Method Article

Mayi glikoz tolerans testi, akciğer işlev ölçümü ve akciğer fiksasyonu obezite ve pulmoner sonuçlar üzerine Engelli metabolizma etkisini incelemek için

DOI:

10.3791/56685

⸱

March 15th, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Translational Experimental Pediatrics, Experimental Pulmonology, Department of Pediatrics and Adolescent Medicine, University of Cologne, 2Department of Pediatrics and Adolescent Medicine, University of Cologne, 3Division of Experimental Pediatrics and Metabolism, University Children's Hospital, Heinrich Heine University Düsseldorf

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Obezite sıklığı artıyor ve kronik akciğer hastalıkları riskini artırır. Temel mekanizmaları ve Önleme stratejileri, iyi tanımlanmış hayvan kurmak için modelleri ihtiyaç vardır. Burada, üç yöntem (glikoz tolerans testi, vücut pletismografisi ve akciğer fiksasyon) obezite etkisi farelerde akciğer sonuçlar üzerine eğitim sağlamak.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Obezite ve solunum bozukluğu önemli sağlık sorunları vardır. Obezite böylece büyüyen bir sosyo-ekonomik yük temsil eden 2030 1 milyardan fazla obez bireyler dünya çapında beklenen sayıda sahip gelişmekte olan bir salgın haline geliyor. Aynı anda, diyabet gibi kalp ve kronik akciğer hastalıkları, dahil olmak üzere comorbidities, obezite ile ilgili sürekli olarak artmaktadır. Obezite astım exacerbations riski ile ilişkili olmasına rağmen solunum yolu semptomları ve kötü kontrol, kötüleşen işlevsel rolü obezite ve kronik akciğer hastalığı patogenezinde perişan metabolizma kez hafife nedir, ve temel moleküler mekanizmaları zor kalır. Bu makalede yöntemleri obezite etkisi metabolizma, hem de akciğer yapısı ve fonksiyonu değerlendirmek için mevcut amaçlamaktadır. Burada, fareler araştırmalar üç teknikler tarif: Obezite etkisi glikoz metabolizması; çözümlenecek mayi glikoz toleransı (ipGTT) (1) değerlendirilmesi (2) ölçüm havayolu direnci (Res) ve solunum sistemi uyumluluk obezite etkisi akciğer fonksiyonu; analiz etmek için (Cdyn) ve (3) hazırlık ve sonraki nicel histolojik değerlendirme için akciğer fiksasyonu. Obezite ile ilgili akciğer hastalıkları muhtemelen multifaktöriyel, potansiyel olumsuz etkisi Akciğer işlev ve tedaviye yanıt sistemik inflamatuar ve metabolik bozukluk kaynaklanan vardır. Bu nedenle, moleküler mekanizmaları ve roman tedavilerin etkisini incelemek için standart bir metodoloji esastır.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dünya Sağlık Örgütü (WHO göre) 2008 yılında, fazla 1.4 milyar yetişkinler 20 yaş ve üstü, yaş, vücut kitle indeksi (BMI) 25 veya fazlası ile aşırı kilolu muydun; Ayrıca, 200 milyondan fazla erkek ve yaklaşık 300 milyon kadınlardı obez (BMI≥30)1. Obezite ve metabolik sendrom hastalıklar çok sayıda için büyük risk faktörleri vardır. Obezite ve eşlik eden artan beyaz yağ dokusu kitle yakından tip 2 diyabet2,3, kardiyo-vasküler hastalıkları koroner kalp hastalığı (KKH), kalp yetmezliği (HF), Atriyal fibrilasyon4 de dahil olmak üzere için bağlanmıştır ve osteoartrit5, fonksiyonel rollerinin solunum bozukluğu patogenezinde kalır kötü anlaşılır. Ancak, epidemiyolojik çalışmalar obezite şiddetle exertional dispne, obstrüktif uyku apne Sendromu (OSAS), obezite hipoventilasyon Sendromu (İSG), kronik dahil olmak üzere Kronik solunum koşulları ile ilişkili olduğunu göstermiştir obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH), pulmoner emboli, aspirasyon pnömoni ve bronşiyal astım6,7,8,9. Potansiyel mekanizmaları, obezite ve perişan metabolizma bağlama örneğin, insülin direnci ve tip II diyabet, kronik akciğer hastalığı patogenezinde için sadece Ağırlık mekanik ve fiziksel sonuçlarını oluşturan havalandırma üzerinde aynı zamanda kazanç Neden bir kronik Subakut inflamatuar durumu10,11. Obezite ve etkili önleyici stratejileri ve tedavi yaklaşımları, eksikliği ile birleştiğinde akciğer hastalıkları son on yılda obezite ile ilgili akciğer yönetmek için yeni yollar tanımlamak için moleküler mekanizmaları araştırmak gereğini vurgulamaktadır hastalıklar.

Burada, obezite ve akciğer yapısı ve fonksiyonu fare modellerinde üzerindeki etkilerini araştırmak için önemli temelleri üç standart testleri, tarif: (1) mayi glikoz toleransı (ipGTT) (2) hava yolu direnci (Res) ölçümü ve solunum Sistem uyumluluğu (Cdyn); ve (3) hazırlık ve sonraki nicel histolojik değerlendirme için akciğer fiksasyonu. İpGTT bir ölçü glikoz alımı ve böylece metabolizma obezite etkisi güçlü tarama testidir. Yöntemi sadelik iyi standardizasyon ve bu nedenle sonuçlar karşılaştırılabilir laboratuvarlar arasında sağlar. Hiperglisemik kelepçeler veya izole adacıkları, çalışmaları gibi daha gelişmiş yöntemleri metabolik fenotip12ayrıntılı bir analiz için kullanılabilir. Burada bir akciğer sonuç üzerinde daha fazla çalışmalar için temel olarak sistemik ve metabolik bozukluğu obezite ile ilişkili durumunu tanımlamak için oral glikoz toleransı değerlendirmek. Obezite ve metabolik bozukluk akciğer fonksiyon üzerindeki etkisini değerlendirmek için havayolu direnci (Res) ve solunum sistemi uyumluluk (Cdyn) ölçülür. Akciğer hastalığı karakterize etmek için akciğer işlev değerlendirmesi için kontrolsüz gibi ölçülü yöntemleri kullanılabilir. Hayvanlar özgürce hareket kontrolsüz pletismografisi taklit eder nefes desenleri yansıtan doğal bir durum; Buna ek olarak, daha doğru13Res ve cDyn derinden imzalat farelerde dinamik akciğer mekaniği, değerlendirmek için giriş empedansı ölçümü gibi invaziv yöntemler vardır. Bu yana Kronik solunum koşulları akciğer dokusu histolojik değişiklikler tarafından yansıtılır, daha fazla çözümleme için uygun akciğer fiksasyon her an olabilir. Doku fiksasyon ve hazırlık yöntemi seçimi, örneğin, Havayolları ya da akciğer parankimi14iletken okudu akciğer yuvası üzerinde bağlıdır. Burada, obezite etkisi astım gelişimi üzerine eğitim için iletken solunum yolları nitel ve nicel bir değerlendirme sağlar bir yöntemi açıklanmaktadır.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm hayvan yordamları yerel hükümet yetkilileri tarafından onaylanmış protokolleri ile uyumlu yapılmıştır (arazi NRW, AZ: 2012.A424) ve Alman hayvan refahı hukuk ve refah üzerinde düzenlemeler veya deneyler için kullanılan hayvanların uygun olduğunu diğer bilimsel amaçlar. Akciğer fonksiyonu analizi akciğer yapısı etkileyebilir ve bu nedenle sonraki histolojik analizler, Res ve Cdyn ve hazırlık ve akciğer Histomorfometri için fiksasyonu ölçüm farklı hayvanlarda gerçekleştirilmesi gerekiyor. Ancak, ölçüm Res ve ipGTT takip Cdyn mümkündür. Stres ipGTT sırasında çalışmasına engel bu yana akciğer fonksiyonu için gerekli anestezi testleri, bir iyileşme süresi yaklaşık 2 hafta sonra ipGTT fareler vücut ağırlık kaybı kurtarmak izin vermek için tavsiye edilir ve kan parametreleri12' değiştirir.

1. hazırlık mayi glikoz tolerans testi (ipGTT)

Not: oruç 12 h sonra yaklaşık 2 saat tam ipGTT olur.

  1. Stres kan şekeri önemli ölçüde etkiler beri her iki adaptasyon farelerin, hem de eğitim bilim adamının, yapılmaktadır emin olun.
  2. Hayvanlar deneysel alan sessiz ve stressiz koşullar altında aktarın.
  3. Hypercaloric diyet uygulanması obezite farelerde ikna etmek için göz önünde bulundurun. Daha fazla tavsiye için tartışma bölümüne bakın.
  4. 12 h için hızlı hayvanlar, su erişimi sınırlama olmadan bir gecede. Ertesi gün, oruç, 12 h hazırladıktan sonra kan şekeri ölçüm cihazı üretici göre'nın protokol ( malzemelerin tabloyabakın) test şeridi bağlantı noktasına yeni bir test şeridi ekleyerek.
  5. Yavaşça fare kuyruğunu, adlı koruyarak steril makas kullanarak kuyruk ucu deşmek ve hemen serbest akışlı bir kan damlası (en az örnek boyutu 0.5 µL) kan şekeri ölçüm cihazı test şeridi uygulayarak oruç kan glukoz ölçümü.
    Not: Bir geri sayım sayacı ekranda yeterli kan örneği uygulamadan sonra başlar. Sonra 4 s, test sonucu ekranda görünür.
  6. Daha sonra tartmak ve işaretleme renk kullanarak tek tek hayvan etiket.
  7. 2 g glikoz/kg vücut ağırlığı ile mayi enjeksiyon yönetmek. Enjeksiyon hacmi 0.1 mL/10 g vücut ağırlığı (27 G iğne ve 1 cc şırınga) olduğundan emin olun.
  8. Daha sonra 15, 30, 60 ve 120 dakika sonra kan glukoz ölçümü yeni bir test şeridi üzerinde bir damla kan serbest akışlı uygulayarak.
    Not: Kuyruk ucu-wards nazik masaj kan akımı artırılabilir. Kuyruk yara encrusts, % 0,9 Sodyum Klorür çözüm batırılmış bir Steril bez kullanarak temiz.
  9. Hayvanlar onların ev kafeslerde sınırsız erişim ölçüleri arasında su dinlenme sağlar.

2. Akciğer işlev analiz ölçü Res ve cDyn

Not: Res ve cDyn rahatsız edilmeden ölçümü için fareler derin anestezi altında havalandırılmış gerekiyor. Stresten hayvan işleme ve uygun anestezi izleme gereklidir. Steril teknikleri kullanarak genel yönergeler için lütfen makaleyi Hoogstraten-Miller vd tarafından inceleyin. 15

  1. Pletismograf deneyler her kümesi önce kalibre ve çalışma ayarları yazılım içinde hazırlamak ( Tablo malzemelerigörmek).
  2. Ameliyat öncesi, derin hayvanlar üzerinden mayi enjeksiyon Xylazine (10 mg/kg vücut ağırlığı) ve ketamin (100 mg/kg vücut ağırlığı) anestezi (27 G iğne ve 1 cc şırınga). Enjeksiyon hacmi vücut ağırlığı başına 0.1 mL/10 g olduğundan emin olun.
    Not: ketamin farelerde uygun bir analjezik etkisi olduğundan, hiçbir ek ağrı tedavisi gereklidir. İnvaziv trakeal kateter/Pletismograf yordamı yaklaşık 5-7 dakika sürer, sonra veri toplama başlayabilirsiniz.
  3. Vücut ısısını korumak için bir Isıtma yastık üzerinde sırtüstü pozisyonda fareyi getirin.
  4. Anestezi altında kuruluğu önlemek için merhem gözlerle kapsar.
  5. Sürekli ayak çimdik-yanıt kullanarak anestezi derinliği izlemek.
    Not: Ek yönetim anestezi anestezi cerrahi bir uçak korumak için gerekli olabilir.
  6. Tiroid bölgede % 70 etanol ile cerrahi alan kürk nemlendirin.
  7. Dikkatli bir şekilde orta hat için yaklaşık 1 cm Şah çentiği kadınlarda göğüs kemiği ve mentum yumru symphyses arasında deride Forseps ile kaldırma ve künt makas (şekil 1A) kullanarak görsel denetim altında deri kırpma tarafından deşmek.
  8. Temel cilt altı yağ dokusu ve tiroid bezi görselleştirin.
  9. Trakea dikkatle künt her iki tiroid loblar berzah ve sternothyroid ve sternothyroid kasları (şekil 1B) diseksiyon ayırarak maruz. Herhangi bir gemi zarar ve bu kalp-damar sistemi üzerinde olumsuz etkilere neden olabilir beri kanamaya, neden değil dikkatli olun ve sonuçta ölçümler üzerinde.
  10. Daha sonra bir 4-0 örgülü cerrahi sütür trakea ve künt forseps kullanarak yemek borusu arasında geçmektedir. Dikkatle gırtlak mikro makasla trakeal kıkırdak arasındaki yakın Trakea deşmek.
  11. Görsel kontrol (şekil 1 c) altında trakeal tüp (0,04 inç/1.02 mm çap) ile Tüp takacağım. Via tüp ligasyonu sistemdeki herhangi bir sızıntı önlemek için cerrahi sütür ile düzeltmek.
  12. Daha sonra hayvan vücut odası ısıtmalı yatağa taşımak ve trakeal tüp yüz levha (şekil 1 d) bağlayın ve havalandırma üzerinde denetleyicisi (şekil 1E) ön panelde havalandırma düğmesine basarak açın.
  13. Havalandırma havalandırma oranı ile contemporaneously göğüs hareketi gözlemleyerek anket. Uygun trakeal tüp yerleşimini onaylamak için Toraks ve her iki taraf aynı anda taşımak emin olun.
  14. Basınç izlemek sinyal bilgisayar ekranında (şekil 1F). Havalandırma eğriler düzgün olduğundan emin olun. Yoksa, hayvan ayırmak ve cerrahi git hadi. Kan ve mukus trakeal tüp engelleme dikkatli olun.
    Not: 20-25 g vücut ağırlığı ile yetişkin hayvanlar için Şekil 2 ' de gösterildiği gibi solunum ayarları üreticinin önerilerini uygun olarak önerilmektedir.
  15. Havalandırma sırasında trans-pulmoner basınç değişiklikleri denetlemek için yemek borusu akciğerlere düzeyde yaklasik derinlikte bir özofagus tüp (0,04 inç/1.02 mm çap) takın. Ekran tüpü yerleştirerek süre dikkat et. Tüp nerede maksimal basınç saptırma ve en az kalp eşya üstünde belgili tanımlık perde görülebilir yerleştirin.
  16. Ameliyattan sonra hayvan ölçüm için hazır olun. Anestezi ile mayi enjeksiyon 27-G iğne ve 1 cc şırınga kullanarak ketamin bas (100 mg/kg vücut ağırlığı) kanlarını. Enjeksiyon hacmi vücut ağırlığı başına 0.1 mL/10 g olduğundan emin olun.
    Not: bronş hyperreagibility değerlendirmek için methacholine, non-selektif muscarinic reseptör agonist bronchoconstriction indükler parasempatik sinir sistemi nebulize. Veri toplama dört farklı aşamalarında (şekil 3) gerçekleştirilir.
  17. Veri toplama manufacturer´s protokolüne göre başlatın.
    Not: Yazılım otomatik olarak edinme işlemi boyunca kullanıcılara yol gösteren.
  18. Calıştıkları 5 dk sonra nebulization başlatmak ve PBS (araç) 10 µL Nebulizatör üzerinde uygulamak. Daha sonra bir yanıt faz 3 dk, nerede Res (cmH2O/mL/s) ve cDyn (mL/cmH2O) ölçülür izleyin. Sonunda, sonraki nebulization önce hayvan kurtarma faz 3 dk sağlamak.
  19. Belgili tanımlık bilgisayar yazılımı methacholine (2,5 µg/10 µL, 6.25 µg/10 µL ve 12.5 µg/10 µL) konsantrasyonlarda solunum üzerinde artan 10 µL kademeli uygulama tarafından izleyin.
  20. Bir kez tüm ölçümler yapılır ve kaydedilen, hayvan tarafından servikal çıkığı kurban.

3. akciğer yalıtım için nicel Histomorphometric çözümleme-in yetişkin fareler

  1. Derin Xylazine (10 mg/kg vücut ağırlığı) ve ketamin (100 mg/kg vücut ağırlığı) mayi enjeksiyon hayvan ile anestezi (27 G iğne ve 1 cc şırınga). Enjeksiyon hacmi vücut ağırlığı başına 0.1 mL/10 g olmalıdır.
    Not: cerrahi tolerans durumunu ulaştıktan sonra hazırlık yaklaşık 5 dk ardından organ perfüzyon ve fiksasyon için 30 dk sürer.
  2. Hayvan cerrahi toleransı (negatif ayak çimdik-response) durumunu ulaştı, % 70 etanol hayvanla dezenfekte ve hayvan bir yastık üzerinde cerrahi bant ile düzeltmek.
  3. Kardiyak ponksiyon ve kanama tarafından hayvan kurban. Kısaca, karın deri ve künt makas kullanarak karın zarını medial bir kesi ile açın.
  4. Diyafram baş wards karaciğer bulun ve karaciğer diyaframdan dikkatlice ayırın.
  5. Küçük bir insizyon attım künt makas kullanarak diyafram olun ve punctate 20 G iğne ile kalbin sol ventrikül 2 mL şırınga bağlı. Yavaş yavaş hayvan exsanguinate.
    Not: Yavaş ve dikkatli kan kaybı rahatsız edilmeden kan akımı inhibe negatif basınç nedeniyle çöküyor ventrikül önlemek önemlidir.
  6. Akciğer Toraks hafifçe eğimli, künt makas kullanarak göğüs kafesi tüm uzunluğu boyunca bir parasternal kesi aracılığıyla açarak incelemek.
  7. Daha sonra göğüs kafesi plevral boşluğu (şekil 3 c) ortaya çıkarmak için kaldırın. Kalp ve akciğer görmek için timus kaldırın.
    Not: İsteğe bağlı enjeksiyon perfüzyon akciğer damar sistemi ve daha sonra bir sabitleştirici çözüm [örneğin, %4 (kütle/hacim) paraformaldehyde (PFA)] ile buz gibi PBS ile ardından sağ ventrikül mümkündür. Alveoler septae rüptürü ve olumsuz etkileyen bu yöntemi kullanarak akciğer yapısı için riski olduğunu unutmayın.
  8. Akciğer ilk tarafından dikkatle incelemek kalp kaldırma.
  9. Daha sonra bir 4-0 örgülü cerrahi sütür trakea ve künt forseps kullanarak yemek borusu arasında geçmektedir.
  10. Daha sonra dikkatlice gırtlak trakeal kıkırdak arasındaki yakın Trakea deşmek, intravenöz bir kanül (26 G) ile entübasyon ve akciğer basınç fiksasyon 20 cm H2O bir sabit basınçta tarafından açıldığı sabitleştirici Ajan [örneğin, %4 (kitle kullanarak İngiltere'de yılın /Volume)].
  11. İngiltere'de yılın fiksasyon için oda sıcaklığında 30 dk için sabitleştirici bırakın. Daha sonra nefes borusu ligate ve kanül kaldırın. Daha sonra akciğer dikkatle doku zarar vermeden tüketim ve gecede sabitleştirici Ajan 4 ° C'de depolayın.
    Not: Alternatif olarak, telefon santralleri/ETS göre fikir birliği kağıt % 2.5 GA OsO4 tamponlu, urasil çözüm için uygun doku istikrar kullanılır. Daha fazla doku hazırlık için bkz: fikir birliği kağıt tarafından Hsia vd. 14

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mayi glikoz tolerans testi (ipGTT) (şekil 4) temsilcisi sonuçlarını, Hematoksilen Eozin gösteren akciğer fonksiyon testi (şekil 5) ve temsilcisi görüntüleri akciğer (şekil 6) lekeli.

İpGTT farelerde obez (mavi) yüksek yağlı diyet (HFD) 7 hafta sonra gerçekleştirildi. Standart diyet beslenen farelerin denetimleri (siyah) görev yaptı. Obez fa...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu rapor üç iletişim kuralları için Obezite glikoz metabolizması ve pulmoner sonuçları üzerinde etkisini analiz etmek üç farklı yöntem sunar. İlk olarak, glikoz tolerans testi hücre içi glikoz alımı analiz etmek için bir fırsat sunuyor ve insülin direnci göstergesi olabilir. İkinci olarak, tüm vücut pletismografisi Akciğer işlev ölçmek için bir teknik ve böylece yeni tedavilerin etkinliğini test etmek yararlıdır. Üçüncü olarak, bir standart fiksasyon protokol, obezite yapısal değişiklikler üzerinde etkisini değerlendirme...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deneyler Marga ve Walter koza-Stiftung, Kerpen, Almanya tarafından desteklenen edildi; 210-02-16 (MAAA), proje 210-03-15 (MAAA) proje ve Alman Araştırma Vakfı (DFG; AL1632-02; MAAA), Bonn, Almanya; Merkezi moleküler tıp Köln (CMMC; Üniversite Hastanesi Köln; Kariyer gelişme programı; MAAA), Köln servet (Tıp Fakültesi, Köln Üniversitesi; KD).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
GlucoMen LXA.Menarini teşhis, Firneze, İtalya38969kan şekeri ölçüm cihazı
GlucoMen LX SensörüA.Menarini teşhis, Firneze, İtalya39765Test şeritleri
Glikoz %20B. Braun, Melsung, Almanya2356746
FinePointe YazılımıDSI, MC s&akut; Hertogenbosch, Hollanda601-1831-002
FinePointe RC Tek Bölgeli Fare MasasıDSI, MC s&akut; Hertogenbosch, Hollanda601-1831-001
FPRC Kontrol CihazıDSI, MC s&akut; Hertogenbosch, Hollanda601-1075-001
FPRC Aerosol BloğuDSI, MC s&akut; Hertogenbosch, Hollanda601-1106-001
Aerogen neb kafa-5.2-4umDSI, MC s&akut; Hertogenbosch, Hollanda601-2306-001
ForsepsFST, Britanya Kolumbiyası, Kanada11065-07
Künt makasFST, Britanya Kolumbiyası, Kanada14105-12
Mikro makasFST, Britanya Kolumbiyası, Kanada15000-00
Perma-Hand 4-0Ethicon, Porto Riko, ABD736HCerrahi sütür
Roti-Histofix %4RothP087.1%4 Paraformaldehid
KetasetZoetis, Berlin, Almanya10013389Ketamin
Rompun 2%Bayer, Leverkusen, Almanya770081Ksilazin

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kelly, T., Yang, W., Chen, C. S., Reynolds, K., He, J. Global burden of obesity in 2005 and projections to 2030. Int J Obes (Lond). 32, 1431-1437 (2008).
  2. Freemantle, N., Holmes, J., Hockey, A., Kumar, S. How strong is the association between abdominal obesity and the incidence of type 2 diabetes? International journal of clinical practice. 62, 1391-1396 (2008).
  3. Wassink, A. M. J., et al. Waist circumference and metabolic risk factors have separate and additive effects on the risk of future Type 2 diabetes in patients with vascular diseases. A cohort study. Diabetic Medicine. 28, 932-940 (2011).
  4. Oktay, A. A., et al. The Interaction of Cardiorespiratory Fitness with Obesity and the Obesity Paradox in Cardiovascular Disease. Progress in cardiovascular diseases. , (2017).
  5. Azamar-Llamas, D., Hernandez-Molina, G., Ramos-Avalos, B., Furuzawa-Carballeda, J. Adipokine Contribution to the Pathogenesis of Osteoarthritis. Mediators Inflamm. 2017, 5468023(2017).
  6. Koenig, S. M. Pulmonary complications of obesity. The American journal of the medical sciences. 321, 249-279 (2001).
  7. Stunkard, A. J. Current views on obesity. The American journal of medicine. 100, 230-236 (1996).
  8. Murugan, A. T., Sharma, G. Obesity and respiratory diseases. Chron Respir Dis. 5, 233-242 (2008).
  9. Zammit, C., Liddicoat, H., Moonsie, I., Makker, H. Obesity and respiratory diseases. International journal of general medicine. 3, 335-343 (2010).
  10. Ouchi, N., Parker, J. L., Lugus, J. J., Walsh, K. Adipokines in inflammation and metabolic disease. Nat Rev Immunol. 11, 85-97 (2011).
  11. McArdle, M. A., Finucane, O. M., Connaughton, R. M., McMorrow, A. M., Roche, H. M. Mechanisms of obesity-induced inflammation and insulin resistance: insights into the emerging role of nutritional strategies. Front Endocrinol (Lausanne). 4, 52(2013).
  12. Ayala, J. E., et al. Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice. Disease models & mechanisms. 3, 525-534 (2010).
  13. Bates, J. H., Irvin, C. G. Measuring lung function in mice: the phenotyping uncertainty principle. J Appl Physiol. 94 (1985), 1297-1306 (2003).
  14. Hsia, C. C., Hyde, D. M., Ochs, M., Weibel, E. R. An official research policy statement of the American Thoracic Society/European Respiratory Society: standards for quantitative assessment of lung structure. Am J Respir Crit Care Med. 181, 394-418 (2010).
  15. Hoogstraten-Miller, S. L., Brown, P. A. Techniques in aseptic rodent surgery. Curr Protoc Immunol. Chapter 1, Unit 1 12 11-11 12-14 (2008).
  16. Heydemann, A. An Overview of Murine High Fat Diet as a Model for Type 2 Diabetes Mellitus. Journal of diabetes research. 2016, 2902351(2016).
  17. Asha, G. V., Raja Gopal Reddy, M., Mahesh, M., Vajreswari, A., Jeyakumar, S. M. Male mice are susceptible to high fat diet-induced hyperglycaemia and display increased circulatory retinol binding protein 4 (RBP4) levels and its expression in visceral adipose depots. Archives of physiology and biochemistry. 122, 19-26 (2016).
  18. Jovicic, N., et al. Differential Immunometabolic Phenotype in Th1 and Th2 Dominant Mouse Strains in Response to High-Fat Feeding. PLoS One. 10, e0134089(2015).
  19. Fontaine, D. A., Davis, D. B. Attention to Background Strain Is Essential for Metabolic Research: C57BL/6 and the International Knockout Mouse Consortium. Diabetes. 65, 25-33 (2016).
  20. Muniyappa, R., Lee, S., Chen, H., Quon, M. J. Current approaches for assessing insulin sensitivity and resistance in vivo: advantages, limitations, and appropriate usage. Am J Physiol Endocrinol Metab. 294, E15-E26 (2008).
  21. Heijboer, A. C., et al. Sixteen hours of fasting differentially affects hepatic and muscle insulin sensitivity in mice. Journal of lipid research. 46, 582-588 (2005).
  22. Heikkinen, S., Argmann, C. A., Champy, M. F., Auwerx, J. Evaluation of glucose homeostasis. Current protocols in molecular biology. Chapter 29, Unit 29B.23 (2007).
  23. McGuinness, O. P., Ayala, J. E., Laughlin, M. R., Wasserman, D. H. NIH experiment in centralized mouse phenotyping: the Vanderbilt experience and recommendations for evaluating glucose homeostasis in the mouse. Am J Physiol Endocrinol Metab. 297, E849-E855 (2009).
  24. Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse. Diabetes. 55, 390-397 (2006).
  25. Lodhi, I. J., Semenkovich, C. F. Why we should put clothes on mice. Cell Metab. 9, 111-112 (2009).
  26. Swoap, S. J., Gutilla, M. J., Liles, L. C., Smith, R. O., Weinshenker, D. The full expression of fasting-induced torpor requires beta 3-adrenergic receptor signaling. J Neurosci. 26, 241-245 (2006).
  27. Geiser, F. Metabolic rate and body temperature reduction during hibernation and daily torpor. Annu Rev Physiol. 66, 239-274 (2004).
  28. Mead, J. Mechanical properties of lungs. Physiological reviews. 41, 281-330 (1961).
  29. Lundblad, L. K., Irvin, C. G., Adler, A., Bates, J. H. A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice. J Appl Physiol. 93, 1198-1207 (2002).
  30. Lundblad, L. K., et al. Penh is not a measure of airway resistance! Eur Respir J. 30, 805(2007).
  31. Adler, A., Cieslewicz, G., Irvin, C. G. Unrestrained plethysmography is an unreliable measure of airway responsiveness in BALB/c and C57BL/6 mice. J Appl Physiol. 97, 286-292 (2004).
  32. Fairchild, G. A. Measurement of respiratory volume for virus retention studies in mice. Applied microbiology. 24, 812-818 (1972).
  33. Brown, R. H., Wagner, E. M. Mechanisms of bronchoprotection by anesthetic induction agents: propofol versus ketamine. Anesthesiology. 90, 822-828 (1999).
  34. Goyal, S., Agrawal, A. Ketamine in status asthmaticus: A review. Indian journal of critical care medicine: peer-reviewed, official publication of Indian Society of Critical Care Medicine. 17, 154-161 (2013).
  35. Doi, M., Ikeda, K. Airway irritation produced by volatile anaesthetics during brief inhalation: comparison of halothane, enflurane, isoflurane and sevoflurane. Canadian journal of anaesthesia = Journal canadien d'anesthesie. 40, 122-126 (1993).
  36. Braber, S., Verheijden, K. A., Henricks, P. A., Kraneveld, A. D., Folkerts, G. A comparison of fixation methods on lung morphology in a murine model of emphysema. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 299, L843-L851 (2010).
  37. Weibel, E. R., Limacher, W., Bachofen, H. Electron microscopy of rapidly frozen lungs: evaluation on the basis of standard criteria. Journal of applied physiology: respiratory, environmental and exercise physiology. 53, 516-527 (1982).
  38. Rolls, G. Process of Fixation and the Nature of Fixatives. , (2017).
  39. Winsor, L. Tissue processing. Laboratory histopathology. Woods, A., Ellis, R. , 4.2-1-4.2-39 (1994).
  40. Histochemistry, theoretical and applied. Pearse, A. , Churchill Livingstone. London. (1980).
  41. Weibel, E. R. Morphological basis of alveolar-capillary gas exchange. Physiological reviews. 53, 419-495 (1973).
  42. Bur, S., Bachofen, H., Gehr, P., Weibel, E. R. Lung fixation by airway instillation: effects on capillary hematocrit. Experimental lung research. 9, 57-66 (1985).
  43. Bachofen, H., Ammann, A., Wangensteen, D., Weibel, E. R. Perfusion fixation of lungs for structure-function analysis: credits and limitations. Journal of applied physiology: respiratory, environmental and exercise physiology. 53, 528-533 (1982).
  44. Balcombe, J. P., Barnard, N. D., Sandusky, C. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary topics in laboratory animal science. 43, 42-51 (2004).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Intraperitoneal Glucose Tolerance TestLung Function MeasurementLung FixationObesity MetabolismAirway ResistanceRespiratory System ComplianceTracheal IntubationMethacholine ChallengeHistological AssessmentPressure Fixation

Related Articles