Pupa dönemi ve kanat pigmentasyon Drosophila guttifera ölçümü evreleme için protokol açıklanmıştır. Evreleme ve pigmentasyon miktar yetişkin özellikleri ile gelişimsel mekanizmaları eğitim için sağlam bir temel sağlamak ve özellik geliştirme interspecific karşılaştırma etkinleştirin.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Evreleme pupa dönemi ve ölçüm kanat pigmentasyon Drosophila guttifera yöntemleri
Bu makalede
Özet
Özet
Drosophila (meyve sineği) çeşitli türlerin gelişim ve genetik değişiklikler için evrimsel değişiklikler sorumlu mekanizmaları incelemek için fırsatlar sağlar. Özellikle, Yetişkin sahne Morfolojik özellikleri kanat pigmentasyon karşılaştırma da dahil olmak üzere interspecific karşılaştırma için zengin bir kaynağıdır. Türler arasında gelişimsel farklılıkları eğitim için detaylı gözlem ve uygun evreleme kesin karşılaştırma için gereklidir. Burada evreleme pupa dönemi ve bir polka noktalı meyve sineği Drosophila guttiferakanat pigmentasyon miktar için iletişim kuralları açıklar. İlk olarak, ayrıntılı morfolojik gözlem ve pupa aşamaları türleri üzerinde Morfoloji temel tanımını için yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntem pupa türleri Morfoloji detaylı gözlem etkinleştirmek için pupa, dış chitinous durumda puparium kaldırmak için bir yöntem içerir. İkinci olarak, tanımlanmış pupa aşamaları süresi ölçme yöntemi açıklanmaktadır. Son olarak, dijital görüntü ve ImageJ yazılım kullanarak görüntü analizi dayalı kanat pigmentasyon miktar için yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntemler ile yetişkin özellikleri ile gelişimsel süreçleri pupa evrelerinde karşılaştırmak için sağlam bir temel oluşturabilir.
Giriş
Drosophila morfolojik özelliklerin bazıları tür1,2,3,4,5arasında çeşitlendirilmiş. Soru yaklaşım olabilir bu türleri Morfoloji nesil mekanizmaları karşılaştırarak nasıl morfolojik çeşitlilik ortaya çıkar. Böyle türleri Morfoloji larva trichomes, yetişkin sex taraklar, dış genital aparatı, karın pigmentasyon ve kanat pigmentasyon6,7,8,9, örnekler
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. stok fly
- Drosophila guttifera tüm aşağıdaki iletişim kuralları için kullanın.
- Plastik şişeleri kullanın (çapı 25 mm yükseklik x 96 mm) ve selüloz prizler (çapı 23 mm yükseklik x 26 mm) hisse senedi bakım için. Bu tür2diğer üç alternatif tariflerini takip bir yayın açıklanan ve standart bir Mısır unu/şeker/Maya/agar gıda kullanın.
Not: D. guttifera (stok numarası 15130-1971.10) Drosophila tür stok merkezi San Diego Kaliforniya Üniversitesi tarafından sağlanır. Her ne kadar immigransiçin - uzaktan D. melanogaster için içinde cins23ilgilidir,tripunctata ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
D. guttifera pupa dönemine 17 aşamaları (P1 - P15(ii); görüntüler üç temsilcisi aşamaları (P1, P5 - 6, P10) şekil 3ve tüm 17 aşamaları şekil 4' te gösterilmiştir gösterilir) ayrılmıştır. Bainbridge ve Bownes17 20 D. melanogasteraşamalarında kabul rağmen bu aşamaların bazıları D. guttiferaiçin uygulanamadı. İki gelişimsel olayların sırası, sarı vücudun (kitle içindeki midgut
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Burada pupa aşamaları, tanımını protokollerde pupa aşamaları sürelerini ve siyah noktalar üzerinde D. guttiferakanadında yoğunluğu ölçümü ölçme detaylı gözlem için puparium kaldırma açıklar. Bu protokoller için birçok Drosophila uygulanabilir ve sinek türleri, özellikle türler kanat pigmentasyon ile ilgili.
Daha da derinlemesine gözlem ve gelişimsel olaylarını daha ayrıntılı açıklamasını alt aşamaları sağlayacak. Birçok durumda, diseksiyon gerektiren veya bir pupa kesit geliş.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar hiçbir çıkar çatışması var.
Teşekkürler
Biz Sean B. Carroll ve Thomas Werner sinek hisse senetleri, Naoyuki sigorta donanımları için Byung Seok Jin filme, Kiyokazu rehberlik için Agata ve Elizabeth İngilizce düzenleme Nakajima'onun yardım sağlamak için teşekkür ederiz. Bu eser KAKENHI tarafından desteklenen 17K 19427 ve Takeda Bilim Vakfı.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Drosophila guttifera | U.C. San Diego'daki Drosophila Tür Stok Merkezi | 15130-1971.10 | Drosophila guttifera, bu makalede kullanılan bir meyve sineği türü |
| Plastik şişe | Hightech | MKC-30 | Sinek stoğu bakımı için plastik şişe |
| Cam şişeler için vızıltı bujileri şişesi ve şişe kapakları | Fisher Scientific | AS-271 | Sinek stoğu bakımı için selüloz tapa |
| Beyaz yumuşak şeker | Mitsui Sugar | J-500g | Beyaz yumuşak şeker, standart mısır unu/şeker/maya/agar yemi için |
| Mısır unu | Nippon Un Değirmenleri | F | Mısır unu, standart mısır unu/şeker/maya/agar yemi için |
| Mısır ezmesi - C | Nippon Un Değirmenleri | GC | Mısır ezmesi - C, standart mısır unu/şeker/maya/agar yemi için |
| Agar tozu | Matsuki Kanten Sangyo | No.602 | Agar tozu, standart mısır unu/şeker/maya/agar gıdaları için |
| Kuru bira mayası | Asahi Food & Sağlık | Hizmetleri Y2A | Kuru bira mayası, standart mısır unu/şeker/maya/agar gıdaları için |
| Bütil p-hidroksibenzoat | Nacalai Tesque | 06327-02 | Bütil p-hidroksibenzoat, standart mısır unu/şeker/maya/agar gıdaları için |
| Etanol | Wako | 057-00456 | Etanol, standart mısır unu / şeker / maya / agar gıdaları için |
| Düz tabanlı mikrotüp | Ina Optica | CF-0150 | 1.5 mL mikrotüp, için pupa toplama |
| CAPSULEFUGE | Tomy | PMC-060 | Mini mikrosantrifüj, pupa toplamak için |
| Sterilize Edilmiş Schale NB | Sansei Medical | 01-013 | Plastik Petri kabı (çap 90 mm x yükseklik 15 mm) |
| Serum tüp rafı | Iwaki | 9796-050 | Pupa'nın gözlemlenmesi için nemli bir oda olarak kullanılır |
| Corning Falcon Easy-Grip doku kültürü kabı | Corning | 353001 | Plastik Petri kabı (çap 35 mm x yükseklik 10 mm) |
| Falcon standart doku kültürü kabı | Corning | 353002 | Plastik Petri kabı (çap 60 mm x yükseklik 15 mm) |
| Push-pin | Kokuyo | 51233709 | Mikrotüp kapağında iğne delikleri açmak için Stereomikroskop |
| Olympus | SZX16 | Stereomikroskop, morfolojik gözlem için | |
| Dijital fotoğraf makinesi | Olympus | DSE-330-A | Dijital kamera, görüntüleme için |
| NICETACK çift taraflı bant | Nichiban | NW-15SF | Çift taraflı bant, puparium |
| Dumont #5 forsepslerini | Güzel Bilim Araçları | 11252-20 | Forseps, puparium çıkarmak için |
| Van Gogh VISUAL Boya fırçası | Talens Japonya | GWVR-#5/0 | Puparium Greiner'ı çıkarmak için boya fırçası |
| CELLSTAR 12 kuyulu hücre kültürü plakası | Merck | 665-180 | 12 oyuklu hücre kültürü plakası, pupa dönemlerinin sürelerini ölçmek için |
| NaCl | Wako | 191-01665 | NaCl, PBS |
| KCl | Nacalai Tesque | 285-14 | KCl, PBS |
| Na2HPO4· için; 12H2O | Wako | 196-02835 | Na2HPO4· 12H2O, |
| PBS için KH2PO4 | Nacalai Tesque | 28721-55 | KH2PO4, PBS |
| Kademeli Nötr Yoğunluk (ND) Filtresi 0.04 - 3.0 | için Edmund Optics | 64-384 | Kademeli yoğunluk filtresi, pigmentasyon ölçümünün kalibrasyonu için |
| ImageJ yazılımı | NIH | 1.8.0-101 | ImageJ yazılımı, bir kanattaki siyah noktaların yoğunluğunun ölçümü için (https://imagej.nih.gov) |
| FINE FROST cam slayt | Matsunami Glass Ind | FF-001 | Kanattaki siyah noktaların yoğunluğunun ölçümü için cam slayt |
| Kare mikroskop kapak camı 18 x 18 | Matsunami Glass Ind | C018181 | Bir kanat üzerindeki siyah noktaların yoğunluğunun ölçümü için kapak kayması, |
Kaynaklar
- Carson, H. L., Hardy, D. E., Spieth, H. T., Stone, W. S. The evolutionary biology of the Hawaiian Drosophilidae. Essays in evolution and genetics in honor of Theodosius Dobzhansky. Hecht, M. K., Steere, W. C. , Springer (Meredith Corporation). New York. 437-543 (1970).
- Markow, T. A., O'Grady, P. M. Drosophila: a guide to species id....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
