İmalat işlemleri ve Birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı Lanthanide iyon şelat Fosfolipid Derlemeler tasarlama

Stéphane Isabettini; Mirjam E. Baumgartner; Peter Fischer; Erich J. Windhab; Marianne Liebi; Simon Kuster

doi:10.3791/56812

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

İmalat işlemleri ve Birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı Lanthanide iyon şelat Fosfolipid Derlemeler tasarlama

7K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/56812

⸱

3 Ocak 2018

Stéphane Isabettini¹ , Mirjam E. Baumgartner¹ , Peter Fischer¹ , Erich J. Windhab¹ , Marianne Liebi² , Simon Kuster¹

¹Laboratory of Food Process Engineering, ETH Zurich, ²MAX IV Laboratory, Lund University

Bu makalede

Özet

İmalat işlemleri polymolecular derlemeler şelat manyetik olarak son derece duyarlı lanthanide iyon için sunulmaktadır. Manyetik yanıt ekstrüzyon nanopore membranlar yoluyla tarafından hazırlanmıştır derleme boyutu tarafından belirlenir. Derlemeler manyetik alignability ve yapısal değişiklikler sıcaklık kaynaklı birefringence ölçümleri, Nükleer manyetik rezonans ve küçük açı nötron saçılma için ücretsiz bir teknik tarafından izlenir.

Özet

Bicelles lipid karışımları çok sayıda oluşmuş akort disk benzeri polymolecular derlemeler vardır. Uygulamalar nanoteknolojik gelişmeler optik aktif ve manyetik olarak değiştirilebilir jelleri oluşumu da dahil olmak üzere membran proteini yapısal çalışmalar Nükleer manyetik rezonans (NMR) arasında değişir. Bu tür teknolojiler derleme boyutu, manyetik yanıt ve termal direnci yüksek kontrol gerektirir. Karışımları 1,2-dimyristoyl -sn- glycero-3-phosphocholine (DMPC) ve onun lanthanide iyon Fosfolipid eşlenik, 1,2 şelat (Ln^{3 +})-dimyristoyl -sn- glycero-3-fosfo-etanolamin-diethylene triaminepentaacetate () DMPE-DTPA), manyetik olarak son derece duyarlı derlemeler gibi DMPC/DMPE-DTPA/Ln^{3 +} içine monte (molar oranı 4:1:1) bicelles. Kolesterol (CHOI-OH) ve başka bir küme benzersiz FİZİKO-kimyasal özellikleri sunan birleştirmeler bilayer sonuçlarında steroid türevleri giriş. Verilen lipid kompozisyon için manyetik alignability bicelle boyutuyla orantılıdır. Ln^{3 +} complexation büyüklüğü ve hizalama yönü açısından görülmemiş manyetik yanıt sonuçlanır. Disk benzeri yapıları termo-tersinir çöküşü içine veziküller Isıtma üzerine derlemeler boyutları ekstrüzyon tarafından tanımlanmış gözenek boyutları ile membran filtreleri ile terzilik sağlar. Manyetik olarak alignable bicelles 5 ° C, vezikül öncüleri tarafından tanımlanan derleme boyutları sonuçlanan soğutma tarafından yeniden oluşturulur. Burada, bu üretim yordamı açıkladı ve tüm derlemeler manyetik alignability birefringence ölçümleri 5,5 T manyetik alan altında tarafından sayılabilir. Fosfolipid bilayer kaynaklanan birefringence sinyal daha da bilayer içinde meydana gelen polymolecular değişiklikleri izleme sağlar. Bu basit tekniği yaygın olarak bicelles karakterize etmek için istihdam edilmektedir NMR deneyler için tamamlayıcı.

Giriş

Bicelles çok sayıda lipid karışımlar elde edilen disk benzeri polymolecular derlemeler vardır. ¹ ^, ² ^, ³ ^, ⁴ ^, ⁵ onlar membran biomolecules yapısal karakterizasyonu için NMR spektroskopisi tarafından yaygın olarak kullanılmaktadır. ⁶ ^, ⁷ ancak, son çabaları olası uygulama alanın genişletin hedefliyoruz. ⁵ ^, ⁸ ^, ⁹ en çok çalışılan bicelle sistem 1,2 karışımından oluşmaktadır-dimyristoyl -sn- glycero-3-derleme ve 1,2 düzlemsel kısmını phosphocholine (DMPC),-dihexanoyl -sn- glycero-3-phosphocholine (DHPC) Fosfolipid kenarına kapsayan. ¹ ^, ² ^, ³ bilayer dikte kendi kendine monte polymolecular yapısı mimari beste fosfolipitler moleküler geometri. ⁴ ^, ⁵ yerine DHPC DMPE-DTPA ile manyetik olarak son derece duyarlı ve ayarlanabilir bicelle sistemleri oluşturur. ¹⁰ ^, ¹¹ DMPC/DMPE-DTPA/Ln^{3 +} (molar oranı 4:1:1) bicelles ilişkilendirmek çoğu ile daha fazla paramagnetic lanthanide iyonları (Ln^{3 +}) bilayer'ın yüzeyinde, gelişmiş bir manyetik tepkisine yol. ¹⁰ Ayrıca, suda çözünen DHPC molekülleri DMPE-DTPA/Ln^{3 +} sağlar ile seyreltme dayanıklı bicelles oluşumunu değiştirme. ¹¹

Düzlemsel polymolecular derlemeler manyetik alignability genel olarak manyetik enerji tarafından dikte edilir,

figure-introduction-1 (1)

B manyetik alan şiddeti, olduğu yerde figure-introduction-2 manyetik sabit, n toplama numarası ve figure-introduction-3 bilayer beste lipidler moleküler diamagnetic duyarlılık anizotropi. Bu nedenle, DMPC/DMPE-DTPA/Ln^{3 +} bicelles yanıt manyetik alanlar için onların boyutu (Toplam sayı n) ve moleküler diamagnetic duyarlılık anizotropi Δχ tarafından hazırlanmıştır. İkinci kolayca Şelatatlı Ln^{3 +}doğası değiştirerek elde edilir. ¹² ^, ¹³ ^, ¹⁴ ^, ¹⁵ Introducing kolesterol (CHOI-OH) veya bilayer steroid diğer türevleri toplama n sayısına ve manyetik duyarlılık Δχ kurulumları ayarlama imkanı sunuyor. ¹¹ ^, ¹⁶ ^, ¹⁷ ^, ¹⁸ ^, ¹⁹ verilen lipid kompozisyon için daha alignable türler kaynaklanan daha fazla lipidler E_mag için (daha büyük toplama n sayısına), katkıda bulunmak ve yetenekli büyük derlemeler içerir. DMPC/DHPC bicelles, boyutunu örneğin, geleneksel çıktısından lipid oranı veya toplam konsantrasyonu optimizasyon ile kontrol edilir. ²⁰ ^, ²¹ ^, ²² bu DMPC/DMPE-DTPA/Ln^{3 +} bicelles mümkün olsa da, bicelle veziküller Teklifler Isıtma üzerine onların termo-tersinir dönüşüm terzilik seçenekleri eklendi. Veziküller şekillendirme membran filtreleri ile ekstrüzyon sağlar gibi mekanik anlamına gelir. Manyetik olarak alignable bicelles 5 ° C-soğutma üzerine yeniden oluşturulur ve boyutlarıyla vezikül öncüleri dikte. ¹¹ işbu, mekanik imalat işlemleri ile DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} potansiyelini ele (molar oranı 4:1:1) veya DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5) referans sistemleri olarak. Süreç siparişlerimiz ile diğer Ln^{3 +} daha Tm^{3 +}çalışırken işler. Bu teknikler tarafından sunulan olanaklar geniş şekil 1 ' de vurgulanır ve kapsamlı bir şekilde başka bir yerde tartışıldı. ²³

figure-introduction-4
Şekil 1: olası üretim prosedürleri şematik bakış. Okudu manyetik alignable Ln^{3 +} şelat polymolecular derlemeler her iki DMPC/DMPE-DTPA/Tm-^{3 +} in oluşmaktadır (molar oranı 4:1:1) veya DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5). Kuru lipit filmin 7,4 pH değeri, bir 50 mM fosfat tampon ile sulu ve toplam lipid konsantrasyon 15 mM. Etkili bir nemlendirme lipit filmin de donma çözülme döngüsü (FT) veya Isıtma ve soğutma çevrimleri gerektirir (H & C). H & C döngüleri örnekleri son donma adım çözdürme sonra yeniden veya eğer onlar daha fazla ekstrüzyon kullanılmak üzere uzun bir süre içinde donmuş muhafaza örnekleri yeniden oluşturmak için gerekli. Aşağıdaki adımları Isabettini ve arktarafından kapsamlı bir şekilde ele alınmıştır. ²³ sonuna kadar alignable polymolecular derlemeler, lipid kompozisyona göre farklı derleme mimarileri teslim elde edilir. Bicelle boyutu ve manyetik alignability nanopore membran filtreleri ile ekstrüzyon (Ext) tarafından ayarlanabilir. Sunulan hizalama etkenler A_f 2D küçük açı nötron saçılma (San) desenleri 800, 400, 200 veya 100 kalıptan çekilmiş DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5) örneği üzerinden hesaplanan nm gözenekleri. Ölçümler daha ayrıntılı olarak burada kapsamında olmayan bicelle hizalama miktarının, tamamlayıcı bir anlamı vardır. ¹¹ ^, ¹⁶ izotropik saçılma için 0 -1 (paralel nötron saçılma veya manyetik alan yönü ile ilgili olarak bicelles dikey hizalamasını) arasında A_f değişen.Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Bicelles yapısını karakterizasyonu teknikleri geniş bir dizi tarafından kapsamlı bir şekilde okudu. ¹³ bicelles bir manyetik alana maruz hizalamasını NMR spektroskopisi veya küçük açı nötron saçılma (San) deneyler kullanarak sayısal. ⁵ ^, ¹⁰ ^, ¹¹ ^, ¹² ^, ¹³ ^, ¹⁶ ^, ¹⁷ ^, ¹⁸ ^, ¹⁹ ^, ²⁴ ^, ²⁵ ancak, shift ve Ln^{3 +} varlığında meydana gelen NMR doruklarına genişletmektedir yöntemine ciddi sınırlamalar vardır. ¹⁵ ^, ²⁶ ^, ²⁷ ^, ²⁸ rağmen SANS deneyler bu sınırlama, alternatif ve olmaz daha erişilebilir teknikleri çözüm derlemelerde manyetik olarak indüklenen hizalamasını rutin miktar için arzu edilir. Birefringence ölçümleri uygun ve nispeten basit bir alternatiftir. Mahsum NMR deneyleri için birefringence ölçümleri lipid düzenlemeler ve lipid aşamaları bilayer içinde meydana gelen değerli bilgileri ortaya koyuyor. Ayrıca, geometrik dönüştürmeleri sıcaklık gibi çevre koşulları değişen polymolecular derleme içinde meydana gelen izlenir. ¹¹ ^, ¹² ^, ¹³ ^, ¹⁶ manyetik olarak indüklenen birefringence Δn′ Fosfolipid sistemleri çeşitli çalışma kullanılmaya başlanmıştır. ¹³ ^, ²⁹ ^, ³⁰ birefringence ölçümleri bir manyetik alan içinde faz modülasyon tekniği dayalı bicelles yönünü bulmak için uygun bir yöntem var. ¹² ^, ¹⁶ ^, ¹⁸ ^, ²⁹ ^, ³¹ ^, ³² bicelles birefringence yüksek manyetik alanlarda en fazla 35 T ile soruşturma imkanı da M. Liebi vd tarafından sunuldu ¹³

Bir Anizotropik malzeme polarize ışığın girdiği zaman, olağan ve olağanüstü bir dalga kırılan. ¹¹ iki dalgalar farklı hızları var ve aşamasında retardasyon δ tarafından kaydırılır. Geriliği δ derecesini ölçülen ve bir birefringence sinyale dönüştürülür figure-introduction-5 malzeme kullanarak anizotropi derecesini ölçmek için

figure-introduction-6 (2)

Burada λ dalga boyu lazer ve d numune kalınlığı olmasıdır. Fosfolipitler optik Anizotropik ve onların optik eksen hidrokarbon kuyrukları paralel onların uzun moleküler eksenli denk geliyor. ¹¹ ^, ¹² fosfolipitler rastgele çözüm odaklı Eğer hiçbir retardasyon ölçülür. Fosfolipitler birbirine paralel hizalandığında retardasyon ölçülür. Manyetik olarak indüklenen birefringence figure-introduction-7 bir pozitif veya negatif işaret molekülleri yönünü bağlı olarak manyetik alanına; olabilir bkz: Şekil 2. Paralel x ekseni için hizalı fosfolipitler olumsuz bir neden olacaktır figure-introduction-8 , bu hizalanmış z ekseni boyunca olumlu bir sonuç ise figure-introduction-9 . Hiçbir birefringence Fosfolipid paralel y ekseni olarak hizalar gibi optik eksen ışık yayma yönü ile ne zaman denk görülmektedir.

figure-introduction-10
Resim 2: Uyum fosfolipitler ve karşılık gelen manyetik olarak indüklenen birefringence iz figure-introduction-11 . Ölçülen iz figure-introduction-12 manyetik alandaki Fosfolipid yönünü bağlıdır. Optik eksen molekülün kesik çizgilerle gösterilir. Işık 45 ° polarize ve y yönde yayar. Manyetik alan B z yönünde olur. Bu rakam M. Liebi değiştirildi. ¹¹ Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Bir izotropik kolloidal süspansiyon bicelles söz konusu olduğunda, bilayer fosfolipitler düzenlenmesi tarafından indüklenen yönlendirme, retardasyon δ sıfırlanması kaybolacaktır. Bicelles aynı zamanda bir zeka özrü δ polarize ışığın neden onların bilayers optik etkin fosfolipitler yönlendirmek amacıyla hizalamanız gerekir. Sonuç olarak, birefringence polymolecular derlemeler manyetik alignability ölçmek için önemli bir araçtır. Bicelles hizalanmış dikey manyetik alan olarak olumlu bir verecek figure-introduction-13 , bu paralel uyumlu bir negatif verecektir iken figure-introduction-14 . İşareti belgili tanımlık tertibat Hizalama'bağlıdır ve örneği ile kontrol edilebilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. üretim yordamı için DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 4:1:1) ve DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5) polymolecular derlemeler

Ön hazırlıklar
1. Yıkama yıkama tarafından tüm Züccaciye Mağazaları bir kez etanol ile stabilize kloroform (> % 99 kloroform) ve sıkıştırılmış hava ile kuru.
2. 2 ayrı 10 mg/mL stok çözümlerinde DMPC ve DMPE-DTPA etanol stabilize kloroform üretmek (> % 99 kloroform), bir 10 mM hisse senedi çözümde Choi-Oh etanol stabilize kloroform (> % 99 kloroform) ve TmCl₃ ' te 10 mM stok çözeltisi metanol.
3. 7.4 pH değeri, bir 50 mM fosfat tampon 0.121 g sodyum dihydrogen fosfat dihydrate ve 0.599 g susuz di-Sodyum hidrojen fosfat ultrasaf H₂o 100 ml karıştırarak hazırlayın
Kuru lipit filmin hazırlanması
1. Amphiphiles (DMPC, DMPE-DTPA ve isteğe bağlı olarak Choi-OH) ve Ln^{3 +} stok çözümleri gerekli miktarda ayrı 3 mL cam ek-bardak içinde 2.5 mL cam şırıngayla tartın.
  1. DMPC/DMPE-DTPA 3 mL örnek hacmi için / Tm3 + (molar oranı 4:1:1, toplam lipid konsantrasyon 15 mm), DMPC hisse senedi çözüm, 1.4731 g DMPE-DTPA hisse senedi çözüm ve TmCl₃ hisse senedi çözüm 0.7126 g 3.6435 g ağırlığında.
  2. DMPC hisse senedi çözüm 2.9148 g, 1.4731 g DMPE-DTPA hisse senedi çözüm, Choi-OH hisse senedi çözüm 1.0749 g ve 0.7126 g için bir 3 mL numune hacmi DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5, 15 mM toplam lipid konsantrasyonu) tartmak TmCl₃ hisse senedi çözüm.
    Dikkat: Kloroform ve metanol toksik ve oda sıcaklığında uçucu vardır. Bir duman başlık altında çalışması ve derhal kitle ölçümleri ile devam edin.
2. Ek-bardak içeriği 25 mL yuvarlak alt şişesi aktarmak. Yaklaşık 2.5 mL karşılık gelen solvent ile yuvarlak alt şişesi içine her ek-fincan yıkayın.
3. Solvent vakum altında 40 ° C'de döner Buharlaştırıcı kaldırmak 30 000 için ilk basınç ayarlı çözücü çoğunu kaldırılıncaya kadar Pa. Baskıyı azaltmak için 100 Pa ve kuru örnek dönüş için en az 2 h altında elde şişeye cam duvarları tek tip kuru lipid filmde.
4. Kuru lipit filmin bir havada lipid oksidasyonu önlemek ve rehydration önce dondurucuda örnek depolamak için argon akışı altında 1 dakika yerleştirin.
Hidrasyon kuru lipit filmin
1. Fosfat tampon 3 mL 15 mM toplam lipid konsantrasyon ulaşmak için yuvarlak alt şişe ekleyin.
2. Bu iyice (kaynar sıvı azot durur) dondurulmuş, daha sonra ısı kadar şişeye dönüş sıvı azot altında dalan tarafından bir donma-çözülme (FT) döngüsü yürütmek için balonun sürekli dönen bir su banyosunda 5 min için örnek koyarak 60 ° C'ye kadar geri eritme işlemi yardım. 30 uygulamak vortexing örnek ne zaman lipit filmin hidrasyon yardım etmek için sıvı dondurma her döngüsü önce s.
  Not: ikinci donma sonra çözülme döngüsü lipid film yok şişesi duvarlarında görünür olmalıdır.
3. 1.3.2 toplam beş kez tekrarlayın. Şişeye örnek sıcak olduğunda fosfat tampon gereksiz buharlaşma önlemek için bir kap ile kapatın. Örnek donmuş zaman protokol duraklatılmış.
4. İki Isıtma ve soğutma için devam (H & C) döngüsü son dondurucu adım dışarı geliyor örnek stabilize veya iki aya kadar donmuş tutmak için. Örnek 40-60 ° C için DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} ısı (molar oranı 4:1:1) veya DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5), sırasıyla, 1 ° C/dk. 5 ° C'de soğutma önce korumak örnek, maksimum ve minimum 5 dk sıcaklıklar döngüsü.
5. Şimdi, ya da harici bir manyetik alan (Adım 2) örnekte birefringence sinyal belirlemek veya daha fazla örnek bicelle boyutları ve manyetik alignability (Adım 1.4) terzi bükün.
  Not: DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 4:1:1) örnekleri esas olarak 70 ortalama hidrodinamik Çapı D_H ile bicelles, oluşan bir numara dağıtım tarafından ortaya nm elde edilen dinamik ışık saçılma (DL) ölçümleri 5 ° C'de üzerinden Bu örnekler aynı zamanda bir ortalama D_H 500 ile daha büyük polymolecular derlemeler içerir bir yoğunluk dağıtım tarafından ortaya nm. DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5) olduğu son derece polydisperse boyutu 700 ortalama D_H açığa tipik yoğunluk dağıtımları ile sayı dağıtımları daha küçük hakim bir nüfus ortaya iken nm, bicelles boyutu aralığı 200 nm. Daha ayrıntılı boyutu dağılımları ve cryo transmisyon elektron mikroskobu görüntüleri bu örneklerin Isabettini vd tarafından bildirilmiştir ²³
Ekstrüzyon polymolecular derlemeler.
1. Ekstruder şekil 3' te gösterilen topla. Eldiven ve cımbız silis tüpler işleme için koruma ile kullanın. Filtre kağıdı (5) (6) membran filtre en iyi bir yerleşim için izin vermek için arabellek birkaç damla ile ıslak. O-ring (7) üzerine koyduktan sonra hiçbir kıvrımlar kağıt olduğundan emin olun.
  Not: Ekstrüzyon işleminin membran filtreleri (6) 100, 200, 400 ve 800 gözenek çapı ile test edildi nm; bkz. Şekil 7.
2. İçin DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} 40 ° c su banyosu ayarla (molar oranı 4:1:1) numune veya 60 ° C extrudable veziküller oluşumu güvence altına almak DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5) örnekleri için.
3. Yüksek basınçlı PVC boru kullanarak bir basınçlı azot biberondan Ekstruder bağlanmak (> 4 MPa) serto adaptörler ile donatılmış ve sıvı malzeme membran ile yükselt. 1 MPa basınç genellikle 200 membran filtreleri (6) gözenek çapı ile ekstrüzyon için gerekli nm ve üstü. 1,5-2,5 MPa ile 100 gözenek çapı daha küçük membran filtreleri (6) için gereklidir nm.
  Not: membran filtre normal olmayan bir şekilde değiştirmek yüksek basınç (> 2.5 MPa) (Bu tıkanma ilk işareti) örnek yükseltme için gereklidir.
4. (10) kapağını açın ve 2 mL cam pipet kullanarak örnek ekleyin. Sonra (10) kapağını kapatın ve örnek çıkış tüp (2) tutarak basınç valfi (12) açın. Ekstrüzyon döngüsü tamamlandıktan sonra basınç valfi (12) kapatmak, delik ve sonraki döngüsü ile devam etmek.
  Not: örnek buharlaşma tarafından aşırı örnek kaybını önlemek için çok uzun süre sıcak ceketli gemi (8) ile temas halinde bırakmayın.

30-60 s Ekstruder içinde basınç valfi (12) açmadan önce equilibrate 3 mL örnek yeterli zamanı.

Şekil 3' te gösterilen belirli membran gözenek boyutu için 10 ekstrüzyon döngüsü devam edin. Çoğu bicelle sistemleri gözenek çapı 100 ile 200 ve başka bir 10 kat membran aracılığıyla gözenek çaplı membranlar yoluyla 10 kez çekilmiş nm, örnek karşılaştırılabilir güvence altına alınması.

Şimdi, birefringence sinyal bir dış manyetik alan (Adım 2) örnek olarak belirleyin.

figure-protocol-1
Şekil 3: bicelle ve vezikül hazırlıkları için kullanılan Laboratuvar Ekstruder. Ekstruder aşağıdan yukarıya monte edilir: (1) aparatı, (2) örnek alan bir 2.4 mm (iç çap) plastik çıkış tüp ve o-ring, (3) ve (4) büyük ve küçük teskin mesh (5) filtre kağıdı, (6) membran filtreleri, o-ring (7), (8) ceketli gemi ile toplama (9. ) üst kapak giriş ve basınç bağlantısı, (10) kapak, (11) kelebek vida, (12) basınç valfi ile. Birleştirilmiş ekstruder bir kroki ve sağ-el-tarafında gösterilir. Azot gazı (N₂) bir basınç teknesi tarafından sağlanır ve ceketli gemi (9) sıcaklık kontrolü için bir su banyosu bağlı. Örnek 10 ekstrüzyon döngüleri için herhangi bir verilen membran filtre gözenek çapı (mavi renkle gösterilen örnek yol) geçer. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

2. DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} birefringence ölçümleri (molar oranı 4:1:1) ve DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} (molar oranı 16:4:5:5) polymolecular derlemeler.

Oluşturmak ve birefringence ayarı olarak sunulan Şekil 4 bağlanmak ve ilgili elektronik elemanları için güç kaynağı. PEM, örnek ve ikinci polarize lazer yolundaki bu aşamada koymayın. Yansıtıcı yüzeyler, örneğin alüminyum ayna sahipleri, siyah kağıt kapsayan tarafından geri dağınık lazer ışık algılama kaçının.
Doğru akım yoğunluğu tarafından temsil edilir dedektörü, lazer yoğunlukta en üst düzeye çıkarmak için aynaları ayarlayın 4B rakamdüşük geçiş filtrede elde.
Dikkat: aynalar ayarlarken uygun göz koruma giymek ve bir lazer Emanet öğretim üyesi ile ilk kez lazerler manipüle danışın.
En üst düzeye çıkarmak için ilk çapraz doğrusal polarize (olay lazer ışını tutulan dik) açmak .

figure-protocol-4
Şekil 4: birefringence kurulum ve optik sinyalleri bağlantılarında şematik gösterimi. A) süper iletken bir elektromıknatıs 5,5 T manyetik alan sağlar. Diode lazer 635, ışıktan nm tarafından iki çapraz polarize polarize. Photoelastic modülatör PEM-90 50 KHz bir genlik ile bir₀ 2.405 rad çalışır ve arasında iki polarize yerleştirilir. Örnek mıknatıs PEM ve ikinci polarize arasında yer almaktadır. Aynalar sigara polarize ışık farklı elemanları aracılığıyla rehberlik ve nihayet bir fotoğraf Dedektör tarafından algılanır. Birinci ve ikinci harmonik figure-protocol-5 ve figure-protocol-6 polymolecular derlemeler şelat Ln^{3 +} manyetik alignability hakkında bilgi veren birefringence sinyal hesaplanması izin AC sinyal olarak izlenir. Örnek küvet sıcaklık kontrolü (mavi) için bir dış su banyosu bağlıdır. Örnek sıcaklığı ile bir sıcaklık probu (kırmızı) izlenir. B) fotoğraf Dedektör sinyal bir ikinci sipariş Sallen-Key düşük geçiş filtresi (24 V AC güç kaynağı) ±12 V DC güç kaynağı braded kablo (3) aracılığıyla kesme frekans 360 Hz ile içine beslenir. Alçak geçiren Filtre DC bileşen ayıklar figure-protocol-7 ve PC-arabirimi (4) BNC 50 Ω kablo aracılığıyla teslim eder. Fotoğraf Dedektör sinyal iki kilit-in amplifikatörler için teslim edilir (birinci ve ikinci harmonik ayıklamak figure-protocol-8 ve figure-protocol-9 ) BNC 50 Ω kablo (1) aracılığıyla & (2). Harmonik yoğunluklarda faz duyarlı algılama tarafından algılanır. Sonuç olarak, PEM sinyal (1f-PEM içine ilk kilit-in amplifikatör ve ikinci, 2f-çıkış çıkışını bağlı BNC ile 50 Ω kabloları) kilit-in amplifikatörler işaretimi başvuru olarak kullanılır. Çıkış sinyalleri PC arayüz birimi BNC 50 Ω kablolar aracılığıyla teslim edilir. Analog edinme birimleri cFP-AI-110 ve cFP-CB-1 izlemek için RS 232 kablo aracılığıyla bilgisayara transfer edilir sinyal digitalize. Türü K sıcaklık probu da nerede izlemek için RS 232 kablo aracılığıyla bilgisayara aktarmadan önce sinyal analog edinme birimleri cFP-CB-3 ve cFP-TC-120 digitalize PC arayüz birimi bağlıdır. C) B. anahtar öğeleri sunulan şematik Kur resmini karşılık gelen 1 ile 4 numaraları ile tanımlanır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

İkinci Çapraz doğrusal polarize olay lazer ışını, dikey şekil 4Aiçinde gösterildiği gibi yerleştirin. En aza indirmek ile ilgili ilk 90 ° açıyla ikinci polarize ayarlayarak.
İki çapraz lineer polarize ve dikey şekil 4Aiçinde gösterildiği gibi olay lazer ışını olarak 0 ° photoelastic modülatör (PEM) bir yer. PEM bir frekansa 50 kHz ve genlik A0 2.405 rad için şekil 5A' gösterildiği gibi ayarlayın. Bu DC bileşeni birefringence ve artırır bağımsız yapar .
Not: PEM optik eksen bir sabit tutmak için bir kaç derece ayarlı herhangi bir örnek ölçme önce havada.
1s için lazer ve sinyal dengelemek için elektronik ekipman açtıktan sonra bekleyin.

Auto-kilit-in amplifikatörler, aşamalı sabit kalır sonra sinyal durumu iyi.

Örnek yolu uzunluğu 10 mm ile bir sıcaklık kontrollü kuvars küvet yerleştirin ve başlangıçta 5 ° C'de küme bir dış su banyosu bağlayın

0,5 mm kalın türü K ısıl (sıcaklık probu) örnek örnek sıcaklık izlemek için doğrudan yerleştirin. Sonda bir beyaz kağıt lazer yolunda (sonra küvet) yerleştirerek ve yoklama ile neden gölgeler için bakarak lazer ışığı ile karışmaz doğrulayın.
Not: Su banyosu sıcaklık kaydı ve örnek sıcaklığı arasında 2-3 ° C fark yoktur.

Küvet mıknatıs, delik içinde şekil 4Aiçinde gösterildiği gibi yerleştirin. Lazer ışık yatay olarak örnek yayar, Sigara polarize aynalar tarafından bükülmesi ve fotoğraf Dedektör tarafından tespit.
Not: Lazer aşağı örneği üzerinden ve aynı yolu geri yukarı Faraday etkileri (yani aşağı gidiş geri ters yönde geldiğiniz zaman iptal edildiğinde manyetik alanı tarafından neden ışığın polarizasyon uçak rotasyon) için hesap için yönlendirilir.

Sabit hava akışı basınçlı hava oda sıcaklığında ve 10000 uygulama Pa küvet üzerinde yoğunlaşma su hücre duvarları, sinyalin yoğunluğunu azaltmak ve gürültü artışı önlemek için. 5 ° C'de ölçerken önem kazanır

Birinci ve ikinci harmonik tespit figure-protocol-13

kilit-in iki yükselteçler ile AC sinyal. Otomatik şekil 5B içinde gösterilen (2) düğmesine basarak kilit-in amplifikatörler faz ve hassasiyetini şekil 5B içinde (1) gösterildiği gibi ayarlayın. Sinyal aşırı yükleme önlemek için şekil 5B içinde (3) gösterildiği gibi amplifikatörler dörtten fazla kırmızı çubuklar olmadığından emin olun. Her iki kilit-in amplifikatörler Tesla_Magnet_Const_V092 programında için istihdam duyarlılık aşağı şekil 5C içinde (8) gösterildiği gibi dikkat edin. Program tamamlayıcı bilgiler sağlanmaktadır.

Manyetik alan 5,5 T kadar şekil 5C içinde (5) gösterildiği gibi Tesla_Magnet_Const_V092 programı aracılığıyla mıknatıs için geçerli sağlayarak rampa.

Birefringence elde figure-protocol-15

denklem 2, nerede geriliği ile hesaplanır kullanarak
figure-protocol-16

(3)
nerede figure-protocol-17

ile birinci türden Bessel fonksiyonları vardır figure-protocol-19

. ¹¹ ^, ¹³ ^, ¹⁸ ^, ³³ ^, ³⁴ şekil 5C içinde (4) gösterildiği gibi Tesla_Magnet_Const_V092, programda retardasyon arsa.
Not: program tarafından sağlanan retardasyon iki kilit-in amplifikatörler aynı hassasiyeti çalışmıyorsanız birefringence sinyal hesaplamak için kullanılmamalıdır (bkz. Adım 2.12). Günlüğe kaydedilen harmonik yoğunluklarını figure-protocol-21

doğru boyutlarını almak için kilitli amplifikatörler duyarlılık tarafından çarpılan gerek. Ayrıca, bir mıknatıs alanı altında ölçülen birefringence sinyal 0 T. elde edilen ortalama birefringence sinyal çıkararak normalleştirilmiş gerekir

Örnek'in birefringence sinyal sabit ya da şekil 4' te gösterilen küvet bağlı su banyosu sıcaklığını düzenleyen tarafından sıcaklık (1 ° C/dak) değiştirme izlemek.

Bir dosya adı (9) sağlayan ve "START kütük" düğme (10) tuşuna basarak deneysel veriler şekil 5C (8), deneysel açıklama doldurarak oturum.

figure-protocol-23
Şekil 5: programın ekran görüntüleri ve istihdam ayarlar illüstrasyonlar. A) PEM ayarları: retardasyon 2.405 rad, dalga boyu 635 nm, frekansı 50 Hz. beyaz daireler belirtmek aktif olması için hangi ayarları (USR kullanıcı tanımlı retardasyon, LOC = çalışma yerel modu =). B) kilit amplifikatör ayarları. Hassasiyet (1) 2.11. adımda gerekli her ölçüyü önce seçilmesi gerekiyor. Bir sinyal aşırı yükleme önlemek için ekranda (3) dörtten fazla kırmızı çubuklar olmamalıdır. Aşırı yüklenme (1) led kırmızı açar, bir ölçüm imkansız hale oluşur. Her ölçüm önce otomatik faz düğmesi (2) tuşuna basın. C) ekran programı ek bilgiler Tesla_Magnet_Const_V092 . Program denetim manyetik alan ve kayıt tüm sinyal bir fonksiyonu olarak çıktılar sağlar. Manyetik alan şiddeti ve numune sıcaklığı (1) çizilir. Birinci ve ikinci harmonik figure-protocol-24 ve figure-protocol-25 göre gibi iki kilit amplifikatörler ölçülen AC sinyal (2) çizilir. Doğru akım yoğunluğu figure-protocol-26 (3) çizilir. Geriliği 2,13 adımda anlatıldığı gibi hesaplanır ve (4) çizilen. Manyetik alan şiddeti (5) ayarlanır. Tip K ısıl tarafından kaydedilen sıcaklık doğrudan ölçümü (6 adet) sunulan ve çıkış sinyalleri ( figure-protocol-27 ve figure-protocol-28 ) (7). Ek örnek bilgiler (8) istihdam duyarlılığını amplifikatörler, örnek adı, vb gibi eklenebilir. Verileri günlüğe ve (9) sağlanan bir .txt dosyası ihraç. Başlatma ve durdurma "START kütük" düğme (10) ile veri toplama. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bir sigara kalıptan çekilmiş DMPC/DMPE-DTPA/Tm^{3 +} birefringence sinyal (molar oranı 4:1:1) örnek bir Isıtma ve soğutma döngüsü 5 ila 40 ° C ve 1 ° C/dk (şekil 6) oranında geri sırasında 5,5 T manyetik alan altında izlenir. Birefringence sonuçları 5 ° c değeri yüksek manyetik hizalamaları 1.5 x 10^-5, iki kat daha güçlü bildirilen ekstrüzyon sistemleri gelince doğruladı. ⁶ ^, ⁷

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Derlemeler olduğunu Isabettini vd. fosfolipitler şelat manyetik olarak son derece duyarlı Ln^{3 +}oluşturmak için yöntemleri değerlendirmek için nasıl birefringence ölçümleri SANS ile birlikte kullanılan ayrıntılı hesabını deneyler ²³ önerilen imalat protokolleri de daha uzun DPPC ve DPPE-DTPA fosfolipitler oluşan derlemeler için veya onların bilayer kimyasal mühendislik steroid türevleri içerenler için geçerlidir. ¹¹ ^, ¹²

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Yazarlar SMhardBi (proje numarası 200021_150088/1) finansmanı için İsviçre Ulusal Bilim Vakfı kabul etmiş oluyorsunuz. İsviçre spallation nötron kaynağı Hoşlandığımı, Paul Scherrer Instute, Villigen, İsviçre SANS deneyler yapıldı. Yazarlar sıcak Dr. Joachim Kohlbrecher SANS deneyleri ile onun rehberlik için teşekkür ederiz. Birefringence ölçüm Kur yüksek manyetik alanlar'ın altında yüksek-alan manyetik Laboratuvarı HFML, Nijmegen, Hollanda varolan kurulumundan ilham kaynağı oldu. Bruno Pfister birefringence Kur elektronik gelişmekte olan onun yardım için Jan Corsano ve Daniel iyi ve facile hizalama lazer izin çerçeveler oluşturmak için Kiechl ve Dr. Bernhard Koller devam eden teknik destek için teşekkür ederiz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
1,2-dimiristoil-sn-glisero-3-fosfokolin (DMPC)	Avanti Polar Lipidler	850345P	>99%
1,2-dimyristoyl-sn-glisero-3-fosfo-etanolamin-dietilen triaminpentaasetat asit heksamonyum tuzu (DMPE-DTPA)	Avanti Polar Lipidler	790535P	>99%
Thulium(III) klorür	Sigma-Aldrich	439649	susuz, toz, %99,9 eser metal bazlı
Disprosyum(III) klorür	Sigma-Aldrich	325546	susuz, toz, %99,9 eser metal bazlı
İterbiyum(III) klorür	Sigma-Aldrich	439614	susuz, toz, %99,9 eser metal bazlı
Kloroform	Sigma-Aldrich	319988	stabilizatör, ACS reaktifi vb. olarak etanol içerir; % 99.8
Metanol	Sigma-Aldrich	34860	& ge; %99,9
Kolesterol	Amresco	433	Ultra saf sınıf
D2O	ARMAR kimyasalları	1410	99,8 atom %D
Ultra saf su	Millipore		Synergy pak2 (SYPK0SIX2), Millipack GP (MPGP02001)
elektronik pH metre	Metrohm	17440010
Whatmann Nuclepore 25 mm 100nm membran filtre	VWR	515-2028
Whatmann Nuclepore 25 mm 200nm membran filtre	VWR	515-2029
Whatmann Nuclepore 25 mm 400nm membran filtre	VWR	515-2030
Whatmann Nuclepore 25 mm 800nm membran filtre	VWR	515-2032
Whatmann Filtre kağıdı	VWR	230600
25 ml yuvarlak tabanlı şişe	VWR	201-1352	14/23 NS
3 ml cam çıtçıtlı bardak	VWR	548-0554	ND18, 18x30mm
2.5 ml cam şırınga	Hamilton
Sodyum dihidrojen fosfat dihidrat	Merk	1.06342	Fosfat tamponu yapmak için kullanılan tuz
di-Sodyum hidrojen fosfat	Merk	1.06586	Fosfat tamponu yapmak için kullanılan tuz
Sıvı Azot	Karbagas-
Basınçlı Azot gazı	Carbagas-200		bar şişe
Lipid Ekstruder 10 ml	Lipex-Termovaril		ile tam donanımlı
Yüksek basınçlı PVC tüp	GR NETUM-4		MPa'dan fazla
dayanmalıdır Serto adaptörleri	Sertot-Nitril
eldivenler	VWR-2
ml cam pipetler	VWR	612-1702	230 mm uzunluğunda
Diyot Lazer	Newport	LPM635-25C
DSP Çift Fazlı Kilitli Amplifikatör	SRS	SR830
Fotodiyot Dedektörü	Silonex Inc.	SLSD-71N5	5mm2, Silikon, foto iletken
5,5 T Kriyojenik Manyetik	Kriyojenik/Oerlikon		AG-12 bar O soğutmalı. RW4000/6000 kompresör, RGD 5/100 TA kriyo kafası
İkinci dereceden alçak geçiren filtre	ev	yapımı-Doğrusal	güç kaynağı 24V DC, ikinci sıra, Sallen Anahtarı, kesme frekansı 360 Hz, +/- 12V, maksimum 10 mA
Fotoelastik modülatör	Hinds aletleri	PEM-90
Glan-Thompson Kalsit Polarizör	Newport	10GT04	25,4 mm çap
Kuvars numune küveti	Hellma	165-10-40	sıcaklık kontrollü hücre, 0,8 ml, 10 mm yol uzunluğu
Sıcaklık probu	Termokontrol Tipi		K, 0,5 mm çap, Thermocoax
Polarize olmayan aynalar	Newport	50326-1002	25,4 mm
RS 232 kablolar	Ulusal Aletler	189284-02	Kompakt FieldPoint Kontrolörleri BNC 50 & Omega'nın önündeki RS-232 Bağlantı Noktasına Bağlantı için
; Kablo ve konektörler	Ulusal Aletler	763389-01
cFP-AI-110	Ulusal Aletler	777318-110	için 8 Kanallı Analog Voltaj ve Akım
	Giriş Modülü Ulusal Aletler	778618-01	Kompakt FieldPoint G/Ç
cFP-CB-3	Ulusal Cihazlara	778618-03	Termokuplları cFP-TC-120 Modülüne Bağlamak için Entegre İzotermal Konnektör Bloğu
cFP-TC-120	Ulusal Aletler	777318-120	Kompakt FieldPoint için 8 Kanallı Termokupl Giriş Modülü
cFP-1804	Ulusal Aletler	779490-01	NI Compact FieldPoint
LabView 2010	Arabirim Ulusal	Aletler-Endüstriyel
güç tedarik	Traco Power	TCL 060-124	100-240V AC
Su banyosu	Julabo	FP40-HE	soğutmalı/Isıtmalı Sirkülatör

Kompakt FieldPoint cFP-CB-1 Kablolama için Entegre Konnektör Bloğu için Ethernet/Seri

Kaynaklar

Sanders, C. R., Hare, B. J., Howard, K. P., Prestegard, J. H. Magnetically-oriented phospholipid micelles as a tool for the study of membrane-associated molecules. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 26, 421-444 (1994).
Glover, K. J., et al. Structural evaluation of phospholipid bicelles for solution-state studies of membrane-associated biomolecules. Biophys. J. 81 (4), 2163-2171 (2001).
Katsaras, J. H. T. A., Pencer, J., Nieh, M. -P. "Bicellar" lipid mixtures as used in biochemical and biophysical studies. Naturwissenschaften. 92 (8), 355-366 (2005).
Sanders, C. R., Prosser, R. S. Bicelles: a model membrane system for all seasons? Structure. 6 (10), 1227-1234 (1998).
Dürr, U. H. N., Soong, R., Ramamoorthy, A. When detergent meets bilayer: birth and coming of age of lipid bicelles. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 69, 1-22 (2013).
Dürr, U. H. N., Gildenberg, M., Ramamoorthy, A. The magic of bicelles lights up membrane protein structure. Chem. Rev. 112, 6054-6074 (2012).
Ujwal, R., Abramson, J. High-throughput crystallization of membrane proteins using the lepidic bicelle method. J. Vis. Exp. (59), (2012).
Barbosa-Barros, L., et al. Bicelles: lipid nanostructured platforms with potential dermal applications. Small. 6, 807-818 (2012).
Lin, L., et al. Hybrid bicelles as a pH-sensitive nanocarrier for hydrophobic drug delivery. RSC Adv. 6, 79811-79821 (2016).
Beck, P., et al. Novel type of bicellar disks from a mixture of DMPC and DMPE-DTPA with complexed lanthanides. Langmuir. 26 (8), 5382-5387 (2010).
Liebi, M. Tailored phospholipid bicelles to generate magnetically switchable material. , ETH Zürich. Switzerland. PhD Thesis n° 21048, ISBN 978-3-905609-55-4 (2013).
Liebi, M., et al. Magnetically enhanced bicelles delivering switchable anisotropy in optical gels. ACS. Appl. Mater. Interfaces. 6 (2), 1100-1105 (2014).
Liebi, M., et al. Alignment of bicelles studied with high-field magnetic birefringence and small-angle neutron scattering measurements. Langmuir. 29, 3467-3473 (2013).
Prosser, R. S., Hwang, J. S., Vold, R. R. Magnetically aligned phospholipid bilayers with positive ordering: a new model membrane system. Biophys J. 74, 2405-2418 (1998).
Prosser, R. S., Bryant, H., Bryant, R. G., Vold, R. R. Lanthanide chelates as bilayer alignment tools in NMR studies of membrane-associated peptides. J. Magn. Reson. 141, 256-260 (1999).
Liebi, M., Kohlbrecher, J., Ishikawa, T., Fischer, P., Walde, P., Windhab, E. J. Cholesterol increases the magnetic aligning of bicellar disks from an aqueous mixture of DMPC and DMPE-DTPA with complexed thulium ions. Langmuir. 28 (29), 10905-10915 (2012).
Liebi, M., et al. Cholesterol-diethylenetriaminepentaacetate complexed with thulium ions integrated into bicelles to increase their magnetic alignability. J. Phys. Chem. B. 117 (47), 14743-14748 (2013).
Isabettini, S., et al. Tailoring bicelle morphology and thermal stability with lanthanide-chelating cholesterol conjugates. Langmuir. 32, 9005-9014 (2016).
Isabettini, S., et al. Mastering the magnetic susceptibility of magnetically responsive bicelles with 3β-Amino-5-Cholestene and complexed lanthanide ions. Phys. Chem. Chem. Phys. 19, 10820-10824 (2017).
De Angelis, A. A., Opella, S. J. Bicelle samples for solid-state NMR of membrane proteins. Nat. Protoc. 2 (10), 2332-2338 (2007).
Son, W. S., et al. "Q-Titration" of long-chain and short-chain lipids differentiates between structured and mobile residues of membrane proteins studied in bicelles by solution NMR spectroscopy. J. Magn. Reson. 214, 111-118 (2012).
Avanti Polar Lipids Inc. Bicelle Preparation. , Available from: https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/bicelle-preparation (2017).
Isabettini, S., et al. Methods for Generating Highly Magnetically Responsive Lanthanide-Chelating Phospholipid Polymolecular Assemblies. Langmuir. 33, 6363-6371 (2017).
Nieh, M. -P., Glinka, C. J., Krueger, S., Prosser, R. S., Katsaras, J. SANS study on the effect of lanthanide ions and charged lipids on the morphology of phospholipid mixtures. Biophysical Journal. 82 (5), 2487-2498 (2002).
Watts, A., Spooner, P. J. R. Phospholipid phase transitions as revealed by NMR. Chem. Phys. Lip. 57, 195-211 (1991).
Bleaney, B. Nuclear magnetic-resonance shifts in solution due to lanthanide ions. J. Magn. Reson. 8, 91-100 (1972).
Prosser, R. S., Volkov, V. B., Shiyanovskaya, I. V. Solid-state NMR studies of magnetically aligned phospholipid membranes: taming lanthanides for membrane protein studies. Biochem. Cell Biol. 76, 443-451 (1998).
Prosser, R. S., Volkov, V. B., Shiyanovskaya, I. V. Novel chelate-induced magnetic alignment of biological membranes. Biophys. J. 75, 2163-2169 (1998).
Shklyarevskiy, I. O., et al. Magnetic alignment of self-assembled anthracene organogel fibers. Langmuir. 21, 2108-2112 (2005).
Christianen, P. C. M., Shklyarevskiy, I. O., Boamfa, M. I., Maan, J. C. Alignment of molecular materials in high magnetic fields. Physica B: Condens. Matter. 346, 255-261 (2004).
Maret, G., Dransfeld, K. Biomolecules and polymers in high steady magnetic fields. Top. App. Phys. 57, 143-204 (1985).
Gielen, J. C., Shklyarevskiy, I. O., Schenning, A. P. H. J., Christianen, P. C. M., Maan, J. C. Using magnetic birefringence to determine the molecular arrangement of supramolecular nanostructures. Sci. Tech. Adv. Mater. 10 (1), 014601(2009).
Shklyarevskiy, I. O. Deformation and ordering of molecular assemblies in high magnetic fields. , Nijmegen University. The Netherlands. PhD Thesis, ISBN 90-9018956-4 (2005).
Fuller, G. G. Optical rheometry of complex fluids. , Oxford University Press. NY. (1995).
Walde, P., Cosentino, K., Engel, H., Stano, P. Giant vesicles: preparations and applications. ChemBioChem. 11, 848-865 (2010).
Avanti Polar Lipids Inc. Liposome Preparation. , Available from: https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation (2017).
Avanti Polar Lipids Inc. Preparing Large, Unilamellar Vesicles by Extrusion (LUVET). , Available from: https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/luvet (2017).
Isabettini, S., et al. Molecular engineering of lanthanide ion chelating phospholipids generating assemblies with a switched magnetic susceptibility. Phys. Chem. Chem. Phys. 19, 20991-21002 (2017).
Battaglia, M. R., Ritchie, G. L. D. Molecular magnetic anisotropies from the Cotton-Mouton effect. J. Chem. Soc., Faraday Trans. 2. 73 (2), 209-221 (1977).
Sprunt, S., Nounesis, G., Litster, J. D., Ratna, B., Shashidhar, R. High-field magnetic birefringence study of the phase behavior of concentrated solutions of phospholipid tubules. Phys. Rev. E. 48 (1), 328-339 (1993).
Zhao, J., et al. Continuous paranematic ordering of rigid and semiflexible amyloid-Fe3O4 hybrid fibrils in an external magnetic field. Biomacromolecules. 17 (8), 2555-2561 (2016).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Manyetik D zenekler Lipid Ekstr zyonu DMPC DMPE DTPA Kolesterol Katk l Biseller Manyetik Alan Hizalamas Vezik l Prek rs r Olu umu S cakl k Kontroll D zenleme Polimolek ler D zenleme Tasar m

İmalat işlemleri ve Birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı Lanthanide iyon şelat Fosfolipid Derlemeler tasarlama