Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tedavi Vankomisin ile kalsiyum sülfat ve otojen kemik kemik enfeksiyonu, geliştirilmiş tavşan modeli yüklü

9K görüntülenme

DOI:

10.3791/57294

14 Mart 2019

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu çalışmada geliştirilmiş bir tavşan sunar kemik iliği bakterilerde aynı miktarda engelleyerek Staphylococcus aureus ile enfekte modeli. Vankomisin yüklü kalsiyum sülfat ve otojen kemik antibiyotik ve kemik onarım tedavisi için kullanılır. Protokol kemik enfeksiyonu ve yenilenme eğitim için yararlı olabilir.

Özet

Kemik enfeksiyonu klinik, ortopedik ve travmatik cerrahi olarak tedavi etmek son derece zor bakteriyel istila kaynaklanır. Kemik enfeksiyonu sürekli iltihap, osteomiyelit ve nihai kemik sendikasız sonuçlanabilir. Uygulanabilir ve tekrarlanabilir bir hayvan modelini kurulması kemik enfeksiyonu araştırma ve antibiyotik tedavisi önemlidir. İçinde vivo bir model olarak tavşan modeli kemik enfeksiyonu araştırmalarda yaygın olarak kullanılır. Ancak, önceki çalışmalarda tavşan bakteri miktarı değişken olduğu gibi enfeksiyon durumu tutarsız, gösterdi enfeksiyon modelleri kemik. Bu çalışmada kemik enfeksiyonu bir tavşan, kemik iliği bakterilerde engelleyerek inducing için geliştirilmiş bir cerrahi yöntem sunuyor. O zaman, çok düzeyli değerlendirme modelleme yöntemi doğrulamak için yürütülen olabilir.

Genel olarak, nekrotik doku Debridmanı ve implantasyon Vankomisin yüklü kalsiyum sülfat (VCS) antibiyotik tedavisi baskın. Kalsiyum sülfat VCS içinde sürünerek osteocyte ve yeni Kemik büyümesi faydaları rağmen büyük kemik defektleri Debridmanı sonra oluşur. Otojen kemik (AB) kemik defektleri nekrotik kemik Debridmanı sonra büyük kemik defektleri tedavisi için üstesinden gelmek için çekici bir stratejidir.

Bu çalışmada, bir otojen kemik kemik üründe implante olarak kuyruk kemik kullanılır. Kemik onarım mikro-Bilgisayarlı-Tomografi (mikro-CT) ve histolojik analiz sonra hayvan kurban kullanılarak ölçüldü. Sonuç olarak, VCS grubunda, kemik sendikasız sürekli olarak elde edildi. Buna ek olarak, VCS-AB grubu Kemik defekti alanlarında önemli ölçüde azalma. Mevcut modelleme yöntemi kemik enfeksiyonu manken hazırlamak için tekrarlanabilir, uygulanabilir, istikrarlı bir yöntemi açıklanmıştır. VCS-AB tedavi daha düşük kemik sendikasız fiyatlarına sonra antibiyotik tedavisi sonuçlandı. Gelişmiş kemik enfeksiyonu modeli ve kombinasyon tedavisi VCS ve otojen kemik kemik enfeksiyonu ve kemik rejenerasyon Travmatoloji ortopedik uygulamalar için ilgili temel mekanizmaları okumak yardımcı olabilir.

Giriş

Kemik enfeksiyonu genellikle bakteri ya da diğer mikroorganizma işgalden sonra travma, kemik kırığı veya diğer kemik hastalıkları1kaynaklanır. Kemik enfeksiyonu yüksek düzeyde inflamasyon ve kemik doku imha neden olabilir. Klinikte, kemik enfeksiyonu2,3baskın etken Staphylococcus aureus (S. aureus) olduğunu. Kemik enfeksiyonu zayıflatıcı, acı verici ve genellikle4tedavi son derece zordur kronik bir ders alır. Şu anda, nekrotik doku debridman ve Vankomisin yüklü kalsiyum (VCS) boncuk yerleştirerek doğruladı yerel enfeksiyon5

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Mevcut çalışmada kullanılan tavşanlar Rehberi uygun olarak bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı için tedavi edildi. Deneysel prosedürler kuralları, Biyoetik Komitesi, Zhejiang Akademi, geleneksel Çin tıbbı tarafından takip edildi.

1. bakteriyel süspansiyon hazırlanması

  1. 0.5 mg tozu (ATCC 6538) ile 0.3 mL Luria-Bertani kültür ortamının dağılması S. aureus geçiyoruz. Süspansiyon tamamen karıştırın.
  2. Bakteri süspansiyon tryptic soya Ağar kaplamalar üzerine çizgi ve bakteri kolonileri için 16 h 37 ° C'de kuluçkaya.
  3. Birim (CFU) ve tryptic soya suyu tüpler için 24 h gerçekleştirmek için yaklaşık 24 h 3....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Kemik enfeksiyonu modeli değerlendirilmesi
S. aureusile enfeksiyon sonra tavşan patolojik bulguları klinikte kronik osteomiyelit temsilcisi belirtisi benzerdi. Çalışma, 30 tavşan enfekte ve bir model grubu tabi ve 10 tavşan denetim hayvanlar tabi tutuldu. Tüm modeli tavşan sinüsler ile beyaz ve sarı irin akışı sinüsler (şekil 3A) üzerinde tibia yerel site bulaşmış. H & E boyama sonuçları bakteriyel toplamları .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Önceki çalışmalarda, hem de akut ve kronik kemik enfeksiyonu çalışmaya çeşitli hayvan modelleri inşa edildi; Ancak, ideal modeli için arama devam hala17,18. Buna ek olarak, ideal kemik enfeksiyonu modeli modelleme dönemleri sırasında klinik ortamda kemik enfeksiyonu patolojik özelliklerini taklit, kalır düşük maliyetli ve kolay yapmak bekleniyor. Adatavşanı are elde edilebilir, uygun ve ucuz olarak şimdiye kadar tavşan kemik enfeksiyonu inflamatuar kemik hastalığ.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar bu çalışmalarında hiçbir çıkar çatışmaları rapor.

Teşekkürler

Bu eser Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Çin (81803808, 81873062), Zhejiang İl Sağlık ve sağlık bilim ve Teknoloji Fonu (2017KY271) ve bilim ve teknoloji proje Zhejiang eyaleti (2017C 37181) tarafından desteklenmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
emilebilir cerrahi sütürJinghuan18S0604A
asepsi enjektörüJinglong20170501
kemik balmumuETHICONJH5CQLM
CCD kameraOlympusDP72
EDTA-K2 antikoagülan kan damarıXINGE20170802
Elektrikli kemik matkap ünitesiBao KangBKZ-1
Elektrikli tıraş makinesiCodos3800
esnek silika jel kalıbı WRIGHT1527745
Hematoksilen ve Eozin Boyama KitiBeyotime20170523
Luria-Bertani kültür ortamıBaisi Biyotoloji20170306
Tıbbi sınıf kalsiyum sülfatWRIGHT1527745
mikrobilgisayarlı tomografi (mikro-BT)BrukerSkyScan 1172 
MikroskopOlympusCX41
Yeni Zelanda beyaz tavşanlarıZhejiang Deney Hayvanları Merkezi SCXK 2014-0047
No. 11 neşter Yuanlikang20170604
normal tuzlusu Mingsheng20170903
PBSTBD (Jingyi)20170703-0592
pentobarbital sodyumMerk2070124
povidon-iyot çözeltisiLierkang20170114
S. aureus< / em> dondurarak kurutma tozuÇin Genel Mikrobiyoloji Kültür Toplama MerkeziATCC 6538
koyun kanı agarHuanKai Mikrobiyal3103210
triptik soya agar plakalarıHuanKai Mikrobiyal3105697
VankomisinLillyC599180
triptik soya suyu tüpleri HuanKai Mikrobiyal 3104260

Kaynaklar

  1. Malizos, K. N. Global Forum: The Burden of Bone and Joint Infection: A Growing Demand for More Resources. Journal of Bone and Joint Surgery-American Volume. 99, 20(2017).
  2. Peeters, O.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Kemik Enfeksiyon ModeliOtolog Kemik mplantasyonuTav an Tibia EnfeksiyonuMikro BT AnaliziHistolojik AnalizKemik Rejenerasyonu De erlendirmesiStaphylococcus Aureus S spansiyonuKemik Mumu ile BlokajKuyruk Kemi i Grefti