Gıdıklama, fareler işlerken olumlu etkiler Inducing tekniği

Özet

Bu makalede, oynak işleme, sıçan uzaklaşana oyun taklit etmek için tasarlanmış bir gıdıklama teknik standart uygulama gösterilmektedir. Bu teknik insanlar korku tepkileri azaltılmasını etkili olduğunu ve olumlu oluşturma yordamları enjeksiyon gibi araştırma ve fareler genel hayvancılık etkinlikler ve tıbbi işlenme şeklini etkiler.

Özet

Fareler gibi küçük hayvanlar işleme çeşitli yan etkilere yol açabilir. Bu insanlar, işleme, artan yaralanma riski hayvanlar ve onların işleyicileri, azalan hayvan refahı ve geçerli araştırma veri daha az eller için direnç korkusu içerir. Deneysel sonuçlar ve Insan-hayvan ilişkileri üzerinde olumsuz etkileri en aza indirmek için araştırma hayvanlar kez ele için habituated. Ancak, son derece değişken ve genellikle sınırlı etkinliğini habituation yöntemleri vardır. Daha kuvvetli insanlar hayvanların oynak uzaklaşana davranışı yönlerini işleme sırasında taklit etmek mümkündür. Laboratuvar fareler için sistematik bir şekilde uygulandığında, gıdıklıyor olarak adlandırılan bu oynak işleme yükselişi sürekli olarak olumlu davranışsal yanıt verir. Bu makale tekniği gıdıklıyor standart fare ayrıntılı bir açıklamasını sağlar. Buyöntem hayvanlarda olumlu duygusal Birleşik Devletleri içine gelecek araştırmalar için katkıda bulunmak, değişen kafes gibi sık kullanılan hayvancılık etkinliklerini veya enjeksiyon gibi tıp/araştırma prosedürler için rats işlemek ve bir kaynak olarak uygulanması kolaylaştırmak Sosyal zenginleştirme. Bu yöntem verimli ve practicably rats korkaklık insanların azaltmak ve onların refahı geliştirmek, aynı zamanda güvenilir bir şekilde olumlu duygusal Birleşik modeli için kullanılabilir sonucuna varılmıştır.

Giriş

Laboratuarlarında ve evcil hayvan olarak yerli fareler (Rattus norvegicus) tutulur gibi işleme küçük hayvanların davranış ve fizyolojik belirtileri stres¹, hem de itici yanıt düşündüren içinde önemli ölçüde artırdığını neden olabilir duygusal sıkıntı². Fareler işleme daha fazla işleme daha zor hale, hayvan ve işleyici için yaralanma riski artar ve deneysel veriler⁵geçerliliğini sınırlamak korku tabanlı yanıtlar insanlar^3,4doğru tetikleyebilir.

İşleme deneysel sonuçlar ve Insan-hayvan ilişkileri üzerinde olumsuz etkileri önlemek için bir süre onları deneysel tedaviler için atama önce insan etkileşimi için alıştırmak yeni alınan genç hayvanlar için izin vermek için yaygın bir uygulama olduğunu. Bu calıştıkları dönemde hademe fareler için bir dizi son derece değişken biçim ve süre olabilir etkinlik maruz bırakabilir. Bu çok dokunaklı, kaldırma, sevişme, holding, konuşmak, insanlar, pasif maruz içerebilir ve gıda sunan davranır. Her ne kadar insanlar⁶korkusu azaltmak için tür yordamlar kombinasyonları bildirilmiştir, hangi belirli uygulamalar meşgul hayvan hademe tarafından kullanılacak en etkili belli değil. Fareler olumsuz yanıt-e doğru ya da en azından olumlu yanıt, bu bireysel teknikleri^2,7,8,9bazıları olabilir raporlar vardır.

Buna ek olarak, bol kanıt, sıçan, oynak uzaklaşana davranışı yönlerini taklit eden bir işleme tekniği gıdıklıyor sağlam yararlı özellikle için Juvenil fareler^{10sosyal iletişim biçimidir sonucuna destekler, 11,12,13}. Sıçanlar vardır son derece sosyal memeliler, hangi zaman gözlemlemek açıktır harcadıkları birlikte gençlere¹⁴ ve yeniden kurmak ve conspecifics^{15,16, sosyal temas korumak için onların güçlü motivasyon olarak oynama 17}. Sıçan gıdıklıyor işleme olumlu bir deneyim haline dönüştürmek için fareler oynak sosyal doğası faydalanmaktadır. Bu kavramı ilk olumlu duygusal Birleşik sosyal oyun davranış⁷tarafından uyarılmış nörobiyolojik temeli soruşturma için bir model olarak geliştirilmiştir. O zamandan beri diğer teknikleri¹³işleme gıdıklıyor 22 hangi karşılaştırıldığında üzerinde 56 farklı deneylerde gıdıklıyor sıçan kullanılmıştır.

Sıçan uzaklaşana oyun tarafından iki anahtar davranışları karakterizedir: "dorsal iletişim" ve "toplu iğne" (şekil 1)^18,19. Kaba oyun sırasında fare oyun başlatır ortak ense dorsal temas yaparak. Alıcının sırtüstü haddeleme tarafından yanıt verir ve¹⁹yukarıda başlatıcı durarak sıkıştırdık. Oyun sırayla her pozisyonda, üstte ve¹⁸altında olmak fareler ile devam ediyor. İnsan işleyicileri uzaklaşana oyunun iki anahtar bileşenleri ne dedikleri ense (dorsal temas) ile temas ve ne zaman bir çocuk gıdıklıyor kullanılan benzer parmak dinç, hızlı hareketleri kullanarak ventral yüzey (PIN) arasında geçiş yapma tarafından taklit edebiliyoruz. Fareler gıdıklıyor sırasında insan eli yıkamazsınız çünkü Tabii ki, gıdıklama sıçan uzaklaşana oyun tam bir kopyasını değil. Nitekim, nişan uzaklaşana oyun ve gıdıklama bireylerin düzeyini^20,21farklı olabilir. Buna rağmen Görünüşe göre gıdıklıyor aynı ödül mekanizmaları arasında conspecifics kaba oyun olarak çağırır. Gıdıklama aktif hayvanlar tarafından istenen ve öğrenme, dört köşe genç sıçanlar^7,11,12için^, büyük ölçüde tatmin edici kanıtlar katkıda Edimsel için bir ödül olarak hizmet verebilir ^{13 , 22}. fareler de nazik ödül olarak okşayarak karşılığında operant bir görev bilgi için bildirilmistir rağmen daha hızlı el gıdıklıyor karşılaştırıldığında⁷okşayarak için sunan bir kişinin yaklaşım olduklarını.

Gıdıklama içinde kullanılan iğneler ortak kısıtlama yordamlar için benzer görünebilir ama fareler bu tür farklı işleme algıladıkları kanıt yoktur. Fareler sürekli olarak sınırlanmıştır zaman gibi bir enjeksiyon yordamı için onlar chromodacryorrhea ("kırmızı gözyaşları")⁸' kaynaklanan aşırı porfirinler salgılar. Chromodacryorrhea akut stres yanıt olarak ortaya çıkar ve deri ve kürk gözler ve burun kırmızımsı renk²³lekeli olmak için neden olur. Tekrar tekrar aşağı düzenlenen ve arkadaki bir PIN olduğu gibi ölçülü, fareler gösterdi daha az insanlardan daha ne zaman cazibe gıdıklayan¹². Bu sonuçların tekrarlanan kısa kısıtlama yok ve gıdıklama sırasında bültenleri oynak olmayan kısıtlama farklı algılandığını göstermektedir. Böylece, gıdıklama içinde kullanılan hassas tekniği stres işlemeye katkı karşı olumlu bir duygusal durumu oluşturmak için önemli sonuçları vardır.

Sıçan duygusal durumuna gıdıklıyor etkisi izleme kolayca rats'vocalizations katılıyor tarafından gerçekleştirilebilir. Fareler genellikle ultrasonik vocalizations (USVs), iki kategoriye, 22 kHz ve 50-kHz, sesli vocalizations ek olarak üretmek. Öngörmeyi caydırıcı olaylar ve olan yükseltilmiş beyin kolinerjik etkinlik²⁴tarafından eşliğinde 22 kHz USVs genellikle oluşur. Bu nedenle, 22 kHz USVs anksiyete olumsuz duygusal durumunu belirtmek için sayılır. Özellikle "trill" frekans modülasyonlu türünde (Resim 2), 50 kHz USVs tatmin edici durumlar ve uyaranlara ile genellikle ilişkili olan ve artan beyin dopaminerjik etkinlik^24,25tarafından yayımlanır. Buna göre bol 50 kHz USVs ifadeler bir olumlu duygusal devlet^24,26,27,28yansıtmak için kabul edilir. Son olarak, sesli vocalizations genellikle ile ilişkili ve bu nedenle işaretleri, fiziksel ağrı ve rahatsızlık kullanılır. Farklı üretim vocalizations bu üç formları böylece güvenilir değişikliklerin kaydı ile rats²⁶duygusal devlet sunuyor. Fareler USVs adlı 22-kHz üretmek yırtıcılar arasında pozlama, pozlama ayak şok ve arası erkek dövüş²⁸gibi ağrılı uyaranlara karşı sırasında. Okşayarak aynı zamanda birden fazla 22 kHz USVs olumsuz etkiler²gösteren olarak anlaşılmaktadır saf Sıçanlarda temin için rapor edildi. Buna ek olarak, insanlar tarafından olarak ne zaman diğer farelerle uzaklaşana oyunda yapan dört köşe, fareler çok sayıda 50 kHz USVs üretir. Bu 50 kHz USVs oranı^29,30gıdıklıyor tarafından üretilen olumlu duygusal yanıt kademeli bir ölçüsü sağlar izler.

"Nasıl bir sıçan gıdıklamak için" varolan açıklamaları oldukça kısadır ve değişken sonuçlara yol açabilir. Ayrıca, acemi "sıçan gıdıklayan" kaba oyun taklit etmek için girişimleri aşırı geçici olabilir. Kelimeleri gıdıklamak"şiddetle" görsel olarak gösterdi zaman anlamak kolaydır. Bu nedenle, bu makalenin amacı ayrıntılı açıklama ve rats pozitif oynak etkileşim güvenilir zaman ele en rats olumlu tepkiler ortaya çıkarır bir etkili ve tutarlı bir şekilde taklit etmek nasıl gösterimi sağlamaktır. Bu iletişim kuralı standart bir gıdıklama teknik açıklar ve nasıl gıdıklıyor kısıtlama ve potansiyel olarak hoş olmayan duygusal deneyimler azaltmak için enjeksiyon gibi prosedürler ile birleştirilebilir açıklar.

Protokol

Tüm deneyler Ulusal Sağlık Rehberi Enstitüleri uygun olarak bakım için yapılmıştır ve tesislerde kullanım laboratuvar hayvanlarının^31,32 AAALAC International tarafından akredite ve Washington Devlet tarafından kabul edildi Üniversitesi Kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı Komitesi. Aşağıdaki iletişim kuralı laboratuvar hayvan alerjenlere personel açığa çıkarabilir. Kişisel koruyucu donanım kurumsal iş sağlığı ve güvenliği programı ve sağlık sağlayıcıları tarafından tavsiye edilen şekilde takılmalıdır. Protokol prosedürleri altında tipik laboratuvar şartları konut gösteriyor ama (örneğin kullanarak bir biyogüvenlik kabini, vb.) daha yüksek Biyogüvenlik İmkanları kullanmak için adapte olabilir.

1. hazırlık ekipmanları ve kurulum

1. Taşıma kutusu
   1. Bir hayvanın eve kafes veya diğer muhafaza gıdıklıyor için bundan sonra işleme kutusu olarak adlandırılan hazırlayın.
   2. Taşıma kutusu memorandum'ın el ve onları dışarı atlama engelleyen sırasında hareket etmek fare için alan sağlamak için geniş olduğundan emin olun.
   3. Taşıma kutusunun engellerle ücretsiz olduğundan emin olun. Böylece, ev kafeste gıdıklıyor iletken kulübeleri, sopa ve oluklu kağıt kemiren gibi nesnelerin kaldırın.
   4. Satır işleme kutusu kat³³yatak takımları ile. Yumuşak zemin kapak diğer türleri kullanılabilir ancak 50 kHz vocalizations¹³alabilme etkili değildir.
   5. Bir tablo veya tezgah işleyicisi'nın el rahat taşıma kutusunun tüm katı alana ulaşmak sağlar bir yükseklikte işleme kutusuna yerleştirin.
   6. Yenilik etkisini gıdıklıyor önce işleme kutusuna fareler habituating tarafından gerekirse en aza.
2. Zamanlayıcı: başlangıç ve bitiş 15 s krizi belirtmek için bir zamanlama cihazı nerede kolayca okunabilir işleme kutusu koyun. Alternatif olarak, işitsel bir saat sinyalini memorandum kulaklık aracılığıyla iletilebilir.
3. Konser kaydı
   1. Eğer vocalizations kaydedilir-e doğru araştırma amacıyla farklı seslendirme türleri ölçmek, 10-120-kHz geniş bant ses esir alma yeteneğine sahip bir mikrofon kullanmak, bir aygıta yüksek frekanslı sesler kaydedebilen bağlı.
   2. Askıya alma veya üst veya kutusunun, açıkça aramaları algılamak ve fareler yakındaki kafeslerde ama fareler fiziksel eriþiminden gelen çağrıları ile karışıklığı önlemek için düşük tarafında mikrofon takın.
   3. Vocalizations yalnızca uygun gıdıklama tekniği onaylamak için izlenen gerekiyorsa, bir yarasa Dedektör kullanmak ve yan tarafında kutusunu ayarla. Basit, heterodyne dedektörü kullanılıyorsa, aygıtı 50-kHz ayarlayın.
4. Laboratuvar eldiven: çıplak veya ince eldivenli elini gıdıklıyor kullanın. Gıdıklama tekniği çıplak elle kullanarak geliştirilmiştir.  Ancak, bir ince eldivenli elini de oynak davranış ve işleyicinin sıçan vücuda uygulanan basınç miktarı hissediyorum ve fare yanıt eldiven aracılığıyla hissediyorum izin verirken 50 kHz USV üretim inducing etkilidir.

2. gıdıklama yordamı

1. Gerekli laboratuvar eldiven koymak. Bir tablo veya tezgah eve kafes getirin. Nazikçe Eğer gıdıklıyor ev kafeste yapılır değil fare işleme kutusuna aktarın. Zamanlayıcı ve radyo sinyalleriyle iletilen yazmak gerekirse başlayın.
2. 15 arasında tutarlı uygulama için alternatif s el iletişim ve 2 dk toplam kişiden 15 s açıklaması. Bu etkileşimin süresini cazibe sıçan insanlar¹¹artırmak için yeterli bulundu.
   1. 15 s sürümüyle gıdıklama oturumuna başlamak için el hareketsiz içinde işleme kutusunun bir yana koyun. El yalıyor yönlendirerek etkileşimi isteme fareler sağlar ve ışık (nibbles)²²etkileşimine sıçan ilgi gösteren el doğru nips. Bu durumda, oynak el sıçan tarafından takip talebinde sıçan uzak elimi hareket. Alternatif olarak, el 15 s yayın sırasında kutunun dışında bırakın.
   2. 15 birlikte izleyin gıdıklıyor, s başlatmak dorsal kişi (2-4 sn) ile etkileşim. Bir yandan kullanarak, şiddetle sıçan ense (dorsal yüzey boyun) yaygın insan gıdıklıyor gerçekleştirilen hızlı parmak hareketleri kullanarak parmak ile dokunun. Bu alan vücut agresif Buluşmaları³⁴sırasında hedef olarak kıç temastan kaçının.
   3. Bir PIN dorsal kişiyle izleyin. Baş ve orta parmak fare ayaklarından altında yerleştirin; sıçan, fare onun kuyruk sağlarken sırtını değil müstehcen hızlı bir şekilde izin vermek için yeterince yüksek kaldır.
      Not: Hafifçe fareyi sırtını açarken küçük parmak fareyle sırtına itmek için yardımcı olabilir.
   4. Fareyi gevşek, ama sıkıca tutun; iddialı ama değil güçlü olması. Fare yere sırtında olduğunda, vücut gevşek parmakları hızlı bir şekilde ve şiddetle ama hafifçe karnına, genellikle insan gıdıklıyor kullanılan hareket ederken basılı tutun.
   5. Hızlı ve iddialı stimülasyon olmasına rağmen (2-4 s/PIN) olumsuz yanıt-e doğru en aza indirgemek için tempolu sabitleme tutun. Kendisi sağ ve dorsal bir kişi ile hızlı bir şekilde takip fareyi izin.
   6. Dorsal kişiler ve pinler arasında geçiş devam. Ortalama olarak 4-5 pin/15 s³⁵olmalıdır.
   7. Her iki el ile sıçan kadar seçme. 15 sırasında s gıdıklıyor, her zaman hareketli parmak tutmak ve sıçan vücut ile temas halinde bile pimleri ve dorsal kişiler arasında geçişler.
   8. Üç ek 15-s gıdıklıyor ve 15-s bültenleri 2 dk toplam için gerçekleştirin.
3. Bir taşıma kutusu kullanıyorsanız, fare için ev onun kafes dönmek. Eve kafes kullanıyorsanız, zenginleştirme nesneleri kafesine döndü yerleştirin. Temiz dışkı ve idrar değil çıkarmak için kağıt havlu işleme kutusuyla yatak tarafından emilir.
4. Fareler, sonraki kafes ile gerektiği kadar yineleyin.

3. aynı anda birden çok fareler gıdıklıyor

1. Fareler gibi bir grup³⁶dört köşe. İşleme süresi değil ise ilgili, diğer her fare 15 gıdıklıyor s. Gıdıklama oturum süresi 2 dk her fare el kişi serbest bırakmak yanında serpiştirilmiş gıdıklıyor dört nöbetleri alır böylece gerektiğinde uzatılabilir.
2. İşleme süresi araştırma sonuçları için ilgili ise, aşağıdaki yordamları kullanın:
   1. Çiftleri için 15 için bir fare gıdıklamak s ardından hemen sonraki 15 ikinci fare gıdıklıyor tarafından s (i.e., ilk fare yayın sırasında), ve benzeri. Memorandum bir dinlenme süresi yok.
   2. Üçüz için iki fareler gıdıklamak ve öte yandan kullanarak başka biri olarak aynı zamanda üçüncü bir gıdıklamak için 3.2.1 içinde açıklanan yordamı kullanın.
   3. Fareler 4 veya daha fazla gruplar için her fare ya da sıçan 15 çift gıdıklamak s. Gıdıklama oturum süresi 2 dk gerektiği şekilde genişletilebilir.

Sonuçlar

Etkileyen veya potansiyel olarak etkileyen faktörler, gıdıklama yanıt-e doğru Tablo 1' de özetlenmiştir. Sıçan gıdıklıyor gelen olumlu sonuçlar sıçan refah ve olumlu etkiler birden çok önlemlerle belirttiler. Ortak bulgular 50 kHz USVs, artan yaklaşım davranış ve artan işleme kolaylığı artan üretim içerir. Sıçan genetik ve hücresel düzeyde gıdıklıyor etkileri dahil değişmiş gen ekspresyonu hipotalamus³⁷yılında bildirdi ve artan Hipokampus^38,39dentat gyrus neurogenesis. Sonuçlar gösterge azaltılmış yaygın anksiyete ve korku insanların aynı zamanda bildirmiştir azaltılmış gibi 9 farklı yaklaşımda gecikme süresi^40,41, Klima korku sonra buz gibi daha az¹³, deneyler ve artan girişleri bir açık alan arena tarafından ayrı ayrı ev fareleri³⁶ortasına. Daha fazla bilgi için bkz: LaFollette ve ark., gıdıklama edebiyatı sistematik bir inceleme bu kim mevcut fare ile karşılaştırıldığında diğer teknikleri¹³gıdıklıyor sonuçlar araştıran 22 raporlarını tanımlar.

Gıdıklama teknik kısıtlama ve intra Periton (IP) enjeksiyon yordamlar ile eşleştirildiğinde elde edilebilir sonuçlar sonraki, belirli örnekleri özetlenmiştir.

Sprague-Dawley Rat (erkek; 85-94 gün yaş; n 48 =) için 2 dk hemen önce ve sonra IP tuzlu enjeksiyon her gün için 10 gün, dört köşe özellikle çocuk gıdıklıyor ile kombine edildiğinde deneyim (2 dk/gün'den yaş 25-45 gün), sadece daha fazla 50 kHz USV üretilen daha önce (GLM ANOVA, F_{3, 44} = 9.59, p < 0,0001; Şekil 3A) ve hemen sonra (F_{3, 44} 8.74, p = 0.0001; = Şekil 3B) enjeksiyon (Tukey Kramer, p < 0,05) pasif el¹⁰maruz fareler karşılaştırıldığında. Enjeksiyon gerçek kısa doğum esnasında 50 kHz USVs üretimini sınırlama (yani ± SE, 15 ± 1.4 USVs/dak) ve tedavi işleme onların oranı¹⁰üzerinde bir etkisi vardı. Gıdıklama, önce ve sonra bir enjeksiyon yordam uygulandığında bu gençlere gıdıklıyor için maruz kalan için özellikle aversiveness yordam, yönetilir olumlu bir duygusal devlet indüklenen sonucuna varıldı.

Gıdıklama önce veya sonra bir enjeksiyon tercihan--dan her ikisi de azaltılmış ve, yani, hangi zaman daha iyi olurdu eğer etkili olup olmadığını denetlemek fare yanıt gıdıklama önce sonra ve önce-sonra enjeksiyon için karşılaştırıldı. Göstergeler olumlu ve olumsuz etkiler olarak sırasıyla¹²50 kHz USVs ve Sesli çağrılar oranda ölçüldü. Sprague-Dawley Rat (erkek; 32-41 gün yaş; n = 96) ya ölçülü bir günlük IP salin enjeksiyonu (INJ) verilen veya iğne (kontrol, CON) almadan ölçülü ve aşağıdaki tedavilerden biri maruz: yok gıdıklıyor, fareler değildi dokundum önce ve sonra kısıtlama yordam (TN); (TB), önce 2 dk sonra (TA), dört köşe veya önce ve sonra (TBA) kısıtlama¹². Kısıtlama önce 2 dk içinde sıçanlarından emir kısıtlama (TB, TBA) önce gıdıklıyor alınan tedaviler üretilen en 50 kHz USVs (GLMM ANOVA, F_3,88 = 49.19, p < 0,0001; Şekil 3 c). TA ve TN fareler olmayan farklı-kısıtlama yordam daha önce üretilen USVs oranı. İşlem sırasında gıdıklama (TA, TB, TBA) alınan herhangi bir sıçan olduğunu o (TN; dört köşe değil daha daha fazla 50 kHz USV üretilen. F_3,88 50.67, p < 0,0001; = Şekil 3D). Çok fareler arasında o yordamı (TB, TBA) önce gıdıklıyor almaya daha fazla 50 kHz USVs kısıtlama (TA; daha sonra dört köşe olanlar karşılaştırıldığında sırasında üretilen p < 0.05). Prosedür sonra 2-min dönemde olduğunu o (TN; dört köşe değil daha daha fazla 50 kHz USVs (TA, TB, TBA) tüm çok grupta fareler üretilen F_3,88 = 53.64, p < 0,0001; Şekil 3E). Ayrıca, işlem sırasında dört köşe fareler daha önce kısıtlama (TB, TBA) üretilen gıdıklıyor alınmayan yapan fareler için (TN), kıyasla daha az sesli aramaları daha sonra dört köşe fareler (TA) bu diğer gruplardaki farklı değil ise (F_3,88 = 3.67, p= 0.02; Şekil 3F). Sonuçları bir IP enjeksiyon için yasaklama önce fareler gıdıklıyor işaretleri büyük olumlu etkiler öncesinde, sırasında ve sonra daha sonra sadece¹²kısıtlama gıdıklıyor yordam dönemleri arasında üretti olduğunu göstermektedir.

Hademe aşağıdaki işleme tedaviler fareler için uygulanan (Sprague-Dawley erkek; n = 32) 57-yaş 74 gün üzerinden: kafes bir hafta değiştirdiğinizde; (1) en az işleme (2) 2 dk her gün için pasif bir el maruz; (3) sosyal taklit etmek için her gün gıdıklıyor, 2 dk oynamak; (4) 2 dk her gün unreciprocated bir baskın¹¹tarafından sabitleme simüle sıçan sırtına gözü kör. Dakikadan bir IP takip enjeksiyon, fareler Tickled ve pasif tedaviler daha fazla zaman yakın araştırmacı nerede duruyordu, kafes, ön kısmında yetiştirme sıçanlarından emir asgari ve kısıtlama tedaviler (GLM ANOVA, F_{3, 27 ile karşılaştırıldığında geçirdi} 5,70, p = 0,004; = Şekil 3 g). Ayrıca, Tickled sıçanlar fareler bir insan yaklaşımı testinde 3 min için bir tanıdık veya yabancı el maruz pasif tedavisinde daha daha fazla 50 kHz USVs çıkardı (ortalama ± SE aramalar/dak, günlük dönüştürdü en az: 0.7 ± 0,26, pasif: 0,6 ± 0.18, dört köşe: 1.8 ± 0,30, Kısıtlama: 1.4 ± 0,28; F_3,28 4,04, p = 0.02 =). Böylece, pasif bir el basit varlığı habituation sıçan insanlara göre en az işleme destekli, ama gıdıklıyor insanlar¹¹doğru olumlu bir yanıt üretmek için en etkili yöntem oldu.

Şekil 1: fare yuvarlanmak oynamak davranış. (A)Dorsal kişi; (B) Pin¹⁸. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Şekil 2: 50 kHz frekans ultrasonik vocalizations modüle "trill" türü. Beş trill vocalizations 1'üretildi gıdıklıyor sırasında bir sıçan tarafından s. 17, 25 ve 70 kHz Yatay çizgiler odasında elektronik cihaz tarafından üretildi (örn., bilgisayar, mikrofon, kamera).

Şekil 3: sıçan gibi içi Periton (IP) enjeksiyonları gıdıklama önce veya birlikte, deneysel prosedürler maruz yanıt. Önce oranı 50 kHz USVs (ortalama ± SE aramalar/dak) üretilen(a)ve (yetişkin erkek rats bir enjeksiyon yordamının için en az maruz sonraB) (M) işleme veya gençlere ve pasif el (P) (T) gıdıklıyor ya da hemen önce ve sonra (T) gıdıklıyor enjeksiyon (dört tedavi kombinasyonu verimli: M-P, T-P, M-T, T-T); Cloutier vd. ¹⁰. üretilen oranı 50 kHz USVs (ortalama ± SE aramalar/dak) (C) önce (D) sırasında ve (E) kısıtlama (veya IP iğne olmadan) sonra her gün için 10 gün üst üste yok (TN) gıdıklıyor alınan çocuk erkek rats tarafından bir kez ya da daha önce (TB), sonra (TA), gıdıklama veya her ikisini de öncesi ve sonrası (TBA) yordamı; ve (F) sesli arama hızı kısıtlama sırasında üretilen; Cloutier vd. ¹². (G) süresi (ortalama ± SE s) bir IP enjeksiyon erkek rats en az, pasif, gıdıklama veya kısıtlama caretakers tarafından; işleme maruz tarafından takip 1dk sırasında araştırmacı yetiştirme Cloutier vd. ¹¹. çubuklar farklı harfler (a, b, c) ile ikili karşılaştırmalar (Tukey Kramer, p < 0,05) farklılıklar gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Faktör	Etkisi				Referanslar
İçsel
Yaş	89-92 gün eski ve fareler yaş 24-44 arasında hiçbir fark-50 kHz ultrasonik vocalizations (USVs) içinde				18, 29, 42
	148 gün eski 71 gün eski fareler için 50 kHz USVs azalma				29
	17 gün eski erkek pek çok daha fazla 50 kHz USVs 7-9 ay daha eski erkek yaptı.				43
	Hem genç hem de yetişkin olarak dört köşe fareler sadece gençler veya yetişkin dört köşe fareler karşılaştırıldığında en olumlu sonuçlar gösterdi.				10
Seks	Erkek rats, 44 ve 71 gün eski daha fazla 50 kHz USVs üretilen ama dişiler daha fazla 50 kHz USVs 148 gün eski, üretilen				29
	Erkek rats 44 ve 58 gün kadınlara göre daha fazla 50 kHz USVs üretti.				43
	50 kHz USVs 96 Juvenil uzun-Evans fareler veya 52 Juvenil Wistar fareler hiçbir cinsiyet farklılıkları				42, 44
	Daha fazla 22 kHz USVs erkeklerden daha kadın çocuk Wistar fareler üretilen				44
İnter bireysel farklılıklar	Azalan yaklaşım zaman gösterdi daha fazla 50 kHz USVs çıkardı fareler gıdıklıyor kendi kendine yönetilen, olumlu karar önyargı gıdıklıyor sonra arttı ve Hipokampal hücre çoğalması gıdıklıyor sonra arttı				27, 37, 45
	Daha fazla 50 kHz USVs daha oynak fareler üretilen				43
Zorlanma	Sıçanlarından emir farklı suşları değil bildirilen ama anekdot niteliğinde kanıtlar gösteriyor ve doğurmak gıdıklıyor onların yanıt farklı. Sıçan çizgiler üzerine yüksek gıdıklıyor karşılık 50 KHz USVs oranı düşük vs seçildiğinde ayrılmaktadır.				22, 26, 42 46
Gıdıklama önceki deneyimi	50 kHz ultrasonik USVs artan üretim				12
Dışsal
Odada mevcut yataklar kullanılıyorsa	Tanıdık yatak takımları vs üzerinde hiçbir yatak gıdıklayan ne zaman daha fazla 50 kHz USVs fareler üretilen				33
Stres	Gıdıklama 1 saat ama değil 23 saat sonra kısıtlama stres 50 kHz USVs üretim azalır, sıçanlar				47, 48
Zamanlama	Enjeksiyon daha sonra enjeksiyon gıdıklıyor daha 50 KHz USVs artırmada etkili olmadan önce fareler gıdıklıyor				12
İşleyicinin seks	Etkisiz bulundu				Panksepp, J. 2014, yayınlanmamış veri
Sıçan aşinalık işleyicisi	Fareler daha fazla 50 kHz USVs üretilen ve yakınındaki bir tanıdık için yabancı bir memorandum kıyasla daha fazla zaman harcadı				11
Deneyim gıdıklıyor işleyici / işleyicisi tarafından gıdıklıyor canlılığı	50 kHz USVs ama değil tercih ve yaklaşım davranış etkilenen imalatı				Cloutier, S. 2011, yayınlanmamış veri
Süre Pins işleyicisi tarafından / dorsal kişiler ile iğne arasındaki değişim sıklığı	Düşük frekans (talep oynamak gibi yorumlanır) nibbles 15-s iğne (kısıtlama) ile birden çok dorsal dokunma ve iğne başına 15 gıdıklıyor veren bir el daha heybetli bir el Yönetmen: s				11
İşleyicisi tarafından kullanılan Odorants (örneğin, parfüm, şampuan, tıraş kremi)	Rapor değil
Sosyal Grup boyutu	Bireysel konut olumlu yanıt-e doğru grup konut çoğu deneylerde karşılaştırıldığında gıdıklıyor arttı. Bu fark içinde belgili tanımlık ev kafes kafes arkadaşları ile grup yer alan fareler gıdıklıyor azaltılmış				7, 22, 27, 36
Işık şiddeti	1000 lux adlı gıdıklıyor 50 kHz USVs 25 Lux'a karşılaştırıldığında sınırlı.				43
Gürültü	Rapor değil
Kafes gıdıklıyor önce Temizleme	22 kHz USVs bazı Sıçanlarda indüklenen üretimi				12
Günün saati	Başına veya hafif dönem sonu gerçekleştirildiğinde 50 kHz USVs üretimi üzerinde hiçbir etkisi. Sıçanlar sonunda başlangıç/orta açık veya koyu döneminin henüz karşılaştırıldığında hafif dönem vs gıdıklıyor				Cloutier, S. 2011, yayınlanmamış veri

Tablo 1: Etkileyen veya potansiyel olarak etkileyen, gıdıklama, sıçan uzaklaşana oyun taklit etmek amacıyla bir oynak işleme tekniği yanıt-e doğru rats faktörler listesi.

Tartışma

Bu iletişim kuralı için iri fare-gıdıklıyor, vocalizations olumlu etkisini gösterge üreten ve fareler işlenir yaklaşım davranış artan etkilidir sıçan uzaklaşana oyun davranışı taklit eden bir oynak işleme tekniği bir teknik anlatılmaktadır ortak yetiştirme veya tıbbi ve araştırma IP enjeksiyon gibi prosedürler.

Sosyal oyun, sosyal iletişim, genellikle olumlu bir biçimi korkutucu durumlar^42,43duygusal tepkiler kalibrasyonu yardımcı ve esneklik için anksiyete ve depresyon⁴⁴oluşturmak için teklif edildi. Taklit eden fare sosyal oyun, gıdıklama benzer şekilde yararlı etkileri⁷gibi görünüyor. Böylece, olumlu duygusal devletler inducing başarılı olmak gıdıklıyor uygulaması için gıdıklama sırasında el "oyun ortağı olarak" hareket için tasarlanmıştır akılda tutmak önemlidir. El çekici çünkü fareler bekliyoruz ve başka bir sıçan gelen kaba oynarken zevk davranışları taklit eder. Bu nedenle, kaldırma ve sıçan iki eliyle tutarak fare oyun taklit değil ve aynı etkiye sahip olmayabilirsiniz. Aslında, laboratuvar fareler bir işleyici onları tek eliyle tutar ve onları diğer el⁴⁵ile vuruş oynak sigara kısıtlamaları önlemek öğreneceksiniz. Sıçan gıdıklıyor sırasında Ayrıca el güvenle ve assertively, canlı ve eğlenceli olurken taşımak önemlidir. Sabitleme tempolu (2-4 s/PIN) olumsuz yanıt uzaklaşana oyunda fareler arasında 22 kHz USVs¹⁸âh sabitleme neden tekrarlanan çünkü en aza indirmek gerekir tutmak.

Juvenil fareler daha eğlenceli ve daha güçlü yanıt-e doğru yetişkin fareler¹⁸yaşından gıdıklıyor göstermek olsa bile, yetişkinlikte gıdıklıyor yararları¹⁰da vardır. Fareler zaman genç gıdıklıyor da fareler üzerinde duygusal tepkileri insan varlığı için uzun süreli bir olumlu etkisi deneyim düşündüren daha sonra hayat³⁶, yararları olduğu bulunmuştur. Cinsiyet farklılıkları gıdıklıyor karşılık genç erkekler daha fazla 50 kHz vocalizations ve daha az 22 kHz vocalizations Juvenil dişilerden^{29 üreten, raporlar Juvenil fareler46,47, hiçbir cinsiyet farklılıkları ile tutarsız ,48,39}ve aynı yaşlı erkekler²⁹, benzer bulgular sosyal oyun⁴⁹için daha daha fazla 50 kHz vocalizations üreten büyük kadın.

Gıdıklama tekniği etkinliğini fare hareketi desen ve seslendirme kullanarak tespit edilebilir. Fareler kemirmek ve gıdıklama¹¹takip yayın 15-s dönemlerinde işleyicisi'nın parmak yalamak. Nibbles genç sıçanlar²²oyun-talep davranış olarak açıklanan ışık, zararlı olmayan alıntılar vardır. İşleyici işleme kutunun etrafında el taşındığında, fareyi takip edecek ve bunu takip. Fareler, özellikle genç olanlar, aynı zamanda çalıştırın, gıdıklama nöbetleri arasında kutunun etrafında koşmak ve kaba oyun karakterize çalışan etkinlik için benzer gıdıklama bir müddet sonra faaliyete ayrı bir artış gösteriyor. Eğer fare yayımları, PIN süresini azaltma konusuna gibi gıdıklama tekniği, düzeltilmesi sırasında hareketsiz kalır veya daha az pimleri, veren muhtemelen gerekli. Bu iğneler ilk gıdıklama oturum için kısa süreli vermek en iyisidir. Fareler gıdıklıyor için alışmak gibi süresi ve pin sayısı artırılabilir. Fareler Triller, gıdıklama sırasında ve gıdıklama nöbetleri arasında da dahil olmak üzere 50 kHz USVs utter. 15-s bültenleri sırasında üretilen Trillerle sayısında dereceli bir artışı günlük gıdıklıyor⁴⁷sabitleme önce ilk iki hafta içinde görülebilir. Bireysel farklılıklar çok fareler içine yüksek ve düşük differentially stres yanıt arayanlar, anksiyete ve anhedonia^46,47,50bölünmesine olanak sağlar.

Gıdıklama sıçan başarıyla olumlu etkiler¹³gıdıklıyor sırasında 50 kHz USVs biçilen dayalı üretim olarak ikna etmek için kullanılmıştır. Son zamanlarda fareler insanlarda korku azaltmak ve onların aversiveness tıbbi ve enjeksiyon gibi araştırma prosedürler azaltmak için bir teknik olarak uygulanmıştır. Kanıt her gün hayvan başına sadece 2 min için sağlanan zaman gıdıklıyor insanlar¹¹kaçınma azaltmak için etkili ve pratik bir yöntem olduğunu, göstermektedir. Yaklaşık 60 dakika her gün için 2 dk günlük gıdıklıyor^51,52,53, ama muhtemelen pratik için Juvenil fareler birlikte fareler arasında sosyal oyun tam etkilerini çoğaltmak için çok kısa oynayacak düşünüyor. Genellikle onların fareler laboratuvar hademe daha işlemek için daha fazla zamana sahip, sahipleri evde beslenen hayvan iri fare, rats fareler olumlu yanıt vermeye devam sürece ek gıdıklıyor ile sağlayabilir. Burgdorf ve ark. üzerinde dayalı ^{44 , 45}, kaba oyunun ilk 15 dk fareler için en olumlu gibi görünüyor. Buna karşılık, özellikle haklı bir sebebi onlar sosyal bir grup içinde muhafaza edemez eğer fareler için dönem-in ilâ 15 dk, gıdıklamak kullanmak daha etkili olabilir. Ancak, "eğitim beklenmedik"³⁸olarak oyun dayanarak, burada açıklanan yöntemi olabilir daha değişik bir teknik daha uzun oyunculuk sürdürebilmek için ihtiyaç duyulan oturumları gıdıklıyor. Uyku ve beslenme gibi biyolojik açıdan önemli diğer faaliyetler zayıflatmak değildir sürece ek gıdıklama oturum her gün de yararlı olabilir. Laboratuvar ve evde beslenen hayvan rats refahını artırmak için katkıda yanı sıra, açıklanan standart gıdıklama tekniği devam eden araştırma sosyal oyun ve bileşenlerinin etkilerini anlama amaçlı kullanılabilir üzerinde davranış, sosyal ve beyin geliştirme.

Gıdıklıyor enjeksiyon çevreleyen gerçekleştirildiğinde, özellikle ne zaman kombine ile önceki gıdıklama deneyim (bitiş 40-50 gün önce), o 50 kHz USV önce ve sonra enjeksiyon ve oranları arttı, enjeksiyon¹⁰ sırasında sesli arama ücretleri azaltılmış . Böylece gıdıklıyor IP enjeksiyon, özellikle gençlere¹⁰gıdıklıyor için alışık Sıçanlarda yan etkilerinin hafifletilmiş gibi görünüyor. Gıdıklama sesli aramaların biçilen dayalı üretim olarak enjeksiyon ile ilgili rahatsızlık engel değil olsa bile, sırasında ve sonrasında kısıtlama yordamı¹²daha önce kontrol durumuna göre 50 kHz USVs arttı. 50 kHz USV verilerine göre gıdıklama uygulamak için en etkili zaman noktası hemen önce yerine kısıtlama yordamı¹²sonra oldu. Enjeksiyon yükseltilmiş o pozitif etkisi bir etkilenmişimdir bulamadan gıdıklama fareler sırasında yordamı¹²etkiler. Gıdıklıyor bu nedenle rutin tıbbi prosedürleri sıçan refah ve davranışı üzerinde potansiyel olumsuz etkileri en aza indirebilirsiniz. Daha fazla araştırma nasıl teknik etkili diğer enjeksiyon teknikleri ve diğer tıbbi/deneysel prosedürler ile eşleştirilmiş belirlemek gereklidir.

Genel olarak, sıçan gıdıklama sonuçları olumlu sonuçlar gibi 50 kHz USV ve yaklaşım davranış üretimi artmış, hem de insanlar kaçınma ve işleme direnci azalmıştır göstermiştir. Fare fare refah iyileştirilmesi ve olumlu duygusal Birleşik Modelleme için uygun bir yöntem olarak gıdıklıyor tavsiye ediyoruz.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Masa veya tezgah			Belirli bir marka önerilmez.
Taşıma kutusu (sıçan ev kafesi veya başka bir muhafaza)Belirli			bir marka önerilmez.
Yatak takımı veya başka türde yumuşak örtü			Belirli bir marka önerilmez.
Eldiven (ince laboratuvar eldivenleri)			İsteğe bağlı.
Zamanlama cihazı	Deltaworks	Aralık Zamanlayıcısı: HIIT Antrenmanı için Zamanlama, Antrenmanlar https://itunes.apple.com/us/app/interval-timer-timing-for-hiit-training-workouts/id406473568?mt=8	İsteğe Bağlı. Herhangi bir zamanlayıcı işe yarayacaktır, ancak birden fazla fareyi gıdıklıyorsanız bir aralık zamanlayıcısı kullanmak uygun olacaktır.
Yarasa dedektörü veya USB mikrofon gibi ultrasonik mikrofon	Magenta Electronics Ltd	Bat4 Yarasa Dedektörü https://www.magenta2000.co.uk/acatalog/Bat_Detector_Bat4.html	İsteğe bağlı. Eflatun yarasa dedektörü nispeten ucuzdur ve kullanımı kolaydır, ancak aynı anda yalnızca bir aralıktaki sesleri algılayabilir.
	Dodotronic	Ultramic 200K http://www.dodotronic.com/ultramics/?v=7516fd43adaa	İsteğe bağlı. Bu mikrofon deneylerimizde iyi çalıştı. Ultrasonik mikrofonlar için başka birçok seçenek vardır.
Biyoakustik yazılım	CIBRA	SeaWave http://www-3.unipv.it/cibra/seawave.html	İsteğe bağlı. Sınırlı kayıt yeteneklerine sahip ücretsiz yazılım.
	CIBRA	SeaPro http://www-3.unipv.it/cibra/seapro.html	İsteğe bağlı. Bu yazılım kapsamlı kayıt yeteneklerine sahiptir ve çalışmalarımızda iyi çalışmıştır. Biyoakustik mikrofonlarla çalışan başka birçok yazılım paketi vardır.