inme patofizyolojisini anlamak için, güvenilir modeller kullanmak önemlidir. Farelerde en sık kullanılan inme modellerinden birini anlatacağız Bu yazıda, orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli olarak adlandırılan reperfüzyon ile (ayrıca lümen içi filament veya sütür modeli olarak adlandırılır).
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım
Bu makalede
Özet
Özet
İnme, tüm dünyada ölüm önde gelen nedenidir ve uzun vadeli yetişkin engelli temel nedenlerinden biri olmaya devam etmektedir. vuruşları yaklaşık% 87 iskemik orijinlidir ve orta serebral arter (MCA) topraklarında meydana gelir. Şu anda sadece Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) bu yıkıcı hastalığın tedavisi için ilaç onayladı doku plazminojen aktivatörü (tPA) 'dir. Bununla birlikte, tPA uygulama için küçük bir terapötik penceresi olan (3-6 saat) ve aslında uygulanan hastaların% 4 etkilidir. Mevcut araştırma potansiyel terapötik hedefleri bulmak için inme patofizyolojisinin anlaşılmasında odaklanır. Böylece, güvenilir modeller çok önemlidir ve MCA oklüzyonu (MCAO) modeli iskemik inme klinik olarak en uygun cerrahi modeli olarak kabul edilir (ayrıca lümen Filament veya sütür modeli olarak adlandırılan) ve oldukça non-invaziv ve kolay tekrarlanabilir. Genellikle MCAO modeli nedeniyle özellikle fare ile, kemirgenler kullanılırBu türler için mevcut tüm genetik varyasyonları. Burada tarif (ve video mevcut) başarıyla güvenilir ve tekrarlanabilir verileri oluşturmak için farelerde (reperfüzyon) ile MCAO modelini nasıl gerçekleştirileceği.
Giriş
İnme bir kişi hastalıktan her 4 dakikada bir ölen ile, dünya çapında ölüm beşinci önde gelen nedenidir. 800.000 üzerinde Amerikalılar sadece hasta için yıkıcı olmayan bir felç, her yıl, acı, ama aynı zamanda aileleri için. İnme yetişkin sakatlık ana nedenidir ve yıllık harcama mevcut olan çok az tedavi seçenekleri olmasına rağmen 36500000000 $ 1 düzeyinde olduğu tahmin edilmektedir.
Doku plazminojen aktivatörü (tPA) Sadece Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) iskemik inme için ilaç lisanslı. Inme 3-6 saat içinde hastaya uygulandığı ve bu gibi durumlarda bu hastaların 2% 4 yarar Ancak, bu geçerlidir. Nedenle, inme, tekrar üreti....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
video bildirilen Bu protokol ve deneyler LSUHSC-S Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve NIH kurallarına uygundur bulundu.
Not: Erkek C57BL / 25 ağırlığında 6 fareleri - 29 g Bu çalışmada kullanılmıştır. farenin tek havalandırılmış kafeslerde, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsü altında, suya serbest erişim ile standart bir yiyecek topağı diyet ile beslendi. Prosedür steril teknikler (örneğin, steril eldiven, steril aletleri) kullanılarak steril koşullar altında yapılacaktır.
1. Ön cerrahi Hazırlıklar
- Ketamin (150 mg / kg) ve ksilazin (10 mg / kg) bir kombinasyonu kullanılarak anestezi neden intraperitona....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Fareler reperfüzyon süresi ardından 30 dakika MCAO-kaynaklı beyin iskemisi (Şekil 1) uygulandı (24 saat, 1 hafta, burada sunulan, ancak reperfüzyon uzunluğunun değiştirilmesi olabilir). MCAO sırasında ölüm (yaklaşık% 2) çok az oldu. Mesaj iskemi, (ilk 24 saat içinde) ölüm oranı yaklaşık% 26 idi.
Lazer Doppler flowmetre öncesi ve MCAO / reperfüzyon sonrası MCA topraklarında kan akımı perfüzyon teyit etmek için .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
20 yıl önce anlayışı bu yana, bir filamanın sokulmasını kapsayan insan inme için MCAO modeli çalışmaları çok sayıda kullanılmıştır. Bunun nedeni o inme (yani, iskemik inme) en sık görülen klinik ne taklit gerçeği esas olarak. striatum serebral korteks daha iskemi karşı daha duyarlıdır ve bu nedenle, iskemik sürenin uzunluğu striatum ve dorsolateral korteks hem de etkilenmiş, ya da sadece striatum olup olmayacağı çevirmek olacaktır. Hem enfarktüs ve reperfüzyon süreleri buna göre değiştirilebilir ve bu araştırma.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüsü, Ulusal Kalp, Akciğer ve Kan Enstitüsü (NIH ve NHLBI; HL125572-01A1) ve LSUHSC-S, F.N.E. Gavins'e başlangıç fonu.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Erkek C57BL / 6 fareler | Jackson Laboratuvarı, Bar Harbor, ME | # 000664 | |
| Ketamin Hidroklorür | Morris & Dickson, Shreveport, LA | 67457-108-10 | |
| Xylazine | Akorn, Inc, Lake Forest, IL | NADA # 139-236 | |
| DC sıcaklık kontrol sistemi | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-8D | |
| Mini rektal termistör probu | FHC, Bowdoin, ME | 40-80-5D-02 | |
| Isıtma yastığı | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-2-06 | |
| Makas | Amazon, Bellevue, WA | # 64800 | |
| 70 etanol | Dünya Çapında Tıbbi Ürünler, Bristol, PA | # 51011023 | |
| Diseksiyon mikroskobu | Olympus, Center Valley, PA | SZ40 | |
| İris makası (düz) | Güzel Bilim Araçları, Foster City, CA | 11251-20 | |
| Dumont forseps (45 derece bükülmüş uç) | Güzel Bilim Araçları, Foster City, CA | 11297-00 | |
| Mikro damar klipsi | Güzel Bilim Aletleri, Foster City, CA | 18055-05 | |
| Mikro diseksiyon yaylı makas (düz) | Güzel Bilim Aletleri, Foster City, CA | 14088-10 | |
| Ekartörler (kör) | Güzel Bilim Aletleri, Foster City, CA | 18200-11 (Helen 17022-13 tarafından kullanılır) | |
| Pamuk uçlu aplikatörler | Fisher Scientific, Waltham, MA | 23-400-100 | |
| Gazlı bez süngerler | Covidien, Mansfield, MA | # 9023 | |
| 7-0 ipek örgülü cerrahi sütür | Braintree Scientific, Braintree, MA | SUT-S103 | |
| %0.9 sodyum klorür | Morris & Dickson, Lake Forest, IL | 0409-4888-20 | |
| 6-0 orta MCAO sütür (silikon kauçuk kaplı monofilament) | Doccol Corporation, Sharon, MA | 6023PKRe | |
| Sofsilk 6-0 silikon kaplı örgülü ipek | Covidien, Mansfield, MA | SUT-14-1 | |
| Carprofen | Pfizer, New York, NY | NADA # 141-199 | |
| Puralube | Dechra, Norwich, Birleşik Krallık | NDC 17033-211-38 | |
| Physitemp sıcaklık kontrolörü | Harvard Aparatı, Holliston, MA | TCAT-2AC | |
| Isı lambası | Harvard Aparatı, Holliston, MA | HL-1 | |
| Lazer doppler probu | AD Instruments, Colorado Springs, CO | MSP100XP | |
| 24 kuyulu plakalar | Fisher Scientific, Waltham, MA | # 353226 | |
| Fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) | Life Technologies, Carlsbad, CA | 20012-050 | |
| Tek kenarlı tıraş bıçağı | Fisher Scientific, Waltham, MA | 12-640 | |
| 2,3,5-trifeniltetrazalyum klorür (TTC) | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | T8877-50G | |
| Fare beyni matris dilimleyici | Braintree Bilimsel, Braintree, MA | BS-A 5000C | |
| Su banyosu | VWR, Radnor, PA | # 182 | |
| 10 formalin | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | HT501128-4L | |
| ImageJ analiz yazılımı | NIH, Bethesda, MD | ücretsiz indir | |
| Ekartör | Tıbbi Cihaz Satın Alma, Newcastle, CA | MP-740 |
Kaynaklar
- Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).
- Marks, M. P., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
