Method Article

Gıda kaynaklı patojen tarama kullanarak Manyeto-floresan Nanosensor: E. Coli O157: H7 hızlı tespiti

DOI:

10.3791/55821

⸱

September 17th, 2017

 ,  ,  ,  , 
1Department of Chemistry and Kansas Polymer Research Center, Pittsburg State University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hızlı algılama özellikle patojenik bakterilerin manyetik gevşeme ve floresan emisyon modaliteleri kombinasyonu ile hedef ve bu protokol genel amacı, düşük maliyetli, taşınabilir için fonksiyonel nanosensors sentez etmektir.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7-var bağlı su bazlı hem de ve gıda kaynaklı hastalıklar ve bir tehdit rağmen gıda ve su filtreleme yöntemleri kullanılan şu anda kalır. Polimeraz zincir tepkimesi (PCR) ve enzim bağlı immunosorbent deneyleri (ELISA) özellikle patojenik kirleticiler, algılayabilir gibi konvansiyonel bakteri algılama yöntemleri, bunlar geniş numune hazırlama ve uzun bekleme süreleri gerektirir. Ayrıca, bu uygulamaları talep gelişmiş Laboratuvar Cihazları ve ayarları ve eğitimli profesyoneller tarafından yürütülmelidir. Burada, bir protokol manyetik ve floresan parametreleri nanoparçacık tabanlı bir platform, eşsiz kombinasyonu özellikleri basit bir tanı tekniği için önerilmiştir. Önerilen multiparametric Manyeto-floresan nanosensors (MFnS) E. coli O157: H7 kirlenme olduğu kadar az 1 adet az 1 h çözümünüzde mevcut koloni oluşturan ile algılayabilir. Ayrıca, MFnS gibi karmaşık medyada son derece işlevsel kalır yeteneği süt ve göl su doğrulanmadı. Ek özgüllük deneyleri de MFnS yalnızca belirli hedef bakteri, hatta huzurunda benzer bakteriyel tür algılama yeteneğini göstermek için kullanılmıştır. Manyetik ve floresan yöntemleri eşleştirme algılama ve patojen bulaşma her iki erken ve geç-aşamalı kirlenme algılama içinde yüksek performans sergileyen konsantrasyonları, geniş bir alanda miktar sağlar. Etkinliği, uygun fiyatta ve MFnS taşınabilirliği için bakım noktası tarama bakteriyel kirletici için ideal bir aday ayarları, geniş bir ticari olarak paketlenmiş gıda su depoları dan onları.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bakteriyel kontaminasyon hem de kalıcı geçtiği ticari gıda üretilen ve su kaynaklarının giderek hızlı ve spesifik tanı platformları için bir ihtiyaç yarattı. 1 , 2 , Salmonella, Staphylococcus, Listeria, Vibrio, Shigella, Bacillus ve Escherichia cins daha yaygın bakteriyel kirletici için yiyecek ve su kirlenmesi sorumlu bazılarıdır. 3 , 4 kez bakteriyel kontaminasyon Bu patojenler tarafından ateş, kolera, gastroenterit ve ishal gibi belirtiler olur. 4 su kaynaklarının kirlenme kez yeterince filtrelenmiş su erişimi olmayan topluluklar üzerinde ciddi ve olumsuz etkileri vardır ve gıda kontaminasyonu hastalıklar ve ürün geri çekme çabaları çok sayıda için açmıştır. 5 , 6

Bakteriyel kirlenme tarafından neden olduğu hastalıkların oluşumunu azaltmak için bir dizi hangi su ve yiyecek verimli satış veya tüketim önce taranabilir yöntemleri geliştirmek için çaba olmuştur. PCR,1,7,8,9,10 ELISA,11,12 döngü-aracılı izotermal amplifikasyon () gibi 3 teknikleri LAMBA),13,14 diğerleri arasında15,16,17,18,19,20,21, 22,23,24 son zamanlarda çeşitli patojenler tespiti için kullanılır. Geleneksel bakteriyel kültür yöntemleri ile karşılaştırıldığında, bu tekniklerin özgüllük ve zaman açısından çok daha verimli. Ancak, bu teknikler hala yanlış pozitif ve negatif, karmaşık prosedürleri ve maliyet ile mücadele. 1 , 3 , 25 multiparametric Manyeto-floresan nanosensors (MFnS) bakteriyel algılama için alternatif bir yöntem olarak önerilen bu nedenle içindir.

Bu nanosensors benzersiz olarak birlikte manyetik gevşeme ve floresan yöntemleri, hızlı ve doğru bir çift-algılama platformu için izin eşleyin. E. coli O157: H7 örnek kirletici kullanarak, MFnS dakika içinde olduğu kadar az 1 CFU algılama yeteneğini gösterilmiştir. Patojen özel antikorlar özgüllüğü artırmak için kullanılır ve algılama ve miktar her iki düşük ve yüksek kirlilik aralıklardaki bakteriyel kirletici için manyetik ve floresan modaliteleri kombinasyonu sağlar. 16 bakteriyel kontaminasyon durumunda patojen özgü antikorların hedefleme yetenekleri nedeniyle bakteri çevresinde nanosensors swarm. Manyetik nanosensors ile bakteri arasındaki manyetik demir çekirdekli ve çevresindeki su proton arasındaki etkileşimi sınırlar. Bu artış T2 gevşeme zamanlarda manyetik bir relaxometer tarafından kaydedildiği şekilde neden olur. Çözüm bakterilerde konsantrasyon yükselir gibi bakteri, alt T2 değerleri kaynaklanan artan sayıda nanosensors dağıtmak. Tersine, Floresans emisyon nanosensors patojen için doğrudan bağlı artan sayıda nedeniyle bakteri konsantrasyonu ile orantılı artar. Santrifüjü örnekleri ve bakteriyel Pelet yalıtım sadece doğrudan herhangi bir serbest yüzer nanosensors kaldırılması ve doğrudan Floresans emisyon sayısı ile korele bakteri iliştirilmiş nano tanecikleri tasarruf etmek bakteri içinde çözüm sunuyoruz. Bu mekanizma şematik gösterimi şekil 1' de temsil edilir.

Bu MFnS platform bakım noktası tarama unutmayın, düşük maliyetli ve taşınabilir özellikleri kaynaklanan ile dizayn edilmiştir. MFnS oda sıcaklığında kararlı olduğunu ve sadece doğru algılama bakteriyel kirletici için çok düşük konsantrasyonlarda gerekmektedir. Ayrıca, sentez sonra MFnS kullanımı basittir ve alanında eğitimli uzmanları kullanımı gerektirmez. Son olarak, bu tanı platform, bu tarafından bir platformda her türlü patojenler birçok farklı ortamlarda algılamak için kullanılan bir araç sağlayarak son derece özelleştirilebilir hedefleme için sağlar.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. sentez ve çok parametrik Manyeto-floresan Nanosensors (MFnS) Functionalization.

  1. Superparamagnetic demir oksit sentezi nano tanecikleri (IONPs)
    1. IONP sentezi için hazırlamak için aşağıdaki 3 çözümleri hazırlamak: çözüm 1: FeCl 3 (0.70 g) ve FeCl 2 H 2 O içinde (2 mL), çözüm 2: NH 4 OH (2.0 mL, 13.4 M) H 2 O (15 mL) ve çözüm 3: polyacrylic asit (0.855 g) H 2 O (5 mL).
    2. 2 M hidroklorik asit (HCl) 90 µL çözüm 1'e ve daha sonra hemen vortexing 875 devirde iken çözüm 2 ile karıştırın. O zaman çözüm 3 ekleyin. Vortexing 60 dakika süreyle devam
    3. Santrifüj için 1,620 x g., 20 dk santrifüj kapasitesi süpernatant 2.880 x g., 20 dk
    4. Son süpernatant ile diyaliz arındırmak. Süpernatant bir Diyaliz Ekle (MWCO 6 − 8 K) ve fosfat tamponlu tuz (PBS) içeren bir ölçek yerleştirin (pH 7.4 =) ve spin bar. Her 2-3 h. ile taze tampon yerine 12 h için emmek izin
  2. IONPs yüzey için hedef özgü antikorların konjugasyon
    1. Aşağıdaki dört çözümleri hazırlamak: çözüm A: 5 mg 1-etil - 3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hidroklorid (EDC) 250 µL MES [2-(N- morpholino) ethanesulfonic asit] arabellek (0.1 M, pH 6.8 =), çözüm B: 3 mg, N-Hydroxysuccinimide (NHS) 250 µL MES arabelleği (0.1 M, pH 6.8 =), Igg1, E. coli mAb fosfat tamponlu tuz (PBS) (pH 7,4) 225 µL içinde çözüm C: 5 µg ve IONP çözüm D: 4 mL (5.0 mmol) PBS (pH 7,4) 1 ml.
    2. Ekleyin 2-(N-Morpholino) ethanesulfonic asit (MES) arabellek eriyik-e doğru A, o zaman hemen çözüm eklemek A çözüm D 15 içinde küçük artışlarla s, çözüm karıştırma için her eklenmesinden sonra ters çevirme.
    3. Hemen çözüm B çözüm D için küçük aralıklarla üç dakikalık bir süre içinde eklemek için başlayın. Her eklenmesinden sonra çözüm ters çevirme tarafından Mix.
    4. 5 µL artırımlarıyla çözüm çözüm C eklemek çözüm karıştırma için her eklenmesinden sonra ters çevirme.
    5. Oda sıcaklığında 3 h için devam etmek ve o zaman kuluçka gecede 4 ° C'de devam etmek tepki izin.
    6. Arındırmak manyetik sütun PBS kullanma yolu ile elde edilen Ab Birleşik IONPs (pH 7.4, final [Fe] = = 3,5 mmol) herhangi bir çekimsiz antikorlar kaldırmak için.
      1. Yıkama manyetik sütun PBS (1 mL) ile. Sütun için manyetik plaka ekleyin ve IONP çözüm ekleyin.
      2. Manyetik sütun PBS (1 mL) ile tekrar yıkayın. Manyetik sütun Manyetik plaka kaldırın. PBS sütununu ekleyin ve çözüm toplamak. Mağaza 4 ° C'de
  3. Floresan 1,1 kapsülleme ' - Dioctadecyl - 3,3,3 ', 3 '-Tetramethylindocarbocyanine perklorat (dıı) boya kullanarak antikor Birleşik IONPs polyacrylic asit (PAA) kaplama içine bir Solvent Difüzyon yöntemi.
    1. IONPs 4 mL için dropwise 2.0 ekleyin dıı boya (2 mmol) 100 µL DMSO, sürekli 1100 devir / dakikada karıştırma ile µL.
    2. [Fe] son demir konsantrasyonu ile son bir MFnS çözüm oluşturma PBS karşı elde edilen çözüm (MWCO 6-8 KDa, 12 h) diyaliz 2 mmol =.
  4. MFnS karakterizasyonu
    1. spektrofotometrik analiz için bir plaka okuyucu ile floresan emisyon 595, kapsüllenmiş dıı boya algılamak için kullanın nM.
    2. Dinamik ışık saçılma
      1. ortalama boyutu ve MFnS yüzey ücret belirlemek için zetasizer MFnS çözüm örneği yerleştirin.
        Not: Burada, ortalama boyutu ve fonksiyonel MFnS yüzey ücret 77.09 bulundu nm ve-22.3 mV, sırasıyla.

2. Bakteriyel Culturing ve hisse senedi çözüm hazırlık

  1. bakteri kültürü
    1. besin suyu 1 ml dondurularak Pelet (E. coli O157: H7) hidrat ve bir ek 5 mL suyu ekleyin.
    2. Bu çözümün bir agar plaka ve çizgi uygulamak 100 µL kuluçka için 24 h 37 ° C'de ve ardından bir steril aşılama döngü kullanarak
    3. Sonra 24 h, izole bir koloni agar plaka seçin ve bir 15 mL kültür suyu ekleyin. Süre optik yoğunluk değeri izleme için 4-6 h, 37 ° C'de kuluçkaya (600 Absorbans nm).
    4. Bir optik yoğunluk değerini 0.1 alındıktan sonra kültür durdurmak ve seri dilutions gerçekleştirmek.
  2. Seri dilutions
    1. ekleyin 900 µL sekiz steril microcentrifuge tüpler için besin suyu.
    2. Ekle 100 µL bakteriyel süspansiyon ilk tüp (seyreltme 10 -1).
    3. Al 100 µL ilk tüp ve ikinci 10 -2 seyreltme elde etmek için ekleyin. Bu model 10 -8 son bir seyreltme ile biten kalan tüpler için devam.
    4. Transfer 100 µL Ağar kaplamalar ayrı ve 37 24 h için kuluçkaya her tüp ° C.
    5. Ertesi gün, her tabağa birimleri (CFUs) oluşturan colony saymak. ~ 100 CFUs ile kalıbı seçin. Karşılık gelen dilutions daha fazla deneyler için kullanın (100 µL ~ 100 CFUs =).
      Not: Burada ~ 100 CFUs sonuçlanan 10 -6 seyreltme oldu.

3. MFnS kullanarak hızlı algılama E. coli O157: H7

  1. 1-100 arasında değişmektedir CFU sonuçlanan 10 -6 bakteriyel hisse senedi, miktarda artan çeşitli PBS Çözümleri (1 X, pH 7.4, 300 µL) Spike. MFnS tutarlı bir miktar eklemek (100 µL) Bu çözümler için.
  2. Sadece PBS (1 X, pH 7.4, 300 µL) içeren bir temel çözüm oluşturmak ve MFnS (100 µL).
  3. 37 ° C'de 30 dk için çözümler kuluçkaya ve sonra oda sıcaklığında soğumaya izin.
  4. Manyetik relaxometer (0,47 Tesla) ve kayıt değişiklikleri gevşeme zamanlarda (T2) her çözümde CFUs göre transfer bireysel çözümler.
      T2 değerlerde değişiklikleri kaydetmek, sadece PBS ve MFnS içeren temel çözüm T2 değerini ölçerek başlamak için
    1. .
      1. Yer manyetik çözümde relaxometer. İlgili yazılım açık, seçin " T2 gevşeme " ayarı ve basın " ölçü birimi. "
    2. temel T2, topluluğu takip çeşitli ile çivili ek çözümler T2 değerini ölçmek bakteri konsantrasyonları.
      Not: Taban çizgisi çivili T2 düşülen T2 T2 değişiklik eşdeğerdir.
  5. Manyetik relaxometer örnekleri kaldırmak ve 10 dakika süreyle 2880 x g de tüpler santrifüj kapasitesi
  6. Süpernatant dikkatle boşaltmak ve PBS (1 X, pH 7,4) 100 µL içinde bakteri granül resuspend.
  7. Eklemek 80 µL, her resuspension bir 96-şey plaka ve kayıt Floresans Koyulukları 595 nM.
    Not: Test sonuçları bölümünde açıklandığı gibi göl su, süt ve diğerleri dahil olmak üzere farklı çözücüler kullanılarak tekrar edilebilir

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MFnS etki mekanizması şekil 1' de temsil edilir. MFnS bakteriyel kirletici yüzeyi kümeleme MFnS magnetic cores ve çevresindeki hidrojen çekirdekleri arasındaki etkileşimler etkilemektedir. Bu kümeleme, manyetik gevşeme sonucu olarak değerlerini artırmak. Bakteriyel kirletici konsantrasyonu arttıkça, kümeleme azaltır ve T2 değerleri değişikliği azalır. Bu nedenle, bir floresan modality eklenmesi önemlidir. Bakteri konsantrasyonu arttıkça, her iki düşük ve yüksek konsantrasyon aralıklardaki ba...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu iletişim kuralı basit tamamen işlevsel MFnS üretmek için tasarlanmış mümkün olduğunca. Ancak, değişiklik Protokolü'nün kullanıcının nihai hedef bağlı olarak yararlı olabilecek çok önemli noktalar vardır. Örneğin, farklı antikor kullanımı birçok diğer patojenleri hedefleme için izin verecek. Ayrıca, bu iletişim kuralını molekülleri hedefleme olarak antikor kullanımı sınırlı değildir. Konak hücre reseptörleri gibi hedef patojenler için özel bağlayıcı ilgi olan herhangi bir molekül molekü...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu nanoteknoloji gösterdiği uygulama henüz FDA tarafından onaylanmış değil.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu eser K-INBRE P20GM103418, Kansas soya Komisyonu (KSC/PSU 1663), ACS PRF 56629-UNI7 ve PSU polimer kimya başlangıç Fonu, tüm SS tarafından desteklenmektedir. Biz Üniversitesi videoları çekiyor, Bay Jacob Anselmi, video ile onun en iyi çalışma için teşekkür ederim. Biz de Bay Roger Heckert ve Bayan Katha Heckert cömert destekleri araştırma için teşekkür ederiz.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Demir Klorür TetrahidratFisher ScientificI90-500
Ferrik Klorür HeksahidratFisher ScientificI88-500
Amonyum HidroksitFisher ScientificA669S-500
Hidroklorik AsitFisher ScientificA144S-500
Poliakrilik AsitSigma-Aldrich323667-100G
EDCThermofisher Scientific22980
NHSFisher ScientificAC157270250
Anti-E. coli O111 antikoru sera care5310-0352
Anti-E. coli O157:H7 antikoru [P3C6] Abcamab75244
DiI LekeFisher ScientificD282
Besin SuyuDifco233000
Dondurularak kurutulmuş E. coli O157:H7 peletATCC700728
Manyetik Relaxomteter Brukermq20
ZetasizerMalvernNANO-ZS90
Plaka Okuyucu TecanInfinite M200 PRO
Manyetik Kolon QuadroMACS130-090-976
SantrifüjEppendorf5804 Serisi
Santrifüj (accuSpin Micro 17)Fisher Scientific13-100-676
Zemin Modeli Sallama İnkübatörüSHEL LABSSI5
Analitik TeraziMetler ToledoME104E
Dijital Vorteks KarıştırıcıFisher Scientific02-215-370
Açık Hava Sallanan ÇalkalayıcıFisher Scientific02-217-765

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Law, J. W., Ab Mutalib, N. S., Chan, K. G., Lee, L. H. Rapid methods for the detection of foodborne bacterial pathogens: principles, applications, advantages and limitations. Front Microbiol. 5, 770(2014).
  2. Pandey, P. K., Kass, P. H., Soupir, M. L., Biswas, S., Singh, V. P. Contamination of water resources by pathogenic bacteria. AMB Express. 4, 51(2014).
  3. Zhao, X., Lin, C. W., Wang, J., Oh, D. H. Advances in rapid detection methods for foodborne pathogens. J Microbiol Biotechnol. 24 (3), 297-312 (2014).
  4. Heithoff, D. M., et al. Intraspecies variation in the emergence of hyperinfectious bacterial strains in nature. PLoS Pathog. 8 (4), e1002647(2012).
  5. Ishii, S., Sadowsky, M. J. Escherichia coli in the Environment: Implications for Water Quality and Human Health. Microbes Environ. 23 (2), 101-108 (2008).
  6. Chiou, C. S., Hsu, S. Y., Chiu, S. I., Wang, T. K., Chao, C. S. Vibrio parahaemolyticus serovar O3:K6 as cause of unusually high incidence of food-borne disease outbreaks in Taiwan from 1996 to 1999. J Clin Microbiol. 38 (12), 4621-4625 (2000).
  7. Zhou, G., et al. PCR methods for the rapid detection and identification of four pathogenic Legionella spp. and two Legionella pneumophila subspecies based on the gene amplification of gyrB. Appl Microbiol Biotechnol. 91 (3), 777-787 (2011).
  8. Chen, J., Tang, J., Liu, J., Cai, Z., Bai, X. Development and evaluation of a multiplex PCR for simultaneous detection of five foodborne pathogens. J Appl Microbiol. 112 (4), 823-830 (2012).
  9. LeBlanc, J. J., et al. Switching gears for an influenza pandemic: validation of a duplex reverse transcriptase PCR assay for simultaneous detection and confirmatory identification of pandemic (H1N1) 2009 influenza virus. J Clin Microbiol. 47 (12), 3805-3813 (2009).
  10. Mahony, J. B., Chong, S., Luinstra, K., Petrich, A., Smieja, M. Development of a novel bead-based multiplex PCR assay for combined subtyping and oseltamivir resistance genotyping (H275Y) of seasonal and pandemic H1N1 influenza A viruses. J Clin Virol. 49 (4), 277-282 (2010).
  11. Alvarez, M. M., et al. Specific recognition of influenza A/H1N1/2009 antibodies in human serum: a simple virus-free ELISA method. PLoS One. 5 (4), e10176(2010).
  12. Huang, C. J., Dostalek, J., Sessitsch, A., Knoll, W. Long-range surface plasmon-enhanced fluorescence spectroscopy biosensor for ultrasensitive detection of E. coli O157:H7. Anal Chem. 83 (3), 674-677 (2011).
  13. Zhang, J., et al. Rapid visual detection of highly pathogenic Streptococcus suis serotype 2 isolates by use of loop-mediated isothermal amplification. J Clin Microbiol. 51 (10), 3250-3256 (2013).
  14. Han, F., Wang, F., Ge, B. Detecting potentially virulent Vibrio vulnificus strains in raw oysters by quantitative loop-mediated isothermal amplification. Appl Environ Microbiol. 77 (8), 2589-2595 (2011).
  15. Wang, J., et al. Rapid detection of pathogenic bacteria and screening of phage-derived peptides using microcantilevers. Anal Chem. 86 (3), 1671-1678 (2014).
  16. Banerjee, T., et al. Multiparametric Magneto-fluorescent Nanosensors for the Ultrasensitive Detection of Escherichia coli O157:H7. ACS Infect Dis. 2 (10), 667-673 (2016).
  17. Shelby, T., et al. Novel magnetic relaxation nanosensors: an unparalleled "spin" on influenza diagnosis. Nanoscale. 8, 19605-19613 (2016).
  18. Bui, M. P., Ahmed, S., Abbas, A. Single-Digit Pathogen and Attomolar Detection with the Naked Eye Using Liposome-Amplified Plasmonic Immunoassay. Nano Lett. 15 (9), 6239-6246 (2015).
  19. Farnleitner, A. H., et al. Rapid enzymatic detection of Escherichia coli contamination in polluted river water. Lett Appl Microbiol. 33 (3), 246-250 (2001).
  20. Huh, Y. S., Lowe, A. J., Strickland, A. D., Batt, C. A., Erickson, D. Surface-enhanced Raman scattering based ligase detection reaction. J Am Chem Soc. 131 (6), 2208-2213 (2009).
  21. Jayamohan, H., et al. Highly sensitive bacteria quantification using immunomagnetic separation and electrochemical detection of guanine-labeled secondary beads. Sensors (Basel). 15 (5), 12034-12052 (2015).
  22. Kaittanis, C., Naser, S. A., Perez, J. M. One-step, nanoparticle-mediated bacterial detection with magnetic relaxation. Nano Lett. 7 (2), 380-383 (2007).
  23. Meeker, D. G., et al. Synergistic Photothermal and Antibiotic Killing of Biofilm-Associated Staphylococcus aureus Using Targeted Antibiotic-Loaded Gold Nanoconstructs. ACS Infect Dis. 2 (4), 241-250 (2016).
  24. Wang, Y., Ye, Z., Si, C., Ying, Y. Subtractive inhibition assay for the detection of E. coli O157:H7 using surface plasmon resonance. Sensors (Basel). 11 (3), 2728-2739 (2011).
  25. Zhao, X., et al. A rapid bioassay for single bacterial cell quantitation using bioconjugated nanoparticles. Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (42), 15027-15032 (2004).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Magneto fluorescent NanosensorsE coli O157 H7 DetectionAntibody ConjugationFluorescent Dye LoadingMagnetic RelaxationFluorescence Plate ReaderZetasizer AnalysisBacterial Contamination ScreeningPoint of Care DiagnosticsSpecificity Assays

Related Articles