Method Article

ExCYT: yüksek boyutlu sitometresi veri analizi düzene için bir grafik kullanıcı arabirimi

DOI:

10.3791/57473

January 16th, 2019

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ExCYT bir MATLAB tabanlı grafiksel kullanıcı arayüzü (kullanıcıların kendi akış sitometresi veri yolu ile yaygın olarak analiz olanak sağlayan GUI) dimensionality azaltma yolu ile t-SNE, otomatik ve el ile çeşitli dahil olmak üzere yüksek boyutlu verileri için analitik teknikler istihdam olduğunu kümeleme yöntemleri, heatmaps ve Roman yüksek boyutlu Akış grafiğini çizer.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Akış cytometers parametreleri giderek artan sayıda ölçme yeteneğine sahip çıkmasıyla, bilim adamları phenotypically onların hücresel örnekleri özelliklerini keşfetmek için daha büyük paneller geliştirmeye devam. Ancak, bu teknolojik gelişmeler objektif manuel tabanlı geleneksel gating programları içinde analiz için giderek daha zor hale gelmiştir yüksek boyutlu veri kümeleri verim. Daha iyi analiz ve veri sunmak için akış sitometresi verilerini ayrıştırmak için yüksek boyutlu veri çözümleme uzmanlık ile bioinformaticians ile bilim adamları ortak. Bu yöntemler akış sitometresi okumak çok değerli olduğu gösterilmiştir iken, onlar henüz basit ve kullanımı kolay bir pakette Hesaplamalı veya programlama uzmanlık eksikliği bilim adamları için dahil olmak gerek. Bu gereksinimi karşılamak için biz ExCYT, bir MATLAB tabanlı grafik kullanıcı arabirimi (yüksek boyutlu akış sitometresi verilerin analizi yüksek boyutlu veri de dahil olmak üzere yaygın olarak istihdam analitik tekniklerini uygulayarak akıcılık GUI) geliştirdik t-SNE tarafından dimensionality azaltma, otomatik ve el ile kümeleme yöntem, heatmaps ve Roman yüksek boyutlu akış çeşitli çizer. Ayrıca, ExCYT daha fazla t-SNE ve Kümeleme Analizi yanı sıra yetenek gates doğrudan t-SNE araziler üzerinde uygulamak için ilgi seçin örneğin alınma olasılığını geleneksel gating seçenekleri sağlar. Belgili tanımlık bilgisayar yazılımı da telafi işe ek avantajı veya uncompensated FCS dosyaları sağlar. Olay bu sonrası edinme tazminat gereklidir, Kullanıcı bir dizin tek lekeleri ve günahı bir örnek program sağlamak seçebilirsiniz. Program tüm kanalları olumlu olayları algılar ve bu verileri seçme daha objektif olarak tazminat matris hesaplamak için kullanır. Özetle, ExCYT akış sitometresi veri FCS dosyaları şeklinde almak ve herhangi bir bireysel hesaplama verilerini anlamada en son algoritmik yaklaşımlar kullanmak için eğitim, ne olursa olsun, izin vermek için kapsamlı bir analiz boru hattı sağlar.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Akış Sitometresi yanı sıra kitle sitometresi gelişiyle gelişmeler klinisyenler ve bilim adamları hızla belirlemek ve phenotypically biyolojik ve klinik olarak ilginç örnekleri çözünürlük büyük oluşturma, yeni seviyeleri ile karakterize izin verdi bilgi zengin1,2,3olan yüksek boyutlu veri kümeleri. Ise manuel geçişi gibi akış sitometresi veri analizi için geleneksel yöntemler orada birkaç işaretleri ve görsel olarak discernable nüfus bu işaretleri var deneyler için daha basit olabilirdi, bu yaklaşım oluşturmak başarısız olabilir yüksek boyutlu veri kümeleri ya da bir spektrum ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. toplama ve sitometresi veri hazırlama

  1. Tüm tek lekeleri bir klasörde kendilerini ve etiket tarafından kanal adıyla (fluorophore tarafından imini içermeden) yerleştirin.

2. veri ithalat & ön işleme

  1. Duraklatmak veya bu analiz boru hattı kaydetmek için çalışma alanı olarak kaydetme için programın sol alt Çalışma alanını Kaydet'i düğmesini kullanın bir '. MAT' Yük çalışma alanı düğmesi ile daha sonra yüklenebilir dosya. Program birden fazla örneğini bir anda çalıştırmayın. Bu nedenle, yeni bir çalışma alanı yüklerken, ExCYT çalışan diğer hiçbir örnek kontrol etmek emin olun.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ExCYT kullanılabilirliğini sınamak için analiz ettik adlı bir veri kümesinin Chevrier ve ark. 'Bir bağışıklık Atlas, açık hücre böbrek nerede grubu CyTOF analiz 73 alınan tümör örnekler üzerinde kapsamlı bir bağışıklık paneliyle yürütülen Karsinomu' başlıklı tarafından yayınlandı hastalar11. İki ayrı panel, myeloid ve lenfoid bir panel, phenotypically tümör microenvironment karakterize etmek için kullanılmıştır. Çalışmamızın amacı kendi t-SNE sonuçlarını ö.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada en son yüksek boyutlu veri uygulamak için programlama arka plan ile bireylerin izin ExCYT, MATLAB tabanlı algoritmalar yüksek boyutlu sitometresi, veri çözümlemesi kolaylaştırmak için çalışan bir roman grafik kullanıcı arabirimi mevcut analiz algoritmaları. Bu yazılım daha geniş bilimsel topluluk için kullanılabilirliğini akış sitometresi verilerine bir sezgisel ve kolay iş akışı içinde keşfetmek bilim adamları sağlayacaktır. T-SNE dimensionality azaltma iletken bir kümeleme yöntemi uygulayarak, güçlü olmak ile sı.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Analizi çalıştırmak için kullanılanMasaüstüSuperMicroÖzel Yapı
MATLABMathworksN/AExCYT geliştirmek için kullanılan yazılım
Bilgisayarı

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Benoist, C., Hacohen, N. Flow cytometry, amped up. Science. 332 (6030), 677-678 (2011).
  2. Ornatsky, O., et al. Highly multiparametric analysis by mass cytometry. Journal of immunological methods. 361 (1), 1-20 (2010).
  3. Tanner, S. D., et al.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

High Dimensional CytometryFlow Cytometry Analysist SNE Dimensionality ReductionAutomated Clustering MethodsHeatmap VisualizationGraphical User InterfaceCompensation Matrix CalculationConventional Flow PlotsHigh Dimensional Flow PlotsCluster Analysis Thresholding

Related Articles