Bu yordamları genel amacı kurmak, korumak ve Eristalis tenax esir nüfusu bir araştırma ortamda yenilemek etmektir.
Yöntem makalesi
Bu yordamları genel amacı kurmak, korumak ve Eristalis tenax esir nüfusu bir araştırma ortamda yenilemek etmektir.
Bir tahmini 6000 türler ile dünya çapında, hoverflies Evcil arıları için alternatif tozlayıcı olarak ekolojik önemlidir. Ancak, onlar da hareket vizyon ve uçuş dinamiği kontrollü laboratuvar ortamında çalışmak için yararlı bir bilimsel modeli vardır. Larvalar organik kirli suda geliştirdikçe, onlar yatırım mikrobiyal bağışıklık soruşturma için yararlı modelleri vardır. Tarım için büyük ölçekli ticari doğurmak zaten oluşur iken, bilimsel çalışmalar için esir nüfusu korumak için standart iletişim kuralı yok. Bu dönemler tutarlı, istikrarlı ve sağlam yıl boyunca sık sık diğer araştırma amaçlı gerektiğinde bir nüfus sağlamak için başarısız olabilir en yüksek tozlaşma sırasında çıkış kitle üzerinde odaklanan ticari esir ıslahı programlar olarak önemlidir. Bu nedenle, bir yöntem oluşturmak, sürdürmek ve esir araştırma nüfus yenilemek için gereklidir. Burada, yolcularınsuni uykularını çevriminin, beslenme ve konut gereksinimlerine ek olarak Eristalis tenaxuzun vadeli bakım için kullanımını açıklar. Bu yöntemleri kullanarak, biz önemli ölçüde sağlık ve uzun yaşam-in önceki raporlar'karşılaştırma E. tenax esir nüfus artmıştır. Ayrıca küçük ölçekli yetiştirme yöntemleri ve verimleri en iyi duruma getirme ve nüfus nüfus bilgileri değiştirmek için seçenekleri görüşmek.
Hoverflies bilimsel sorular, sinirsel mekanizmalar hareket vision2, tozlaşma verimliliği3,4, temel uçuş davranış1, dahil olmak üzere bir dizi araştırma için faydalı model olarak ortaya çıkıyor 5 , 6 ve mikrobiyal dokunulmazlık7. Ancak, diğer dipteran gibi bazı modeller, Drosophila8, aksine hoverflies kullanılmak üzere bilimsel araştırma laboratuarı yetiştirme için hiçbir standart protokoller vardır. Geçerli edebiyat hoverfly Eristalis tenaxüreme yöntemlerini açıklar bile, gerçekten de, bunların çoğu hoverflies kırpma tozlaşma, biyo-organik atık veya anatomik çalışmalar bozulma için kitle ekimi için geliştirilmiştir 9 , 10 , 11. böylece, nüfusun genetik fitness muhafaza ederken sağlıklı sağlam hoverflies, tutarlı bir tedarik sağlayan kolay bir iletişim kuralları için ihtiyaç karşılarlar değil.
Arılar ve bumblebees, hoverflies en önemli vahşi, kültürlü tozlayıcı grupları12,13vardır. Yaklaşık 6000 hoverfly türler dünya çapında14,15, İsveç16 75 cins 300'den fazla tür ve Hindistan17,18,1969 cins 300'den fazla tür vardır. Örneğin, tarıma önemli marmelat hoverfly reçel sineği ve uçak sinek, biz burada, odak Eristalis tenax, Avrupa, Amerika ve Asya6,16arasındabulunur, 17,18,19,20,21,22,23,24,25. Hoverflies yıl boyunca, ne de gün boyunca aynı derecede aktif değildir. Gerçekten de, sadece sezon ve zaman gün, aynı zamanda ışık şiddeti dalgalanmalar sıcaklık, nem, Rüzgar hızı, etkiler hoverflies26,27etkinlik şekillerinin. Alanında, Eristalis yılın herhangi bir zamanda Akdeniz iklimleri11' bulunabilir ancak active hoverflies sayıda kışın çok düşüktür. Diğer taraftan soğuk ılıman iklimlerde Eristalis kış kış uykusuna ve aktif olarak yer alan alanında çevresinde Ekim-Mart28davranıyor bulunamadı.
Özgürce hoverflies uçan örgü alanında tarafından toplanabilir. Nitekim, ılıman iklimlerde en büyük bolluk içinde buluncaya kadar orta geç sabah için üzerinde sakin sonunda yaz ve sonbahar26,27boyunca güneşli gün. Alternatif olarak, Olgun E. tenax larva, ikinci veya üçüncü biçim, tespit ve gübre gibi organik madde yığın bozulması ya da organik kirli akarsu10,11--dan hasat. Nitekim, laboratuvar E. tenax yetiştirme için yayımlanan teknikleri tüm organik kirli suda, ya bir çeşit bitkisel veya fekal madde9,10,29, üzerinden larva yetiştirme dayanmaktadır 30 , 31 , 32 , 33. ancak, larva toplama sezon tarafından sınırlıdır ve yalnızca bir geçerli koleksiyonu aracından ilkbahar geç sonbahar11başlanır. Ayrıca, ortam sıcaklık değişiklikleri her iki oluşumunu oviposition ve larva geliştirme oranları9,28etkileyebilir gibi larva bolluk yerel hava desen tarafından etkilenir.
Bu nedenle, larva ve yumurta laboratuvar içinde yetiştirme sağlıklı stokları hoverflies korumak için stratejiler deneyler yıl boyunca, sezon veya yerel hava olayları bağımsız olarak yapılabilir emin olmak için ihtiyaç vardır. Önemlisi, burada açıklanan tekniği sadece vahşi şeklindeki kadın üzerinden hoverflies doğurur. Bu Francuski, et al. tarafından yapılan bir çalışma olarak önemlidir 10 bir laboratuvar genetik çeşitlilik hoverflies nüfusu yetiştirilmiş, başlangıçta 120 olgun larva kurulan, bulundu hızla kayboldu. Bu nedenle bu genetik çeşitlilik doldurulan veya hatta tamamen yeniden kurulan, toplanan alan kişilerle her bahar10gerek bu ticari kırpma tozlaşma amaçlar için kullanılmak üzere sömürgelerinde korumak için tavsiye ettiler.
Görme veya Kur ve çiftleşme kullanılan diğer duyuları üzerinde çalışırken, böylece genetik çeşitlilik, koloni kurmak veya düzenli olarak toplanan alan kişilerle koloni Yenileyici korumak öneririz. Bu nüfusun genetik sürüklenme cinsel seçimi etkiler kadar önemlidir. Gerçekten de, vahşi, Erkek hoverflies tanımlamak ve uygun arkadaşları müdahale, aynı zamanda diğer erkek ile onların toprakları34savunmak tarafından hakları çiftleşme için rekabet gerek. Bu işlem en iyi görme ve kayma dikkat ile erkek çiftleşme içinde en başarılı olması muhtemeldir ve dolayısıyla bu özellikler sonraki nesile geçer sağlar. Devam eden bu işlemlerden sonuç etkisi kısmen, cinsel dimorphisms görsel yolu hoverflies35,36varlığı gösterilmiştir. Esaret erkekler başarılı olduğu gibi alan çiftleşme aynı engeller var mı: Birincisi, kadın kolayca kullanılabilir ve ikinci olarak küçük, sınırlı muhafaza çiftleşme erişim diğer caydırmak için hareket toprak davranışları etkisini olumsuzlar rekabetçi erkek. Drosophila melanogaster, cinsel seçim deneysel kaldırılması genel vücut büyüklüğü, testis boyutu ve sperm üretim37ve erkek indirimli oranda bir azalma ile esir nüfus üzerinde önemli bir etkisi için gösterilen Kur davranışları38. Böylece, program, cinsel seçimin herhangi bir göz olmadan üreme bir esir hem görsel ve davranışsal çalışmalar daha sonra yapılan üzerinde derin bir etkisi olabilir.
Sağlıklı hoverflies tutarlı bir tedarik sağlar basit ve düşük maliyetli bir çözüm burada açıklayın. Esnek ve basit-e doğru yeniden başlamak ve/veya, upscale araştırma talepleri bağlı olarak iletişim kuralıdır.
1. kurmak esir E. tenax koloni
2. Konut ve uzun vadeli bakım Hoverflies
3. laboratuvar Rearing, E. tenax
Biz görsel ve davranış Araştırmaları ( Şekil 1' de özetlenen) sağlıklı bir nüfus tutar bir üçlü strateji geliştirdik. Bizim Yöntem--dan belgili tanımlık vahşi (adım 1, Şekil 1) hoverflies koleksiyonu ile başlar. Bizim laboratuarımızda hoverflies yerleştirilmiştir böcek kafes veya plastik torbalar, yolcularınsuni uykularını çevriminin altında (2. adımda, resim 1), önemli ölçüde onların ömrü uzatan. Artan numaraları için çoluk çocuk vahşi şeklindeki kadın (adım 3, Şekil 1) yetiştirilen.
Biz vahşi hoverflies sayıda yakalamak zaman yoğun çaba olduğunu, düz ne zaman çevre koşulları olumlu bulduk. Buna ek olarak, başarılı olgun larva yetiştirme çiftlikleri vahşi hoverflies (1. adımda, resim 1), çok sayıda kaynak çok daha verimli bir yoldur sığır gübresi açılan çukurlar bizimle 0,03 m3 ' e kadar 700 larva toplama hasat gübre. Ayrıca, arka yumurta tarafından yakalanan gravid kadın seks bizim teknikleri başarılı (adım 3, Şekil 1) olduğu kanıtlanmıştır. Kadın bir Akdeniz iklimi (Adelaide) sonbahar sırasında yakalanan ve kış aylarında 24 kümeleriyle 19 kadın 20 haftalık bir süre içinde gözlenen yumurta, çeşitli toplu işlemleri koydu. Bu yumurta toplu halde, tüm bunların verimli ve larva tarama sonuçlandı suya 10 yerleştirildi. Larvalar 3 grupları daha sonra bu noktadan sonra alınan ve tavşan dışkı Bulamaç yerleştirilir, sonuçlanan 163 ± 34 (ortalama ± SD, N = 3) hoverflies, ile hiçbir gözlenen cinsiyet önyargı (Şekil 2) ortaya çıktı.
Bu laboratuvar yetiştirilen hoverflies sağlık ağırlığı karşılaştırılması ve kadın hoverflies esir alan kişilere göre lokomotor aktivite tarafından tespit edilmiştir. Genel lokomotor aktivite lokomotor aktivite izleme sistemi (DEKORASYONUNDA),39daha önce açıklandığı gibi kullanarak değerlendirildi. Esaret altında bizim yolcularınsuni uykularını 4 ay döngüsü sonra ağırlık (Şekil 3A) ya da etkinlik (Şekil 3B) hiçbir önemli farklılıkları yetiştirilen laboratuvar ve vahşi yakalanan hoverflies arasında tespit edildi. E. tenax muhafaza ne zaman laboratuvar yolcularınsuni uykularını çevriminin kullanmanıza gerek kalmadan uzun ömürlü, bir ömrü 2,5-3 ay (73 ± 5 kadın için 7 gün) ve 79 ± 4 gün 11 erkekler için önemli bir azalma gördüm. Ne zaman hoverflies yolcularınsuni uykularını tutuldu aşan 12 ay yaşayabilir.
Ayrıca, uzun vadeli bakım bizim açıklanan yöntemleri kullanarak, etkisini daha da yetiştirilen laboratuvar hoverflies her iki cinsiyet için zaman içinde ağırlık bir karşılaştırma tarafından değerlendirildi. Biz sürekli olarak tartım kadın ile erkek karşılıkları (p < 0,0001, iki yönlü ANOVA, N = 12, Şekil 4) fazla ağırlık önemli bir artış için her iki cinste, 4 aylık bir dönemde gözlenen.

Şekil 1: Akış diyagramı için sağlıklı esir nüfusu bakım yöntemleri anahat oluşturma E. tenax. (1) burada açıklanan yordamı her iki Olgun larva inek gübresi (adım 1.2) üzerinden veya serbestçe uçan hoverflies (adım 1.3) topluluğu ile başlar. (2) hoverflies böcek kafes veya plastik torbalar, sayı üzerine bağımlı yerleştirilmiştir. 8-10 ° C'de 3-4 günde bozuldu bir yolcularınsuni uykularını döngüsünde tutulur. (3) toplanan larva onların inek gübresi (adım 3.2) tutulur. Laboratuarda koydu yumurta bir tavşan dışkı Bulamaç (adım 3.3) yerleştirilir. Olgunluk ulaşmak zaman, 3rd INSTAR larva nerede onlar YavruIar çevreleyen testere toz sürün. Eclosion 6-10 gün sonra ortaya çıkar ve eclosed hoverflies Konut (adım 2) yerleştirilir. Bu dosyayı indirmek için buraya tıklayınız.

Şekil 2: Numarası ve cinsiyet oranı E. tenax başarılı bir şekilde yetiştirilen bireysel yumurta toplu işlemleri üzerinden. E. tenax pupa üzerinden bu eclosed sayıda yumurta 3 toplu halde geliştirilmiş veri göstermek bizim laboratuarımızda koydu. Yumurta vahşi yakalanan kadın tarafından atılmıştır. Renk kodlu sineklerin seks için verilerdir. Oranı anlamlı bir fark vardır.

Şekil 3: Nüfus sağlık laboratuvarında değerlendirilmesi yetiştirilen ve alan toplanan kadın hoverflies uzun vadeli esaret sonra. (A) laboratuvar yetiştirilen ve alan arasında Ağırlık karşılaştırma tutsak yolcularınsuni uykularını (N = 12) altında 4 ay sonra kadın hoverflies yakalanan. (B) aktivite düzeyleri laboratuvar yetiştirilen ve alan kadın hoverflies 4 ay sonra tutsak yolcularınsuni uykularını altında ele geçirdi. Hoverflies lokomotor aktivite lokomotor aktivite sistemde onlar hareketi sırasında bir kızılötesi ışını kırarak tarafından ölçüldü. Daha önce biz faaliyet lokomotor aktivite monitör sistemi39 ' ikinci tam gün gün ortasında 6,7 saat arasında ortalama olarak (Nalan yakaladı= 9, NLaboratuvar yetiştirilen= 12). Ortanca, her kutu çizimi merkezi işareti gösterir veri ve bıyık için 75inci testlerinde 25inci kutusu kenarları en fazla veri için en az ve genişletir.

Şekil 4: Uzun vadeli bakım etkisi laboratuvar ağırlığını karşılaştırılması yetiştirilen hoverflies her iki cinsiyetten. Verileri hoverfly ağırlık esaret yolcularınsuni uykularını altında nda zamanın bir fonksiyonu olarak göstermek. Tüm hoverflies bizim laboratuvar (her veri noktasında N = 12) ve t yumurtadan yetiştirilen edildi gibi = 0'a eşit pupa kuluçka süresi, esaret zamanında hayvanlar yaşlandıkça aynıdır. Ortanca, her kutu çizimi merkezi işareti gösterir veri ve bıyık için 75incitestlerinde 25inci kutusu kenarları en fazla veri için en az ve genişletir.
Bizim yöntemlerle (Şekil 1) hoverflies edilmiş laboratuvar olarak 1 yıl içinde bir süre için muhafaza ve başarıyla esaret39' 7 ay sonra davranış deneylerde kullanılan. Nitekim, counterintuitive, hoverflies daha doğal bir ortamda tutulması görünse bile 12 s ışık: 12 altında oda sıcaklığında s karanlık koşullar önemli ölçüde azalır onların yaşam süresi 2-3 ay. E. tenax bizim yolcularınsuni uykularını döngüsü için bir yıldan daha önceki önemli ölçüde uzun bakımı farklı protokolleri (77 gün33, 4 ay9, 18 haftalık30) kullanarak çalışır. Artan bu uzun ömürlü etkileyen ana faktör muhtemelen 8-10 ° C'de yolcularınsuni uykularını kullanılır Deliği hazırda bekleme kırarak, her 3-4 gün (2. adımda, resim 1), biz hoverflies hem yem ve kendi kendine damat, böylece olarak gözlenen artış ağırlık (kanıtladığı beslenme durumu ve hoverflies, refah sağlamak için izin Şekil 4) ve Lokomotor aktivite bir değişiklik tutsak (Şekil 3ve bkz:39) uzun süre sonra bile yok. Nitekim, yolcularınsuni uykularını, başarısız denemeleri edebiyat raporlarında böylece artmış mortalite ve kalıp9varlığı için önde gelen hazırda bekleme döngüsü bozulmaz.
Ayrıca, bazı tartışmalara polen sağlanması bir besin kaynağı olarak olarak edebiyat boyunca vardır. Birkaç arı polen özel olarak oviposition için yeterli değildir ve yalnızca gerçekten taze veya kuru polen sağlanması uygun9,29olduğunu söyleyin. Arı polen bal ve su ile tamamlayan tarafından uzun ömür ve oviposition, Esaret, cinsiyetler (Şekil 4) ve hala içinde meydana gelen oviposition görülen kilo artışı ile uzun süre sonra bile görüyoruz ki bizim bulgular göstermektedir Kadın esaret39' den fazla 5 ay sonra. Artan bu uzun ömürlü tüm yaşam evreleri hoverflies davranışlarını incelemek için bize izin verir.
Alanında, kadın hoverflies önce mevsimlik hazırda bekleme döllenmiş ve üreme diapause, nerede sperm depolanır ve yumurta bahar28kadar az gelişmiş, kalan kalır. Tipik bir erkek 60 gün293000 yumurta atma yeteneğine sahip olduğunu göz önüne alındığında, bu yumurta yetiştirme bu nedenle bizim esir nüfusu artırmak için hızlı ve verimli bir şekilde var. Ancak, geçerli anlayışımız hazırda bir süre sonra yumurta geliştirme yol açan faktörlerin sınırlıdır. Sıcaklık, nem, ışık şiddeti ve beslenme durumu tüm üreme diapause28,40kontrol bir rol oynamaya olarak önerilmiştir. Gibi faktörlerin deneysel işleme için daha büyük bir yönetim oviposition zamanlama ve oranları neden olabilir.
Canlılığı çok daha uzun olabilir, ancak benzer şekilde, biz başarıyla larva, gelişimi yanı sıra Pupa, eclosion 2 hafta boyunca 8-10 ° C'de karanlık depoda tarafından ertelediniz. Nitekim, Heal30 37 gün pupa sıcaklık 10 ° C'ye 25 ° C ne zaman kesildi bir pupa süresi artış bildirdi Bu stratejileri istihdam ve yumurta üretimi ve/veya pupa gelişimini geciktirmek esir nüfusun demografik büyük bir manipülasyon için izin verecek.
Arz zamansal tutarlılık büyük verim bizim gereksinimleri için daha çok önemli olmakla birlikte, bu tozlaşma seralarda gibi diğer kullanımlar için daha önemli olabilir. Bizim teknik tavşan dışkı ile kullanırken, biz yumurta (N = 3) her debriyaj 163 ± 34 eclosed hoverflies olduğunu bulmuşlar. Verilen bu tipik bir erkek 200 yumurta40bırakır, biz bunlar larva büyüme9 önemli ölçüde etkileyen olarak karıştığı olmuştur olarak azalan ya da aşırı kalabalık ve gıda rekabet veya sıcaklık ayarlama bu verim artırmak mümkün olabilir ,31,40,41. Ancak, temel medya büyük ölçüde verim32etkiler hiçbir gösterge yoktur. Buna ek olarak, diğer omurgalı29,30,31,42gelen dışkı aksine tavşan dışkı olduğunu nispeten koku ücretsiz, koloni normal laboratuvar koşullarında tutulması izin ezelî belgili tanımlık lüzum için ek havalandırma. Larva medya yoğunluğunu azaltarak veya beslenme ekleyerek Maya gibi takviyeleri gibi 20-25 ° C arasında sabit bir sıcaklıkta tutulması tam verim31,32, iyi duruma getirmek muhtemelen yeterli olacaktır 40.
Özgürce hoverflies uçan veya genetik olarak farklı bir esir nüfus sürdürülmesi yeterli sayıda toplama ve pratik pratik her iki ve küçük ölçekli araştırma projeleri için kısıtlayıcı zaman. Bu nedenle, yıl boyunca kullanım için bir araştırma ortamda en pratik Seçenekler E. tenax , vahşi şeklindeki dişiler yavru yetiştirme ve olgun larva7, hasat tarafından malzemeleri ilave izin verir. Bu yöntemler içinde koleksiyonu ortaya çıkabilir, her iki yetişkin hoverflies uzun ömür sağlamak için bir ihtiyaç ve herhangi bir yumurta yetiştirme koydu mevsim tarafından sınırlı olarak gravid kadın yakalandı.
Yazarlar ifşa gerek yok.
Laboratuarımızın araştırmada Şu anda Avustralya Araştırma Konseyi (ARC, DP170100008 ve DP180100144), bize hava kuvvetleri Office bilimsel araştırma (AFOSR, FA9550-15-1-0188) ve Stiftelsen Olle Engkvist Byggmästare tarafından finanse edilmektedir (2016/348). Biz teşekkür ederiz hoverfly hisse senetleri, Cederholms Lantbruk ve C M & T L yeşil & Son inek gübresi ve hoverflies onların çiftlikleri, erişim için geliştirmek için katkıda bulunan laboratuvar üyeleri geçmiş ve Adelaide ve Uppsala Botanik Bahçeleri koleksiyonu için izin verir ve devam eden destek.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Arı Poleni | Orman Süper Gıdalar | her marka arı poleni uygundur | |
| Bal | Bramwells | her marka sıvı bal uygundur | |
| Tavşan dışkısı | , bulamaç haline getirilmiş veya domuz gübresi ile ikame edilebilir | ||
| BugDome | Avustralya Plastik Torbalar EM42222 | ||
| Woolworths Homebrand | |||
| Cibinlik | Clas Ohlson | 34-1113 | |
| Pamuk Topları | Woolworths Select | ||
| Buzdolabı | Hisense | buzdolabının 8-10 ° C'lik sabit bir sıcaklığa sahip olması gerekir; C | |
| Kovalar (2-3L) | |||
| Büyük plastik küvetler (30L) | |||
| Odun talaşı | Pollards Talaş Malzemeleri | MaxiFlake (75) | |
| Çanta klipsleri | IKEA | Bevara 303.391.70 | |
| Petri Kabı (100mm x 20mm) | Corning | 430167 |