içinde Microengineered İnsan Bağırsak Villi Oturma mikrobiyomu Co-kültür, bir Gut-on-a-Chip mikroakışkan Aygıt

Hyun Jung Kim; Jaewon Lee; Jin-Ha Choi; Anthony Bahinski; Donald E. Ingber

doi:10.3791/54344

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

içinde Microengineered İnsan Bağırsak Villi Oturma mikrobiyomu Co-kültür, bir Gut-on-a-Chip mikroakışkan Aygıt

22.5K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/54344

⸱

30 Ağustos 2016

Hyun Jung Kim¹ , Jaewon Lee¹ , Jin-Ha Choi¹ , Anthony Bahinski² , Donald E. Ingber²^,³^,⁴

¹Department of Biomedical Engineering, The University of Texas at Austin, ²Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering at Harvard University, ³Vascular Biology Program, Boston Children's Hospital, Harvard Medical School, ⁴John A. Paulson School of Engineering and Applied Sciences, Harvard University

Bu makalede

Özet

Biz, insan bağırsak-on-a-chip microphysiological sistemi kullanılarak uzun bir süre için bir in vitro protokole ko-kültür bağırsak mikrobiyomları ve bağırsak villi açıklar.

Özet

Burada, bir insan bağırsak-on-a-chip microphysiological cihazda microengineered bağırsak villi çoklu tür uzun süreli ko-kültür, insan bağırsak mikrobiyomları gerçekleştirmek için bir protokol açıklar. Biz fizyolojik, mekanik deformasyonlar ve sıvı kayma akışı sürekli peristalsis taklit uygulanır mikroakışkan bir cihaz, bağırsak lümen-kapiller doku arayüzü özetlemek. Lümen mikrokanal olarak, insan bağırsak epitel Caco-2 hücreleri, bir 'mikropsuz' villus epitel oluşturulması ve ince bağırsak villi yeniden oluşturmak için kültürlenmiştir. Önceden kültürlenmiş mikrobik hücreler, bir konak-mikrop ekosistem kurmak için lümen tarafına aşılanır. mikrobiyal hücreler villi apikal yüzeyine yapışmasını sonra sıvı akışı ve mekanik deformasyonlar bir kalıcı-hal, taze kültür vasatı sürekli olarak tedarik edildiği mikro-ve bağlanmamış bakterileri (bakterial atıklar) sürekli kaldırılır üretilmesi için devam edilir. Genişletilmiş ko-kültür f sonrasıhaftaya ROM gün birden mikrokoloniler rastgele tüyleri arasında yer tespit edilmiştir ve mikrobik ve epitel hücreleri hem de kültür içinde, en az bir hafta boyunca sürekli ve işlevsel kalır. Bizim eş-kültür protokolü sağlık ve hastalık olayını insan mikrobiyomu rolü in vitro çalışmada kolaylaştırabilir çeşitli insan organ bulunabilir diğer host-mikrobiyomları ekosistemlere için çok yönlü bir platformu sağlamak için adapte edilebilir.

Giriş

İnsan bağırsak mikrobiyal türlerin şaşırtıcı çeşitli bir dizi (<1.000 tür) ve muazzam bir mikrobiyal hücrelerin sayısını (insan konakçı hücrelere göre 10 kat daha fazla) ve gen (insan genomu 100 kat daha fazla) ¹ barındırır. Bunlar insan microbiomes, besin ve xenobiotik metabolize bağışıklık tepkilerini düzenleyen ve intestinal homeostasis ² korumada önemli bir rol oynamaktadır. Beklendiği gibi, bu farklı fonksiyonlar verilmiş, ortakçı bağırsak mikrobiyomları yoğun sağlık ve hastalık ³ modüle eder. Böylece, bağırsak mikrobiyomları ve konak-mikrop etkileşimlerinin rolünü anlamak gastrointestinal (GI) sağlığı teşvik ve bağırsak bozukluk....