Bu dönemde in vivo insan plasental fizyoloji çalışmak için ayrıntılı bir yöntem sunulmaktadır. Yöntem, plasentanın maternal ve fetal taraflarındaki gelen ve giden damarlardan alınan kan örneklerini, hacimsel kan akışı ve plasental doku örneklemesi ile ilgili ultrason ölçümleri ile birleştirir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İnsan vücudunun fizyolojisini bütünleştiren 4 damarlı Örnekleme Yaklaşımı
Bu makalede
Özet
Özet
Insan plasenta rahimde iken hala araştırma için son derece erişilemez. Bu nedenle, plasental anatomi, hemodinamik ve gebeliğin süresindeki türler arasında yüksek çeşitliliğe rağmen, insan plasental fizyolojisinin in vivo olarak mevcut anlayışı büyük oranda hayvan çalışmalarına dayanmaktadır. İnsan plasenta çalışmalarının büyük çoğunluğu ex vivo perfüzyon çalışmaları veya in vitro trofoblast çalışmalardır. In vitro çalışmalar ve hayvan modelleri çok önemlidir, ancak bu tür çalışmaların sonuçlarının insan plasentasına in vivo ekstrapolasyonu kesin değildir. İnsana plasenta fizyolojisini venöz dönemde çalışmayı ve yöntemin ayrıntılı bir protokolünü sunmayı amaçladık. Planlanan sezaryen sırasında uterin vene uterin vene girişin uterus kesi öncesi istismar edilmesi, gelen ve giden damarlardan plasentanın maternal ve fetal taraflarındaki kan örneklerini toplarız. Konuyu birleştirirkenHacimsel kan akımı ölçümleri ile kan numunelerinden elde edilen santrasyon ölçümleri sayesinde, herhangi bir bileşiğin plasental ve fetal alımını ve salımını nicel olarak değerlendirebiliriz. Dahası, aynı anne-fetus çiftlerinden elde edilen plasental doku örnekleri, taşıyıcı yoğunluğunu, aktivitesini ve plasental fonksiyonların diğer yönlerini in vivo olarak ölçebilir . 4 damarlı örnekleme yönteminin bu entegre kullanımı sayesinde hem normal hem de patolojik gebeliklerde plasental besin transferinin ve metabolizmasının bazılarını in vivo olarak test edebiliyoruz. Ayrıca, bu yöntem, plasenta tarafından salgılanan maddelerin maternal dolaşımda tanımlanmasını sağlar ve bu da plasenta disfonksiyonunun biyolojik belirteçlerinin araştırılmasına önemli katkı sağlayabilir.
Giriş
Ulusal Sağlık Enstitüsüne (ABD) göre, plasenta insan vücudunda en az anlaşılmış organ 1 , 2 , 3'tür . Devam eden gebelikte etik olmayan riskler getirmeksizin insan plasentasını in vivo erişmek ve incelemek zordur. İnsandaki plasental fonksiyon çalışmaları büyük oranda in vitro ve ex vivo modellere dayanır. Plasental nakil ve metabolizma ile ilgili önceki in vivo çalışmaların çoğunluğu hayvanlar 4 , 5 , 6'da gerçekleştirilmiştir . Bununla b....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Çalışma, Oslo Üniversitesi Hastanesi'ndeki veri koruma görevlileri ve Güney Norveç 2419/2011 Tıbbi ve Sağlık Araştırma Etikleri Bölgesel Komitesi tarafından onaylandı. Tüm katılımcılar, dahil edilme konusunda yazılı bir bilgilendirilmiş onam imzaladılar.
1. Preparatlar
NOT: İşlemler için bir zaman çizelgesi Şekil 1'de özetlenmiştir.
Şekil 1 : 4 damarlı Numune Alma İşleminde Zamanlamayı ve....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
4 damarlı örnekleme yöntemi klinik uygulamada uygulanabilir ve 209 ana / bebek çifti kan numunesini başarıyla elde ettik. Bunların 128'inde hacimsel kan akışını ölçmekteyiz. Hem ana hem de fetal damarların tam 4 damar örneklemesi ve kaliteli akış ölçümleri, 70 ana-fetus çiftinde elde edildi ( Şekil 3 ). Buna ek olarak, şimdiye kadar 30 preeklamptik hastadan alınan kan ve plasenta örneklerini aldık. Yöntemin 14 ,
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Plasenta 4-gemi örnekleme yöntemi, üç ana amaç için uygundur. İlk olarak, spesifik maddelerin maternal tarafta plasenta tarafından nasıl alındığını ve glikoz ve amino asit çalışmalarımızla gösterildiği gibi muhtemelen umblikal dolaşıma ve fetusa transfer edildiğini incelemek için kullanılabilir. İkincisi, yöntem progesteron sonuçlarına göre plasenta tarafından üretilen ve maternal veya fetal dolaşıma bırakılan maddelerin incelenmesi ile oldukça yakından ilgilidir. Üçüncü olarak, hızlı büyüme ve doku yeniden biçiml.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
Her şeyden önce, bu projeye katılan annelere içtenlikle teşekkür ederiz. Sonra, örnekleme prosedürüne yardımcı olan ve kolaylaştıran tüm personeli, Anestezi uzmanı, hemşire anestezisti ve cerrahi hemşirelerini kabul ediyoruz. Proje, Güneydoğu Norveç Bölgesel Sağlık Otoritesi ve Norveç Kadın Sağlığı Danışma Birimi, Oslo Üniversitesi ve Oslo Üniversitesi Hastanesi tarafından sağlanan yerel fonlardan sağlanan finansman olmaksızın mümkün olmazdı.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Anne vücut kompozisyonu | |||
| Empedans ölçeği | Tanita | veya benzeri | |
| Ultrason ölçümleri < / güçlü > | |||
| Sequoia 512 ultrason makinesi | Acuson | renkli ve nabız dalgası Doppler (frekans bant genişliği 2 - 6 MHz) ile kavisli bir dönüştürücü ile donatılmıştır (frekans bant genişliği 2 - 6 MHz) | |
| < güçlü > Kan örnekleri< / güçlü > | |||
| Arerial kanül | BD Medical | 682245 | veya benzeri |
| 20 cc İğnesiz Eksantrik Luer Uçlu Şırınga | Termo | SS-20ES | veya benzeri. 3 gerekli. |
| 10 cc Eksantrik Luer Uçlu Şırınga İğnesiz | Termo | SS-10ES | veya benzeri. 9 gerekli. |
| İğnesiz 5 cc% 6 Luer Şırınga | Termo | SS-05S1 | veya benzeri. 2 gerekli. |
| Arteriyel kan gazı şırıngası | Radiometer Medical | veya benzeri. 4 gerekli. | |
| Esnek boruya bağlı steril kanatlı iğne, 21 gauge | Greiner Bio-One | 450081 | (tek kullanımlık olarak tasarlanmıştır).3 gerekli. |
| Vacutainer tüpü 6 mL EDTA | Greiner Bio-One | 456043 | veya benzeri. Örnek site ile etiketleyin. 10 gerekli. |
| Vacutainer tüpü 5 mL LH Lityum Heparin Ayırıcı | Greiner Bio-One | 456305 | veya benzeri. Örnek site ile etiketleyin. 5 gerekli. |
| Vacutainer tüp 6 mL Serum Pıhtı Aktivatatörü | Greiner Bio-One | 456089 | veya benzeri. Örnek site ile etiketleyin. 5 gerekli. |
| Vacutainer tüpü 3 mL ve nbsp; 9NC Pıhtılaşma sodyum sitrat %3.2 | Greiner Bio-One | 454334 | veya benzeri. Örnek site ile etiketleyin. 5 gerekli. |
| Kriyojenik şişeler, 2.0 mL | Corning | 430488 | veya benzeri. Örnek bölge, serum/plazma türü ve ID 90 gerekli. |
| Ameliyathanede kan örneklerini taşımak için | taşımak için işaretli tepsiler | ||
| Örneklerin nazikçe karıştırılması için | külbütör | ||
| Strafor kutuda | buz | ||
| Uygun kapta | sıvı nitrojen | ||
| Plasenta örnekleri | |||
| Metal tepsi | |||
| Strafor kutuda | buz | ||
| Kalibre edilmiş ölçek | |||
| Metal cetvel | |||
| 1 M Fosfat tamponlu tuzlu su | Sigma | D1408 | veya benzeri. 10 M ila %nbsp seyreltin. |
| RNA stabilizasyon solüsyonu | Sigma | R0901-500ML | veya benzeri |
| Optimum Kesme Sıcaklığı (OCT) bileşiği | vwr | 361603E | veya benzeri |
| Kriyojenik şişeler, 2.0 mL | Corning | 430488 | veya benzeri. Örnek site ile etiketleyin. içerik ve kimlik. 10 gerekli. |
| Santrifüj tüpleri, konik tabanlı 50 mL | Greiner Bio-One | 227,285 | veya benzeri. "RNA later" ile etiketleyin, numune yeri ve ID. 2 gerekli. |
| Uygun kapta | sıvı nitrojen | ||
| fetal vücut kompozisyonu | |||
| Kalibre edilmiş ölçek | |||
| Ölçüm bandı |
Kaynaklar
- Jansson, T., Powell, T. L. Role of the placenta in fetal programming: underlying mechanisms and potential interventional approaches. Clin Sci (Lond). 113 (1), 1-13 (2007).
- Hanson, M. A., Gluckman, P. D. Early dev....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
