Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

EOB-DTPA ve Ga (III) Complex Araştırmalar Onun

9.6K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/54334

⸱

17 Ağustos 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

Bu makalede

Özet

EOB-DTPA izolasyonu ve sonraki Kompleksleşmeye doğal Ga (III) ve 68 ile Ga burada sunulan yanı sıra etiketleme verimliliği üzerinde tüm bileşiklerin ve soruşturmaların tam bir analizini, in vitro istikrar ve n-oktanol / su için bir prosedür Radyo-etiketli kompleks dağılım katsayısı.

Özet

Bu EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris (karboksimetil) -4- (etoksibenzil) -undecanedioic asit) onun Gd (III) kompleks ve protokoller için izolasyonu için bir yöntem ortaya koymaktadır Buluşun yeni radyoaktif olmayan, yani, doğal GA (III) 'ün hem de radyoaktif 68Ga kompleksinin hazırlanması. Karmaşık bir ligand olarak GA (III), nükleer manyetik rezonans (NMR) spektroskopi ve kütle spektrometresi ve element analizi ile karakterize edildi. 68Ga 68 ge / 68Ga jeneratöründen standart yıkama yöntemi ile elde edilmiştir. Deneyler 3.8-4.0 yapıldı pH EOB-DTPA 68 Ga-etiketleme etkinliğini değerlendirmek için. Kurulan analiz teknikleri, radyo TLC (ince tabaka kromatografi) ve radyo HPLC (yüksek performanslı sıvı kromatografisi) izleyici radyokimyasal saflığı belirlemek için kullanılmıştır. 68 Ga Tracers 'Lipofillik oktanol / su distributio ilk soruşturma olarakpH 7.4 çözeltisi içinde mevcut 68Ga türlerinin N katsayısı bir ekstraksiyon yöntemi ile belirlendi. yapıldı fizyolojik pH'da çeşitli medya radyofarmasötiğin in vitro stabilitesi ölçümü, ayrışma farklı oranlarda ortaya çıkarılmıştır.

Giriş

Gadoxetic asit, EOB-DTPA 1 ligandının Gd (III) kompleksi için ortak bir isim nedeniyle, karaciğer hepatosit ve yüksek yüzde ile kendine özgü alımı için hepatobiliyer manyetik rezonans görüntüleme (MRG). 2,3 sık kullanılan kontrast ajandır hepatobiliyer atılımı fokal lezyonları ve hepatik tümörlerin lokalizasyonu sağlar. 2-5 Bununla birlikte, MRI tekniğinin belirli sınırlamaları (örneğin, kontrast maddelerin toksisite, klostrofobi veya metal implantlar olan hastalarda sınırlı uygulanabilirlik) alternatif bir tanı aracı için çağrı .

Pozitron emisyon tomografisi (PET) gövdesinde dağıtım PET tarayıcı tarafından kaydedilen edildiği radyoaktif bir madde (izleyici-tracer) ve az miktarda tatbik edildiği bir moleküler görüntüleme yöntemi vardır. 6 PET, yüksek olanak sağlayan bir dinamik bir yöntemdir gerek kalmadan mekansal ve zamansal görüntülerin çözünürlüğü yanı sıra sonuçların ölçümü,MRI kontrast ajanları yan etkileri ile ilgilidir. Elde edilen metabolik bilgilerin bilgilendirici değeri daha da gibi en sık PET / BT tarayıcıları bilgisayarlı tomografi (BT) ile hibrid görüntüleme ile elde ek görüntüleme yöntemleri alınan anatomik verilerle birlikte artabilir.

PET için uygun bir izleyicinin kimyasal yapısı pozitron yayıcı olarak hizmet veren bir radyoaktif izotop içermelidir. Positrons onlar hemen dokuyu çevreleyen atom kabuklarının elektronlarla imha beri kısa yaşam süreleri vardır. Yok edilmesi ile hareket ters yönde iki 511 keV'lik gama fotonları PET tarayıcı tarafından kaydedilen olan yayılan. 7,8 PET nuclides bir molekül bağlanmış olabilir, bir izleyici oluşturulması için, 2-deoksi-olduğu gibi 2- [18F] floroglukoz (FDG), en yaygın olarak kullanılan PET izleyici. 7 Ancak, nüklid, aynı zamanda, bir ya da daha fazla ligand ile koordinatif bağlar oluşturan (örn[68Ga] -DOTATOC 9,10) ya da () çözündürüldü inorganik tuzlar gibi, örneğin, [18F] sodyum fluorür 11 uygulanabilir. onun biodistribution, metabolizma ve atılım davranışını belirler olarak Toplamda, izleyicinin yapısı çok önemlidir.

Uygun bir PET nüklid uygun pozitron enerji ve kullanılabilirliği yanı sıra istenen soruşturma için yeterli bir yarılanma ömrü gibi olumlu özelliklerini birleştirir gerekir. 68 Ga Nüklidin son yirmi yılda PET alanında önemli bir güç haline gelmiştir. 12,13 Bu durum bir siklotrondan çevresinde bağımsız bünyesinde etiketleme sağlayan bir jeneratör sistemi ile onun durumu, esas olarak. Bir jeneratör, anne 68 Ge yavru nüklid 68Ga, uygun bir kenetleyici ile yıkanır ve daha sonra etiketlenmiş olan bir sütun üzerinde emilir nüklidin. 6,14 68Ga nüklid bir trival olarak var yanagadoxetic asit gibi aynı genel negatif yük ile bir kompleks doğuracak yerine 68 Ga ile EOB-DTPA kenetleme sadece Gd (III) 10,13 gibi ent katyon. Buna göre, bu 68 Ga izleyici PET görüntüleme için uygunluğu benzer bir karakteristik karaciğer özgüllük birleştirmek olabilir. Gadoxetic asit takip eden kapsamda satın alınmış ve disodyum tuzu olarak tatbik edilmektedir, ancak biz Gd [EOB-DTPA] gibi başvurmak GA [EOB-DTPA] ya da 68 Ga [olarak radyoaktif olmayan GA (III) kompleksine kolaylık bakımından radyo-etiketli bileşenin durumunda EOB-DTPA].

PET için izleyiciler, radyoaktif metal kompleksleri ilk önce in vivo ya da ex vivo deneyler, in vitro kapsamlı olarak incelenmesi gerekebilir olarak uygulanabilirliğini değerlendirmek. ilgili bir tıbbi sorun için uygun olup olmadığını belirlemek için, biyolojik dağılım davranış ve boşluk profili, istikrar, organ özgüllük ve hücre veya Tissu'nun gibi çeşitli izleyici özelliklerialımın araştırılması gerekmektedir. Sahip oldukları invazif olmayan karakteri nedeniyle, in vitro saptanması genellikle in vivo deneyler önce gerçekleştirilir. Genel olarak, in vivo olarak uygulandığında DTPA ve türevleri nispeten hızlı bir ayrışma elde kinetik inertlik yoksun nedeniyle bu komplekslerin 68 Ga için kenetleyiciler, sınırlandırılmadıkça uygunluk olduğu kabul edilmektedir. 14-20 Bu öncelikle bir şekilde hareket eden APO transferrin kaynaklanır plazmada 68 Ga için rakip. Yine de, biz tanılama bilgilerini ve böylece mutlaka uzun vadeli izleyici istikrar gerekmeyen, birkaç dakika içinde post-enjeksiyon 3,4,21-23 sağlanabilir burada hepatobiliyer görüntüleme, onun olası uygulama ile ilgili bu yeni izleyici araştırdık. Bu amaçla gadoxetic asitten EOB-DTPA izole edilmiş ve ilk iki sabit izotoplar, 69 GA ve 71 karışımı olarak var olabilir, doğal Ga (III) ile kompleks gerçekleştirilen Ga. Kompleks, 68Ga, aşağıdaki kelasyon için radyoaktif olmayan bir standart olarak hizmet elde edilmiştir. Biz yöntemleri kurulan ve aynı anda EOB-DTPA 68 Galabeling verimliliğini belirleyen ve yeni 68 Ga izleyici lipofilitesi ve farklı ortamlarda istikrarını araştırmak için onların uygunluğunu değerlendirildi kullanmıştır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

EOB-DTPA ve Ga hazırlanması 1. [EOB-DTPA]

Dikkat: Kullanmadan önce kullanılan organik çözücüler, asit ve alkalin piller tüm ilgili malzeme güvenlik bilgi formlarını (MSDS) danışın. Davlumbaz tüm adımları uygulayın ve kişisel koruyucu ekipman (koruyucu gözlük, eldiven, laboratuvar önlüğü) kullanın.

  1. Gadoxetic asitten EOB-DTPA izolasyonu
    1. bir şişe içine, 0.25 M gadoxetic asit enjekte edilebilir çözelti 3 ml koyun. karıştırılan çözeltiye okzalik asit, 500 mg (5.6 mmol) ekleyin.
    2. 1 saat boyunca karıştırıldıktan sonra, indirgenmiş basınç kullanarak bir cam tozu hamuru boyunca süspansiyonu filtre. sırasıyla su, 3 ml ile Tortu, üç kez yıkayın.
    3. Elde edilen sulu filtratlar birleştirin ve bir pH elektrodunun çözelti donatmak. pH değeri yaklaşık -0.1 olana kadar süzüntüye 12 M hidroklorik asit ilave.
    4. Renksiz bir tortu elde etmek için vakum altında çözücüyü çıkarın. atıl gaz altında depolayın.
    5. iyice kalıntı yıkayın (en az üçetil asetat ile kere) oksalik asit fazlalığını ortadan kaldırmak için. Vakumda bir tortu kurutun.
    6. Oda sıcaklığında 2 ml su içinde bir tortu yeniden çözünmesine ve daha sonra bir buz banyosu içinde çözelti soğutulur. Buz banyosu çıkarmadan oluşumu tamamlanana kadar 0.5 M sulu sodyum hidroksit çözeltisi damla damla ilave renksiz görülmektedir bir katı tutkal.
    7. dekantasyon yoluyla su çıkarmak. Soğuk su, 1 ml bir katı iki kez daha yıkanır. Birinci ürün fraksiyonu elde etmek için vakum altında bir katı kurutun.
    8. Sütun kromatografisi (silika, metanol / su 4/1) ile boşaltılmıştır suyun birleşik fraksiyonlardan ikinci bir ürün fraksiyonu izole edin. 24 çözücü vakum altında çıkarın.
    9. Bu şekilde elde edilen beyaz katı madde olarak saf değilse, 1 ml su içinde çözülür ürünü çökeltmek için 10 ml etanol ve sonra 10 ml dietil eter ekleyin. Indirgenmiş basınç vakum altında kuru kullanarak bir sırdan filtre.
    10. birleştirmekKatı EOB-DTPA fraksiyonları ve NMR spektroskopik, 25 kütle spektrometrik 26 ve element 27 analizleri gerçekleştirmek hem.
  2. Ga N- [EOB-DTPA]
    DİKKAT: kuru inert bir atmosfer altında deposu bir katı GA (III) klorür, çünkü hava, nem veya yağ ayrışma ile temas üzerine aşındırıcı duman ve sarı, kahverengi ve siyah yabancı maddelerin oluşumu ile sonuçlanan, yer alır.
    1. 100 ml su Ga (III) klorür 1.94 g (11.0 mmol) eritilmesi ile 0.11 M'lik bir stok çözelti hazırlayın. 4 ml su ile% 25 sulu amonyak çözeltisi 1 ml seyreltilir.
    2. 10 ml su içinde bir kaba EOB-DTPA 80 mg (0.15 mmol) çözündürülür. Gerekirse, tam bir çözünme elde etmek çözücü ısıtılır.
    3. GA (III) klorür stok çözeltisi 1.4 ml (0.15 mmol) ilave edin. Bir karıştırıcı ve pH-elektrodu ile balon donatmak. Çözeltinin pH değeri yaklaşık 4.1 olana kadar seyreltik sulu amonyak çözeltisi damla damla ekleyin. ro karıştırılmaya30 dakika OM sıcaklığı.
    4. Vakum altında çözücüyü çıkarın. ve merkezi bir paralel yan boyun ile stillhead ile donatılmış bir şişe içinde bir tortu, koyun. Bir vakum pompası çıkışına sahip bir soğutma parmağı ve yan boyun merkezi boyun donatın
    5. indirgenmiş basınç altında (125 ° C, 0.6 mbar) altında bir tortu ısıtın. Periyodik olarak, soğutma parmağı ve yine baş (cam yüzeyinin beyaz kaplama olarak görünür) süblime amonyum klorürü çıkarmak, hem de hafif nemli bir bezle şişenin üst kısımlarından. Yeni yüceltmek görünür hiçbir oluşumu kalmayıncaya kadar işleme devam edin.
    6. sırasıyla sıcak metanol, 0.5 ml kalıntı, üç kez yıkama amonyum klorür son izlerini çıkarmak için. Vakum altında renksiz bir tortu kurutun. NMR spektroskopik, 25 kütle spektrometrik 26 ve element 27 analizlerini gerçekleştirmek.

2. Genel Etiketleme Prosedür

DİKKAT: Tüm eskiRadyoaktif maddeler ile doğrudan veya dolaylı temas da dahil olmak üzere deneylerinizi sadece eğitimli personel tarafından yapılmalıdır. Uygun koruyucu ekipman kullanın. ayrı radyoaktif atıkları toplamak ve depolamak ve geçerli yönetmeliklere uygun olarak imha ediniz.

  1. Jeneratörün elüsyon
    Not: dodesil-3,4,5-trihydroxybenzoate silika üzerinde oksit olarak bağlı anne nüklidle 40 mCi 68 Ge / 68 Ga jeneratör kullanıldı. Bu prosedürde olduğu gibi elüsyon ve arıtma bir peristaltik pompa ve dağıtıcı birimi ile kombine bir otomatik işlem olarak, el ile veya olabilir.
    1. 5.5 M, 1.0 M ve 0.05 M hidroklorik asit solüsyonları hazırlayın. ml başına 5.5 M hidroklorik asit 25 ul ihtiva eden 5.0 M sodyum klorür ihtiva eden bir çözelti hazırlayın. 4.1 g sodyum asetat, 1 ml HCI (% 30) ve 2.5 ml buzlu asetik asit, birleştirme ve 50 ml su ile seyreltilmesi suretiyle pH 4,6 tampon çözeltisi hazırlayın.
    2. prec1 1.0 M hidroklorik asit ilave edildi ve daha sonra 5 ml su yavaş yavaş çalkalayarak PS-H + kartuşu ondition.
    3. 4 mi 0.05 M HCI ile jeneratörün silis kolon Zehir. 12 yüklenebilir PS-H + kartuşu üzerine 68Ga eluat.
    4. 5 ml su ile kartuş yıkayın ve daha sonra hava, 5 ml kurutun. 1 ml 5.0 M asitleştirilmiş sodyum klorür çözeltisi ile kartuşun 68 Ga Zehir. 28
  2. 68 Ga ile EOB-DTPA etiketleme
    1. 1 ml su içinde EOB-DTPA 1 mg (1.9 umol) içinde çözülür. Bu çözeltiye 100 ul (0.19 mmol) almak ve 19 um (10 mg / ml) EOB-DTPA stok çözeltisi hazırlamak için su, 9.9 ml ile seyreltin.
    2. 68 Ga içeren çözeltinin (22-29 MBq eşit) 50 ul çıkarın ve bir şişenin içine koyun. EOB-DTPA 19 mM stok solüsyonu 50 ul (0.5 mg) ve 300 ul o ekleF ila 4.0 pH değerini yükseltmek için tampon. Kısaca çalkalanır ve 5 dakika boyunca oda sıcaklığında çözelti inkübe edin. 1-5 ul bir kısım çıkarın ve HPLC veya TLC analizi koydu.
    3. ., Su / trifloroasetik asit (% 99.9 /% 0.1), - B - trifloroasetik / asetonitril asit (% 99.9 /% 0.1), gradyan A: ters faz (RP) C18 kolonu 29 için aşağıdaki hareketli faz radyo HPLC analizi gerçekleştirmek : 06 dakika% 80 A →% 0 A (0.5 mL / dakika), 610 dakika% 0 A (0.5 ml / dk).
    4. eğri altında kalan alan radyo HPLC sinyallerinin tepe noktası yoğunluklarını belirler. aşağıdaki gibi izleyicinin radyokimyasal saflık (RCP) olarak etiketleme verim hesaplayın:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga + A Ga-EOB-DTPA)% 100 ∙
      Ga-EOB-DTPA: 68Ga [EOB-DTPA] eğrisi altında kalan alan
      Bir Ga: ücretsiz 68 Ga eğri altında kalan alan

3. Etiketleme Verimlilik

  1. tarif olarak etiketleme prosedürleri uygulayınbölüm 2. Kullanımda d (eluat tazeliği bağlı 40-140 ul) 68 Ga eluat aktivitesini başlangıç ​​tutarlı bir dizi, örneğin, 22-29 MBq.
  2. (68Ga, ayrılmış malzeme hacmine bağlı olarak, 40-190 uL) 3.8-4.0 pH ayarlamak için tampon çözeltisi gerekli miktarını ekleyin. Ligand stok solüsyonu istenen bir miktar (19 mM çözeltisi 10-70 ul) eklenir.
  3. 1.75 ml her etiketleme prob genel ses seviyesini ayarlamak için gerekli su miktarını ekleyin. İyice karıştırın ve numune, oda sıcaklığında 5 dakika bekletin. Etiketleme verimi belirlemek için bölüm 2'de tarif edildiği gibi, HPLC analizi yapın.
  4. 0.1 ug adımlarla ligand miktarlarda mcg 0.1 ila 0.7 ile etiketleme prosedürleri uygulayın. Her bir ligand konsantrasyonu için üçlü olarak deneyler gerçekleştirmek. Ortalama verim ve standart sapma hesaplayın.

4. in vitro stabilitesi

  1. Genel procedure ve preparasyonlar
    1. 10 mM'lik bir fosfat konsantrasyonuna sahip bir PBS stok çözelti hazırlamak için, deiyonize su, 200 ml fosfat tamponlu tuzlu su içinde bir tabletin (PBS) içerisinde çözün.
    2. Bölüm 3. örneklerinin alınması tarif edildiği gibi, bölüm 2'de tarif edildiği gibi, 68Ga, ayrılmış malzeme hacmine bağlı olarak, EOB-DTPA stok çözeltisi 0.5 ul 22-29 MBq 68 Ga etiketlenmesi tampon miktarını ayarlamak kararlılık ölçümleri gerçekleştirmek için izleyicinin 6-12 MBq içeren etiketleme çözümü.
    3. Elüent olarak 0.1 M sulu sodyum sitrat kullanılarak 80 mm silis jel kaplanmış alüminyum plakalar üzerindeki radyo TLC analizi gerçekleştirmek ve bir ince tabaka kromatografisi radyoaktivite tarayıcı ile plakaları analiz. 30 eğrisi altındaki alan olarak TLC sinyallerinin yoğunlukları belirlenir. aşağıdaki gibi izleyicinin RCP hesaplayın:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga-ücretsiz + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-kolloidal) ∙% 100
      Bir Ga-EOB-DTPA: 68 Ga [EOB-DTPA] eğrisinin altında kalan alan
      Bir Ga-serbest: ücretsiz 68 Ga eğri altında kalan alan
      Kolloidal 68 Ga eğri altında kalan alan: Bir Ga-koloidal
    4. Her zaman noktası için RCP t / RCP 0 hesaplayın. Başlangıç ​​noktası t = 0 dakika beri zaman farkı vs böylece standart RCP çizilir.
      Zaman noktası t 68 Ga [EOB-DTPA] RCP t = RCP.
      T 68 Ga [EOB-DTPA] = 0 dk BİP 0 = RCP.
  2. Fosfat tamponlu tuzlu su içinde stabilitesi (A)
    1. Etiketleme çözeltisi 65 ul için pH'ı 7.4'e yükseltmek için, PBS stok çözeltisi 150 ul ve sodyum hidroksit çözeltisi (0.1 M) 60 ul ekle. İyice karıştırın.
    2. ( 'Başlangıç ​​noktası') TLC analizi gerçekleştirmek için 1-5 ul bir kısım çıkarın. Hemen 37 ° C'de bir kuluçka çözelti depolamak ve temsil TLC analizi gerçekleştirmek için bölüntülerin3 saat boyunca zaman noktaları ative.
  3. PBS apo -transferrin aşan doğru Stabilite (B)
    1. Etiketleme çözeltisi 120 ul için pH'ı 7.4'e yükseltmek için, PBS stok çözeltisi 50 ul ve sodyum hidroksit çözeltisi (0.1 M) içinde 430 ul ekle. Apo -transferrin (25 mg / ml) içindeki bir çözeltisi 40 ul ekle. İyice karıştırın.
    2. ( 'Başlangıç ​​noktası') TLC analizi gerçekleştirmek için 1-5 ul bir kısım çıkarın. Hemen 37 ° C'de bir kuluçka çözelti depolamak ve 3 saat boyunca Örnek zaman noktalarında TLC analizi gerçekleştirmek için bölüntülerin.
  4. İnsan serumundaki stabilitesi (C)
    1. insan serumu 500 ul için pH'ı 7.4'e yükseltmek etiketleme çözeltisi 25 ul ve sodyum hidroksit çözeltisi (0.1 M) içinde 45 ul ekle. İyice karıştırın.
    2. ( 'Başlangıç ​​noktası') TLC analizi gerçekleştirmek için 1-5 ul bir kısım çıkarın. Hemen bir incu çözümü saklamak37 ° C'de batör ve bölüntülerin 3 saat boyunca Örnek zaman noktalarında TLC analizi gerçekleştirmek için.

Dağıtım Katsayısı 5. belirlenmesi LogD

  1. PH'ı 7.4'e yükseltmek için, PBS stok çözeltisi 20 ul ve sodyum hidroksit çözeltisi (0.1 M) içinde 170 ul markalama çözeltisi 50 ul bölüm 2'de tarif edildiği gibi etiketleme işlemleri gerçekleştirir.
  2. bu çözüm 200 ul çekiniz ve bir plastik V-şişenin içine koydu. N oktanol 200 ul ekleyin. 2 dakika süreyle flakon ve vorteks kapatın. Daha sonra 5 dakika boyunca 1600 x g'de santrifüjleyin.
  3. N oktanol'un faz ve her sulu fazdan 40 ul triplicates çıkarın ve ayrı V-şişeleri koyun. katmanları karıştırmak için dikkatli olun.
  4. 30 sn için bir gamma sayacında de her numunenin aktivitesi ölçülür. Her numune hemen iki ölçümü tekrarlayın ve bunların ortalama aktivite Ᾱ t hesaplamak için dakikada (cpm) başına sayılarında. Böylece kazanılan Ᾱ t listelemek, ilgili birlikte W1, Ᾱ t, W2 ve Ᾱ t, W3 (sulu örneklerde faaliyetlerin) ve Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (n oktanolde faaliyetler) onların belirlenmesi zaman noktası t.
  5. T 0 olarak son örneğinin ölçüm zamanı noktasını tanımlayın. Belirleyin ve ¨t = tt 0 hesaplayarak dakika içinde ¨t listesi. Aşağıdaki formülü kullanarak, Ᾱ t çürüme düzeltme gerçekleştirin:
    Ᾱ 0 = Ᾱ t · 2 (¨t / 68 dk).
  6. Ortalaması olarak W Ᾱ 0, hesaplayın Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 ve Ᾱ 0, W3 yanı sıra Ᾱ 0, O ortalaması olarak Ᾱ 0, A1, Ᾱ 0, O2 ve Ᾱ 0, O3. aşağıdaki formül kullanılarak logD hesaplayın:
    logD = log [(Ᾱ 0, O · 40 mikrogram) / (Ᾱ 0, W · 33 mikrogram)].
  7. üçlü olarak tüm deneyi gerçekleştirmek ve standart sapma ile birlikte ortalama logD hesaplayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Ligand EOB-DTPA ve radyoaktif olmayan GA (III) 'ün 1 H ve13C {1H} NMR spektroskopisi, kütle spektrometrisi ve elementel analiz ile analiz edildi kompleksi. Şekiller 1-6, Tablo 1 'de listelenmiştir ve gösterilen sonuçlar madde saflığını teyit.

68 Ge / 68 Ga jeneratör elüsyon 400-600 MBq 68 Ga çöz...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

EOB-DTPA çok adımlı bir sentez 33 üzerinden erişilebilir, ancak sadece de gadoxetic asit içeren uygun kontrast ajanları izole edilebilir. Bu amaçla, merkezi Gd (III) iyonu oksalik asit fazlası ile çökeltilebilir. Gd (III) oksalat ve oksalik asitin ayrılması Ligant pH 1.5 soğuk su içinde çökeltme ile izole edilebilir. Bununla birlikte, filtre verimi kolon kromatografisine arttırmak için bunun yerine ya da bir izleme prosedürü olarak gerçekleştirilebilir. Her iki yöntem de% 70 toplam verimle analitik olarak saf...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Yazarların teşekkür hakkı yok.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
primovistM
galyum(III) klorürSigma-Aldrich Co.
suyu (deiyonize edilmiş)-Auma-Tec GmbH tarafından musluk suyu deiyonizasyon ekipmanı
hidroklorik asit 12 MVWR20252.29
sodyum hidroksitPolskie Odczynniki Chemiczne SA
oksalik asitSigma-Aldrich Co.75688
etil asetatBrenntag GmbH10010447
silika jelMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0.063-0.2  mm
TLC silika jel 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
metanolVWR20903.55
etanolBrenntag GmbH10018366
eiethyletherVWR23807.468KOH plakaları üzerinde saklanır
amonyak çözeltisi (% 25)VWR1133.1
pH elektroduVWR662-1657
karıştırma ve ısıtma ünitesiHeidolph505-20000-00
pompaIlmvac GmbH322002
frit-özeltasarım
NMR spektrometresiBruker Coorporation-UltraShield 400
kütle spektrometresiThermo Fisher Scientific Inc.-
element analizörüHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVectorEA 3000 CHNS
döteryumlu su D2Oeuriso-topD214%99,90 D
Etiketleme prosedürleri için gerekli malzeme/ekipman
<>sup>68Ge/68Ga jeneratörITG İzotop Teknolojileri Garching GmbHA150
pompa ve dağıtıcı sistemiScintomicsGmbH-Variosystem
hidroklorik asit %30 (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
su (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
sodyum klorür (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
sodyum asetat (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
buzlu asetik asit (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
sodyum sitrat dihidratVEB Laborchemie Apolda10782>98.5
PS-H + < / sup> Kartuş (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo< / em>-TransferrinSigma-Aldrich Co.T2036
PBS tamponu (tabletler)Sigma-Aldrich Co.79382
insan serumuSigma-Aldrich Co.erkek AB plazma şişeleri
, kolonları, vb.< / em>özel tasarım
pH elektrotundanH4522 Knick Elektronische Messger & auml; te GmbH & Co. KG765-Set
ikili pompa (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
UV Vis dedektörü (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
radyoaktif dedektör (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP sütunuİleri Kromatografi Teknolojileri Ltd.ACE-1110-1503/A100528
HPLC cam şişelerGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipetEppendorf-plastik
şişelerSarstedt AG & Co.6542.007
plastik şişelerGreiner Bio-One International GmbH717201
aktivimetreMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2010
cımbızözel tasarım
inkübatörHeraeus Instruments GmbH51008815
vorteks karıştırıcıFisons-Whirlimixer
santrifüjHeraeus Instruments GmbH75003360
gama kuyusu sayacıMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2100
kromatografi için suMerck KGaA1.15333.2500
kromatografi için asetonitrilMerck KGaA1.00030.2500
trifloroasetik asitSigma-Aldrich91707
TLC radyoaktivite tarayıcıışın testi Isotopenmessgerä te GmbHB00003875beta plastik dedektör ile donatılmıştır
Bayer-0.25 450898810925429% İnsan

Kaynaklar

  1. Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
  2. Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln. Radiologe. 44, 1185(2004).
  3. Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. Primovist, Eovist - what to expect. J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).
  4. Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
  5. Leonhardt, M., et al. Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters. Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).
  6. Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease. J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).
  7. Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. Molecular Imaging with PET. Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).
  8. Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. Radiometals for Combined Imaging and Therapy. Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).
  9. Henze, M., et al. PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas. J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).
  10. Hofmann, M., et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).
  11. Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. Fluorine-18: a new isotope for bone scanning. J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).
  12. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium Radiopharmaceutical Chemistry. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).
  13. Rösch, F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).
  14. Liu, S. The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals. Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).
  15. Haubner, R., et al. Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).
  16. Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function. Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).
  17. Chauhan, K., et al. 68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging. Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).
  18. Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators. Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).
  19. Clevette, D. J., Orvig, C. Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium. Polyhedron. 9, 151-161 (1990).
  20. Prinsen, K., et al. Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography. Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).
  21. Vogl, T. J., et al. Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA. Radiology. 200, 59-67 (1996).
  22. Reimer, P., et al. Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence. Radiology. , 177-183 (1996).
  23. Ba-Ssalamah, A., et al. MRT der Leber. Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).
  24. Scott, R. P. W. Journal of Chromatography Library. 22A, Elsevier Scientific Publishing Co. A137-A160 (1983).
  25. Reichenbaecher, M., Popp, J. Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , 1st, B. G. Teubner Verlag. Wiesbaden. (2007).
  26. Gross, J. H. Mass Spectrometry: A Textbook. , Springer. (2004).
  27. Ma, T. S., Rittner, R. C. Modern Organic Elemental Analysis. , Marcel Dekker, Inc. (1979).
  28. Mueller, D., et al. Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity. Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).
  29. Roberts, T. R. Radio-column chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).
  30. Roberts, T. R. Radio-thin-layer chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).
  31. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium radiopharmaceutical chemistry. Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).
  32. Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates. EJNMMI Res. 2, 13(2012).
  33. Schmitt-Willich, H., et al. Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).
  34. 68Ga generator for positron emission tomography. , DE102010037964B3 (2012).
  35. Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates? ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).
  36. Baur, B., et al. Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep. Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).
  37. Boros, E., et al. RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga. Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).
  38. Beck, W. S. Hematology. , 5th, MIT press. Cambridge, Massachusetts. (1998).
  39. Patel, V., Morrissey, J. Practical and Professional Clinical Skills. , 1, Oxford University Press Inc. New York. (2001).
  40. Bartke, A., Constanti, A. Basic Endocrinology. , 1, CRC Press. (1998).
  41. Bernstein, L. R. Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium. Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).
  42. Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. 67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components. Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).
  43. Dumont, R. A., et al. Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856. J. Nucl. Med. 52, 1498(2011).
  44. Pohle, K., et al. 68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process. Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).
  45. Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3. Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Galyum-68 İzleyicisiEOB-DTPA KompleksiRadyoaktif İşaretlemeRadyo HPLC AnaliziRadyo TLC AnaliziDağılım Katsayısıİn Vitro StabiliteLigand İzolasyonuRadyokimyasal Saflık
EOB-DTPA ve Ga (III) Complex Araştırmalar Onun
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.