Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kapalı göğüs domuz miyokard infarktüsü manken standardizasyon doku ve kan örnekleme prosedürleri tarafından geliştirilmesi

11K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/56856

⸱

12 Mart 2018

 ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Burada biz miyokardiyal iskemi/reperfüzyon hasarı Patofizyoloji anlamada translasyonel değerini artırmak için örnekleme prosedürleri akut miyokard infarktüsü, kurulan bir domuz modelinin standart hale getirmek için bir protokol göstermek ve yeni ilaç adaylarının sınamak için.

Özet

Miyokardiyal iskemi reperfüzyon (ı / R) yaralanma nekrotik alan neredeyse yarısı akut miyokard infarktüsü sonrası katkıda bulunur. Bugüne kadar miyokardiyal önlemek veya azaltmak için onaylı bir ilaç yok ben / R yaralanma. Çalışma ve miyokardiyal patofizyolojik mekanizmaları anlama / R yaralanma başarılı tedavileri geliştirmek esastır. Büyük hayvan deneyleri translasyonel yöntemleri konusunda önemli bir adım vardır. Akut Miyokard İnfarktüsünde domuz modeli kurulan ve kendimizi ve diğerleri tarafından açıklanan. Daha fazla değer modelinin örnekleme teknikleri kullanmak gelecekteki deneyler için ayrıntılı olarak odaklanarak geliştirmek amaçlanmıştır. Ayrıca, biz kesin sonuçları kalitesini etkileyebilir küçük ama önemli adımları vurgulamak. Miyokardiyal klinik durumu taklit etmek için ben / R yaralanma, Perkütan koroner girişim (PCI) kateter sol ön inen koroner arter (DOSTUM) imzalat domuz eklenmiş. Bu modeli taklit eder akut miyokard infarktüsü ve PCI tedavi doğru yönü alanını belirleme imkanı ile insanlarda risk nekrotik yanı sıra ° ° °- ve uygun iskemik doku. Burada model bicyclic peptid inhibitörü olan FXIIa etkisini araştırmak için kullanıldı. Model uzun reperfüzyon süreleri akut miyokard infarktüsü sonrası etkilerini incelemek izin vermek için de değiştirilebilir.

Giriş

İskemik kalp hastalığı, özellikle akut miyokard infarktüsü (mı), gelişmiş ülkelerde 1ölüm ana nedenidir. Bugün, MI standart tedavisinde Perkütan koroner girişim (PCI), balon kateter tedavi 's. Yaşam kalitesini etkileyen önemli faktörlerden biri ve prognoz akut MI PCI tedavi sonra hastaların infarktüsü boyutudur. Boyutu azaltma hastanın hayatta kalma ve prognoz 2üzerinde büyük bir etkisi olabilir. Miyokardiyal iskemi/reperfüzyon (ı / R) yaralanma var enfarkt boyutu üzerinde önemli bir etkiye kardiyovasküler araştırma ana amaçlarından biri miyokardiyal azaltmak veya önlemek için bu nedenle ben / R yaralanma 3. Ben tam mekanizmaları / R yaralanma altında hala 4soruşturma. Plazma cascades ve endotel hücre aktivasyonu vardır ben işaretlerinden / R yaralanma 5. Koagülasyon sisteminin harekete geçirmek açıkça dahil 6,7' dir. Son zamanlarda, bir FXII FXII, rol bir erken ters yönde peptid koagülasyon cascade kişi faz aktivasyonu dahil olarak gösterilmiştir fare modeli beyin vurmak / R yaralanma 8. Bu sonuçlar bir domuz modeli doğrulama klinik Çeviri içine önemli bir adımdır. Bu nedenle, bir roman bicyclic (80 kDa proteaz) FXIIa inhibitörü miyokardiyal bağlamında test ediyoruz ben / R yaralanma bir pilot çalışma içinde.

Akut MI ve PCI tedavilerinin klinik durumu taklit, hayvan modelleri bizim anlama miyokardiyal Patofizyoloji ben geliştirmek için gerekli / R yaralanma ve roman tedavi seçenekleri test etmek için. Domuzlar temsil etmek için iyi bir hayvan model klinik miyokardiyal ben / R yaralanma. Çünkü kalpleri çok anatomi ve koroner kan dolaşımı ile ilgili olarak insan kalpleri benzer, ancak onlar da miyokardiyal iskemi ve reperfüzyon 9,10benzer patofizyolojik yanıtları göstermek değil. Sıçanlar ve fareler gibi diğer modeller değil bu kriterleri yerine getirmek ve köpekler, örneğin, pek çok daha fazla teminat koroner damarları ile karşılaştırıldığında insanlar var ise insan kalpleri 11,12' ye, karşılaştırıldığında önemli farkları göster 13.

Domuz akut miyokard infarktüsü modeli yaygın kardiyovasküler araştırma iskemik kalp hastalığı miyokard dahil olmak üzere araştırma için kullanılmıştır ben / R yaralanma 14,15,16,17. İkinci hangi en aza indirilmesi nedeniyle inflamatuar reaksiyon yöntemdir için ilgili bir enflamatuar, veya koşul aç-göğüs cerrahisinde kullanılan Torakotomi esastır. Klinik bir C-kol anjiyografi ayarı kullanarak kapalı göğüs modeli bu sorunun üstesinden gelir. Ayrıca, en önemli noktalarından biri enfarktüsü boyutu (nekrotik iskemik doku, NIT)-ebilmek bizim iletişim kuralı iskemik (alan) risk, AAR üst ve sol ventrikül (alan değil risk ANR) iskemik olmayan alanları arasında doğru bir ayrım sağlar olduğunu doğru bir şekilde kararlı olmak. Amacımız bu kağıt için açıkça bir domuz miyokardiyal tekrarlanabilir bir metodoloji tanımlamaktır ben / R yaralanma modeli, özellikle ben moleküler mekanizmaları daha kesin bir analiz için izin verir miyokard doku örnekleme ile ilgili olarak / R yaralanma ve bir yeni ilaç tedavileri etkileri daha net görüntü.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. hayvanlar:

Bütün hayvanlar İsviçre Ulusal yasa kurallarına göre tedavi edildi. Çalışma Bern Kanton yerel hayvan deney Komitesi tarafından kabul edildi (izni yok. «««OLMAK) 25/16.

Büyük beyaz domuzlar her iki cinsiyette kullanın (~ 30 ± 5 kg). Hayvanlar körü körüne iki gruba ayırın bir grup bicyclic (80 kDa proteaz) inhibitörü olan FXIIa veya tedavi seçimi ve diğer etkin olmayan bir denetimi alma.

2. cerrahi işlem (şekil 1)

  1. Anestezi ve hayvan hazırlanması:
    1. Hayvanlar için 12 h deneme başlamadan önce hızlı.
    2. 20 mg/kg ketamin ve 2 mg/kg Xylazine 10 mL şırınga kullanarak boyun, içine bir kas içi enjeksiyon yoluyla hayvanla önceden ilaçlamak. Hayvan ağırlık ve seks kaydedin.
    3. Anestezi 0.5 mg/kg Midazolam ve 0,05 mg/kg Atropin kulak çevresi damar içine enjekte edilerek ikna etmek. Tüp endotrakeal tüp hayvanla takacağım.
    4. Anestezi solunum kullanarak mekanik havalandırma tarafından korumak (O2/air 1:3, Sevorane % 1,5), 7-8 mm hava yolu tüp ve bir filtre. % 35 ve 6-10 mL/kg tidal hacim için ilham oksijen (FiO2) kısmını ayarlayın.
    5. Anestezi derinliği kadar yeterli yokluğunda burun pinching motor veya otonomik yanıt-e doğru değerlendirilir. Palpebral refleksleri ve çene sesi sürekli de rahat çene sesi ve palpebral Reflekslerin yokluğu hedefleme takip. Çekirdek sıcaklığı sürekli takip ve bakım normothermia (38-38,5 ° C) pasif ısınma (yalıtkan battaniye ve sıcak şişe) sağlamış.
    6. Teşrih ücretsiz, daha önce Koudstaal ve onun meslektaşları adımları 3-1 3 318, Karotid arter her iki tarafından açıklanan ve 7F kılıf ile cannulate. Venöz kan örnekleme için 7F kılıf ile sol juguler ven cannulate.
    7. 250 µg fentanil analjezik 250 µg/h tarafından bir infüzyon pompası ile sürekli bir intravenöz infüzyon takip Merkezi Venöz hattı üzerinden bir bolus doz yönetmek. Vücut ısısı, kalp hızı ve ritim bir 3-kurşun Elektrokardiyogram (EKG), Bütün deneyin sırasında Arteryel ve merkezi Venöz basınç ile izleyin.
    8. Standart kan toplama borular kullanarak, aşağıdaki temel kan örnekleri Venöz satırından çekilme: 5 mL citrated plazma ve 2.9 mL EDTA plazma ilgili tüpler içine. Hemen, 2.000 x g 4 ° C'de 15 dakika santrifüj kapasitesi 2.9 mL kan serumu tüp içine almak ve yukarıda açıklandığı gibi centrifuging önce oda sıcaklığında 30 dakika koagüle sağlar.
    9. Plazma veya serum 500 µL içine aliquot 200 µL tüpler ve tüm örneklerini daha fazla çözümleme için-80 ° C'de depolayın.
    10. 0.5 mL kan BGA üretici yönergelerine göre BGA makinesi kullanarak ölçmek için özel kan gaz analizi (BGA) şırıngalar kullanılarak Arteryel satırından geri alıyorum.
    11. 0.5 mL kan Venöz satırından bir standart 2 mL şırınga kullanarak geri çekilin ve hemen 30 G iğne kullanarak hareket kartuşun aktarın. Üreticinin yönergelerine göre Pıhtılaşma zamanı ölçmek için hareket makine dolu kartuş takın. Zaman puan için bkz: Şekil 2 .
    12. 5000 IU unfractionated heparin 2 mL şırınga kullanarak Venöz hattına yönetmek ve 20 dk için MI deney başlamadan önce stabilize etmek hayvan izin.
    13. Monitör her 30-45 dk 2.1.11 içinde belirtildiği gibi DAVRAN. Hareket < 180 s ise 2500 unfractionated IU heparin intravenöz enjekte et.
  2. Miyokard İnfarktüsü deney
    1. Standart bir C atış floroskop donatımı kullanın (koroner anjiyografi program, açı 0°, 12 çerçevelemek-de ikinci, ~ 70 kV) - ya da alternatif olarak bir adanmış anjiyografi sistemi - koroner girişim gerçekleştirmek için.
    2. Floroskopik kılavuz daha önce yerleştirilmiş kılıf sol Karotis arter yolu ile bir basınç kateter (5F, 120 cm) eklemek için kullanın. Sol ventrikül ilerlemek. Basınç kateter sol ventrikül basıncı kaydetmek için bir satın alma sisteme bağlayın. Koordinat belirleme sistemi sürekli olarak hesaplamak ve kalp hızı, geliştirilen kaydetmek gerekiyor basınç, dP/dt maksimum (sol ventrikül contractility) ve dP/dt en az (sol ventrikül gevşeme) tüm deney sırasında. 10 dk için temel değerlerini kaydetmek.
    3. 6F (100 cm, EB3.75) eklemek yol gösterici kateter yolu ile sağ Karotis arter içine daha önce yerleştirilmiş kılıf. X-ışını rehberliği altında sol koroner arter ile sol ön inen koroner arter (evlat) ulaşmak için ilerlemek. Kontrast bir temel koroner anjiyografi gerçekleştirmek için yol gösterici kateter yolu ile 20 mL şırınga kullanarak orta enjekte.
      Not: Enjeksiyon kontrast orta el ile basınç tarafından yapıldı ama bir özel güç enjektör sistemi de kullanılabilir.
    4. Perkütan koroner girişim (PCI) kateter uygun boyutunu seçmek için x-ışını monitörde delikanlı boyutunu değerlendirmek. 15-25 mm ve çapları arasında 2 ve 3.5 mm delikanlı boyutuna bağlı olarak uzunluğu ile PCI Balon kullan. PCI kateter ve koroner embolisinin (F 014/J, 175 cm) bir araya getirin. PCI kateter ile kontrast orta önceden doldurulmuş enflasyon aygıt bağlantı kurun.
      Not: Delikanlı çapı bir cetvel kullanılarak kalibre edilmiş monitöre doğrudan ölçülebilir ve PCI balon boyutunu daha sonra buna göre seçilir.
    5. Monte sistemi 2.2.4 yol gösterici kateter Lümen yerleştirin. DELİKANLI ikinci çapraz şube ulaşıncaya kadar embolisinin delikanlı ilerlemek.
    6. DELİKANLI orta hakkında ulaşana kadar PCI kateter ilerlemek için floroskopik kılavuz kullanın. Genellikle sol ventrikül (LV) AAR benzer oranlarda için bazen ilk çapraz şube (şekil 3) sonra ikinci sonra delikanlı engelleme site TRANSPOSE anatomisi göre seçin.
      Not: Çapraz dalları uzunluğu ve böylece kan yolu ile ilgili şube tarafından verilen doku bölgesinin engelleme site seçimi bağlıdır. Uzun durumunda, çatallı ilk çapraz şube engelleme sitesi bundan sonra olacak. Daha kısa bir ilk çapraz şube durumunda belgili tanımlık kütük parçası ikinci diyagonal sonra yapılır.
    7. Embolisinin kaldırmak ve daha sonra 7-10 bar PCI kateter balon şişirmek ve yavaş yavaş 1 h. artırmak için 50-%60 15 ila 40 dk iskemi arasında FiO2 miyokardiyal iskemi neden için enflasyon aygıta basıncı artırmak. Deprem ses 6-10 mL/kg tutun.
      Not: Bu yordam extrasystoles oluşumunu azaltmak ve Ventriküler fibrilasyon sıklığını azaltmak.
    8. Kaydı kontrast orta sadece iskemi başlattıktan sonra yerde anjiyogram PCI kateter balon için yol gösterici kateter aracılığıyla enjekte ederken bir 5-10 s video dizisi; iskemi PCI kateter balon distal delikanlı tam tıkanıklığı doğrulamak için 10 dakika sonra tekrar.
    9. Yakından hemen tespit ve tedavi (2.2.10) hayvan izlemek kardiyak aritmiler. Extrasystoles genellikle oluşur ve frekans artışı (> 3 min başına) 20 ve 40 dakika sonra indüksiyon miyokardiyal iskemi arasında. Böyle bir durumla karşılaşırsanız, nazikçe yanak hemen altında her iki tarafta boyun masaj. Çoğu durumda bu normal bir kalp atışı, muhtemelen ortak Karotid arter üzerinde bulunan Vagus sinir baroreceptors uyarılması yeniden kurmak için yeterli olacaktır.
    10. Kardiyak aritmiler Ventriküler fibrilasyon ilerleme, bir, bifazik cihazı bir sinüs ritmi yeniden oluşturmak için kullanın. 5-10 göğüs sıkıştırma hemen sipariş TRANSPOSE oksijenli kan ile doldurun ve sonra 150 J (için 30 kg hayvan) ile şok şok uygulamadan önce defibrilatör pedleri kullanarak uygulayın.
    11. Tekrarlamak gerekirse ve artış enerji 175 J 3rd şok sonra için. Daha yüksek enerji ayarları ağır hayvanlar için kullanın.
    12. İskemi süre sonundan önce beş dakika 2.1.8-2.1.13 içinde belirtilen kan örnekleme yineleyin. Test madde enjekte (her iki bicyclic FXIIa engelleyici veya 4 mg/kg kontrol, bu körü körüne bunu) intravenöz aracılığıyla ana Venöz damar ve floş 20 mL serum fizyolojik içeren satırı.
    13. Bir plazma sitrat örnek (2.1.8 ve 2.1.9 belirtildiği gibi) çekilme 2.2.12 madde enjekte sonra 4 dak.
    14. DELİKANLI tıkanıklığı, onaylamak sonra PCI kateter balonu deflate ve bu kateter yol gösterici kateter kaldırmak için anjiyogram (2.2.3) gerçekleştirin. Miyokardiyal iskemi belirtileri görünür ECG tarafından daha--dan 5 min için ve hemen önce ne zaman tıkanıklığı siteye distal delikanlı perfüzyon tarafından Anjiyo hemen sonra deflasyon ve PCI kateter, 10 dk sonra balon kaldırılmasını onaylamak yeniden tıkanıklığı, delikanlı.
    15. 2 h için iskemik Miyokardiyum reperfüzyon izin. Plazma ve serum örnekleri reperfüzyon (2.1.8 ve 2.1.9) 10, 30, 60 ve 115 dk az almak. Monitör BGA 60 ve 115 dk (2.1.10).
    16. PCI kateter ile birlikte embolisinin iskemi için kullanılan tam olarak aynı konuma yeniden takın. PCI kateter daha önce balon şişirmek ve delikanlı tıkanıklığı Anjiyo (2.2.3) onaylayın. Sol ventrikül basıncı kateter kaldırmak ve kaydı durdurmak.
    17. %2 100 mL enjekte Evans mavi fosfat tamponlu tuz (PBS, pH 7,4) ana Venöz damar. Yaklaşık 30 s sonra ne zaman tüm hayvan onaylamasına enjekte 40 mL % 20 KCl hayvan ötenazi yapmak. Ölüm ECG sinyalleri ve nabız dalgalar yokluğunda tarafından doğrulandı.

3. örnekleme teknikleri

  1. Ayıklama, anatomi ve kalp (Şekil 4) örnekleme
    1. Kalp ortaya çıkarmak için bir yöntemdir gerçekleştirin. Daha önce Koudstaal ve meslektaşları, adım 8-2 ve 8-318tarafından açıklanan protokol izleyin. Kalp zarını anormallikler, önceki arasında perikardit kök, ve hayvan daha fazla değerlendirme dışlamak için teftiş sırasında kesmiş.
    2. Deflate ve PCI gibi yol gösterici kateter kaldırın. Kalp daha fazla çözümleme için tüketim. Vena kava kesme ve emme pompası kullanarak, sonra kalp ile vücut bağlanma büyük gemilerin kesip kan kaldırmak.
    3. İçte ve dışta kalp oda sıcaklığında salin ile yıkayın. Bütün kalp tartın.
    4. 30-40 dk içinde kalp yaklaşık 3-5 mm'den tepe mitral kapak, keskin bir bıçak kullanarak uzun eksenine dikey Chordae tendinae dilimler halinde kesin.
    5. Her zaman kalp ventral yüzü yukarı bakacak şekilde-kesim örnekleri (şekil 5) yönünü kaybetmemek için ile aynı yönde yerleştirmek dikkatli olun.
    6. Dijital tek objektifli refleks fotoğraf makinesi kullanarak kalp dilim fotoğraf.
    7. Sağ ventrikül (silmek değil gerektiği gibi) Kes gitsin. Sol ventrikül dilimleri fotoğraf ve sol ventrikül toplam ağırlığı için tüm dilimleri tartın.
    8. Evans mavi pozitif ve negatif dokusunda Evans mavi: tüm bölümleri birbirinden ayırmak. İskemik (Evans mavi negatif) bir neşter kullanarak iskemik olmayan dokudan (Evans mavi pozitif) ayırmak için dilimleri incelemek.
    9. İlk Evans mavi negatif bölümler (risk, AAR iskemik alan) analiz. Hepsini tartmak ve bir plastik konteyner içine koydu.
    10. 100-150 mL (göre kalp boyutu) triphenyl tetrazolium klorür çözüm (2 g TTC, 16 g Dextran, molekül ağırlığı 48000-90000, 200 ml taze hazırlanmış PBS) tamamen dilimlerle kapak böylece kalp adet çözüm içinde özgürce hareket edebilirsiniz. Konteyner kapağı ve hafifçe sallayarak süre 37 ° C'de 20 dk için kuluçkaya.
    11. Bu 20 dk kuluçka süresi tartmak sırasında Evans mavi olumlu parçaları (alan değil risk ANR), doku-Tek katıştırma için örnekleri almak (yaralanma en distal bölümü seçin) ve daha fazla analiz-80 ° C'de depolayın. Geri kalan % 4 formaldehit çözüm aktarmak ve Histoloji bölümleri için oda sıcaklığında saklayın.
    12. AAR parçalarını TTC çözümden kaldırmak. Kırmızı lekeli doku uygun iskemik doku (VIT) ve sigara lekeli doku çürümüş iskemik doku (NIT). 2 küçük parçalar (blok 2-3 mm) kesim hem NIT ve VIT, doku - Tek katıştırabilirsiniz ve daha fazla analiz-80 ° C'de depolayın. Bu örnekler aynı ağırlığa sahip.
    13. Adet (Tüm dilimler AAR türetilmiş) geri kalanı bir Styrofoam konteyner sabitleme ve tamamen kaplayan bir duman başlıklı oda sıcaklığında 24 h için % 4 formaldehit çözüm ile sabitleyin. Parçaları düz bir sonraki adımda fotoğraf belgeleri için kalmalısın.
    14. Ertesi gün her iki adet aynı yakınlaştırma ayarını ve doku (aynı büyütme) mesafe yüksek çözünürlüklü bir kamera ile fotoğraf. Otomatik ölçek çubukları için tüm resimleri ekleyin. Tüm çubukları aynı uzunlukta olması gerekir.
      Not: Yüksek çözünürlüklü kamera otomatik olarak ölçek çubuğu her fotoğrafa ekleyen yazılım bağlanması gerekir.
  2. AAR ve enfarktüsü boyutu
    1. Sol ventrikül AAR yüzdesi = (AAR ağırlığı g / ağırlık g sol ventrikül) * 100.
    2. ImageJ yazılım AAR ve fotoğraf üzerinde dayalı NIT (her parçanın iki) Toplam yüzey alanı hesaplamak için kullanın.
    3. Ölçek çubuğu düz çizgi açı aracı kullanarak ölçek çubuğu uzunluğu seçerek ayarlayın. Menüsünden Çözümle seçin > ölçeği ayarla ve bilinen mesafe ve ölçek çubuğu birimi ekleyin. Aynı ölçek tüm fotoğraflara uygulanana kadar "küresel" seçin.
    4. AAR hesaplamak için serbest el seçim aracını kullanarak doku tüm yüzey alanı işaretleyin. Doku ve/veya yağlı doku (Şekil 6-C) tarafı (yükseklik) eklemeyi dikkat et.
    5. "Alanı" ve "etiketi analiz görüntülemek" seçerek ölçüm ayarla > ayarla ölçüleri menüsü. Çözümle gelen yüzey alanı ölçmek > ölçü birimi.
    6. 3.2.5 (işareti sadece sigara lekeli doku) ölçü birimi NIT için adımları yineleyin. Not: yağ dokusu (Şekil 6-D) NIT hesaplamasına dahil etmeyin. Doku diğer tarafında adımı yineleyin.
    7. Ortalama AAR ve NIT doku her parça için hesaplar.
    8. 3.2.7 elde edilen değerler NIT AAR AAR:% NIT yüzdesi hesaplamak için kullanın = (Σ ortalama yüzey alanı NIT cm2/ Σ ortalama yüzölçümü AAR cm2) * 100.
    9. İki farklı müfettişler yukarıdaki yöntemi yinelemeniz. Fark kabul edilebilir marjı % < 10 olduğunu.
  3. İskemi işaretleri
    1. Daha önce-80 ° kardiyak troponin seviyesini ölçmek için C (2.1.9) depolanan EDTA plazma numuneleri kullanın-ben daha önce bir tek-plex Luminex tipi tahlil kullanarak 19açıklanan.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bir hayvan zamanından önce FXIIa inhibitörü veya denetim peptid (test madde eklenmesi önce iskemi süre boyunca kan basıncı ani bir düşüş) teknik bir hata nedeniyle, yönetimi daha önce öldü. Hiçbir iskemi/reperfüzyon hasarı sol ön inen arter (evlat) anormal anatomisi nedeniyle gözlenmiştir çünkü bir hayvan FXIIa inhibitörü grubundan dışarıda bırakıldı. Sol ventrikül ve tepe de dahil olmak üzere, büyük bir kısmı bu hayvan sirkumfleks arter tarafından periosteum. Son analize dahil hayvanlar ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Miyokardiyal ben / R yaralanma sonra akut miyokard infarktüsünde3hastanın prognozu doğrudan çevrilen son enfarktüsü boyutu üzerinde önemli bir etkiye sahip. Miyokardiyal Patofizyoloji anlama ben / R yaralanma azaltmak veya önlemek için ilk adımdır. Miyokardiyal ben / R yaralanma tehlikesi damarları doğrudan reperfüzyon sonra oluşan akut bir durumu. Ben / R yaralanma yol açar doğuştan gelen bağışıklık yanıtının harekete geçirmek ve hücresel hasar oluşur, reperfüzyon ve çevresindeki doku

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar hiçbir çıkar çatışması beyan ederim.

Teşekkürler

Yazarlar Profesör Christian Heinis FXIIa inhibitörü ve ilgili denetim sağlamak için kabul etmek istiyorum. Ayrıca minnetle anıyoruz Olgica Beslac, Dr. Daniel Mettler ve Kay Nettelbeck deneysel cerrahi birimi bölümü Biyomedikal Araştırma, Bern Üniversitesi teknik destek için. Celine Guillod ve Matthias Rausch tanı, Interventional ve pediatrik Radyoloji, Bern Üniversitesi Hastanesi, bölümünden Inselspital x ışını donanımları ve teknikleri ile destek sağlamıştır. Bu proje İsviçre Ulusal Bilim Vakfı tarafından proje no. 320030_156193 finanse edildi. Ayrıca Bay Reto Haenni iletişim ve pazarlama, Bern Üniversitesi Hastanesi, Inselspital video bizim deneme kaydı için teşekkür etmek istiyorum.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
ABL 90 Flex, kan gazı analizörüRadyometre-Kangazı analizi (BGA)
ACT PlusMedtronic-Aktive pıhtılaşma süresi
AtropinSintetica-AtropinumSulfas, 0,5mg/ml
Terazi (20-500 Kg)NAGATA Terazisi, TiwanHTB/HTRAlternatif ürünler kullanılabilir
Balance (21-4200 g)Mettler toledo, İsviçreMS4002SDRAlternatif ürünler kullanılabilir
Kan alma tüpleri: EDTA, sitrat ve serumS-Monovette, Nuembrecht, Almanya05.1167.001,
sırasıyla 05.1071.001
ve
05.1557.001
Alternatif ürünler kullanılabilir
BV Pulsera mobil C-kolluPhilips-Alternatifürünler kullanılabilir
SantrifüjLaboratuvarı, İngiltereALC PK120RAlternatif ürünler kullanılabilir
Defibrilatör Lifepak 12Medtronic-Alternatifürünler kullanılabilir
Leuconostoc mesenteroides'ten DekstranSigma-Aldrich, AlmanyaD3759Ortalama M.wt 48000-90000
Dijital tek lensli refleks kameraSony, TaylandDSLR-A500/A550Alternatif ürünler kullanılabilir
Diseksiyon forsepsAlternatif ürünler kullanılabilir
EMPIRA RX PCI dilatasyon kateteriCordis, Johnson& Johnson, USA85R15300SÇap 3 mm, uzunluk 15 mm, Alternatif ürünler kullanılabilir
EMPIRA RX PCI dilatasyon kateteriCordis, Johnson& Johnson, ABD85R15350SÇap 3,5 mm, uzunluk 15 mm, Alternatif ürünler kullanılabilir
Evans BlueSigma-Aldrich, AlmanyaE2129Toksik
Fabius GS premium solunum cihazıDrä ger, Lü beck,Almanya-Anesteziiş istasyonu, Alternatif ürünler kullanılabilir
FentanilInselspital ISPI-Fentanil2500mcg/50ml
FormaldehitPatoloji Enstitüsü, Bern ÜniversitesiSI148701Alternatif ürünler kullanılabilir
FXIIa inhibitörü. Christian Heinis'in EPFL'dekiYeni bisiklik peptit
Galeo, koroner kılavuz telBiotronik, Almanya125497Alternatif ürünler kullanılabilir
Kılavuz kateterBoston Scientific, Florida, ABD34356-066F (100 cm, EB3.75). Alternatif ürünler kullanılabilir
Heparin SodyumDrossapharm, Basel, İsviçre-Liquemin, 25000 U.I./5 ml
High end elektrocerrahiBOWA, AlmanyaARC 400Kan emme için elektrik kaynağı. Alternatif ürünler kullanılabilir
Hydro-Guardmini solunum filtresiIntersurgical, Litvanya1745000Filtreler
Resim JUlusal Sağlık Enstitüsü, ABD1.47vAlternatif ürünler kullanılabilir
Şişirme cihazı, Atrion QL2530Atrion tıbbi ürün, Alabama, ABD96402Alternatif ürünler kullanılabilir
IntelliVue MP 70Philips, Boeblingen,Almanya-Monitör(EKG, kalp atış hızı, kan basıncı ve vücut ısısı). Alternatif ürünler kullanılabilir
KClSintetica SA-Potasyumklorür %15
KetaminVetokinol-Narketan, 1ml/100mg
LR-ACTMedtronic402-01ACT özel şırıngalar
MidazolamRoche-Dormicum, 5mg/ml
Monopolar neşterAlternatif ürünler kullanılabilir
İğne tutucuAlternatif ürünler kullanılabilir
Yüksek çözünürlüklü kamera, Spotimaging'i Grossing için PathStand Makro Görüntüleme Standı, ABD1080 p HD çözünürlük. Alternatif ürünler kullanılabilir
PBSKurum içihazırlık-Alternatifürünler kullanılabilir
Periferik venöz kanül, 18 GAlternatif ürünler kullanılabilir
PowerLab 4/35 veri toplama sistemiAdinstruments, Spechbach,
Heidolph, Almanya544-41200-00Shaker. Alternatif
Rü kullanılabilir; schelit-Super Safety Clear TubeTeleflex, Dublin, İrlanda112480Hava yolu boruları, Alternatif ürünler kullanılabilir
Güvenli Pico Aspiratör ŞırıngalarıRadiometer956-622BGA özel şırıngalar
SalineSintetica Bioren-NaCl0,9. Alternatif ürünler kullanılabilir
: Sevorane 1.5%AbbVie AG-Sevorane250ml 100%
SheathCordis, Johnson& Johnson, ABD504-607 AAVANTI + / 7 F, Alternatif ürünler kullanılabilir
Uzay infüzyon pompasıB.Braun Medical AG,Almanya-Fentanil infüzyonu için. Alternatif ürünler kullanılabilir
SPR-350 (Millar kateter)Adinstruments, Texas, ABD840-8166MİKRO-TIP, 5F, 120 cm
Sternotomi testeresiAlternatif ürünler kullanılabilir
SütürlerETHICON, Johnson& Johnson,ABD Y3110HMonocryl 3-0 SH-1 Plus. Alternatif ürünler kullanılabilir
Şırıngalar (20, 10 ve 5 mL)CODAN,Baar, İsviçresırasıyla 62.7602,
62.6616,
62.5607
Anestezik materyalleri kas içine veya doğrudan merkezi venöz hatta enjekte etmek için kullanılır. Ayrıca heparin veya FXIIa veya ilgili kontrolü enjekte etmek için. Alternatif ürünler kullanılabilir
Toraks yayıcıAlternatif ürünler kullanılabilir
Tissue-tekSAKURA, Hollanda4583O.C.T. bileşiği
Vasküler forsepsAlternatif ürünler kullanılabilir
Xenetix 300 kontrast maddeGuerbet, Zü zengin,İsviçre-Lobitridol, 300 mg iyodür / ml
KsilazinVetokinol-Ksilapan, 20mg / 1 mL
2,3,5-Trifeniltetrazolyum koridSigma-Aldrich, AvusturyaT8877
500 & mu; L tüpler (eppendorf)Trefflab, İsviçre96.08185.9.03Alternatif ürünler kullanılabilir
Prof laboratuvarı tarafından sağlanmıştır Almanya-Rotamax120T %

Kaynaklar

  1. Mozaffarian, D., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update. Circulation. 133, e338-e360 (2016).
  2. Miller, T. D., et al. Infarct size after acute myocardial infarction measured by quantitative tomographic 99mTc sestamibi imaging predicts subsequent mortality. Circulation. 92, 334-341 (1995).
  3. Ovize, M., et al. Postconditioning and protection from reperfusion injury: where do we stand? Position Paper from the Working Group of Cellular Biology of the Heart of the European Society of Cardiology. Cardiovasc Res. 87, 406-423 (2010).
  4. Neri, M., Riezzo, I., Pascale, N., Pomara, C., Turillazzi, E. Ischemia/Reperfusion Injury following Acute Myocardial Infarction: A Critical Issue for Clinicians and Forensic Pathologists. Mediators Inflamm. 2017, 1-14 (2017).
  5. Yang, Q., He, G. -W., Underwood, M. J., Yu, C. -M. Cellular and molecular mechanisms of endothelial ischemia/reperfusion injury: perspectives and implications for postischemic myocardial protection. Am J Transl Res. 8, 765-777 (2016).
  6. Massberg, S., et al. Platelet-Endothelial Cell Interactions During Ischemia/Reperfusion: The Role of P-Selectin. Blood. 92, 507-515 (1998).
  7. Wang, J., et al. Antithrombin is protective against myocardial ischemia and reperfusion injury. J Thromb and Haemost. 11, 1020-1028 (2013).
  8. Hopp, S., et al. Targeting coagulation factor XII as a novel therapeutic option in brain trauma. Ann Neurol. 79, 970-982 (2016).
  9. Crick, S. J., Sheppard, M. N., Ho, S. Y., Gebstein, L., Anderson, R. H. Anatomy of the pig heart: comparisons with normal human cardiac structure. J Anat. 193 (Pt 1), 105-119 (1998).
  10. Heusch, G., Skyschally, A., Schulz, R. The in-situ pig heart with regional ischemia/reperfusion - ready for translation. J Mol Cell Cardiol. 50, 951-963 (2011).
  11. Poirier, P. Exercise, heart rate variability, and longevity: the cocoon mystery? Circulation. , 2085-2087 (2014).
  12. Milani-Nejad, N., Janssen, P. M. L. Small and large animal models in cardiac contraction research: advantages and disadvantages. Pharmacol Ther. 141, 235-249 (2014).
  13. Bloor, C. M., White, F. C. Functional development of the coronary collateral circulation during coronary artery occlusion in the conscious dog. Am J Pathol. 67, 483-500 (1972).
  14. Banz, Y. Locally targeted cytoprotection with dextran sulfate attenuates experimental porcine myocardial ischaemia/reperfusion injury. Eur Heart J. 26, 2334-2343 (2005).
  15. Krombach, G. A., Kinzel, S., Mahnken, A. H., Günther, R. W., Buecker, A. Minimally Invasive Close-Chest Method for Creating Reperfused or Occlusive Myocardial Infarction in Swine. Invest Radiol. 40, 14(2005).
  16. Suzuki, Y., Lyons, J. K., Yeung, A. C., Ikeno, F. In vivo porcine model of reperfused myocardial infarction: in situ double staining to measure precise infarct area/area at risk. Catheter Cardiovasc Interv. 71, 100-107 (2008).
  17. McCall, F. C., et al. Myocardial infarction and intramyocardial injection models in swine. Nat Protoc. 7, 1479-1496 (2012).
  18. Koudstaal, S., et al. Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs. J Vis Exp. , e51269(2014).
  19. Kamat, P., et al. Dexrazoxane Shows No Protective Effect in the Acute Phase of Reperfusion during Myocardial Infarction in Pigs. PLoS One. 11, e0168541(2016).
  20. Carden, D. L., Granger, D. N. Pathophysiology of ischaemia-reperfusion injury. J Pathol. 190, 255-266 (2000).
  21. Pérez de Prado, A., et al. Closed-chest experimental porcine model of acute myocardial infarction-reperfusion. J Pharmacol Toxicol Methods. 60, 301-306 (2009).
  22. Lown, B., Levine, S. A. The carotid sinus. Clinical value of its stimulation. Circulation. 23, 766-789 (1961).
  23. Regueiro-Purriños, M., et al. Ventricular Arrhythmias and Mortality Associated with Isoflurane and Sevoflurane in a Porcine Model of Myocardial Infarction. J Am Assoc Lab Anim Sci. , (2011).
  24. Roberts, L. N. Evans blue toxicity. Can Med Assoc J. 71, 489-491 (1954).
  25. Ellenbroek, G. H. J. M., et al. Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction. J Vis Exp. , e54021(2016).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

İskemi Reperfüzyon YaralanmasıPorcine ModelPerkütan Koroner GirişimSol Anterior DesendanDoku Örnekleme ProsedürleriKan Örnekleme TeknikleriEvans Blue BoyamaTTC Solüsyonu İnkübasyonuİnfarkt Boyutu Belirleme