Yatay Gen Transferi Çalışmasında Metodolojisi<em&gt; Staphylococcus aureus</em

Fabio Cafini; Nguyen Thi Le Thuy; Federico Román; José Prieto; Sarah Dubrac; Tarek Msadek; Kazuya Morikawa

doi:10.3791/55087

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Yatay Gen Transferi Çalışmasında Metodolojisi

16.5K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/55087

⸱

10 Mart 2017

Fabio Cafini^*¹^,² , Nguyen Thi Le Thuy^*³ , Federico Román⁴ , José Prieto⁵ , Sarah Dubrac⁶^,⁷ , Tarek Msadek⁶^,⁷ , Kazuya Morikawa¹

¹Division of Biomedical Science, Faculty of Medicine, University of Tsukuba, ²Department of Basic Biomedical Science, Universidad Europea de Madrid, ³Human Biology Program, School of Integrative and Global Majors, University of Tsukuba, ⁴Laboratory of Nosocomial Infections, Department of Bacteriology, Centro Nacional de MicrobiologÍa, Instituto de Salud Carlos III, ⁵Division of Microbiology, Department of Medicine, School of Medicine, Universidad Complutense, ⁶Biology of Gram-Positive Pathogens, Department of Microbiology, Institut Pasteur, Paris, France, ⁷ERL3526, CNRS, Paris, France

^* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Burada Staphylococcus aureus konjugasyon, transdüksiyon ve doğal dönüşümün, in vitro incelenmesi için, üç farklı protokoller açıklanmaktadır.

Özet

Ana fırsatçı insan patojeni Staphylococcus aureus önemli bir özelliği, hızlı bir şekilde antibiyotiklere direnç elde etmek için olağanüstü yeteneğidir. Genomik çalışmalar S. aureus yatay gen transferi (HGT) S. aureus evriminde önemli bir rol oynadığını düşündürmektedir mobil genetik elementlerin bulunan birçok virülans ve direnç genleri taşıdığını ortaya koymaktadır. Ancak, yine de, eksik özellikle son zamanlarda bu bakterinin rapor edilmiştir doğal dönüşümü ile ilgili olan S. aureus HGT incelemek için kullanılan metodolojinin tam ve ayrıntılı bir açıklama. Konjugasyon faj iletimi ve doğal dönüşümün Bu çalışma, in vitro, S. aureus HGT incelemek için yararlı olan, üç protokollerini tasvir eder. Phenicols veren bu amaçla, cfr gen (kloramfenikol / florfenikol direnci), linkozamitler, Oksazolidinonlar, Pleuromutilins ve streptogramin A (PhLOPS içinA) fenotipi -karşı kullanılmıştır. S. aureus, diğer suşlar genetik materyaller aktaran geçtiği mekanizmaları anlamak direncin hızlı satın kavrama esastır ve yaygınlaştırma modları gözetim programlarında bildirilen veya gelecekte daha da yayılmasını moduna tahmin etmek netleştirmek için yardımcı olur.

Giriş

Staphylococcus aureus, doğal insan ve hayvanların deri ve burun boşluğu yaşar bir ortakçı Gram pozitif bir bakteridir. Bu bakteri türleri hastane ve sağlık ortamlarında hastane enfeksiyonlarının önde gelen nedenidir. Ayrıca, farklı antimikrobiyal bileşiklere direnç geliştirme kabiliyeti küresel bir endişe içine bu bakterinin neden olduğu enfeksiyonların yönetimini yapmıştır.

direnç fenotipleri yayılmasında karışan iki ana yollar bilinmektedir: dayanıklı genotiplerin klonal yayılmasını ve bakteriyel havuz arasındaki genetik belirleyicileri yayılmasını. S. aureus, farklı antibiyotik direnç genleri (ve hastalık oluşumunu be....