teratojen Pozlama doğum kusurlarına neden olabilir. Balığı kimyasal teratojenik potansiyeli belirlemek için faydalıdır. Biz maruz kalma farklı zamanlarda da nitrit değişik düzeylerde embriyoların açığa tarafından zebrabalıkları yararını göstermektedir. Biz nitrit toksik ve ağır gelişimsel bozukluklara neden olduğunu göstermektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir Model Olarak Zebra balığı Nitrit teratojenik potansiyelini değerlendirmek için
Bu makalede
Özet
Özet
ortamda yüksek nitrat seviyeleri insanlardaki konjenital bozuklukların ve düşüklere neden olabilir. Tahminen bu bağırsak ve tükürük bakterilerin nitratın nitrite dönüştürülmesi kaynaklanmaktadır. fakir üreme sonuçlara yol açabilir Ancak, her ne diğer memeli çalışmalarda, yüksek nitrit düzeyleri, doğum kusurlarına neden yok. Böylece, nitrit teratojenik potansiyel açık değildir. Kolayca nitrit veya ilgi duyulan herhangi bir başka kimyasal teratojenik etkileri değerlendirmek için bir omurgalı bir model sistemi olması yararlı olacaktır. Burada, toksisite ve embriyonik kusurları için bileşiklerin taranması için zebrabalıkları (Danio rerio) kullanımını göstermektedir. Zebra balığı embriyolar onlara teratojenik çalışmalar için iyi bir model yapma, dışarıdan döllenmiş ve hızlı bir gelişme vardır. Biz olumsuz nitrite maruz kalma süresinin artması hayatta kalmasını etkilediğini göstermektedir. nitrat bunu yapmaz nitrit konsantrasyonunu arttırarak da olumsuz, hayatta kalma etkiler. Embriyoların tha içint nitrit poz hayatta, çeşitli kusurlar perikardial dahil oluşabilir ve mesane noninflation ve kraniofasial malformasyon yüzmek, sac ödem yolk. Sonuçlarımız zebra balığı nitrit teratojenik potansiyeli çalışmaları için uygun bir sistem olduğunu göstermektedir. Bu yaklaşım kolayca erken, omurgalı gelişimi üzerindeki etkileri, diğer kimyasal maddeler test etmek için uyarlanabilir.
Giriş
Teratojenez ağır vakalarda 1 kalıcı yapısal ve fonksiyonel anormallikler, büyüme geriliği, ya da düşük yapma yol açarak bir embriyo ya da ceninin normal gelişimini bozan bir süreçtir. Bu çeşitli şekillerde 2 embriyonik gelişim müdahale bazı doğal maddelerin (teratojenler), neden olabilir. insan fetal gelişim sırasında, radyasyon, enfeksiyöz ajanlar, toksik metaller ve organik kimyasallar gibi ortak teratojenler morfogenetik hatalar ile epicanthic kıvrımlar kusurları (üst göz kapağındaki deri kıvrımı) ve klinodaktili (kavisli parmak veya ayak) neden olduğu bildirilmiştir 1.
teratogenez moleküler mekanizması....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu protokol açıklanan prosedürler Pennsylvania Indiana Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi.
1. Hasat Embriyolar
- 28.5 ° C, pH 7, 500-1,500 uS arasındaki iletkenlik zebrafish muhafaza ve 14 saat ışık ve 10 saat 24 ışıksız bir ışık / karanlık çevrimi. Böyle Tü, AB ya da Tü / AB melez olarak yabani tip suşlar kullanın. Farklı suşları kimyasal arıtma 25 farklı yanıt verebilir.
- Bir çiftleşme tankına balık sistem su ilave edilerek hasat yumurta önceki gece çiftleşme için balık ayarlayın. tanka bir erkek ve dişi balık ekleyin ve bir bölücü ile iki balık ayırın. H....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
22 saat süre ile, 300 mM etanol maruz önceki raporlarda 5,23,26 tutarlı sağkalım (veriler gösterilmemiştir), üzerinde herhangi bir etki. etanol, bilinen bir teratojen ve pozitif kontrol olarak hizmet gibi bu beklenir. Gözlenen fenotipleri perikardiyal ödem, yüzme kesesi noninflation (Şekil 1), kraniofasyal kusurları ve gelişimsel gecikme (veriler gösterilmemiştir) dahil.
nitrit ile muamele maruz kal.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Burada anlatılan yöntemi nitrit ve nitrat teratojenik potansiyelini değerlendirirken zebrafish faydasını ortaya koyar. diğer omurgalılar ile karşılaştırıldığında, Zebra balığı yüksek doğurganlığını, dış döllenme, optik şeffaflık ve hızlı bir gelişme içeren avantajlara sahip. (Örneğin casper zebrabalıkları 36 gibi) pigmentasyon eksikliği mevcut mutantlar da iç organların görünürlüğünü artırmak için yardımcı olur. Ayrıca, canlı balık 37 analizini kolaylaştırmak için raportör genlerine sahip transgeni.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
VK, İÜP Biyoloji Bölümü ve Lisansüstü Eğitim ve Araştırma Okulu'ndan (Lisansüstü Öğrenci Mesleki Gelişim) sağlanan hibelerle finanse edilmiştir. CQD ve TWS, İÜP Lisansüstü Eğitim ve Araştırma Okulu (Fakülte Yayın Maliyetleri/Arızi Araştırma Giderleri) tarafından desteklenmiştir. Ayrıca zebra balığı tesisini korudukları için Diep laboratuvarı üyelerine de teşekkür ederiz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| DREL/2010 cihazı | Hach | 26700-03 | |
| Etanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| KIMAX cam Petri Kabı | VWR | 89001-244 | |
| MS-222 | Sigma-Aldrich | E10521 | |
| NitraVer 5 Nitrat Reaktifi | Hach | 14034-46 | |
| NitriVer 3 Nitrit Reaktifi | Hach | 14065-99 | |
| Parafilm | Fisher Scientific | 3-374-10 | |
| Paraformaldehit | Sigma-Aldrich | 158127 | |
| S6E stereomikroskop | Leica | 10446294 | |
| Sodyum nitrat | Fisher Scientific | S343 | |
| Sodyum nitrit | Fisher Scientific | S347 | |
| Transfer pipetleri | Laboratuvarı Ürünler Satış | L320072 | |
| Cam şişeler | Fisher Scientific | 03-338B |
Kaynaklar
- Gilbert-Barness, E. Teratogenic causes of malformations. Ann Clin Lab Sci. 40 (2), 99-114 (2010).
- Brent, R. L. The cause and prevention of human birth defects: What have we learned in the past 50 years. Con Anom. 41 (1), 3-21 (2001).
- Lin, S., Zhao, Y.....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
