Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Laboratuvar istikrarlı sinek ve diğer Muscoid Diptera yetiştirme

8.7K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/57341

⸱

3 Ağustos 2018

 ,  ,  , 
1Agroecosystems Management Research Unit, ARS-USDA

Bu makalede

Özet

İstikrarlı sinekler (Stomoxys calcitrans) yetiştirme için bir yordam sunulur. Yordam diyet bileşenleri, malzeme ve ek malzemeler için mevcut yerel malzemeler kullanır.

Özet

İstikrarlı sinekler, Stomoxys calcitrans, hayvan, insan, refakatçi hayvan ve yaban hayatı dünya çapında ciddi zararlıları vardır. Son 20 + yıl boyunca, birçok ülkede kararlı sinekler ciddi salgınları Agronomik uygulamalar değişimler sonuçlandı. Bu salgınlar insan istirahat bu pest için araştırma ve yönetimi çabaları artırmak için ortak talepleri sonuçlanan ve hayvan üretimi kesintiye. Laboratuar çalışmaları için kararlı sinekler yetiştirme için basit ve ucuz bir yordam sunulur. Yordam mevcut yerel diyet bileşenleri, malzeme ve ek malzemeler kullanır. Yordamı yüz sinek (sinek autumnalis), boynuz sineği (Haematobia irritans) ve ev sineği (sinek domestica) de dahil olmak üzere diğer muscoid sinekler yetiştirme için adapte edilebilir. Yordam 12.5 mg ve % ~ 35 yumurta yetişkin yaşam için Ortalama istikrarlı sinek kozaları üretir. Yaklaşık 3000 sinekler her tavada üretilmektedir.

Giriş

İstikrarlı sinekler, Stomoxys calcitrans (L.), kimin acı sokması hayvan otlatma davranışını bozabilir, acı ve acı hayvan yoldaşı ve eğlence etkinlikleri dünya çapında insan bozabilir hematophagous sinekler vardır. Olgunlaşmamış istikrarlı sinekler bitkisel madde, genellikle hayvan atıkları ile kirlenmiş fermantasyon geliştirmek. Değişen Agronomik uygulamalar ve bitkileri bitki artıkları, Avustralya1sebze, Brezilya2şeker kamışı ve ananas Kosta Rika3kararlı sinekli ciddi salgınları doğurmuştur. Her ne kadar hayvan başına sadece 14 istikrarlı sinekler ekonomik eşik4olarak kabul edilir, hayvan başına 2.000'den fazla sinekler gözlemleri son salgınlar5sırasında yapılmıştır. Böyle istila düzeyleri sıfıra yakın ev sahibi verimlilik azaltmak ve mortalite6neden olabilir. Agronomically ilişkili salgınlar, bir sonucu olarak istikrarlı sinekler ilgiyi alıyorsanız ve laboratuar koloniler için talep önemli ölçüde artmıştır.

Tüm holometamorphic böcekler gelince, istikrarlı sinekler olgunlaşmamış ve larva aşamasında büyüme için gerekli besin elde edilir. Bu nedenle, bir yetiştirme sisteminin önemli bir bileşeni larva diyet veya yüzey. Geniş yüzeylerde alan7 bir geliştirme istikrarlı sinek larvaları gözlenmiştir ve substrat8,9microbial topluluk bağlıdır. Doğal larva yüzeylerde öncelikle çürüyen veya bitkisel malzemeler genellikle azotlu atıklar ile kirlenmiş fermantasyon oluşur.

Laboratuvar yetiştirme için bitkisel bir malzeme ile eklenen azot kaynağı genellikle istikrarlı sineği larva yüzeylerde oluşmaktadır. Çok sayıda malzeme istikrarlı sineği larva diyetler için kullanılmıştır. İlk larva diyetler doğal yüzeylerde taklit ve yulaf saman ve at veya inek gübresi10,11fermantasyon dahil. Buğday kepeği12,13,14, yonca yemek12,13,14 karbonhidrat kaynakları içerir ve ticari bir formülasyon kimyasal özellikleri tarafından geliştirilen Üreticileri Derneği (CSMA, % 33 buğday kepeği, % 27'si yonca yemek, % 40 bira mayası Granül)13,14,15,16. Azot kaynakları Maya süspansiyon12, Balık unu ve Amonyum Bikarbonat17yer alıyor. Inert malzemeler kabarma kez yulaf gövde12, BAGAS13, vermikülit16, talaş13,18 ve pelleted fıstık gövde14dahil olmak üzere diyetinde yer almaktadır.

Laboratuvar yetiştirme bir birincil amacı laboratuvar deneyleri o alan nüfus yansıtan sonuçlar doğurur ki gibi fizyolojik türüne benzer bir şekilde"vahşi" mümkün olduğunca bir ürün üretmektir. Bu üreme ve seçim minimize edilebilir gerektirir genetik korumak için çeşitlilik ve besin kaynakları bu alandaki karşılaştırılabilir. Emek ve giderleri en aza indirmek için ikincil hedefleri bulunmaktadır. Giderleri en aza indirerek önemli parçasını yerel olarak kullanılabilir diyet bileşenleri kullanmaktır. Sunulan sistem yetiştirme istikrarlı anında bu hedeflerini karşılamak için geliştirilmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. yumurta toplama (Şekil 1)

  1. Debaşarılı Kupası hazırlamak, ~ 500 mL kabı (~ 40 ° C) sıcak su dolu bir ucunu bez koyun. Taraf Kupası örtüşme ve bir lastik bant ile düzeltmek. Yarım kalmış din Kupası üst üzerinde geri katlayın.
  2. 8 – 10 gün eski uçar ~ 2 h. Gravid kadın kararlı için kafes debaşarılı Kupası uçar yer üzerine kumaş Hayır.
  3. Debaşarılı Kupası egging bez kapalı kafes ve durulama yumurta içine sıkmak yıkama şişesi ile küçük bir tavada kaldırın.

2. hazırlamak larva yetiştirme Pan

  1. Orta (1 yetiştirme pan miktarlarını) hazırlamak
    1. Buğday kepeği (500 gr), talaş (200 gr) ve 10 L Plastik tabak tavada balık unu (115 g) birleştirin ve iyice karıştırın.
    2. Amonyum Bikarbonat (50 gr) (~ 25 ° C, 1600 mL) su ekleyip eriyene kadar karıştırın.
    3. Su solüsyonu kuru malzemeyi unwetted hiçbir malzeme sağlamak için ekleyip karıştırın. Tavada orta seviye ama sıkıştırma.
  2. İstikrarlı sinek yumurtaları ekleyin
    1. Sığ bir karık ortamda pan uzunluğu olun.
    2. İstikrarlı sinek yumurta (~ 8.000 yumurta) 1 mL karık yumurta pipet (Şekil 2) ile havale.
      Not: bir plastik mezun pipet 100 ekleme istediğiniz noktada kesim tarafından yapılan yumurta pipet mesh ekran ve yapıştırma pipet yeniden bir araya getirmek.
    3. Kapak ince bir tabaka halinde kuruma önlemek için orta yumurta.
    4. Yastık kılıfı ile tava kapağı, bir lastik bant ve etiket ile kapatın. Larva odasında tava koyun (23 ± 2 ° C, % 30-50 RH ve 12:12 [L:D] s photoperiod).
      Not: Larva geliştirme oviposition andan itibaren 10-14 gün sürer.

3. Pupa işleme, larva hareket orta kenarına gün 13 ya da 14 tarafından 7-9 gün sonra Oviposition ve Pupariate

  1. Kepçe kozaları, öncelikle tava dışarı orta yüzeyinde oluşturur ve temiz bir tavaya yerleştirilen kabuk altında kenarlarında bulunan.
  2. Pan, kozaları ile ½-¾ su dolu doldurun. Orta ve kozaları kümeleri kadar break. Buğday kepeği ve protein bileşenleri orta lavabo kozaları > 1 gün eski kayan nokta19.
  3. Kayan malzeme, kozaları ve bazı orta boy bir kevgir ve yıkama elekler (#5, #7, #12, #20) kalan orta kaldırmak için bir dizi ile kaldırın. #12 elek kozaları toplar ve drenaj girmesini #20 katı atık tutar. Kozaları arasında elekler evye püskürtücü ile yıkayın.
  4. Kozaları, temiz bir tavaya #12 elek durulayın. Kaydırmak için ½ su dolu doldurun. Kayan kozaları bir kevgir dökün ve aşırı su drenaj sağlar.
  5. Transfer kozaları kurutma ekran için bir fan ile süzülmüş ve kuru (Şekil 3) kadar bırakın.

4. Pupa raf, kozaları toplamak için alternatif bir yöntem olduğunu bir pupa raf18 ile

Not: 10 L yemek pan (10.2 cm boyunda 10,2 cm x 31, 9 cm uzun geniş x) sonuna bir parça plastik kesme raf yapılmıştır.

  1. Orta 2.1 açıklandığı şekilde hazırlayın. Konik orta ila ~7.5 cm ~2.5 cm derin üzerinde bir ucundan tavada diğer yandan derin.
  2. Yetiştirme pan ve teyp raf (Şekil 4) taramasını larva önlemek için sığ sonunda Orta raf yerleştirin.
    1. Sünger (~14.5 x 9.0 x 4.5 cm3, rejenere selüloz) doyurmak ve su batırılmış bez (30.5 x 42 cm2, pamuk) ve yerde yaklaşık yarım inç Orta rafta sarın.
  3. 2.2 içinde açıklandığı gibi yumurta ekleyin ve daha önce olduğu gibi devam edin.
    1. Her gün tava sünger nemli kalır emin olun.
  4. Durulama kozaları raf, sünger ve bez temiz bir çanak içine pan ve 14 gün sonra oviposition kevgir dökün.

5. kalite kontrol

  1. Tüm pan (Toplam wt.) üretilen kozaları tartın.
  2. 100 kozaları izole, tartmak ve bir 9 cm Petri kabına yerleştirilir.
  3. Sayısı ve seks yetişkin ~ 5-8 gün sonra ortaya çıkması oranı ve cinsiyet oranı belirlemek için. Daha sonraki bir tarihte saymak gerekirse bir dondurucu çıktı yetişkinlerle Petri yemekler saklayın. Sinekler tarafından onların gözlerinin şekli ve genişliğini fronto-orbital plaka20 veya genital düşük büyütme altında kadın belirlenmiştir.
  4. Kayıt ağırlığı toplam ağırlığı 100 kozaları ve numarasını ortaya yetişkin erkek ve kadın.

6. kan hazırlanması

  1. Taze sığır kan 19 L kovalar 70 g sodyum sitrat Tribazik dihydrate 500 ml su içeren yerel bir mezbaha toplamak. Heyecan şiddetle 5-10 dk için kan ve laboratuvara geri döndü.
  2. Kaldırmak için bir kevgir zorlanma kan pıhtılaşır ve 2 L kaplara etiket koleksiyonu ve bir dondurucu (-20 ° C) deposunda tarihi ile bölümlenmiş.
  3. Dondurucu ve buzdolabında yer kaldır kapsayıcıdan 2 gün önce ihtiyacım vardı. Kan ~ 2 bir kez çözdürülen ve ilâ 1 yıl için dolaba saklanan haftalar için kullanılabilir.

7. yetişkin bakım

  1. Kafesler, hat kafes alt temizliği kolaylaştırmak için kasap kağıdı ile hazırlayın.
  2. 50 gr kuru istikrarlı sinek Pupa (~ 3500) her kafese koyun. Yetişkin eclose için bir kaç gün pupa işlemlerden sonra birkaç saat.
  3. Yerde taze bir kan kadınsı peçete üzerine beslenme için her kafes batırılmış. Yetişkin eclosion içinde 24 h besleme başlar ve her gün bir gün önce oviposition (9 – 10 gün sonra ortaya çıkması) kadar tekrarlayın.
  4. Oviposition (Bölüm 1) sonra 4-8 h için dondurucuda kafes yerleştirin ve sonra kağıdı çıkarmadan, frass taraf ve zemin sıcak su ile durulama ve çamaşır deterjanı ve klor ağartıcı ile tüm yüzeyler ovma temiz. Kafesleri sıcak su ile durulayın ve kurumasını bekleyin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Larva pupariate 10-14 gün ve yetişkin ortaya 14-16 gün sonra oviposition. Oluşturma süresi, yumurta yumurta, ~ 24 gün var. Mayıs 2013 Ocak 2017 için yetiştirme verilerle üç farklı ajanlar kabarma ve iki kolonileri Şekil 5' te sunulmaktadır. Cottonwood verdi en iyi verim, 3867 ±1442 (figure-results-1 ± standart sapma) 74 ±19% eclosion ile 12,5 ±1.6 mg ağırlığında pupa 2,872 ±1294 üreten yetişkin kurulan laboratuv...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

İstikrarlı sinekler geniş yüzeylerde doğada çeşitli geliştirme bulunabilir ve medya Laboratuvarı birçok türde yetiştirilen. Biz talaş ve vermikülit ajanlar kabarma olarak kullanmışlardır. Vermikülit iyi çalıştı ama orta zor yetiştirme dan ayıran kozaları yapılmış ve pahalı (~$0.60/pan) yapıldı. Muhtemelen kozaları ortamından ayıran eklenen titizlik nedeniyle, eclosion, ayrıca vermikülit, talaş için %75 vs % 57 ile daha düşük. Cottonwood talaşı vermikülit karşılaştırılabilir ama bazen zor temin etmek. Maya ve bir "açık" y...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Anthony Weinhold ve bizimle yıl teknik destek için hem de bizim böcek yordamlar yetiştirme geliştirmek için öneriler üzerinde çalıştım çok sayıda öğrencilere teşekkür etmek istiyorum.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
DiamaltPremier Malt Ürünleri, Inc., Saddle Brook, NJ2540
CSMA Fly mediaPurina Hayvan Besleme, Arden Hills, MN5S6Z
İnce Maxi PedTranzonic Co., Cleveland, OH, ABD5001M Buzağı
MannaMannaPro, Chesterfield, MO, ABDManna Pro
Amonyum Bikarbonat SpektrumKimyasal İmalat A.Ş., Gardena, CAA1125
Buğday kepeği, KabaSiemer Değirmen Şirketi, Teutopolis, IL
Ağaç talaşıTraktör Tedarik Şirketi, Brentwood, TN502770699
BalıkUnu Tüketici Tedarik Dağıtımı, North Sioux City, SDF1550
Yetişkin kafesleriTüm Alüminyum Pencere Şirketi, Lincoln, NeÖzel45 ve kez; 45 ve kez; 45 cm, 18 &kler; 16 gözenekli alüminyum ekran, stok erişimi
9 > 28 cm siyah pamuklu bezRobert Kaufman Kumaşlar, Los Angeles, CAK040-114Yumurta bezi
10 L plastik bulaşık tavalarıRubbermaid, Saratoga Springs, NYFG2951ARWHTLarva tavaları
Stockinette, Pamuk, 12 inç x 25 yarda ruloTex-Care Medical Company, Burlington, NC91311-225

Kaynaklar

  1. Cook, D. F., Dadour, I. R., Keals, N. J. Stable fly, house fly (Diptera: Muscidae), and other nuisance fly development in poultry litter associated with horticultural crop production. J. Econ. Entomol. 92 (6), 1352-1357 (1999).
  2. Dominghetti, T. F., de Barros, A. T., Soares, C. O., Cançado, P. H. Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) outbreaks: current situation and future outlook with emphasis on Brazil. Rev. Bras. Parasitol. Vet. 24 (4), 387-395 (2015).
  3. Solórzano, J. -A., Guilles, J., Bravo, O., Vargas, C., Gomez-Bonilla, Y., Bingham, G., Taylor, D. B. Biology and trapping of stable flies (Diptera: Muscidae) developing in pineapple residues (Ananas comosus) in Costa Rica. J. Insect Sci. 15 (1), 145(2015).
  4. Berry, I. L., Stage, D. A., Campbell, J. B. Populations and economic impacts of stable flies on cattle. Trans. Am. Soc. Agric. Eng. 26, 873-877 (1983).
  5. Taylor, D. B. Area-wide management of stable flies. Area-wide management of insect pests. Vreysen, J., Hendrichs, R., Cardoso Pereira, R. , in press (2017).
  6. Bishopp, F. C. The stable fly (Stomoxys calcitrans L.), an important live stock pest. J.Econ. Entomol. 6 (1), 112-126 (1913).
  7. Hogsette, J. A., Ruff, J. P., Jones, C. J. Stable fly biology and control in northwest Florida. J. Agric. Entomol. 4 (1), 1-11 (1987).
  8. Lysyk, T., Kalischuk-Tymensen, L., Selinger, L., Lancaster, R., Wever, L., Cheng, K. Rearing stable fly larvae (Diptera: Muscidae) on an egg yolk medium. J. Med. Entomol. 38, 382-388 (1999).
  9. Romero, A., Broce, A., Zurek, L. Role of bacteria in the oviposition behaviour and larval development of stable flies. Med. Vet. Entomol. 20, 115-121 (2006).
  10. Glaser, R. W. Rearing flies for experimental purposes with biological notes. J. Econ. Entomol. 17 (4), 486-496 (1924).
  11. Melvin, R. Physiological studies on the effect of flies and fly sprays on cattle. J. Econ. Entomol. 25 (6), 1151-1164 (1932).
  12. Doty, A. E. Convenient method of rearing the stable fly. J. Econ. Entomol. 30 (2), 367-369 (1937).
  13. Bridges, A. C., Spates, G. E. Larval medium for the stable fly Stomoxys calcitrans (L.). Southwest. Entomol. 8 (1), 6-10 (1983).
  14. Hogsette, J. A. New diets for production of house flies and stable flies (Diptera: Muscidae) in the laboratory. J. Econ. Entomol. 85 (6), 2291-2294 (1992).
  15. McGregor, W. S., Dreiss, J. M. Rearing stable flies in the laboratory. J. Econ. Entomol. 48 (3), 327-328 (1955).
  16. Goodhue, L. D., Cantrel, K. E. The use of vermiculite in medium for stable fly larvae. J. Econ. Entomol. 51 (2), 250(1958).
  17. Friesen, K., Berkebile, D. R., Zhu, J. J., Taylor, D. B. Augmenting laboratory rearing of stable fly (Diptera: Muscidae) larvae with ammoniacal salts. J. Insect Sci. 17 (1), 1-6 (2017).
  18. Berkebile, D. R., Weinhold, A. P., Taylor, D. B. A new method for collecting clean stable fly (Diptera:Muscidae) pupae of known age. Southwest. Entomol. 34 (4), 469-476 (2009).
  19. Champlain, R. A., Fisk, F. W., Dowdy, A. C. Some improvements in rearing stable flies. J. Econ. Entomol. 47 (5), 940-941 (1954).
  20. Zumpt, F. The stomoxyine biting flies of the world. , Gustav Fischer Verlag. Stuttgart. (1973).
  21. Wienhold, B. J., Taylor, D. B. Substrate properties of stable fly (Diptera: Muscidae) developmental sites associated with round bale hay feeding sites in eastern Nebraska. Environ. Entomol. 41 (2), 213-221 (2012).
  22. Friesen, K., Berkebile, D. R., Wienhold, B. J., Durso, L., Zhu, J., Taylor, D. B. Environmental parameters associated with stable fly (Diptera: Muscidae) development at hay feeding sites. Environ. Entomol. 45 (3), 570-576 (2016).
  23. Albuquerque, T. A., Zurek, L. Temporal changes in the bacterial community of animal feces and their correlation with stable fly oviposition, larval development, and adult fitness. Front. Microbiol. 5 (590), 1-9 (2014).
  24. Bailey, D. L., Whitfield, T. L., LaBrecque, G. C. Laboratory biology and techniques for mass producing the stable fly, Stomoxys calcitrans (L.) (Diptera: Muscidae). J. Med. Entomol. 12 (2), 189-193 (1975).
  25. Smith, J. P., Hall, R. D., Thomas, G. D. Field studies on mortality of the immature stages of the stable fly (Diptera: Muscidae). Environ. Entomol. 14 (6), 881-890 (1985).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Ahır Sineği YetiştirmeStomoxys calcitransYumurta Toplama YöntemiLarval GelişimPupa İzolasyonuSinek Besiyeri HazırlamaKan Besleme ProtokolüKoloni Sağlığı İzlemeMuscoid Sinek AdaptasyonuLaboratuvar Entomolojisi
Laboratuvar istikrarlı sinek ve diğer Muscoid Diptera yetiştirme
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.