İnsan yağ dokusu mikrovasküler işlevini kullanarak Videomicroscopy değerlendirilmesi

Summary

Videomicroscopy sistemleri izole yağ dokusu arteriyoller fizyolojik ve farmakolojik uyaranlara yanıt olarak fonksiyonel özelliklerini incelemek için kullanılır. Bu teknik obez insanlarda farklı yağ dokusu etki alanlarındaki mikrovasküler fenotipleri incelemek için kullanılabilir.

Abstract

Obezite yakından metabolik ve kardiyovasküler hastalık gelişimine bağlı iken az bu süreçleri yöneten mekanizmaları hakkında bilinir. Özellikle merkez/visseral obezite işbirliğiyle yağlı doku serbest pro aterojenik arabulucu yerel ve sistemik patojenik vasküler değişiklikler tanıtmak ve kavramı o kardiyovasküler hastalık olabilir onaylanmadığına karar yağ doku disfonksiyon sonucu gelişmeye devam ediyor. Burada, analiz olduğu gibi küçük insan arteriyoller yaşayan insan denekler yağ deposundan kaldırıldı vazodilatör ve vasoconstrictor tepkilerin içerir videomicroscopy benzersiz bir yöntem açıklanmaktadır. Videomicroscopy farmakolojik veya fizyolojik uyaranlar vivo içinde koşulları taklit eden bir baskı sistemi kullanarak yanıt olarak izole yüzdeki fonksiyonel özelliklerini incelemek için kullanılır. Teknik patofizyolojisi ve vasküler disfonksiyon yağ dokusu ortamın içinde yerel olarak katkıda moleküler mekanizmalar anlamak için yararlı bir yaklaşımdır. Ayrıca, yağ dokusu microvasculature anormallikleri de sistemik hastalıklarla bağlantılı olmuştur. Biz depo özel vasküler yanıt obez bireylerde incelemek için bu tekniği uygulanır. Endotel bağımlı vazodilatasyon yüksek akış ve asetilkolin adipose arteriyoller (50-350 µm iç çapı, 2-3 mm uzunluğunda) aynı birey bariatrik cerrahi sırasında iki farklı yağ depoları izole olarak değerlendirildi. Visseral yağ arteriyoller subkutan perondan izole kaplar kıyasla Özürlüler endotel bağımlı vazodilatasyon sergi gösterdi. Bulgular visseral microenvironment klinik gözlem artan visseral obezite sistemik hastalik mekanizmaları için bağlama ile ilgili olabilecek vasküler endotel disfonksiyonu ile ilişkili olduğunu göstermektedir. Videomicroscopy tekniği farklı yağ depoları gelen vasküler fenotipleri incelemek gibi bulgular farklı derecelerde obezite ve metabolik fonksiyon bozukluğu olan bireyler arasında karşılaştırmak için kullanılabilir. Yöntem damar yanıtlarında boyuna yanıt-e doğru klinik müdahaleler incelemek için kullanılabilir.

Introduction

Videomicroscopy küçük arteriyoller yaşayan insan denekler ex vivokaldırıldı vasomotor işlevini incelemek için kullanılan yararlı bir tekniktir. Bizim laboratuvar microvasculature çeşitli yağ microenvironments etkilerini karakterize etmek için farklı yağ dokusu bölmeleri gelen küçük yüzdeki dışarı dissekan odaklanmıştır. Bu teknik önemli bir avantajı kan damarları insan vücudundan kaldırıldı işlevsel kalır ve kolayca dakika ile biyopsi takip saat içinde incelenebilir var. Fizyolojik şartlarda taklit ve birçok vivo içinde özellikleri özetlemek mikro-cam Kanüller üzerinden intraluminal uzayda tutulan transmural basınç sabit. ¹

Protocol

protokolü ve burada anlatılan örnekler Boston Üniversitesi okul tıp kurumsal inceleme kurulu'nin (IRB, iletişim kuralı #H-25644) kabul edildi ve Helsinki Deklarasyonu uygun olarak yapılmıştır. Tüm konularda yazılı Onam önce katılım sağlanan.

1. hazırlık çözümler ve mikro-cam Kanüller

1. hazırla 4-2-hydrosyethyl-1-piperazineethanesulfonic asidik solüsyon (HEPES) çözüm. 1 L için 8.059 g NaCl, 0,298 g KCl, 0,296 g MgSO ₄ dissolve • 7 H ₂ O, 0.235 g CaCl ₂ • 2 H ₂ O, 0,16 g KH ₂ PO ₄, 0,01 g EDTA, 1.081 g D-glukoz ve 2.383 g HEPES asit 950 ml deiyonize su. Se....

Results

Bizim laboratuvar videomicroscopy endotel bağımlı incelemek için kullanılan ve - bağımsız vazodilatasyon, aynı zamanda yağ dokusu arteriyoller vasocontractile fonksiyonu obez insanların subkutan ve viseral yağ izole. Karakteristik deneysel set-up şekil 1A' görüntülenir. Yağ dokusu arteriyoller iki cam kapiller Pipetler arasında askıya ve yerde dikiş içinde şekil 1Badımında gösterildiği gibi organ odası ile güvenli. 5.1 bölümünde .......

Discussion

Diseksiyon ve dokuları çevreleyen dan adipose arteriyoller yalıtım dikkat detay ve teknik iletişim kuralı ile zaman alıcı ve emek yoğun bir işlem olabilir. Mikrodiseksiyon yordam titiz beceri ve düz kas ve endotel olabilecek hasarları önlemek için özel diseksiyon mutfak eşyaları microvasculature katmanları hücre gerektirir. Arterioler duvardaki bile küçük yanlışlıkla delikler intraluminal basınçlandırma ve başarısız bir deney sonuçlarında engelleyebilirsiniz. Ayrıca, cannulation dikiş kullanan arteriyoller, gemi her ucun.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Kimyasal Adı< / güçlü >
Asetilkolin	Sigma Aldrich	A6625
Kalsiyum klorür (CaCl2< / sub>)	Sigma Aldrich	223506
D - (+) - Glikoz	Sigma Aldrich	G5767
Endotelin-1	Sigma Aldrich	E7764
Etilen glikol-bis (2-aminoetileter) -N, N, N', N'-tetra asetik asit (EGTA)	Sigma Aldrich	E3889
Etilen diamin tetra asetik asit (EDTA)	Sigma Aldrich	E9884
HEPES	Sigma Aldrich	H3784
N < sub>w < / em >< / sub>-nito-L-arginin metil ester hidroklorür	Sigma Aldrich	N5751
Magnezyum sülfat (MgSO4)	Sigma Aldrich	M7506
Potasyum klorür (KCL)	Sigma Aldrich	P3911
Potasyum fosfat (KH2PO4)	Sigma Aldrich	P5655
Papaverine	Sigma Aldrich	P3510
Sodyum bikarbonat (NaHCO 3	Sigma Aldrich	S6014
Sodyum klorür (NaCl)	Sigma Aldrich	S7653
Sodyum fosfat monobazik monohidrat (NaH2Po4)	Sigma Aldrich	S9638
< güçlü > İsim< / güçlü > <	güçlü > Şirket< / güçlü >	< güçlü > Katalog Numarası< / güçlü >	< güçlü > Yorumlar< >
Ekipman< / güçlü >
Forseps	İnce bilim araçları	15000-08
Ters mikroskop	Zeiss Achromat
Laboratuvar boruları	Euro-Pharm	250100306F999
İğne / pippette çektirme	David kopf aletleri	720
Oftalmik monofilament naylon sütür	Cerrahi uzmanlıklar	A7756N
Makas	Finescience araçları	150000-08
Damar Haznesi	DMT	VAS v.2.1