Nöromüsküler kavşak işlevleri ölçme

Nöromüsküler kavşak (NMJ) kas fiber motor endplate ve motor nöron axon terminal arasında bağlantı oluşturduğu bir kimyasal synapse var. Kas ve sinir arasındaki iletişim, yaşlanma veya amyotrofik lateral skleroz (ALS) gerçekleştiği sırada bozulmuş olduğunda çok önemli bir rol oynamaya NMJ gösterilmiştir. Kas ve sinir bir çift yönlü yol^1,2' olarak, NMJ kusurları kas defektleri dan ayrı olarak ölçmek için güçlü olmak onların Fizyopatolojik Interplay yeni görüşler sağlayabilir. Gerçekten de, bu işlevsel değerlendirme morfolojik ya da biyokimyasal değişiklikler işlevselliği sinyal neurotransmission azaltmak değerlendirmek için yardımcı olabilir.

Kas contractile yanıt sinir stimülasyonu ve onun membran doğrudan uyarılması tarafından uyarılmış aynı kas yanıt elde edildi karşılaştırılması NMJ işlevselliği dolaylı bir ölçüm evlenme teklif etti. Gerçekten de, sinyal membran stimülasyon geçer tarafından neurotransmission beri iki contractile yanıt-e doğru tüm farklılıkları NMJ değişikliklere atfedilen. Bu yaklaşım yaygın olarak fareler^3,4,5,6,7için önerilen ve ayrıca fare modelleri⁸tarihinde^,9,10,11,12bilgi toplamak için kullanılır.

Burada, tüketim ve soleus siyatik ve diyafram frenik hazırlıkları iki kas-sinir hazırlıklar, yani sınamak için bir yordam ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Bir özel kullanarak yazılım, biz tasarlanmış işlevsellik, NMJ ve kas karakterize birkaç parametre ölçümü birleştirir sürekli bir test Protokolü böylece NMJ hasar kapsamlı bir değerlendirme ayrı ayrı bu kas verimli. Özellikle, protokol seğirme gücü, kas Kinetik, kuvvet-frekans eğrisi için doğrudan ve sinir elektrodlar, hem bir ateş ve tetanic sıklık ve intratetanic yorgunluk⁷neurotransmission başarısızlık¹³ ölçer.

Tüm hayvan deneyleri, Roma La Sapienza Üniversitesi-Histoloji ve Tıbbi Embriyoloji Birimi etik kurulu tarafından onaylandı ve İtalyan Hayvanları Koruma Kanunu'nun güncel versiyonuna uygun olarak gerçekleştirildi.

1. Deney kurulumu

1. 1 adet aktüatör/dönüştürücü, 2 adet stimülatör, 1 adet in-vitro kas aparatı, 1 adet hazırlık doku banyosu, 1 adet aspirasyon elektrodu, 1 adet dijital osiloskop, 1 adet stereomikroskop, 1 adet soğuk ışık aydınlatıcı, 1 adet kayıt kartı, 1 adet konektör bloğu ve bir adet kişisel bilgisayardan oluşan deney sisteminin kurulması.
   NOT: Burada komut yazılımı LabView'da programlanmıştır ve stimülasyonların yüksek esnekliğini, doğruluğunu ve tekrarlanabilirliğini garanti etmek için tasarlanmıştır. Her stimülasyon için, kullanıcı nabız genişliğini, frekansını, süresini seçebilir ve zara mı yoksa sinir yoluyla mı iletileceğine karar verebilir. Kullanıcı ayrıca her stimülasyondan önce dinlenme süresinin uzunluğunu da seçebilir.

2. Soleus ve diyafram kaslarının NMJ kasılma özelliklerinin değerlendirilmesi

1. Sistem ısınması
   1. Krebs Ringer buffer^{14'ü hazırlayın} ve montaj aparatının bulunduğu bir banyoya ve hazırlık dokusu banyosuna yerleştirin. Hazırlık doku banyosuna 4 ml silikon ile hazırlanmış 60 mm'lik bir tabak yerleştirin.
   2. Sirkülasyonlu su banyosunu açın ve sıcaklığı soleus kası için 30 °C'ye ve diyafram kası için 27 °C'ye ayarlayın.
   3. % 95_O2 -% 5 CO₂ karışımının her iki banyoya da akmasına izin verin.
   4. Aktüatörü/dönüştürücüyü ve iki nabız stimülatörünü açın ve akım değerlerini membran stimülasyonu için 300 mA'ya ve sinir stimülasyonu için 5 mA'ya ayarlayın.
      NOT: 300 mA akım değerinin, çözelti < sup sınıfı = "xref>" 15'e D-tubokurarin eklendiğinde sinir dallarında önemli bir kasılmaya neden olmadığı gösterilmiştir. 5 mA akım değeri, çözelti vasıtasıyla indüklenen membran stimülasyonu ile bir örtüşme oluşturmadan kasın sinir yoluyla uyarılması için gereken akım miktarına karşılık gelir. Emme elektrodu ile kas arasındaki mesafe sinir uzunluğuna bağlı olduğundan, bu akım değeri her deneyden önce aşağıda anlatıldığı gibi dikkatli bir şekilde ayarlanmalıdır.
2. Soleus ve diyafram diseksiyonu
   1. Acıyı en aza indirmek için fareyi servikal çıkık ile feda edin ve test için kasları hemen aşağıdaki gibi çıkarın.
   2. Soleus-siyatik hazırlama, diseksiyon ve kurulum
      1. Fare bacağına p etanol püskürtün ve bacağı kaplayan deriyi çıkarın. Bir makasla bacağın üst kısmında bir kesi yapın ve ardından cildi sıkıca çekin. Aşil tendonunu kaval kemiğinden izole edin ve ardından Aşil tendonunu bir makasla kesin.
      2. Tendonu bir çift forseps ile sıkıca sıkıştırın ve gastroknemius kasını soleus ile birlikte yavaşça çekin. Soleusun proksimal tendonu açığa çıktığında, Aşil tendonunu tutarken tüm baldırı bir makasla kesin. Doku örneğini hemen hazırlık doku banyosuna yerleştirin.
      3. Hazırlık banyosunu stereomikroskobun altına yerleştirin ve baldırı 0,20 mm çapında paslanmaz çelik pimler kullanarak silikon tabağa sabitleyin. Bir çift forseps kullanarak, soleusun proksimal tendonunu kelepçeleyin ve siyatik innervasyonunu ortaya çıkarmak için hafifçe çekin.
      4. İnnervasyon açığa çıktığında (Şekil 1), sinirin yaklaşık 5 mm'sini açığa çıkarmak için çevredeki dokuyu dikkatlice çıkarın. Siniri kesmek için ince bir makas kullanın. Soleus'u bir çift forseps ile proksimal tendon üzerine sıkıca sıkıştırırken, tekrar çekin ve Aşil tendonunu bir makasla keserek eksize edin.
      5. Aktüatörün/dönüştürücünün kol kolunun deliğinden bir naylon tel geçirin. Telin ucunda bir ilmik oluşturun ve kas montaj aparatının banyosuna ulaşana kadar teli geri çekmeden önce Aşil tendonunu kavrayın. Proksimal tendonu sabit kelepçenin içine sıkıştırın ve naylon teli kol kolunun etrafına bağlayın. Kasın çözelti içinde dengelenmesine izin verin.
      6. İlk optimum uzunluğu (L₀) belirleyin.
         1. İlk olarak, kası 10 mN'de önceden yüklemek için gerin (bu değer maksimum seğirme kuvvetini garanti eder (deneyime dayalı olarak)). Ardından, ön yükü değiştirmek için kası hafifçe gerin ve bir dizi tek darbeyle uyarın. Maksimum seğirme kuvveti ölçüldüğünde optimum uzunluk elde edilir.
   3. Diyafram frenik hazırlık, diseksiyon ve kurulum
      1. Fare derisine p etanol püskürtün. Göğüs kemiği üzerinden bir makasla kesi yaparak ve cildi sıkıca çekerek diyafram kasını örten cildi çıkarın.
      2. Bir makasla, karnı sternumun altında yatay olarak kesin ve bağırsağı ve organları bir çift forseps ile nazikçe çıkarın. Omurgayı kesmek için bir çift kalın makas kullanın.
      3. Kaburgaları sternumun yaklaşık 1 cm üzerinden kesin ve yatay olarak ilerleyin. Dış organları bir çift forseps ile nazikçe çıkarın ve diyaframı içeren dairesel bir kaburga halkası elde etmek için omurgayı kesin.
      4. Preparatı Krebs Ringer tamponu içeren bir tabakta yıkayın ve ardından üst tarafı yukarı ve sternum öne bakacak şekilde hazırlık doku banyosunun içindeki silikon tabağa yerleştirin.
      5. Stereomikroskobu kullanarak, akciğerleri ve kalan organları dikkatlice çıkarın; frenik sinir sağ tarafta görünecektir (Şekil 2A).
      6. Diyafram boyunca yaklaşık 2 mm'lik bir halka bırakacak şekilde kaburgaları kesin.
      7. Forseps kullanarak, 0.20 mm çapında bir paslanmaz çelik pimi, frenik sinir innervasyonuna karşılık gelen noktada diyafram merkezi tendonuna ve ilgilenilen diyafram şeridini tanımlamak için aynı eksendeki kaburgalara başka bir pim sabitleyin.
      8. Diyaframı yerleştirmek için merkezi tendon üzerine iki ek pim ve seçilen şeridin her iki yanındaki kaburgalara iki pim daha sabitleyin. Gerekirse, frenik siniri forseps kullanarak çevredeki bağ dokusundan temizleyin.
      9. Kavisli bir bıçak kullanarak, Şekil 2B'de gösterildiği gibi bir tendon-kas-kaburga şeridini tanımlamak için diyaframı innervasyonun her iki tarafından kesin.
      10. Aktüatörün/dönüştürücünün kol kolunun deliğinden bir naylon tel geçirin. Telin ucunda bir ilmik oluşturun ve kas montaj aparatının banyosuna ulaşana kadar teli geri çekmeden önce tendonu kavrayın.
      11. Kaburgaları sabit kelepçenin içine sıkıştırın ve naylon teli kol kolunun etrafına bağlayın.
      12. Kasın çözelti içinde dengelenmesine izin verin ve başlangıçtaki optimal uzunluğu (L0) belirleyin.
          1. 5 mN'de önceden yüklemek için kası gerin. Ön yükü değiştirmek için kası hafifçe gerin ve bir dizi tek darbeyle uyarın. Maksimum seğirme kuvveti ölçüldüğünde optimum uzunluk elde edilir.

Şekil 1 - Soleus-siyatik sinir hazırlığı. Soleus-siyatik sinirin cerrahi operasyon sırasında fonksiyonel testleri için. Siyatik, bir çift forseps kullanılarak açığa çıkar. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2 - Diyafram-frenik sinir hazırlığı. Resim, diyafram-frenik sinir hazırlığı eksizyonun (A) bir aşamasını ve fonksiyonel testler (B) için monte edilecek şeridi göstermektedir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

1. NMJ özelliklerinin kas kasılmasından ayrı olarak ölçülmesi
   1. Sinir boyunca stimülasyon için en iyi akım yoğunluğunu ayarlayın ve emme elektrodundan geçen akım darbelerinin, banyodaki akımın yayılmasıyla kas kasılmasına neden olmadığını doğrulayın.
      1. Emme elektrodunu kasın yakınına yerleştirin ve siniri içeri çekin. Akım yoğunluğunu nazikçe arttırırken (5 mA'dan başlayarak), kası bir dizi tek darbeyle uyarın. Optimum akım değeri, seğirme kuvveti maksimum olduğunda belirlenir.
      2. Siniri elektrottan dışarı itin ve birkaç tek darbe verin. Solüsyon vasıtasıyla zar stimülasyonu ile örtüşme nedeniyle kasın kasılmadığından emin olun. Siniri tekrar içeri çekin.
   2. Programı başlatın ve istenen test protokolünü çalıştırmak için giriş dosyasını seçin.
      NOT: Giriş dosyası, tüm protokolü çalıştırmak için gereken tüm stimülasyon parametrelerini içerir. Her iki kas için aynı protokol yapısı kullanılsa da, stimülasyon parametreleri protokole bağlı olarak farklılık gösterir: soleus veya diyafram kaslarına atıfta bulunur.
      1. Soleussiyatik sinir stimülasyonu (bakınız Tablo 1)
         1. Tüm elektriksel stimülasyonlar için aşağıdaki darbe genişliklerini kullanın: siyatik sinir stimülasyonu için 1,4 ms ve doğrudan soleus stimülasyonu için 0,1 ms. Tam protokol yaklaşık 65 dakika sürer.
      2. Diyafram frenik sinir stimülasyonu (bakınız Tablo 2)
         1. Tüm elektriksel stimülasyonlar için aşağıdaki darbe genişliklerini kullanın: frenik sinir stimülasyonu için 1,8 ms ve doğrudan diyafram stimülasyonu için 0,2 ms. Tam protokol yaklaşık 55 dakika sürer.
      3. Deney protokolünün sonunda, sırasıyla 0.05 mm hassasiyette bir analog kumpas ve 0.1 mg hassasiyette bir hassas ölçek kullanarak kasın uzunluğunu ve ıslak ağırlığını ölçün.
         1. Kas kütlesini optimal lif uzunluğunun (L_f) ve memeli iskelet kasının yoğunluğunun (1.06 mg/mm³) çarpımına bölerek kesit alanını (CSA) hesaplayın¹⁶.
            NOT: L_f, L_0'ın lif uzunluğu/kas uzunluğu oranıyla çarpılmasıyla elde edilir (soleus muscle^{16 için 0,71} ve diyafram kası^{17 için 1}).

Tablo 1 - Soleus-siyatik sinir stimülasyon protokolü. Tablo, soleus-siyatik sinir preparatlarını test etmek için tam protokolü oluşturan testlerin sırasını listeler.

Tablo 2 - Diyafram-frenik sinir stimülasyon protokolü. Tablo, diyafram-frenik sinir preparatlarını test etmek için tam protokolü oluşturan testlerin sırasını listeler.

3. Veri analizi

NOT: Protokolün sonunda istenen tüm parametreleri aşağıdaki gibi hesaplayın.

1. Tek nabız stimülasyonundan
   1. Seğirme kuvvetini (mN; seğirme sırasında üretilen maksimum aktif kuvvet) ve özgül seğirme kuvvetini (mN/^mm2) hesaplayın. İlk ön yük değerini kas tarafından üretilen maksimum kuvvete çıkararak hesaplayın. Spesifik seğirme kuvvetini, seğirme kuvvetinin kas CSA'sına bölünmesiyle hesaplayın.
   2. Darbe serbest bırakmasından seğirme kuvvetine kadar geçen süre olarak tepe gerilimine kadar geçen süreyi (TTP) (ms) hesaplayın.
   3. Yarım gevşeme süresini (1/2RT) (ms) seğirme kuvvetinden seğirme kuvvetinin P'sine kadar olan süre olarak hesaplayın.
   4. Kasılma fazı sırasında kuvvet türevinin maksimum değeri olarak dF/dt'yi (mN/ms) hesaplayın.
   5. Gevşeme fazı sırasında kuvvet türevinin maksimum değeri olarak -dF/dt'yi (mN/ms) hesaplayın.
2. Nabız treni stimülasyonlarından
   1. Kaynaşmamış kuvveti (mN) ve özgül kaynaşmamış kuvveti (mN/^mm2) hesaplayın. İlk ön yük değerini kas tarafından üretilen maksimum kuvvete çıkararak hesaplayın. Spesifik kaynaşmamış kuvveti, kaynaşmamış kuvvetin kas CSA'sına bölünmesiyle hesaplayın.
      NOT: Kaynaşmamış kuvvet, tetanik frekanstan daha düşük bir frekansa sahip bir darbe dizisi sırasında üretilen maksimum aktif kuvvettir.
   2. Tetanik kuvveti (mN) ve özgül tetanik kuvveti (mN/mm2) hesaplayın; maksimum kuvvet, tetanik frekansta iletilen bir darbe dizisi sırasında üretilen maksimum aktif kuvvettir. İlk ön yük değerini kas tarafından üretilen maksimum kuvvete çıkararak hesaplayın. Spesifik tetanik kuvveti, tetanik kuvvetin kas CSA'sına bölünmesiyle hesaplayın.
   3. Kuvvet-frekans eğrisini hesaplayın. Artan stimülasyon sıklığına karşı her bir stimülasyon için elde edilen kuvvetin (veya spesifik kuvvetin) değerini çizin. Tipik olarak, tek nabız stimülasyonu ile başlar ve tetanik frekans ile sona erer.
3. Yorgunluk paradigmalarından
   1. Nörotransmisyon yetmezliğini (NF) şu şekilde hesaplayın:
      
      MF, kas stimülasyonunu takiben kuvvet azalmasıdır ve F, kas stimülasyonundan sonraki ilk nabız treninde ölçülen sinir stimülasyonunu takiben kuvvet azalmasıdır.
   2. İntetani yorgunluğu (IF) şu şekilde hesaplayın:
      
      burada F_lp, stimülasyonun son nabzında kas tarafından üretilen kuvvettir ve F_m, aynı nabız treni sırasında kas tarafından üretilen maksimum kuvvettir. Sinir stimülasyonu ile ilgili olarak, doğrudan stimülasyondan hemen sonra ilk nabız trenindeki intratetanik yorgunluğu hesaplayın.

4. İstatistiksel analiz

NOT: İstatistiksel analiz modelleri, hem sinir hem de membran stimülasyonlarına kas yanıtının aynı hayvan modeli içinde mi yoksa 2 farklı hayvan modeli arasında mı karşılaştırıldığına göre seçilmelidir^18,19.

Doğrudan
1. ve dolaylı stimülasyonlara yalnızca kas tepkilerini karşılaştırıyorsanız, TTP, 1/2RT, dF/dt, -dF/dt için Öğrenci t testini kullanın. 2 farklı fare suşundan elde edilen kas preparatlarını karşılaştırıyorsanız, sabit faktörler olarak stimülasyon tipi ve fare suşu ile 2 yönlü ANOVA kullanın. 2 yönlü ANOVA önemli bir sonuç verdiğinde, istatistiksel farklılıkları aramak için birden fazla karşılaştırma testi kullanın.
2. Kuvvet-frekans eğrisi için (doğrudan ve dolaylı stimülasyonlara yalnızca kas tepkileri karşılaştırılıyorsa), sabit faktörler olarak stimülasyon tipi ve stimülasyon sıklığı ile 2 yönlü ANOVA kullanın. Gerekirse birden fazla karşılaştırma testi kullanın.
   1. 2 farklı fare suşundan elde edilen kas preparatlarını karşılaştırıyorsanız, sabit faktörler olarak stimülasyon tipi, stimülasyon sıklığı ve fare suşu ile 3 ANOVA kullanın.
      1. 3 ANOVA, hayvan suşu ve stimülasyon tipi faktörlerinin önemli bir etkisini verdiğinde, aynı anda 2 grup arasındaki önemli farklılıkları belirlemek için 2 ANOVA kullanın. Örneğin, 2 grubun membran stimülasyonuna kas tepkisi arasındaki farklar veya bir grup içindeki doğrudan ve dolaylı stimülasyonlara kas tepkisi arasındaki farklar değerlendirilebilir.
3. İntetantik yorgunluk
   NOT: Protokol, kontrol farelerinde bile sinir stimülasyonuna yanıt olarak yorgunluğu indüklemek için tasarlandığından, bu parametre yalnızca 2 fare suşu arasındaki farkları araştırmak için kullanılabilir ve tek bir grup içindeki istatistiksel bir analiz her zaman önemli farklılıklar sağlayacaktır.
   1. İki grubu karşılaştırmak için, sabit faktörler olarak stimülasyon türü, zaman ve fare zorlanması ile 3 ANOVA kullanın. 3 ANOVA, hayvan suşu ve stimülasyon tipi faktörlerinin önemli bir etkisini verdiğinde, kuvvet-frekans eğrisinde olduğu gibi, bir seferde 2 grup arasındaki önemli farkları belirlemek için 2 ANOVA kullanın.
4. Nörotransmisyon yetmezliği için, sabit faktörler olarak hayvan suşu ve zaman ile 2 yönlü ANOVA kullanın. Önemli sonuçlar döndürürse, istatistiksel farklılıkları aramak için birden çok karşılaştırma testi kullanın.
   NOT: Bu parametre her fare zorlanması için yalnızca bir değer döndürdüğünden, farklı fare modellerinin karşılaştırılmasına olanak tanır.
5. Kas ağırlığı, uzunluğu ve CSA için, farklı hayvan modellerinden kas-sinir preparatlarını karşılaştırırken farklılıkları araştırmak için Student t testini kullanın.

Biz açıklanan protokol fonksiyonel denervation birkaç nöromüsküler hastalıklar veya yaşlanma-mücadele hakkında bilgiler sağlar. Bu iletişim kuralı olup olmadığını (ve eğer öyleyse, hangi düzeyde) belirlemek için kullanılan kas değişiklikler çoğu kas kendisi veya nöromuskuler iletim oluşan seçici değişiklikleri nedeniyle. Aşağıda gösterilen veri amyotrofik lateral skleroz hastalığı20son aşamasında SOD1G93A transgenik fare modeli üzerinde yapılan bizim grup18tarafından bir önceki çalışmanın sonuçlarıdır. SOD1G93A transgenik fare ubiquitously mutant antioksidan enzim süperoksit dismutaz 1 (SOD1) overexpresses. Şekil 3 ve 4 dF/dt ve soleus siyatik sinir (solda) ve diyafram frenik sinir (sağda) hazırlıkları tetanic kuvvet değerlerinin göster. Bu sonuçlara NMJ için kesinlikle kas için ilgili tersine ilişkili transgenik kaslarda işlev hataları tespit etmek için burada önerilen teknik yeteneğini göstermek. Nitekim, dF/dt ve tetanic gücü için SOD1G93A soleus kas kontrolü kas, ne zaman doğrudan teşvik ve bir daha da azaltma sinir uyardığında görüntülenen ile karşılaştırıldığında düşük bir contractile yanıt görüntülenir. Buna karşılık, diyafram kas şeritler membran uyardığında diyafram kas sinir uyardığında önemli değişiklikler tespit edildi, ancak hafif değişiklikler bu iki parametre gözlendi.

Şekil 3 - Contractile Kinetik. DF/dt ± SEM soleus (A) ve diyafram (B) için hazırlıklar demek. Soleus numuneler görüntülenen bir önemli yavaşlama aşağı doğrudan uyardığında (-27%) ve bir daha da düşüş sinir uyardığında (-58%). Diyafram numuneler görüntülenen bir sinir uyardığında yavaşlama (-30%). Rizzuto vd. 18uyarlanmıştır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Şekil 4 - Tetanic kuvvet. Tetanic belirli kuvvet ± SEM soleus (A) ve diyafram (B) için hazırlıklar demek. Soleus numuneler görüntülenen bir önemli yavaşlama aşağı doğrudan uyardığında (-26%) ve sinir uyardığında daha fazla bir düşüş (-50%). Diyafram numuneler görüntülenen yalnızca sinir uyardığında kuvvet azalması (-44%). Rizzuto vd. 18uyarlanmıştır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Değerlendirme intratetanic yorgunluk ve neurotransmission hata ölçülecek NMJ belirli parametrelere izin. Şekil 5 (Eğer tetanic yorgunluk paradigma soleus kaslar (şekil 5A) sırasında ölçülen) intratetanic yorgunluk ortalama değerleri gösterir ve diyafram (şekil 5B) şeritler. Protokol bölümünde bildirildiği gibi biz uygulanan yorgunluk paradigma değil kas NMJ yine de stres şekilde geliştirilmiştir. Sonuç olarak, doğrudan kas uyarımı asla değiştirildi için IF ölçülür. Sinir stimülasyonu farklı fare suşları arasında karşılaştırmalar için düşünülmelidir parametresi için gerçekten de, eğer hesaplanan. Bizim sonuçları IF transgenik soleus ve diyafram kaslarında kontrol karşıtları daha önemli ölçüde daha düşük gösteriyor. Bu fark içinde bir küçük kas hatası algılandı, diyafram, daha ve daha küçük soleus, hangi zaten önemli kas hasarı ölçülen. Transgenik soleus kas önemli ölçüde zarar görmüş olduğundan, NMJ değerlendirme sadece transgenik kas kuvvet uyarılmış zaman null değeri döndürmek gereken süredir stimülasyon, 8 dakikaya kadar için doğru akılda nce karşılanması. Transgenik soleus stimülasyon 8 dk sonra değerler temel olarak gürültü ifade EDERSEK.

Şekil 5 - İntratetanic yorgunluk. İntratetanic yorgunluk soleus (A) ve diyafram (B) kasları için transgenik NMJ işlevselliği önemli bir azalma görüntülenir. Ortalama ± SEM uyarlama sayfasından Rizzuto vd. 18değerlerdir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Şekil 6 soleus (şekil 6A) ve diyafram (şekil 6B) numuneler ölçülen tetanic frekansta neurotransmission başarısızlık gösterir. Diyafram kas numuneler önemli bir artış nöromüsküler kavşak fatigability içinde görüntülenen, ancak eğer sonuçları doğrultusunda soleus kas neurotransmission hiçbir kusur tespit edilmiştir.

Şekil 6 -Neurotransmission hatası. Neurotransmission başarısızlık herhangi bir değişiklik soleus kasları (A) içinde göstermedi, NMJ işlevindeki transgenik önemli bir azalma vurgulanan iken diyafram (B) şeritler. Ortalama ± SEM uyarlama sayfasından Rizzuto vd. 18değerlerdir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Yazarlar ifşa gerek yok.