Yöntem makalesi

Cue reaktivite kokain kullanımı bozukluğu bir sıçan modelinde ölçmek için bir protokol

DOI:

10.3791/55864

⸱

18 Haziran 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Addiction Research, University of Texas Medical Branch, 2Institute for Translational Sciences, University of Texas Medical Branch, 3Mitchell Center for Neurodegenerative Diseases, University of Texas Medical Branch, 4Department of Neurology, University of Texas Medical Branch, 5Department of Pathology, University of Texas Medical Branch, 6Department of Pharmacology and Toxicology, University of Texas Medical Branch

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İşaret reaktivite duyarlılık ipuçlarını özlem için katkıda bulunmak ve kanaatkâr insanlarda relaps uyuşturucu alma deneyimleri ile bağlantılı olarak kavramsallaştırma. İşaret reaktivite Rat appetitive yaklaşım davranış kendi kendine Yönetim takip ve oruç zorla bir işaret reaktivite testi sonuçları ölçme dikkatte yönlendirme uyuşturucu ilgili ipuçlarını doğru tarafından modellenmiştir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kokain kullanımı bozukluğu (GEVİŞ) tekrarlayan öz yönetim sırasında daha önce tarafsız uyaranlar teşvik değeri elde bir yörünge izler. İşaret reaktivite, daha önce uyuşturucu alma deneyimi ile bağlantılı ipuçlarını duyarlılığı insan özlem oruç sırasında önemli bir rol oynar. İşaret reaktivite appetitive yaklaşım davranış ise preklinik ve insan çalışmaları olarak ölçülebilir dikkatte yönlendirmeyi uyuşturucu ilgili ipuçlarını doğru olarak tespit edilebilir. Burada işaret reaktivite sıçanlarda kokain yapabilirsiniz için eğitilmiş bir değerlendirmesini açıklar. Kokain öz yönetim şartına reinforcers (yani, ev ışık, uyarıcı ışık, infüzyon pompası sesler) hareket ayrık cues sunumu ile eşleştirilmiş. Oruç bir süre sonrasında, daha önce kokain infüzyonu ile eşleştirilmiş ayrık ipuçları eşliğinde kokain öz yönetim bağlamda kolu presler işaret reaktivite ölçülür. Nörobiyolojik mekanizmaları sağaltımı işaret reaktivite bastırmak ve bu nedenle, nüks güvenlik açığı değiştirmek için değerlendirmek için işaret reaktivite süreçleri de yatan keşfetmek kullanışlı bir modeldir. Modelinin avantajı translasyonel önemini ve onun yüz ve akıllı müddətləri içerir. Birincil model işaret reaktivite görev yalnızca seyrek olarak gerçekleştirilebilir ve sadece kısa süre içinde kullanılması gerekir kısıtlamasıdır (Örn., 1 saat), aksi takdirde fareler kokain uyarıcı ile ayrık ipuçları eşleştirme söndürmek başlayacak. Model ile ayrık ipuçları eşleştirilmiş olumlu destekleyen herhangi bir uyarana Genişletilebilir; Uyuşturucu istismarı özellikle ilgili olsa da, bu model obezite gibi alanlarda nerede lezzetli yiyecek Ödülleri olumlu bir çekim gücü takviye olarak hareket edebilir gelecekteki uygulamalar saptanabilir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kokain kullanımı bozukluğu (GEVİŞ) hangi sırasında daha önce teşvik değer1nötr uyaran kazanç tekrarlayan öz yönetim bir yörünge izler. İşaret reaktivite daha önce uyuşturucu alma deneyimi ile bağlantılı ipuçlarını duyarlılığı, ve insan özlem2',3,4,5önemli bir rol oynar. CUD yanı sıra nüks ilerleme sırasında oruç, riski yüksek hassasiyet uyuşturucu ilgili ipuçları6,7hızlı bireyler için daha yüksek olduğu düşünülmektedir. Çevresel bağlamlarda (Örneğin, insanlar, binalar, müzik türleri) ve ayrı uyuşturucu ilişkili uyaranlara (Örneğin, gereçlerinin) kokain ödül ile ilişkili hale gelir; pozlama bu ipuçlarını çevresel Fizyoloji (Örneğin, kalp hızı, cilt sıcaklığı ve cilt direnç), beyin plastisite ve beyin fonksiyonel bağlantı2,8,9 değişiklikleri tetikleyebilir ,10. Başka bir deyişle, re-pozlama kokain ilgili ipuçlarını limbik corticostriatal devreler appetitive yaklaşım (ilaç-arama) davranış11,12 sürücü şartına fizyolojik ve öznel yanıt uyandırmak için etkinleştirir ,13,14,15.

Fonksiyonel beyin görüntüleme analizleri ile ölçülen işaret reaktivite CUD16olan bireylerde nüks açığının akıllı. Bir vekil ölçmek için relaps riski ve çevirim çalışmaları için yararlanılabilir işaret reaktivite ölçümleri kemirgen modellerinde hizmet. Böylece, bir farmakoterapi işaret reaktivite Rodents olabilir azaltır insan klinik çalışmalarda nüks önleme tedavisi olarak ileri taşıdı. Çünkü şu anda yok FDA onaylı sağaltımı CUD17ile gerekli translasyonel hak ve akıllı yürürlük preklinik modelleri özellikle önemlidir.

Kemirgen öz yönetim yordam altın standart, temel CUD translasyonel modeli ile akıllı geçerlilik insan uyuşturucu alma18 ve moleküler ve fizyolojik anlamak için önemli işler. Yanıt - yanıt -bağımlı kokain pozlama göre farklı davranış, moleküler ve nörokimyasal etkileri kokain sonuçlarındabağımsız teslim; Örn., yanıt -bağımsız kokain teslim anlamlı olarak daha yüksek mortalite19çağrıştırır. Ayrıca, yanıt -bağımlı kokain öz yönetim oruç nörokimyasal sonuçlarını bu yanıt -bağımsız kokain teslim20, oruç tarafından tetiklenen farklıdır 21. böylece, yanıtbağımlı teslim kokain alan CUD modelleri üstün translasyonel işaret reaktivite ve eylem ilişkili mekanizmaları değerlendirirken modellerdir.

Aşağıda özetlenen iletişim kuralında, kokain intravenöz kalıcı bir intra şah kateter teslim edilir. Ancak, ilaç ağız ve solunum yolları üzerinden yapabilirsiniz için alternatif yöntemler geliştirilmiştir. Önemlisi, kemirgenler uyuşturucu teslimini operant yanıtları ile benzer insanları kontrol. Bu nedenle, kemirgenler ve insanlar22tarafından kendi kendine yönetilen ilaçlar arasında yüksek uyumluluk yoktur. Aşağıdaki preklinik uyuşturucu öz yönetim yordam basarak, araç kontrol yüksek yanıt oranları motive etmek için ilaç dağıtım, takviye kolu kullanır. İlaç-arama davranışı kokain infüzyonu ile başlangıçta "tarafsız" yardımlar (Örneğin, bir uyarıcı ışık veya sesi ve bağlamsal çevrenin hangi kokain öz yönetim oluşur) çifti tarafından eğitilmiş; Bu yardımlar şartına reinforcers haline (gözden geçirme için: Cunningham & Anastasio, 201423). İlaç-arama davranışı (yani, daha önce aktif yandaki tuşuna basarak aracılığıyla kokain sunmak için çalışır) kemirgenler hem de özlem ve nüks CUD konular24, , sonraki re-pozlama kokain ilgili ipuçlarını tetikleyen 25 , 26 , 27.

Tipik olarak, geçersiz kalma eğitim ve/veya uyuşturucu geri alalım ve uyuşturucu ilişkili ortam28,29içinde, yapılan ilaç-arama davranışı kokain öz yönetim takip preklinik kemirgen çalışmaları kullanmak 30 , 31 , 32. presler yokluğunda, uyuşturucu ve/veya işaret teslim, daha önce aktif kolu üzerinde genellikle yok olma33,34,35takip iade ölçüsü oluşturmaktadır. Aksine, işaret reaktivite ilaç-arama davranışı önceden kalma eğitimi28,36,37,38,39 olmadan biçilen aşağıdaki zorla oruç olduğunu .

Sonuç ölçümleri ve deneysel değişkenleri edilmiş dikkatle seçilmiş ve Nörobiyoloji ilaç arama ve nüks benzeri davranış farklı yönlerini incelemek için doğrulanmış ve neuroadaptations modelleri arasında farklılık köklü ve Geçersiz kalma eğitim 40,41,42,43. Ruh Birleşik, yerler ve insanlar44uyuşturucuyla ilgili yardımlar dahil beri Ayrıca, translasyonel bir bakış açısından, kemirgen tükenme eğitim CUD için klinik ayarlarında yansıtılır değil; Bu ipuçları eşsiz kombinasyonu büyük olasılıkla bir klinik ortamda45,46,47mevcut değil. Böylece, burada açıklanan kemirgen modeli daha iyi bir insan durumun paralel çok modelleri şu anda daha görür.

Doğrulanmış kokain öz yönetim eğitim aşağıda açıklanmıştır, zorla oruç ve işaret reaktivite test protokolünü fareler için. Kısaca, fareler intra şah kateterler, kokain ya da serum 'etkin' kolu basın, üzerinden yapabilirsiniz için eğitim ile implante edilir ve kokain ya da serum uyarıcı alınmasından şartına reinforcers hizmet ayrı ışık ve ses ipuçları ile eşleştirilmiş. Kokain öz yönetim 14 gün fareler için 30 gün zorla oruç ve hangi kolu içeri acil ölçülür bir sonraki 60 dk işaret reaktivite testi tabi tutulmaktadır. İşaret reaktivite testi insanlarda kokain nüks güvenlik açığı için bir vekil ölçüsüdür.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm hayvan manipülasyonlar bakım ve Laboratuvar hayvanlarının kullanım kılavuzu (2011) uygun olarak ve kurumsal hayvan bakım ve kullanım Kurulu onayı ile yapılır.

1. hayvanlar

  1. Erkek Sprague Dawley rat yaklaşık 8-9 hafta-in yaş (250-260 g) için en az yedi gün 12 h koyu döngüsü (6:00-18:00 h ışıkları) üzerinde 21-23 ° C ve 45-%50 nem muhafaza bir koloni odada alışmana.
  2. Fareler iki ev / kafes ve her gün çalışma kolu. Gıda sağlamak ve ad libitum çalışmanın tüm aşamaları boyunca ev kafeste su.
    Not: Gıda kısıtlama kokain ödül48saliency artırır, lokomotor aktivite kokain kaynaklı49, potentiates ve iade50 için bir tetikleyici görevi görür ve böylece aynı zamanda etkisi işaret reaktivite olabilir.
  3. Rastgele sıçan serum veya kokain tedavi grupları atayın.

2. cerrahi

  1. Fare bir kokteyl içeren 8.6 mg/kg xylazine, 1.5 mg/kg acepromazine ve 43 mg/kg ketamin bakteriyostatik salin askıya kullanarak anestezi altında yerleştirin. Fareyi yeterince onun parmak pinching ve motor refleksleri ve solunum izleme anestezi onaylayın. Oftalmik merhem göz kuruluğu önlemek için gözleri doğrudan uygulanır.
    Not: Eğer fare değil yeterince anestezi bir motor yanıt-e doğru ayak parmağı çimdik sergileyecek ve sıçan Solunum oranı hızla artabilir.
    1. Fareyi anestezi altında iken aseptik tekniği kullanarak, implant bir damar içi kateter juguler ven içine geri mount bir kanül ile bağlı. Cerrahi implantasyon sonra fareler için 5-7 gün 28,36,37,51kurtarmak izin verir.
      Not: Hızlı artış beyin kokain düzeyleri52,53, kokain öz yönetim insanlarda intravenöz rotanın sonuçlanır. Böylece, bir en yaygın preklinik türevleri, kokain intra şah bir kateter yolu ile yapabilirsiniz için fareler eğitilmiştir.
  2. Kateter a_ılabilinirse 0.1 mL heparin sodyum (10 U/mL), streptokinaz (0.67 mg/mL) ve ticarcillin disodyum (66.67 mg/mL) içeren bakteriyostatik tuz çözeltisi kullanarak günlük basması ile koruyun. Ameliyat gün sonra kızarma kateter başlayacak ve her gün kendi kendine yönetim oturumları takip devam etmektedir.
    1. Çözümle bir şırıngaya doldur ve arka Dağı şırınga temizlemek için polietilen boru yoluyla bağlanın.
    2. Uygun kateter deneme boyunca düzenli aralıklarla 10 mg/kg methohexital sodyum intravenöz yönetimi tarafından doğrulama.
      Not: Bu bir doz kısa bir süre sadece intravenöz yönetilen zaman hayvan anestezi için yeterli olduğunu.

3. kendi kendine Yönetim

  1. Aşağıda açıklandığı gibi 4 ayrı programlar oluşturmak için programlama yazılımı kullanın.
    1. Kod 2 programları sabit oran (FR) üzerinde kendi kendine Yönetim için 1 zamanlama, i.e., bir etkin kolu basın bir infüzyon sonuçları nerede. #1 program için sol kolu etkin kolu kodu; #2 için program, sağ kolu etkin kolu kodu. 180-min uzunluğu ve teslim kokain uyarıcı ve ayrık cue aşağıdaki şekilde karmaşık olmak her iki program oluşturun:
      1. Neden aynı anda aydınlatma ev ışık ve uyarıcı ışık etkin kolu yukarıda basın bir etkin kolu var.
      2. 1-s bir gecikmeyle çözüm 0.1 mL 6-s teslim infüzyon pompa var.
      3. 7-s (infüzyon pompa aynı anda ihracı) sonra kapamak uzakta uyarıcı ışık var.
      4. 27-s sonra son 20-hangi sırasında etkin kolu presler zamanlanmış hiçbir sonuçlara henüz bunlar hala kaydedilir zaman aşımı süresini gösteren s ile kapamak uzakta ev ışık var.
      5. Veri çıkışı için infüzyon, etkin kolu presler, etkin olmayan kolu presler ve gecikme süresi ilk etkin kolu basına toplamak.
    2. Bir FR5 üzerinde kendi kendine Yönetim için iki daha fazla program program kodu, i.e., beş bir infüzyon presler sonucu kolu nerede. Yine, bir program ile etkin kolu ile sol ve bir program olarak kolu aktif sağa dön. Her iki program 180 dk uzunluğu yapın ve reinforcer ve ayrık cue aşağıdaki şekilde karmaşık teslim:
      1. Beş etkin kolu presler neden eşzamanlı aydınlatma ev ışık ve uyarıcı etkin kolu ışık var.
      2. Adımları 3.1.1.2 3.1.1.5aracılığıyla yineleyin.
  2. Kendi kendine yönetim eğitim
    1. Kokain çözümde her gün steril % 0,9 hazırlamak NaCl 0,75 mg/kg/0.1 mL bir doz için.
      Not: her 180 dk otomatik yönetim oturumu süresince, fareler yaklaşık 4-5 mL kokain çözeltisi, böylece yönetmek fazla hazırlamak için her gün yaklaşık 8 mL/fare tahmin.
    2. Kateter şırınga (10 mL) kokain ya da tuzlu çözüm en az 8 mL ile doldurulması. Kokain/serum çözüm akıyor olduktan sonra şırıngaları infüzyon pompa yerleştirin ve metal bahar tasma, her otomatik yönetim oturumu başlatın tarafından kaplı polietilen boru bağlanın. Öyle ki çözüm eşit olduğunu ve tamamlanmış dikkatle her Kateter takılması önce Polietilen boru içinde dağıtılmış her infüzyon pompa şırıngada ayarlayın.
    3. Fareler havalandırılmış, ses inceltiyorum kabinleri hayranları ile muhafaza odaları klima ilgili standart edimsel yerleştirin. Sürekli olarak aynı operant odasında her fare yerleştirin ve tüm denemeler boyunca aynı tarafta etkin kolu tut. Atama sıçan sol ve sağ aktif kolları arasında dengelemek.
      Not: İki geri çekilebilir yanıt kolları, her yanıt kolu yukarıda bir uyarıcı ışık ve kolları karşısında bir ev ışık çevrili bir Pelet receptacle her odası bulunuyor. Kokain/serum şırınga için 23 g bağlı olan iğne (boru poking kaçınmaya under) bağlı polietilen boru içinde her fare kateter bağlanır ve bir sıvı döner üzerinde işletilen bir metal bahar tasma kaplı için. Şırınga infüzyon pompalar bulunan hücre için bitişik yerleştirilir.
    4. Tren fareler kolu için kokain infüzyon (0,75 mg/kg/0.1 mL infüzyon) tuşuna basın veya salin infüzyon (0.1 mL) kullanarak günlük 180-min oturumları sırasında kurulan yöntemleri28,36,37,51.
      Not: Bu eğitim sadece fare operant odanın içine yerleştirerek ve kolu basına izin tarafından gerçekleştirilir; etkin olmayan kolu basarak zamanlanmış hiçbir sonuçları ayılar ise etkin kolu basarak ayrık işaret karmaşık alınmasından ve kokain telkin, neden.
      1. Zamanlama tamamlamaların bir kokain veya 6 sn süre içinde serum fizyolojik infüzyonu teslimat etkin kolu sonucu üzerinde aynı anda ev ışık ve uyarıcı etkin kolu ışık aydınlatma ve (Bu ayrı bir infüzyon pompa aktivasyonu ile eşleştirilmiş işaret kompleksi) kokain teslimat ile eşleştirilmiş; etkin olmayan kolu presler zamanlanmış hiçbir sonuçları üretmek. Reinforcer (kokain) teslim uyarıcı ışık yanı sıra infüzyon pompa inaktive; ev ışık üzerinde bir ek 20-sırasında zamanlanmış hiçbirşeyi kolu presler var bir zaman aşımı süresi belirtmek s için kalır.
        Not: Bunu ayarlamak nasıl bir açıklama adımları 3.1.1.1-3.1.1.4 içinde bulundu
    5. Üzerinde ikmal-in 180-min oturum, her fare onun edimsel Klima odasından kaldırın ve onun kateter (adım 2.2) floş. Dikkatle chambers arada oturum, her yüzey bir % 70 etanol çözüm ile silerek temizleyin.
      Not: otomatik yönetim oturumu sırasında kokain almak fareler odasından kaldırmak zor olabilir ve daha Agresif olması muhtemeldir. Yavaş, dikkatli hareketleri--dan onun urgan her fare kesmek için kullanın.
    6. Tren fareler takviye ve ilerleme bir ölçüt yedi infüzyon/h az % 10 ile elde sonra bir FR5 zamanlama FR1 zamanlamaya göre değişkenlik infüzyon üç gün üst üste için oturum başına toplam sayısı. Fareler öz yönetim eğitim 14 gün toplam gelinceye öz yönetim devam etmesi.
      Not: Bu bir türevidir operant öğrenme; Bazı iletişim kuralları FR1 deneme tamamı kalır fareler sahip olmayı tercih edebilir. Sabit oran zamanlamadan FR1 FR5 değişiklikleri sayısı etkisi değil İnfüzyonlar bir hayvan54,55self-administers. Ancak, sabit oran boyutunun artırılması içinde sıçan yanıt istikrarı sağlamak için yardımcı olur ve ödül56saliency artırabilir. Bir tedavi zorla oruç sırasında istenirse, Ayrıca, fareler sözde rasgele istikrar sağlanması üzerine tedavi gruplarına atanması gereken (daha az % 10 değişkenlik 3 gün üst üste en az oturum başına infüzyon toplam sayısı), FR5 zamanlama. Serum saliency FR1 FR5 için ilerleme için gereken istikrar ulaşmak için yeterli değil gibi Ayrıca, tuzlu fareler FR1 FR5 için ilerleme olacaktır değil.

4. zorunlu oruç

  1. Fareler zorla oruç için 30 gün verin; diğer bir deyişle, fareler kokain ya da serum 30 günlük bir süre için yapabilirsiniz fırsatını sağlar. Önemlisi, bu dönemde operant chambers (kendi kendine Yönetim önceki bağlamında) fareler döndürmüyor. Ancak, rats daily ve işleme için genel sağlık bir ölçüsü olarak tartım ev kafesleri kaldırın.
    Not: Zorla perhiz süresi değiştirilebilir, ancak tavan ve zemin etkilerinden korunmak yeterli bir süre seçmek önemlidir. Zorla oruç döneminin süresi seçerken farkında olmak kemirgen zorlanma, yaş, kendi kendine yönetim oturum uzunluğu ve süresi, uyuşturucu, uyuşturucu doz ve infüzyon süresi ve hayvan seks faktörler.

5. kokain işaret reaktivite

  1. İki yazılım programı işaret reaktivite görev FR1 programı için kod; bir program active kolu ve sağ kolu olarak etkin kolu olan sol kolu ile. 60-min için veri basarak kolu toplamak için her program oluşturmak ve ayrık işaret aşağıda açıklandığı gibi karmaşık teslim.
    1. Adımları 3.1.1.1-3.1.1.4 tekrar
    2. Veri çıkışı için işaret sunumlar (daha önce infüzyon da bilinir), daha önce aktif kolu presler, etkin olmayan kolu presler ve gecikme süresi ilk kolu basına toplamak.
  2. Kokain işaret reaktivite testi oturum
    1. İşaret reaktivite gün 30 zorla oruç 60 dk operant test oturumu değerlendirmek. Başlangıç saatleri sıçan hızlı işten çıkarma ve beyin hasat kolaylaştırmak için bocalama. Önemlisi, işaret reaktivite testi için şırınga infüzyon pompa İnfüzyon Pompası sesi işitsel bir işaret hizmet eder ama hiç kokain takviye teslim edilir böylece koymayın.
      Not: İşaret reaktivite gün gün 30 zorla oruç dışında tespit edilebilir, ancak yanıt kokain eşleştirilmiş ipuçlarını zaman34 üzerinde değişir aslında olmalıdır akılda tutulması tarihi işaret reaktivite testi için seçerken.
    2. Hangi eğitim gördü kendi kendine Yönetim odasında her fare yerleştirin ve günlük kendi kendine Yönetim oturumlarında gibi onun kanül için urgan. Daha önce kokain veya serum teslim kolu üzerinde presler şimdi sadece takviye ile ayrık işaret kompleks teslim (i.e., uyarıcı ışık ve ev aydınlatılmış ve infüzyon pompa etkinleştirilir) FR1 zamanlamaya (yani, bir ayrık işaret karmaşık etkin kolu basın sunulur); işaret sunumlar ve daha önce aktif kolu presler bir 60 dakika oturumu sırasında say ve ayrıca etkin olmayan kolu presler kaydedin. Ancak, kendi kendine Yönetim gibi ile etkin olmayan kolu presler zamanlanmış hiçbir sonuçları üretmek.
      Not: Daha önce aktif ve inaktif kolu presler zamanlanmış sonuçları yokluğunda kaydetmek için bir ek denetim seçenektir (i.e., hiçbir ayrık işaret karmaşık reinforcer).
    3. İşaret reaktivite tamamlanmasından sonra oturum test, hemen fareler re-edimsel Klima odası ve ayrık işaret karmaşık maruz biyokimyasal etkileri yakalamak için ötenazi.

6. veri toplama, organizasyon ve Analizi

  1. Veri üç geleneksel kategoriler halinde yıkmak: genel sağlık, kendi kendine Yönetim ve işaret reaktivite.
    1. İzlemek genel sağlık (e.g., hayvan ağırlık, kürk koşulu) deneme boyunca ve veteriner hayvanlarla iyi bak, gerekirse veya kolu acil sağlık tarafından etkilenen görüntülenirse çalışma kaldırmak sağlar.
    2. Kendi kendine yönetim verileri kendi kendine Yönetim 14 gün boyunca toplamak. Bir unpaired, iki kuyruklu t-testi ilk etkin kolu basına kokain ve infüzyon, etkin kolu presler, etkin olmayan kolu presler ve gecikme süresi toplam sayısı için serum fizyolojik öz yönetim grupları arasında istatistiksel farkları belirlemek için kullanın.
      Not: Eğer bir (ortalama sayısı eşit İnfüzyonlar, hem de etkin ve etkin olmayan gruplar olabilir ki zorla oruç sırasında bir tedavinin etkisini işaret reaktivite üzerinde çalışmaya istediği kendi kendine Yönetim önce Çözümlenecek veri ihtiyacı yoksunluk zorla kolu presleri). İkişer ikişer tasarım (kokain ± tedavi, tuzlu ± tedavi) seçilirse, bir iki yönlü ANOVA uygun öğleden hoc analizi ile bu verileri çözümlemek için kullanılır.
    3. İşaret reaktivite verilerini toplamak ve işaret sunumlar toplam sayısı için analiz için daha önce aktif kolu presler, etkin olmayan kolu presler ve gecikme süresi ilk kolu için tuşuna basın. Ayrıca bir unpaired, iki kuyruklu t-kokain ve bu serum kendini yönetme kendini yönetme hayvanlar arasındaki farkları belirlemek için test ile bu verileri analiz.
      Not: ikişer ikişer tasarım (kokain ± tedavi, tuzlu ± tedavi) seçilirse, yine, bir iki yönlü ANOVA uygun öğleden hoc analizi ile bu verileri analiz etmek için kullanılmalıdır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir işaret reaktivite testi ile bir daha önce yayımlanmış çalışma57 takip kokain öz yönetim ve oruç denemenin sonuçları Şekil 1' de gösterilir. Çalışma zaman çizelgesi Şekil 1Aile tasvir edilir.

Ölçütlere uyan gibi fareler FR1 ayrı ayrı FR5 için geçiş. Edimsel Klima kokain yönetme grubunda devam ettikçe, onlar bir plato (Şeki...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uyuşturucu eşleştirilmiş ipuçları ve fizyolojik değişiklikler bu cues16 yanıt olarak maruz relapse,11,16 ile ilişkili ve yukarıda contingently istihdam kokain işaret reaktivite testi kokain eşleştirilmiş ipuçları sunar ilaç yokluğu; Böylece, ilaç-arama davranışı daha önce aktif kollu pres şeklinde nüks güvenlik açığı bir ölçüsü olarak hizmet vermektedir. Burada açıklanan işaret reaktivite protokol hangi nüks değiştirme sağaltımı test edile...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar hiçbir ifşa etmek çıkar çatışması var.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm davranış test çekirdeğindeyken Dr Kelly Dineley tarafından yönetildi ve bağımlılığı araştırma, Dr Kathryn Cunningham tarafından yönetilen merkezi içinde yer alan Teksas Üniversitesi Tıbbi şube (UTMB) kemirgen In Vivo değerlendirme (RIVA) gerçekleştirildi. Bu eser Peter F. McManus hayırsever güven, Ulusal Enstitüsü'nden Çevre Sağlık Bilimleri Merkezi UTMB, Çevresel Toksikoloji geldi desteği (T32ES007254), UTMB (UL1TR001439), translasyonel Bilimleri Enstitüsü Mitchell merkezi nörodejeneratif hastalıklar ve UTMB (DA007287, DA070087 ve pilot çalışma fonları) bağımlılığı araştırma merkezi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Ekipman< / güçlü >
Kateter Borusu: 0,50 mm İç Çap x 0,94 mm OD x 0,2 mm genişlikFisher Scientific, Hampton, NH, ABD11-189-15A1/deney
Cue LightMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDENV-229M2/edimsel hazne
Kılavuz Kanülleri (22 gauge, kaide boyutu-8mm, kesim uzunluğu 11 mm, kaidenin 5 mm üzerinde)Plastik Bir, Roanoke, VA, ABD8IC313G5UPXC1 / sıçan
Ev IşığıMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDENV-227M1 / edimsel oda
İnfüzyonPompası Med Associates Inc., St. Albans, VT, ABDPHM-1001 / edimsel oda
KollarMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDENV-110M2 / edimsel oda
Sıvı FırdöndülerInstech, Plymouth Toplantısı, PA, ABD375/221/İnfüzyon Pompası Yazılımı ile Edimsel Oda
MED-PC PaketiMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDSOF-735 (infüzyon yazılımı SOF-700RA-10 sürüm 1.04)1
Metal Yaylı TasmaPlastik Bir, Roanoke, VA, ABDC313CS/SPC1/edimsel hazne
İğne (23g, 1 inç)Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, ABD3051931/ edimsel oda
Nitex Mesh (6/6 dokuma örgü levha, 12 "x12", 500 mikron kalınlığında,% 38 Açık Alan)Amazon, Seattle, WA, ABDCMN-0500-C, B000FMUNE6~1 yaprak/100 sıçan
PCI Arayüz PaketiMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDDIG-700P2-R2, MED-SYST-161/16 ameliyat odaları
Arayüz Modülleri için Güç KaynağıMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDSG-6510D1/16 Edimsel Odalar
Ses Azaltıcı HücreMed Associates Inc., St. Albans, VT, ABDENV-018V1/edimsel oda
Şırıngalar, 10 mL Luer-Lok™ tipFisher Scientific, Hampton, NH, ABD14-827-521 vaka/deney (1/edimsel oda)
Yıkamalar için Tygon Boru: 0,51 mmID x 1,52 mm OD 0,51 mm genişlik x 152,4 m uzunlukFisher Scientific, Hampton, NH, ABD14-170-15B1/ deney
Kimyasallar< / güçlü >
Asepromazin (10mg / mL)Henry Schein (Hayvan Sağlığı), Melville, NY, ABD003845~ 0.5mg / sıçan *
Acraweld Onarım ReçinesiHenry Schein (Diş), Melville, NY, ABD10139591/deney
Altalube (oftalmik merhem)Henry Schein (Diş), Melville, NY, ABD60500591/deney
KokainNIDA North Bethesda, MD, ABDN/A~ 350mgs/rat tüm deney için *; DEA Lisansı gerektirir
Heparin (10.000 USP birimi/10 mL)Sagent Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, ABDNDC 25021-400-101/deney (~ 21 birim / sıçan*)
Jet SıvıHenry Schein (Diş), Melville, NY, ABD12564011/deney
Ketamin (100mg/mL, 10mL)Henry Schein (Diş), Melville, NY, ABD1049007~15mg/sıçan*; DEA lisansı gerektirir
Metoheksetal Sodyum (Brevital®, 500 mg / 50 mL)Patterson Dental, Saint Paul, MN, ABD043-54611/deney; DEA Lisansı Tuzlu
Al gerektirir (%0,9, USP)Baxter, Deerfield, IL, ABD2B13071 vaka/deney
β-hemolitik Streptokok'tan streptokinaz (Lancefield Grup C) ≥ 3.000 birim / mgSigma Aldrich, St. Louis, MO, ABDS3134-250KU1 şişe / deney (~ 1.5mg / sıçan / deney *)
Ticarcillin Disodium SaltFisher Scientific, Hampton, NH, ABD50-213-695~ 4 şişe / egzersiz veya 25g flakon kedisini satın alın.# 50-489-093 (~ 150mg / sıçan / deney *)
Ksilazin (100mg / mL)Henry Schein (Hayvan Sağlığı), Melville, NY, ABD033198~ 3mg / sıçan *
< td colspan = "4">* Sıçan yaşının protokolde tarif edilen yaş olduğunu, sıçanların 14 gün boyunca kendi kendine uyguladığını ve yıkamaların 21 gün boyunca gerçekleştiğini varsayar.

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Koob, G. F., Volkow, N. D. Neurobiology of addiction: a neurocircuitry analysis. Lancet Psychiatry. 3 (8), 760-773 (2016).
  2. Carter, B. L., Tiffany, S. T. Meta-analysis of cue-reactivity in addiction research. Addiction. 94 (3), 327-340 (1999).
  3. Drummond, D. C. Theories of drug craving, ancient and modern. Addiction. 96 (1), 33-46 (2001).
  4. Mahler, S. V., de Wit, H. Cue-reactors: individual differences in cue-induced craving after food or smoking abstinence. PLoS One. 5 (11), (2010).
  5. O'Brien, C. P., Childress, A. R., Ehrman, R., Robbins, S. J. Conditioning factors in drug abuse: can they explain compulsion? J Psychopharmacol. 12 (1), 15-22 (1998).
  6. Hendershot, C. S., Witkiewitz, K., George, W. H., Marlatt, G. A. Relapse prevention for addictive behaviors. Subst Abuse Treat Prev Policy. 6, 17(2011).
  7. Prisciandaro, J. J., Myrick, H., Henderson, S., McRae-Clark, A. L., Brady, K. T. Prospective associations between brain activation to cocaine and no-go cues and cocaine relapse. Drug Alcohol Depend. 131 (1-2), 44-49 (2013).
  8. Foltin, R. W., Haney, M. Conditioned effects of environmental stimuli paired with smoked cocaine in humans. Psychopharmacology. 149 (1), 24-33 (2000).
  9. Wang, X., et al. Nucleus Accumbens Core Mammalian Target of Rapamycin Signaling Pathway Is Critical for Cue-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Rats. J Neurosci. 30 (38), 12632-12641 (2010).
  10. Gipson, C. D., Kupchik, Y. M., Shen, H., Reissner, K. J., Thomas, C. A., Kalivas, P. W. Relapse Induced by Cues Predicting Cocaine Depends on Rapid, Transient Synaptic Potentiation. Neuron. 77 (5), 867-872 (2013).
  11. Wallace, B. C. Psychological and environmental determinants of relapse in crack cocaine smokers. J Subst Abuse Treat. 6 (2), 95-106 (1989).
  12. Weiss, F., et al. Compulsive Drug-Seeking Behavior and Relapse: Neuroadaptation, Stress, and Conditioning Factors. Annals of the New York Academy of Sciences. 937 (1), 1-26 (2001).
  13. Potenza, M. N., et al. Neural Correlates of Stress-Induced and Cue-Induced Drug Craving: Influences of Sex and Cocaine Dependence. Am J Psych. 169 (4), 406-414 (2012).
  14. Shaham, Y., Hope, B. T. The role of neuroadaptations in relapse to drug seeking. Nature Neuroscience. 8 (11), 1437-1439 (2005).
  15. Neisewander, J. L., et al. Fos protein expression and cocaine-seeking behavior in rats after exposure to a cocaine self-administration environment. J Neurosci. 20 (2), 798-805 (2000).
  16. Kosten, T. R., et al. Cue-induced brain activity changes and relapse in cocaine-dependent patients. Neuropsychopharmacology. 31 (3), 644-650 (2006).
  17. Skolnick, P., Volkow, N. D. Addiction therapeutics: obstacles and opportunities. Biol Psychiatry. 72 (11), 890-891 (2012).
  18. O'Connor, E. C., Chapman, K., Butler, P., Mead, A. N. The predictive validity of the rat self-administration model for abuse liability. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 35 (3), 912-938 (2011).
  19. Dworkin, S. I., Mirkis, S., Smith, J. E. Response-dependent versus response-independent presentation of cocaine: differences in the lethal effects of the drug. Psychopharmacology (Berl). 117 (3), 262-266 (1995).
  20. Dworkin, S. I., Co, C., Smith, J. E. Rat brain neurotransmitter turnover rates altered during withdrawal from chronic cocaine administration. Brain Res. 682 (1-2), 116-126 (1995).
  21. Twining, R. C., Bolan, M., Grigson, P. S. Yoked delivery of cocaine is aversive and protects against the motivation for drug in rats. Behav Neurosci. 123 (4), 913-925 (2009).
  22. Gardner, E. L. What we have learned about addiction from animal models of drug self-administration. Am J Addict. 9 (4), 285-313 (2000).
  23. Cunningham, K. A., Anastasio, N. C. Serotonin at the nexus of impulsivity and cue reactivity in cocaine addiction. Neuropharmacology. 76 Pt B. 76 Pt B, 460-478 (2014).
  24. Carpenter, K. M., Schreiber, E., Church, S., McDowell, D. Drug Stroop performance: relationships with primary substance of use and treatment outcome in a drug-dependent outpatient sample. Addict Behav. 31 (1), 174-181 (2006).
  25. Copersino, M. L., et al. Cocaine craving and attentional bias in cocaine-dependent schizophrenic patients. Psychiatry Res. 128 (3), 209-218 (2004).
  26. Field, M., Munafò, M. R., Franken, I. H. A meta-analytic investigation of the relationship between attentional bias and subjective craving in substance abuse. Psychol Bull. 135 (4), 589-607 (2009).
  27. Robbins, S. J., Ehrman, R. N., Childress, A. R., O'Brien, C. P. Relationships among physiological and self-report responses produced by cocaine-related cues. Addict Behav. 22 (2), 157-167 (1997).
  28. Cunningham, K. A., et al. Synergism between a serotonin 5-HT2A receptor (5-HT2AR) antagonist and 5-HT2CR agonist suggests new pharmacotherapeutics for cocaine addiction. ACS Chem Neurosci. 4 (1), 110-121 (2013).
  29. Fletcher, P. J., Rizos, Z., Sinyard, J., Tampakeras, M., Higgins, G. A. The 5-HT2C receptor agonist Ro60-0175 reduces cocaine self-administration and reinstatement induced by the stressor yohimbine, and contextual cues. Neuropsychopharmacology. 33 (6), 1402-1412 (2008).
  30. See, R. E. Neural substrates of cocaine-cue associations that trigger relapse. Eur J Pharmacol. 526 (1-3), 140-146 (2005).
  31. Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 3-20 (2003).
  32. Meil, W. M., See, R. E. Conditioned cued recovery of responding following prolonged withdrawal from self-administered cocaine in rats: an animal model of relapse. Behav Pharmacol. 7 (8), 754-763 (1996).
  33. Fuchs, R. A., Tran-Nguyen, L. T., Specio, S. E., Groff, R. S., Neisewander, J. L. Predictive validity of the extinction/reinstatement model of drug craving. Psychopharmacology (Berl). 135 (2), 151-160 (1998).
  34. Grimm, J. W., Hope, B. T., Wise, R. A., Shaham, Y. Neuroadaptation. Incubation of cocaine craving after withdrawal. Nature. 412 (6843), 141-142 (2001).
  35. Panlilio, L. V., Goldberg, S. R. Self-administration of drugs in animals and humans as a model and an investigative tool. Addiction. 102 (12), 1863-1870 (2007).
  36. Anastasio, N. C., et al. Variation within the serotonin (5-HT) 5-HT2C receptor system aligns with vulnerability to cocaine cue reactivity. Transl Psychiatry. 4, e369(2014).
  37. Anastasio, N. C., et al. Functional status of the serotonin 5-HT2C receptor (5-HT2CR) drives interlocked phenotypes that precipitate relapse-like behaviors in cocaine dependence. Neuropsychopharmacology. 39 (2), 370-382 (2014).
  38. Liu, H. S., et al. Dorsolateral caudate nucleus differentiates cocaine from natural reward-associated contextual cues. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (10), 4093-4098 (2013).
  39. Swinford-Jackson, S. E., Anastasio, N. C., Fox, R. G., Stutz, S. J., Cunningham, K. A. Incubation of cocaine cue reactivity associates with neuroadaptations in the cortical serotonin (5-HT) 5-HT2C receptor (5-HT2CR) system. Neuroscience. 324, 50-61 (2016).
  40. Di Ciano, P., Everitt, B. J. Reinstatement and spontaneous recovery of cocaine-seeking following extinction and different durations of withdrawal. Behav Pharmacol. 13 (5-6), 397-405 (2002).
  41. Schmidt, E. F., et al. Extinction training regulates tyrosine hydroxylase during withdrawal from cocaine self-administration. J Neurosci. 21 (7), RC137(2001).
  42. Self, D. W., Choi, K. H., Simmons, D., Walker, J. R., Smagula, C. S. Extinction training regulates neuroadaptive responses to withdrawal from chronic cocaine self-administration. Learn Mem. 11 (5), 648-657 (2004).
  43. Sutton, M. A., et al. Extinction-induced upregulation in AMPA receptors reduces cocaine-seeking behaviour. Nature. 421 (6918), 70-75 (2003).
  44. Gawin, F. H., Ellinwood, E. H. Cocaine dependence. Annu Rev Med. 40, 149-161 (1989).
  45. Bouton, M. E. Context, ambiguity, and unlearning: sources of relapse after behavioral extinction. Biological Psychiatry. 52 (10), 976-986 (2002).
  46. Torregrossa, M. M., Taylor, J. R. Learning to forget: manipulating extinction and reconsolidation processes to treat addiction. Psychopharmacology. 226 (4), 659-672 (2013).
  47. Conklin, C. A., Tiffany, S. T. Applying extinction research and theory to cue-exposure addiction treatments. Addiction. 97 (2), 155-167 (2002).
  48. Carr, K. D., Kim, G. -Y., Cabeza de Vaca, S. Chronic food restriction in rats augments the central rewarding effect of cocaine and the δ 1 opioid agonist, DPDPE, but not the δ 2 agonist, deltorphin-II. Psychopharmacology. 152 (2), 200-207 (2000).
  49. Stamp, J. A., Mashoodh, R., van Kampen, J. M., Robertson, H. A. Food restriction enhances peak corticosterone levels, cocaine-induced locomotor activity, and ΔFosB expression in the nucleus accumbens of the rat. Brain Research. 1204, 94-101 (2008).
  50. Shalev, U., Marinelli, M., Baumann, M. H., Piazza, P. -V., Shaham, Y. The role of corticosterone in food deprivation-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat. Psychopharmacology. 168 (1-2), 170-176 (2003).
  51. Cunningham, K. A., et al. Selective serotonin 5-HT(2C) receptor activation suppresses the reinforcing efficacy of cocaine and sucrose but differentially affects the incentive-salience value of cocaine- vs. sucrose-associated cues. Neuropharmacology. 61 (3), 513-523 (2011).
  52. Fowler, J. S., et al. Mapping cocaine binding sites in human and baboon brain in vivo. Synapse. 4 (4), 371-377 (1989).
  53. Kufahl, P. R., et al. Neural responses to acute cocaine administration in the human brain detected by fMRI. Neuroimage. 28 (4), 904-914 (2005).
  54. Goldberg, S. R., Hoffmeister, F., Schlichting, U. U., Wuttke, W. A comparison of pentobarbital and cocaine self-administration in rhesus monkeys: effects of dose and fixed-ratio parameter. J Pharmacol Exp Ther. 179 (2), 277-283 (1971).
  55. Pickens, R., Thompson, T. Cocaine-reinforced behavior in rats: effects of reinforcement magnitude and fixed-ratio size. J Pharmacol Exp Ther. 161 (1), 122-129 (1968).
  56. Boren, J. J. Resistance to extinction as a function of the fixed ratio. J Exp Psychol. 61 (4), 304-308 (1961).
  57. Miller, W. R., et al. PPARγ agonism attenuates cocaine cue reactivity. Addict Biol. , (2016).
  58. Schmitz, J. M., et al. PPAR-gamma agonist pioglitazone modifies craving intensity and brain white matter integrity in patients with primary cocaine use disorder: a double-blind randomized controlled pilot trial. Addiction. , (2017).
  59. Kalivas, P. W., Peters, J., Knackstedt, L. Animal Models and Brain Circuits in Drug Addiction. Molecular Interventions. 6 (6), 339-344 (2006).
  60. Reichel, C. M., Bevins, R. A. Forced abstinence model of relapse to study pharmacological treatments of substance use disorder. Curr Drug Abuse Rev. 2 (2), 184-194 (2009).
  61. Ahmed, S. H., Koob, G. F. Transition from moderate to excessive drug intake: change in hedonic set point. Science. 282 (5387), 298-300 (1998).
  62. Gawin, F. H., Ellinwood, E. H. Cocaine and other stimulants. Actions, abuse, and treatment. N Engl J Med. 318 (18), 1173-1182 (1988).
  63. Bozarth, M. A., Wise, R. A. Toxicity associated with long-term intravenous heroin and cocaine self-administration in the rat. JAMA. 254 (1), 81-83 (1985).
  64. Liu, Y., Roberts, D. C. S., Morgan, D. Sensitization of the reinforcing effects of self-administered cocaine in rats: effects of dose and intravenous injection speed. European Journal of Neuroscience. 22 (1), 195-200 (2005).
  65. Jackson, L. R., Robinson, T. E., Becker, J. B. Sex differences and hormonal influences on acquisition of cocaine self-administration in rats. Neuropsychopharmacology. 31 (1), 129-138 (2006).
  66. Feltenstein, M. W., See, R. E. Plasma progesterone levels and cocaine-seeking in freely cycling female rats across the estrous cycle. Drug Alcohol Depend. 89 (2-3), 183-189 (2007).
  67. Kreek, M. J., Nielsen, D. A., Butelman, E. R., LaForge, K. S. Genetic influences on impulsivity, risk taking, stress responsivity and vulnerability to drug abuse and addiction. Nature Neuroscience. 8 (11), 1450-1457 (2005).
  68. Brenhouse, H. C., Andersen, S. L. Delayed extinction and stronger reinstatement of cocaine conditioned place preference in adolescent rats, compared to adults. Behav Neurosci. 122 (2), 460-465 (2008).
  69. Kmiotek, E. K., Baimel, C., Gill, K. J. Methods for intravenous self administration in a mouse model. J Vis Exp. (70), e3739(2012).
  70. Grimm, J. W., et al. Brief exposure to novel or enriched environments reduces sucrose cue-reactivity and consumption in rats after 1 or 30 days of forced abstinence from self-administration. PLoS One. 8 (1), e54164(2013).
  71. Grimm, J. W., Barnes, J., North, K., Collins, S., Weber, R. A general method for evaluating incubation of sucrose craving in rats. J Vis Exp. (57), e3335(2011).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Kokain Kendine UygulamaManivela Bas mAbstinenlik D nemiKateter A klSabit Oranl ProgramOperant Odanf zyon PompasRelaps Riski

İlgili makaleler