).
- Liu, Z., Tang, R., Zhou, Z., Song, Z., Wang, H., Gu, Y. Comparison of two porcine-derived materials for repairing abdominal wall defect in rats. PLOS One. 6 (5), e20520(2011).
- Zhang, J., Wang, G. Y., Xiao, Y. P., Fan, L. Y., Wang, Q. The biomechanical behavior and host response to porcine-derived small intestine submucosa, pericardium and dermal matrix acellular grafts in a rat abdominal defect model. Biomaterials. 32 (29), 7086-7095 (2011).
- Ma, J., Sahoo, S., Baker, A. R., Derwin, K. A. Investigating muscle regeneration with a dermis/small intestinal submucosa scaffold in a rat full-thickness abdominal wall defect model. J.Biomed.Mater.Res.Part B. 103 (2), 355-364 (2015).
- Greca, F. H., Souza-Filho, Z. A., Giovanni, A., Rubin, M. R., Kuenzer, R. F., Reese, F. B., Araujo, L. M. The influence of porosity on the integration histology of two polypropylene meshes for the treatment of abdominal wall defects in dogs. Hernia. 12 (1), 45-49 (2008).
- Hiles, M., Record-Ritchie, R. D., Altizer, A. M. Are biologic grafts effective for hernia repair? A systematic review of the literature. Surg. Innov. 16 (1), 26-37 (2009).
- Helton, W. S., Fisichella, P. M., Berger, R., Horgan, S., Espat, N. J., Abcarian, H. Short-term outcomes with small intestinal submucosa for ventral abdominal hernia. Arch. Surg. 140 (6), 560-562 (2005).
- Franklin, M. E., Trevino, J. M., Portillo, G., Vela, I., Glass, J. L., Gonzalez, J. J. The use of porcine small intestinal submucosa as a prosthetic material for laparascopic hernia repair in infected and potentially contaminated fields: long-term follow-up. Surg. Endosc. 22 (9), 1941-1946 (2008).
- Clarke, K. M., Lantz, G. C., Salisbury, S. K., Badylak, S. F., Hiles, M. C., Voytik, S. L. Intestine submucosa and polypropylene mesh for abdominal wall repair in dogs. J. Surg. Res. 60 (1), 107-114 (1996).
- Sarikava, A., Record, R., Wu, C. C., Tullius, B., Badylak, S. F., Ladisch, M. Antimicrobial activity associated with extracellular matrices. Tissue Eng. 8 (1), 63-71 (2002).
- Serra, R., Grande, R., Butrico, L., Rossi, A., Settimio, U. F., Caroleo, B., Amato, B., Gallelli, L., de Franciscis, S. Chronic wound infections: the role of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. Expert Rev. Anti. Infect. Ther. 13 (5), 605-613 (2015).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
