Burada portal hipertansif sendromu sıçanlarda karakterize için portal basınç, splanchnic kan akımı ve sistemik hemodinami gibi hemodinamik parametrelerin invaziv ölçümleri için detaylı bir protokol açıklayın.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sirozlu fareleri Portal hipertansif sendromunda invaziv hemodinamik karakterizasyonu
Bu makalede
Özet
Özet
Bu portal hipertansif sendromu karakterizasyonu için sirozlu fareleri invaziv hemodinamik ölçümlerde açıklayan ayrıntılı bir protokoldür. Portal hipertansiyon (PHT) siroz nedeniyle karaciğer hastalığı olan hastalarda en ciddi komplikasyonlar sorumludur. Portal hipertansif sendromu tam resim artan intrahepatic vasküler direnç (IHVR), hyperdynamic dolaşımı ve artmış splanchnic kan akımı nedeniyle artan portal basıncı (PP) ile karakterizedir. İlerici splanchnic arteriyel vazodilatasyon ve artmış kardiyak çıktı yüksek kalp hızı (HR) ama düşük arteriyel basınç ile karakterize portal hipertansif sendromu.
Roman terapiler PP azaltmak için bu amaçla tarafından hedefleme ya IHVR Şu anda geliştirilmekte olan veya splanchnic kan akımı artmış — ama yan etkileri üzerinde sistemik hemodinami oluşabilir. Böylece, portal venöz, splanchnic ve sistemik Hemodinamik parametreler detaylı karakterizasyonu, ölçüm PP, portal venöz kan akımı (PVBF), mezenterik arteryel kan akımı, ortalama arter basıncı (Harita) ve insan kaynakları da dahil olmak üzere için gereklidir preklinik PHT için yeni tedavi etkinliğinin değerlendirilmesi. Video makalemizi sirozlu fareleri invaziv hemodinamik ölçümleri gerçekleştirmek için yapılandırılmış bir protokol ile okuyucu sağlar. Özellikle, biz femoral arter ve portal ven yoluyla bir ileocolic ven kateterizasyonu ve portal venöz ölçümü tarif ve splanchnic kan akımı perivasküler Doppler ultrason akışı probları ile. Farklı fare modelleri PHT temsilcisi sonuçları gösterilir.
Giriş
PHT patolojik olarak artan kan basıncı hastalarda siroz atardamarında kanama ve asit1gibi ciddi komplikasyonlara neden olabilir portal venöz sistem tanımlı. Süre öncesi hepatik (Örneğin, portal ven trombozu) ve sonrası hepatik (Örneğin, Budd-Chiari sendromu) PHT nadirdir, karaciğer sirozu nedeniyle intrahepatic PHT PHT2en sık nedeni temsil eder.
Karaciğer sirozu PP öncelikle yükseltilmiş IHVR3sonucu olarak artırılır. İleri aşamalarında PHT artmış kardiyak çıkış nedeniyle artan PVBF tarafından ağırlaştırılmış ve sistemik ve splanchnic vasküler direnci azalmıştır — portal hipertansif sendromu4tanımlama. Ohm Kanunu (ΔP = Q * R) IHVR ve kan akışı s5' e ile orantılı olduğunu gösterir. Hastalarda, doğrudan PP riskli ve düzenli olarak gerçekleştirilen ölçümdür; Bunun yerine, hepatik venöz basınç gradyan (HVPG) s6,7dolaylı bir ölçüt olarak kullanılır. HVPG ücretsiz hepatik venöz basıncı (FHVP) hepatik ven8' yerleştirilen bir balon kateter kullanarak ölçülen kamalı hepatik venöz basınç (WHVP), çıkarılarak hesaplanır. Fizyolojik HVPG bir HVPG ≥10 mmHg klinik olarak anlamlı portal hipertansiyon (CSPH) tanımlar ve atardamarında kanama, asit ve hepatik ensefalopati9 gibi PHT ile ilgili komplikasyon riski gösterir iken 1 – 5 mmHg arasında değişmektedir . (Örneğin, HVPG) PP PHT önem, PHT, diğer bileşenler hakkında bilgiler için en uygun parametre olmasına rağmen hyperdynamic dolaşım (HR, harita), önem splanchnic/mezenterik arteryel kan akımı ve IHVR, için önemlidir PHT farklı temel mekanizması kapsamlı bir anlayış elde edilir.
Böylece, insanlarda dolaylı ölçümleri PP aksine fareler için tanıtılan metodoloji PP doğrudan bir ölçü avantajı sunuyor ve portal hipertansif sendromu karakterize ek Hemodinamik parametreler kayıt sağlayan. Ayrıca, PP doğrudan ölçülmesi karaciğer fibrozis (IHVR önemli bir belirleyici) miktarı mükemmel bir bütünleştirici okuma ve fibrozis miktar için karaciğer dokusu örnekleme hataları ile ilgili bazı sınırlamalar üstesinden gelir.
Cerrahi safra kanalı ligasyonu (BDL), toksin kaynaklı karaciğer hasarı (yani, karbon tetraklorür, thioacetamide veya nitrozamin yönetim tarafından) ve diyet kaynaklı metabolik karaciğer sirozlu PHT en sık kullanılan kemirgen modelleri içerir hastalık modelleri. Prehepatik (sirozlu olmayan) PHT kısmi portal ven ligasyonu (PPVL)10tarafından indüklenen.
Küçük kemirgen fareler, hamster, fare veya tavşan, gibi sunulan yöntem için uygundur ve nispeten düşük bakım maliyeti ile ilişkilidir. Buna rağmen tüm hemodinamik değerlendirmelerinin fareler, daha iyi doğruluk ve tekrarlanabilirlik sonuçlarının gerçekleştirmek için uygun fareler veya daha büyük kemirgen hayvan boyutu bariz avantajı nedeniyle görülür. Buna ek olarak, belirli mikro- ve aygıtlar benzer Hemodinamik parametreler farelerde elde etmek için ihtiyaç vardır. Son olarak, fareler alt ilişkili morbidite ve mortalite ile daha sağlam ve böylece, bırakma oranları farelerde sıçanlarda düşük olasılığı daha yüksektir.
Sunulan metodoloji (yani, anti-fibrotik veya anti-inflamatuar ilaçlar) karaciğer hastalığının spesifik tedaviler değerlendirmek için çok uygundur veya bu etki vasküler sesi ve/veya endotel biyoloji roman farmakolojik yaklaşımlar; ve böylece, PHT olası etkisi Hemodinamik parametreler.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm yöntem tanımlamak burada Viyana Tıp Üniversitesi ve Avusturya Bakanlığı Bilim, araştırma ve Ekonomi (BMWFW) Etik Komitesi tarafından onaylanmış olması. Yordamlar bir operasyon odasında aseptik şartlarda gerçekleştirilen veya benzer olmalıdır cerrahi müdahaleler hemodinamik ölçümleri temsil bu yana çalışma alanı temiz. Genellikle, steril koşullarda çalışma önerilir. Bir inhalasyon anestezi, ameliyat odası iş güvenliği için yeterli havalandırma düşünün. Bir saat süre 40-50 min/hayvan vardır durumda bu protokol için sunulan tüm hemodinamik veriler dikkate alınacak.
1. cerrahi öncesi hazırlıklar
- Açmak ve basınç güç çeviriciler üreticinin yönerge göre de dahil olmak üzere elektronik çok kanallı kayıt cihazı kalibre.
- Ultrasonik akış sondaları (1 mm ve 2 mm) köprü amplifikatör bağlamak.
- Steril fizyolojik serum çözüm, vücut ısısı, dokular veya gazlı bez sıkıştırır nemlendirme için 37 ° C ısıtılmış bir rezervuar hazırlayın.
- Ağırlık-düzeltilir anestezi ve vücut ağırlığına bağlı hemodinamik parametreler normalleştirme sağlamak için hayvan vücut ağırlığı kaydetmek.
- Tüm ekipman bir inhalasyon anestezi için hazırlayın.
Not: inhalasyon anestezi ve/veya gerekli ekipman sitesinde veya uygun değil ise, daha sonra ketamin ve xylazine kullanarak enjeksiyon anestezi kullanılabilir (80-100 mg/kg ketamin ile 5-10 mg/kg xylazine fizyolojik serum çözümünde, mayi (IP)). Bir ketamin (azaltılmış doz 20-30 mg/kg, kas içi (sohbet)) 30-45 dakika sonra yeniden dozaj sürekli uçak cerrahi anestezi ikna etmek gereklidir. - Hayvanın inhalasyon anestezi için bir indüksiyon kutusunu kullanarak kısa vadeli isoflurane anestezi altında (5 dk, % 5 v/v isoflurane, 3-4 L O2-akış). Dikkatle kutuyu eğilme ve hayvan hareketsizlik durumuna göre anestezi derinliği kontrol edin.
-
Uygun bir kendi kendine yapılan Endotrakeal tüp fareyle tüp takacağım.
Not: entübasyon tekniği için yeni olan personel için analjezi/anestezi (adım 1,10) hemen sonra kısa vadeli inhalasyon anestezi entübasyon için ekstra zaman sağlamak için verilebilir. Bir hayvan özgü sağlamlılık inhalasyon anestezi için başka bir seçenektir.- Kendi kendine yapılan Endotrakeal tüp sizden bir değiştirilmiş periferik venöz kateter (14 G) kullanın. İşleme kanatlarını kesti ve bir yapışkan bant döngü sıçan yanak çıkığı Endotrakeal Tüpün (Şekil 1A) önlemek için posterior fiksasyon için yapıştırmayın.
- Değiştirilmiş bir arteryel kanül self-made kılavuz tel aygıttan bir kılavuz tel tutucu ve uygun künt uçlu kablo (Şekil 1B) kullanın.
- Uygun entübasyon masa uygun hayvan almak için kullanın. Hayvan açılı pozisyonu sırtüstü pozisyonda kafa ile yerleştirin.
Not: hiçbir entübasyon Resepsiyon varsa, dikkatle tablonun kenar üzerinde gerilmiş boyun ile sırtüstü pozisyonda hayvan için mümkün. Ancak, bu yordamı yaralanma riski nedeniyle önerilmez. - Fareyi bir tarafında bir sütür kesici dişler arkasında düzeltmek ve yavaşça, dikişi (Şekil 1 c) diğer tarafta bağlayarak hayvanın boyun germek.
- Önceden trakeal ventral yaka alan odaklanmış ışık demeti tarafından aydınlatmak. Albino hayvanlarda özellikle, ses telleri geliştirilmiş görselleştirme ve hızlı entübasyon için izin vermek için deri yoluyla ışıklı olun.
Not: bir hayvan özgü Laringoskop pigmentli hayvanların entübasyon için kullanın. - Dilini tut ve yavaşça iki parmak kullanarak çekin.
- Lidokain (pompa sprey) tarafından tedavi bir pamuk bud dikkatle gırtlak alan anestezi için kullanın.
- Hayvan Endotrakeal tüp vokal kıvrımları arasında ve kılavuz tel aygıt (Şekil 1 d) desteği kullanarak nefes borusu içine ekleyerek tüp takacağım.
- Kılavuz tel aygıtı kaldırın.
- Tüp vantilatöre bağlamak.
- Havalandırma için hayvan uygun ayarlarla başlatmak (1 L/min O2-akış, otomatik akış 90/dak; = inspiratory basınç: 18 mmHg; DİKİZLEMEK: 3 mmHg, ben / E = 1:2) ve onay için uygun entübasyon.
Not: Eğer enflasyon mide kaydetti, tüp kaldırın ve yeniden deneyin. Ayrıca, solunum ritmi solunum faaliyete karşılaştırmak veya iki parmağınızı karın duvara doğru mide potansiyel enflasyon değerlendirmek için mide koyun.
- İsoflurane anestezi 0.5-1.0'de başlamak % v/v ve 1 L/dk O2-akış sonra hemen başarılı entübasyon (Şekil 2A).
- Endotrakeal tüp transbuccal dikiş yanak ve tüp yapıştırılmış yapışkan bant döngü ile sabitleyin.
- Ek anestezi ve analjezi iki 1 mL şırınga, Örneğin, ketamin (100 mg/kg) IP (23 G kanül) [veya kaudal uyluk kas (30 G kanül) ikili iğne enjekte birimi (doz) dağıtma tarafından sohbet] yönetmek ve piritramide (2 mg/kg) cilt altı (SC) enjeksiyonla (23 G kanül). Sohbet enjeksiyon enjeksiyon yeri (Şekil 2B) başına maksimum hacmi unutmayın.
- Göz merhem uygulamak. Karın bölgesi ve her iki iç uyluk vücut saç kırpın. Cilt dezenfekte.
Not: Her iki iç uyluk femoral arter kateterizasyonu bir tarafta başarısız HR ve harita ölçmeler için kontralateral femoral arter kullanılmasına izin veren traş. Tıraş daha sonraki bir zamanda noktada cerrahi alan kirletmek saç neden olabilir. - Hayvan bir ısıtma yastığı (38 ° C) üzerine sırtüstü pozisyonda yapışkan bant (Şekil 2C) ile düzeltmek.
- Hayvan sürekli olarak, Örneğin, vücut sıcaklığını bir rektal sıcaklık probu (Şekil 2B) kullanarak izleyin.
- Anestezi derinliği Kapak kapatma refleks ve ayak çimdik testi herhangi bir müdahale veya ameliyat öncesinde tarafından değerlendirmek.
2. insan kaynakları ve harita ölçüm
- Femoral arter varsayılan konumunu yukarıda iç uyluk (select bir tarafı) cilt cilt doku forsepsi tarafından kaldırarak deşmek ve yaklaşık 2 cm cilt alanını kaldırmak uzunluğa göre Mayo makas (3A rakam).
- Ortaya çıkarmak ve açık açık bir hemostat karmaşık boyunca tekrar tekrar açarak bağ dokusu (adventitia) femoral arterin içerir arter-damar-sinir kompleksi incelemek.
- Arter-damar-sinir kompleksi ~1–1.5 cm (Şekil 3B) boyunca çevredeki dokusundan incelemek.
- Gerekirse, bir daha iyi görüş ve diseksiyon için subkutan/perivasküler yağ çıkarmak.
Not: yaralı kan damarları kanamalar neden olabilir beri subkutan/perivasküler yağ kütikül makas tarafından kaldırırken dikkatli olun. Kanama kaydetti, basınç kanama alanda küçük bir gazlı bez kullanarak uygulamak veya bir hemostat tarafından kanamayı durdurmak. - Femoral arter femoral ven ve sinir ayrı iki yüksek hassasiyetli 45 ° açılı geniş nokta forseps ile (femoral ven en medial yapısı ve femoral arter bulunur düşünün daha yanal) (Şekil 3 c-F).
- Bir bağ femoral arter mümkün olduğunca distal ve kavisli bir kelepçe üzerinde dikiş nazik boyuna çekiş femoral arter ile uygulamak için kullanın.
- İkinci (ama değil kapalı düğüm) önceden düğümlü dikiş femoral arter olarak proksimal yerleştirmek mümkün (Şekil 3 g).
- Heparinized steril fizyolojik serum çözüm (5 mL şırınga ve 23 G künt kanül) ile boşaltılan eğimli (~ 45 °) kesme ipucu ile uygun kateter (sıçan femoral arter için PE-50) hazırlayın. Atardamar basıncı ve İK okuma (Şekil 3 H) engel olarak hiçbir hava kabarcıkları kateter içinde olduğundan emin olun.
- Femoral arter arteryel kan akımı (Şekil 3I) geçici olarak durdurmak için bir mikro kelepçe kullanma maruz kalan bölümüne proksimal ucunda sıkıştırın.
- Arteryel duvar disseke bölümünün distal bir yerde bükülmüş kanül (23 G) kullanarak femoral arter (Şekil 3J) altında destekleyici bir mikro metal spatula yerleştirerek süre sorgulamaktı.
- Dikkatle femoral arter eğimli ucu perforasyon yukarı bakacak şekilde kateterin içinden catheterize. Peşin Mikro kelepçe olana kateter yaklaşık olarak (Şekil 3 K).
Not: bir daha proksimal ikinci girişimi durumunda başarısız kateterizasyon ilk denemede, femoral arter gerçekleştirilebilir (2.8 adımda başlar). Damarı yırtığı veya şiddetli kanama ortaya çıkarsa, ligate ya da daha fazla kan kaybı önlemek mümkün olduğu kadar proksimal arter kelepçe. Kan kaybı çok az ise, kontralateral femoral arter catheterizing girişimi (2.1 adımda başlar). - Mikro kelepçe ve pulsatil arteryel kan akışı içine kateter (Şekil 3 L) için onay açın.
- Daha fazla kan akını kateter kateter çıkış bloke ederek önlemek.
- Kateter intraluminal konumunda hazırlanan proksimal bağ femoral arter ve tanıtılan kateter (Şekil 3 M) etrafında kapatarak düzeltin.
- Tekrar tekrar durulayın ve uygun damar içi yerleşim değerlendirmek için femoral arter kateter Aspire edin. Emişli kan sütunundaki arteriyel nabız-meli var olmak kolayca fark edilebilir.
- Kateter pozisyonu çıkığı önlemek ve kateter (Şekil 3N) boyuna konumunu sağlamak için distal ip uçlarını kullanarak gemi düzeltmek.
- Ayrıca, yakın hayvan güvenli ve kaza yerinden çıkması önlemek için cerrahi masada kateter teyp.
- Hava kabarcıklarının oluşumunu kaçınırken fizyolojik serum eriyik-e doğru basınç detektörler dolu kateter takın.
- İK ve dijital arabirimi (Şekil 3O) kullanarak harita kaydetmeye başlamak.
- Bir küçük ıslatılmış gazlı bez kompres (Şekil 3 P) ile iç uyluk üzerinde maruz kalan alanı kapsamaktadır.
- Hyperdynamic (HD) Endeksi hesaplanır: HD harita/HR =.
Not: Gelişmiş PHT içinde sigara-portal hipertansif hayvanlar ile karşılaştırıldığında HD Dizin yükselmiş. Ancak, HD Dizin ameliyat sırasında bir artış da kanama, Hipovclemi ya da ağrı gösterebilir. Kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde kateter tespit edildiğinde, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu yetersiz anestezi derinliği hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.
3. superior mezenterik arter kan akımı (SMABF)
-
Medyan laparotomi (Şekil 4A-C) gerçekleştirmek
- Doku forseps ile cilt katmanı kaldırın 5-6 cm xiphoid ve Kaldır bir Mayo kullanarak cilt ince bir şerit makas linea alba xiphoid kadar ulaşıldığında.
- Orta cilt kesi, doku forsepsi linea boyunca tarafından kas katmanı kaldırın alba splanchnic organlar ve karın duvarı arasındaki mesafe oluşturmak için.
- Periton boşluğuna linea, bir neşter ile karın duvarı incising tarafından açık alba. Doku forsepsi linea boyunca Metzenbaum makas ile tarafından karın duvarı kaldırma sırasında açılış genişletmek alba cilt katmanı olarak aynı mesafe.
- Dikkatle coecum ile başlatarak ıslak pamuk tomurcukları kullanarak bağırsak kazı ve steril fizyolojik serum çözüm kesi (Şekil 4 d-F) yanındaki batırılmış bir büyük gazlı bez kompres yerleştirin.
- Bağırsak gazlı bez sıkıştır sarın ve steril fizyolojik serum çözüm (Şekil 4 g) ile nemlendirilmiş emin olun.
- Bulun ve superior mezenterik arter bulaşmasına neden.
- Superior mezenterik arter iki self-made künt 'Schwabl' ile teşrih-kanca: arter ilk kanca ile Asansör ve ikincisi aynı doku tünelinden yerleştirmeyi deneyin. Superior mezenterik arter akışı sonda (1 mm)-ebilmek var olmak konulmak çevrede o (Şekil 4 H-K) emin olmak için 5 mm mesafe boyunca maruz.
Not: tercih edilen, bir hassas 45° açılı geniş nokta forseps arter de kaldırmak için kullanılabilir. 'Schwabl'-kancalar kanca şekle bükülmüş açık açık kırık ipuçları ile 30 G kanüller hazır. Kollateral damar kapsamlıysa, 'Schwabl'-superior mezenterik arter dissekan önlenebilir iken kanca de¤erler kanamalar daha güvenli olabilir. Superior mezenterik arter hazırlarken kanama meydana gelirse, 1-2 dk hafif basınç ile kanama sitesine bir küçük gazlı bez kompres yerleştirin. Küçük kanama genellikle hızlı bir şekilde durur; her zaman doku düzenli olarak (adım 1.12) nemlendirme için unutmayın. Superior mezenterik arter kendisi zarar gelirse, hemodinamik değerlendirme tamamlanmalıdır. - Ultrasonik akış sondanın sensör için ultrason jeli uygulayın ve bunu splanchnic mezenterik arter ile ekleyin. Superior mezenterik arter (Şekil 4L-M) doğal yol hizalayın.
- Akış sonda (1 mm) kapatır ve yavaşça gerekirse ek Ultrason jeli sinyal kalitesini artırmak için Doppler sensörüne uygular. Bunu Ultrason jeli ve bir künt uçlu kanül (18 G) (Şekil 4N-O) ile dolu bir şırınga (20 mL) kullanarak.
Not: akış sonda de gemi doğal seyri değil hizalanmışsa, gerginlik vasküler daralma ve böylece, türbülanslı akış, akış ölçüm doğruluğunu azaltır neden olabilir. Geminin doğal yol boyunca akışı sonda yönünü yeniden hizalayın ve sonra yeterince akışı sonda uygun bir konumda düzeltmek deneyin. - SMABF ölçmek ve pulsatil akışı sinyal femoral arter kayıt sistolik doruklarına için uygun olarak değerlendirin.
Not: kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde tespit edildiğinde kateter, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre anestezi yetersiz derinliği neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma. - İstikrarlı bir akış sonda (1 mm) konumunu bulmak ve akış inceleyebilirsek tamir. SMABF daha fazla akış sonda (1 mm) (Şekil 4 P) manipülasyon olmadan kaydetmeye başlamak.
4. PVBF
- Bulun ve portal ven karaciğer Hilus (Şekil 5A) yakın olduğunu bıçaklanmasından dorsal yüzüne bulaşmasına neden.
- Yavaşça bir yüksek hassasiyetli 45 ° açılı geniş nokta forseps kullanarak çevredeki dokusundan portal ven teşrih: portal ven yavaşça ve sürekli olarak bir doku (5B rakam) oluşturmaları için portal ven altında forseps iterek yalıtmak.
Not: bir kanama periportal dokudan portal ven hazırlarken ortaya çıkarsa, 1-2 dk pamuk bud kullanarak kanama sitesine hafif basınç uygulayın; Bu kez kanamayı durdurur. - Tünel yüksek hassasiyetli 45 ° açılı geniş nokta forseps yavaş yavaş açarak büyütün ve portal ven perivasküler akışı sonda (2 mm) (Şekil 5C, D) yerleşimini izin vermek için 5-6 mm bir mesafe boyunca ortaya çıkarmak.
- Ultrasonik akış sondanın sensör için ultrason jeli uygulayın ve bunu doğal güzergâhı (Şekil 5E) ile uyumlu portal ven ekleyin.
- Akış sonda (2 mm) kapatır ve gerekirse, yukarıda açıklanan (adım olarak 3,7) ek Ultrason jeli uygular (Şekil 5F).
- Akış sonda portal ven (Şekil 5G) etrafında sıkıcı olmayan bir şekilde yerleştirildiğinden emin olun.
Not: akış sonda de gemi doğal seyri değil hizalanmışsa, gerginlik vasküler daralma ve böylece, türbülanslı akış, akış ölçüm doğruluğunu azaltır neden olabilir. Geminin doğal yol boyunca akışı sonda yönünü yeniden hizalayın ve sonra yeterince akışı sonda uygun bir konumda düzeltmek deneyin. - İstikrarlı bir akış sonda (2 mm) konumunu bulmak ve akış inceleyebilirsek tamir. Sonra PVBF (Şekil 5 H) kaydetmeye başlamak.
Not: kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde tespit edildiğinde kateter, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre anestezi yetersiz derinliği neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.
5. S
- Bir sonda (sıçan mezenterik damarların için PE-50) ile bir eğimli (yaklaşık 45 °) hazırlamak steril fizyolojik serum çözüm (5 mL şırınga ve künt 23 G kanül) aktarılmadan kesme ipucu. Onlar s okuma (Şekil 6A) engel olarak kateter içinde hiçbir hava kabarcıkları olan dikkat edin.
- Bağırsak ıslak eldiven ve parmak (Şekil 6B) dağılmış yer ile başa.
- İnce bağırsak (Şekil 6C) yakın mezenterik vasküler yatağın görünümünü en iyi duruma getirme.
- Portal ven (vena ileocolica - vena mesenterica superior - vena portae) önde gelen ana venöz mezenterik damarları tanımlayın.
- Kateterizasyon için erişilemez ileocolonic damarın uygun bir bağlantı bulmak.
- İlk kateter mezenterik dokusuna bıçaklanmasından visseral periton yakın kateterizasyon için seçilen vasküler kavşak perfore tarafından sopa.
- Gemi kavşak hafif bir izlenim görülür kadar dikkatle kateter daha yakın eğimli ucu ileocolic ven bir birleşme için ilerlemek (Şekil 6D).
- Son olarak, birleşme geminin rota uygun venöz sistemi gemilerin geçiş açıyla vasküler duvar perfore tarafından catheterize. (Şekil 6E).
Not: ileocolic ven kateterizasyonu kanama meydana gelirse, kanama alanda bir küçük gazlı bez kompres ile bir başparmak basın kullanarak. Bu basınç kanamayı durdurmak 1-2 min için sağlanmalıdır. Daha sonra bir daha proksimal ileocolic ven şubesine kateter eklemeye çalışır. - Kateter ilerlemek dikkatle daha ven (Şekil 6F) perfore olmadan portal ven için ana venöz damar yolu birlikte.
Not: kateter portal ven akışı sinyal aktarımında önlemek için ve portal ven perforasyon önlemek için ana dalı yerleştirilen akışı sonda için yeterli bir mesafe tutun. - Hava kabarcıklarının oluşumunu kaçınırken fizyolojik serum eriyik-e doğru basınç detektörler dolu kateter takın.
- PP kaydetmeye başlamak.
- Aynı anda birkaç dakika (Şekil 6G, H) istikrarlı koşullar altında tüm Hemodinamik parametreler kayıt. İsteğe bağlı olarak, portal venöz kateter doku yapıştırıcı kullanarak yerde sabit ve bağırsak karın boşluğuna yeniden konumlandırılabilir.
Not: kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde tespit edildiğinde kateter, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre anestezi yetersiz derinliği neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.
6. IHVR
- Hayvan ödün sonra karaciğer ağırlığı ölçmek. IHVR hesaplamak: IHVR PVBF/s. Normalize = karaciğer ağırlığı bu PVBF değerini.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Hayvan modeli ve karaciğer hastalığı şiddetine bağlı olarak, PHT derecesini ve portal hipertansif sendromu şiddeti farklı (Şekil 7) olduğunu.
BDL modeli biliyer siroz nedeniyle Histiositoz neden olur. Buna göre zaman ve bir hyperdynamic üzerinde s artırır dolaşım geliştirir, İK artış ve harita azalma görüldüğü gibi. Sirozlu hayvanlarda, SMABF, PVBF ve IHVR da önemlisi hepatik ve hemodinamik değişikl...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
S ana sonuç parametresi için portal hipertansif sendromu değerlendirilmesi ve temel siroz şiddetini yansıtır. Matris ifade (Örneğin, fibrozis) ve (nedeniyle hepatik ifade vasoconstrictors artmış ve kavramaları vazodilatör düşmüştür) sinüsoidal vazokonstriksiyona artan IHVR neden olur. Birden çok preklinik11,12,13,14 ve klinik çalışmalar15,
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Bizim araştırma projeleri sırasında veteriner hekimler, hemşireler ve hayvan sahipleri, Merkezi Biyomedikal araştırma sürekli destek için teşekkür ederiz. Yazarlar bu protokolün tüm gözden geçirenlerin önemli giriş kabul eder. Bazı araştırma finanse Avusturyalı Gastroenteroloji Derneği ve Hepatoloji (ÖGGH) PS "Genç Bilim Ödülü" ve "Skoda Ödülü", Avusturya toplum iç hastalıkları için TR tarafından.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Instruments | |||
| LabChart 7 Pro yazılım | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA& | nbsp;- | Software |
| ML870 PowerLab 8/30 | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA | - | >Elektronik çok kanallı kaydedici |
| MLT0380/D | ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA& | nbsp;- | Basınç dönüştürücü (x2: Portal Basınç ve Arteriyel Basınç için) |
| ML112 Dörtlü Köprü Amplifikatör | Cihazları, Colorado Springs, CO, ABD& | nbsp;- | Köprü amplifikatörü |
| TS420 | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, ABD | - | Debimetre modülü |
| Biyolojik Araştırma Aparat 7025 | UGO BASILE S.R.L., Comerio, İtalya | -< | em>Ventilatör |
| Vapor 2000 | Drä ger Medikal AG & ve Tic. A.Ş. KG, Lü beck, Almanya | - | Isofluran Vaporizatör |
| Transonik sistemler için perivasküler problar (sıçan) (Superior Mezenteric Arter) | Transonik Sistemler A.Ş., Ithaca, NY, ABD | Ultrasonik akış probu (1mm) | |
| Transonik sistemler için perivasküler problar (sıçan) (Portal Vein) | Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, ABD | Ultrasonik akış probu ( 2mm) | |
| entübasyon için 1. & temiz cilt kesileri için 2. | - | -< | em>Mayo makas [x2] |
| Metzenbaum makas | - | - - | |
| kütikül makası | - | - | - - |
| e.g. Adson Brown doku forseps | - | - | Doku Forseps |
| Yüksek hassasiyetli 45 açı geniş nokta forseps [x2] | - | ;- - | |
| Hemostat [x4] | - | - | ;- - |
| e.g. Mikulicz periton klempi | - | -< | em>Kavisli kelepçe |
| ör. Dieffenbach kelepçesi | - | - | Mikro kelepçe |
| ör. düz uçlu mikro spatula, genişlik 4 mm, | - | - | Mikro metal spatula |
| entübasyonda transbukkal sütür için | - -< | em>İğne tutucu | |
| Neşter kabzası | - | - | - |
| selfmade | - | -< | em>Entübasyon masası |
| blut, esnek ve arteriyel kanül ve venflow için uygun çap& | nbsp;- | - -< | em>Künt çelik tel |
| Flowstich ile modifiye edilmiş arteriyel hat 20G | Becton Dickinson, Farady Yolu, Swindon, UK | # 682245 | < > Arteriyel hat< / em> |
| Isıtma yastığı< / em> | ;- - | ||
| Rektal sıcaklık probu< / em> | nbsp; - | - - | -< |
| > tuzlu su ısıtıcısı< / em> | nbsp;- | - | - |
| Laringoskop (özel hayvan büyüklüğü için, örneğin sıçan) | - | ;- - | |
| inhalasyon anestezisi için indüksiyon kutusu | - | - - | |
| Ölçek (mg ölçebilir) | - - | - | |
| Saç kesme makinesi | - | - | - |
| İsim | Company | Katalog Numarası | Comments |
| Sarf malzemeleri | |||
| ör. modifiye BD Venflon Pro Safety 14GA | Becton Dickinson İnfüzyon Tedavisi, AB, SE251 06 Helsingborg, İsveç | #393230 | Periferik venöz kateter (14G), < / em> |
| İnce Delikli Polietilen Boru, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex, | Smiths Medical International Ltd., Kent, İngiltere | # 800/100/200 < | > Kateter tüpü (PE-50) < / em> |
| örneğin Omnifix-F Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Almanya | #9161406V | Şırınga 1 mL< / em> |
| örneğin Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Almanya | #4606051V | Şırınga 5 mL |
| ör. Injekt Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Almanya | #4606205V | Şırınga 20 mL< / em> |
| örneğin BD Microlance 3, 18G - 1 1/2 " | Becton Dickinson SA, Fraga, İspanya | #304622 | Kanül (18G) |
| örneğin BD Microlance 3, 23G - 1" | Becton Dickinson S.A., Fraga, İspanya | #300800 | Kanül (23G) |
| >ör. BD Microlance 3, 30G - 1/2" | Becton Dickinson SA, Fraga, İspanya# | 304000 | Kanül (30G) |
| ör. Leukoplast S | BSN medical GmbH, Hamburg, Almanya | # 47619-00 | Yapışkan bant< / em> |
| örneğin Gazin RK Mullkompressen (18x8cm) | Lohmann & Rauscher, Viyana, Avusturya | #10972 | Gazlı bez kompres (küçük) |
| ör. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm) | Lohmann & Rauscher, Viyana, Avusturya | #10961 | Gazlı bez kompres (büyük) |
| İpek Örgülü siyah, USP 4/0, EP 1.5 | SMI AG, St. Vith, Belçika | #2021-04 | Sütür (İpek 4/0, EP 1.5) |
| ör. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime | Johnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Almanya | #EH7552 | Transbukkal sütür |
| ör. Pamuk Çubukları (2,2 mm, 15 cm) | Paul Hartmann AG, Heidenheim, Almanya | #967936 | Pamuk tomurcukları |
| ör. Vue Ultrasoundgel | Optimum Medical Limited, İngiltere# | 1157 | Ultrason jeli |
| ör. Glubran 2 | Gem srl, Viareggio, İtalya | #G-NB2-50< | em>Doku tutkalı |
| ör. Cerrahi neşter bıçağı Nr. 10 - karbon çeliği | Swann-Morton, İngiltere, B.S. | #202 | Neşter Bıçağı |
| Heparin, 5000 IE/mL (Natriumheparin) | Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mü rztal, Avusturya | - | Heparin |
| Florane | Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, İngiltere | - | Isoflurane |
| OeloVital (5g) | Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Avusturya | - | Eye gel |
| Ketasol | aniMedica GmbH, Senden-Bö sensell, almanya | - | ketamin |
| rompun | bayer Avusturya ges.m.b.h., Viyana, Avusturya | - | Xylazine |
| Xylocain %10 Pumpspray | AstraZeneca & Ouml; sterreich GmbH, Viyana, Avusturya | - | Lidokain pompa spreyi |
| Dipidolor | Jansen-Cilag Pharma GmbH, Viyana, Avusturya | - | Piritramide |
| >NaCl %0.9 Fresenius, 1L | Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Avusturya | #13LIP132 | Fizyolojik tuzlu su çözeltisi |
Kaynaklar
- Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
- Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments. J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).
- Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data. J Hepatol. 58 (3), 593-608 (2013).
- Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension. Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291 (6), 699-713 (2008).
- Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice. Liver International. 25 (6), 1079-1090 (2005).
- Franchis, R. d Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension. Journal of Hepatology. 33 (5), 846-852 (2000).
- Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review. Annals of medicine. 46 (1), 8-17 (2014).
- Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn. Indian J Gastroenterol. 27 (2), 74-80 (2008).
- Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. Liver cirrhosis. Lancet. 383 (9930), 1749-1761 (2014).
- Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. Animal models of portal hypertension. World Journal of Gastroenterology : WJG. 12 (41), 6577-6584 (2006).
- Reiberger, T., et al. Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats. Journal of Hepatology. 51 (5), 865-873 (2009).
- Schwabl, P., et al. Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats. Journal of Hepatology. 60 (6), 1135-1142 (2014).
- Reiberger, T., et al. Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling. Liver International. 33 (4), 561-568 (2013).
- Schwabl, P., et al. The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction. Journal of Hepatology. 66 (4), 724-733 (2017).
- Mandorfer, M., et al. Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension. J Hepatol. 65 (4), 692-699 (2016).
- Schwabl, P., et al. Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease. Aliment Pharmacol Ther. 45 (1), 139-149 (2017).
- Reiberger, T., Mandorfer, M. Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis. Journal of Hepatology. 66 (4), 849-859 (2017).
- Reiberger, T., et al. Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol. Gut. 62 (11), 1634-1641 (2013).
- Reiberger, T., et al. Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III). Wiener klinische Wochenschrift. 129 (3), 135-158 (2017).
- de Franchis, R. Expanding consensus in portal hypertension. Journal of Hepatology. 63 (3), 743-752 (2015).
- Pinter, M., et al. The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma - a pilot study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35 (1), 83-91 (2012).
- Schwabl, P., Laleman, W. Novel treatment options for portal hypertension. Gastroenterol Rep (Oxf). 5 (2), 90-103 (2017).
- Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension. , (2017).
- Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
- Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. Routine animal use procedures. , Institute of Veterinary Physiology, University of Zurich, Physiology and Behavior Laboratory, Institute of Food, Nutrition and Health, ETH Zurich. (2016).
- Animal Care and Use Program. Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information. , The University of British Columbia. (2016).
- Davis, J. A. Current Protocols in Neuroscience. , John Wiley & Sons, Inc. (2001).
- Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats. BMC Veterinary Research. 10 (1), 198(2014).
- Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
- Becker, K., et al. Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits. , GV-SOLAS - German veterinary association for animal welfare. (2016).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
