Yöntem makalesi

Endoskopik Submucosal enjeksiyon malzemesi performans değerlendirilmesi için yeni bir Ex Vivo Model

5.9K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/58029

⸱

19 Ekim 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Molecular Gastroenterology and Hepatology, Graduate School of Medical Science, Kyoto Prefectural University of Medicine, 2Department of Infectious Diseases, Graduate School of Medical Science, Kyoto Prefectural University of Medicine

Bu makalede

Özet

Biz sürekli gerginlik domuz gastrik numune için geçerlidir yeni bir ex vivo modeli geliştirdi. Bu gelişme çeşitli SIMs performansını (yükseklik ve submucosal yükselme süresi) doğru değerlendirmek mümkün kıldı.  Bu yeni modelin ayrıntılı kurulum yöntemi açıklanmıştır.

Özet

Submucosal enjeksiyon materyalleri (SIMs) performansını artırmak için erken gastrointestinal kanser endoskopik tedavisi önemlidir. SIM performans yüksek performanslı SIMs geliştirmek için doğru bir şekilde değerlendirebilir bir ex vivo modeli kurmak için önemlidir. Bizim önceki çalışmada, örnek'in uçları için sürekli gerginlik uygulayarak çeşitli SIMs ayrıntılı performansını değerlendirmek için kullanılan yeni bir ex vivo modeli geliştirdik. Biz de önerilen yeni ex vivo modeli doğru submucosal yükseklik yükseklik (SEH) ölçüm Tekdüzen koşulları ve SIMs türleri performanslarının detaylı karşılaştırma altında izin verdiğini doğruladı. Burada, biz yeni ex vivo tarif modeli ve bu modelin ayrıntılı kurulum yöntemi açıklar. Yeni model tüm bölümleri kolay elde beri yeni modelinizin kurulumuna hızla tamamlandı. SEH çeşitli Sims yeni modelini kullanarak daha doğru bir şekilde ölçülen. SIM performans belirler kritik faktör yeni modeli kullanılarak belirlenebilir. Faktör belirlenmiştir sonra SIM geliştirme hızı büyük ölçüde artacaktır.

Giriş

Endoskopik submucosal diseksiyonu (ESD) ve endoskopik mukozal rezeksiyon (EMR) aşamasındaki gastrointestinal kanser1,2için şu anda ortak tedaviler vardır. Submucosal enjeksiyon malzemesi (SIM) submukoza enjekte EMR ve ESD yordamlar2,3için en önemli adımlardan biri. Submucosal yükseklik ve bakım yükselen submucosal EMR/ESD güvenli bir şekilde yürütülmesi için kritik ölçütlerdir.

Her ne kadar normal salin (NS) endoskopik tedavisi4,5, sodyum hyaluronate (HA) icadından beri bir SIM kullanılan bir tedavi son yıllarda6,7olarak kullanılmaya başlandı. HA yaygın endoskopik tedavi sonuçlarının karşılaştırılması olarak yüksek performanslı8,9,10,11nedeniyle üstün bir SIM kullanılır oldu. Şu anda, varolan SIMs arasında bir performans karşılaştırma yapılmıştır ve yüksek performanslı SIMs için başka bir çift SIM5,12,13,14tanımlamak için geliştirilmiştir, 15,16,17,18.

Çünkü insan gastrointestinal sistem performansında SIM tahmini çok zor19,20,21 bir domuz mide örnek kullanarak ex vivo modeli SIM performansını değerlendirmek için kullanılmıştır , 22. ancak, bu geleneksel ex vivo modeli son derece basittir ve iyileştirme için kapsamı vardır. İnsan sindirim mukozasında daha yakın bir ortamda üreyen doğru SIM performans değerlendirilmesi sağlayacaktır.

Bizim önceki çalışmada, örnek'in uçları için sürekli gerginlik uygulayarak çeşitli SIMs ayrıntılı performansını değerlendirmek için kullanılan yeni bir ex vivo modeli geliştirdik. Biz de önerilen yeni ex vivo modeli doğru o ölçüm Tekdüzen koşulları ve detaylı bir karşılaştırma SIMs23türleri performanslarının altında verdiğini doğruladı.

Bu çalışmada yeni ex vivo modelin tam bir görünümünü sunmak ve yeni ex vivo modeli detaylı kurulum metodolojisi videolar ve resimler kullanarak ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Yeni ex vivo modeli kolayca kullanılabilir parçadan oluşur ve hızlı bir şekilde ayarlanabilir. Detaylı kurulum metodoloji açıklamalarını yeni modelinin yaygınlaştırılması için katkıda bulunacaktır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Aşağıdaki protokol Kyoto Kagawa Tıp Üniversitesi hayvan bakımı kuralları izler.

1. bir domuz karın kullanarak numune hazırlanması

Not: Numune ex vivo modeli (Şekil 1) kullanılmak üzere hazırlamak için ilk adımdır. Domuz gastrik duvar kalınlığı mide farklı alanlarında değişir. İnsan mide nispeten benzer domuz midenin üst üçüncü kullanma. Nerede submucosal yükselmesi nedeniyle fibrozis bulunamadı uygunsuz numuneler hariç.

  1. Gastrik numuneler ile yaklaşık 6 × 6 cm boyutlarında kareler kesilmiş.
  2. -30 ° c sıcaklıkta hemen mide numuneler depolamak
  3. Tek tip ölçüm koşulları sağlamak için dondurulmuş gastrik numuneler hemen önce ölçüm yordamı çözülme.

2. ayrıntılı kurulum yeni bir Ex Vivo Model metodolojisi

Not: iki farklı şekilde çözülmüş örnek bir gemide uzatmayayeltenmişti. Geleneksel ex vivo modelinde, numune iğneler (Şekil 1A)19,20,21,22ile düzeltmek. Öte yandan, yeni ex vivo modelinde, düzeltmek veya her iki ucunda da sürekli gerginlik (Şekil 1B, C) üretmek için numune kliplerle uzatın. Yeni model tüm bölümleri almak kolaydır ve yeni modelinizin kurulumuna hızla tamamlanabilir (Şekil 2). Yeni model prosedürü (Şekil 3) aşağıdaki gibidir:

  1. Paslanmaz çelik klibi ve anahtar tel ve S şeklinde kanca (Şekil 3A) bağlayın.
  2. Tel ve S şeklinde kanca ve ağırlık (Şekil 3A) bağlayın.
  3. Kanca kablonun diğer ucunu bağlayın. Bir traksiyon aygıtı yukarıdaki işlemde (Şekil 3B) tamamlanır.
  4. Makaralar (Şekil 2b) Bankası (Şekil 3 c) her iki uçta da düzelt.
  5. Kauçuk plaka (6 x 6 cm) Bankası (Şekil 3 c) ortasına yerleştirin.
  6. Gastrik numune kauçuk plaka ve numune çekiş cihaz klip ile biter çimdik üzerine koyun.
  7. Ağırlık (her iki tarafta) kasnak asmak. Böylece, sürekli gerginlik numune (Şekil 4) uygulanabilir.
  8. Çünkü SEH, ölçüm başlatmak yeni modelinizin kurulumuna tamamen bittikten sonra (bkz: adım 3 aşağı).

3. SIM performans değerlendirilmesi

Not: Bu çalışmada, biz normal salin (NS) ve % 0,4 sodyum hyaluronate (HA) SIMs test edilmesi ve iki Sims SEH ölçmek için kullanılır. Üç bağımsız ölçümleri yapılmaktadır. Elde edilen veriler ortalama ve standart sapma (SD) ifade edilir. İstatistiksel analiz istatistiksel analiz yazılımı (GraphPad prizma 7) kullanılarak gerçekleştirildi. Biz sürekli değişkenler (SEH) analiz bir öğrenci t-testi ve büyüklükleri ile P ile < 0,05 önemli kabul edildi. SEH üzerine yazmalarının kullanılmasını ölçüm (Şekil 5) gibidir.

  1. Mukoza submucosal yükseltme yordamı önce yüksekliğini dayalı yükseklik göstergesi sıfır noktası ayarlama gerçekleştirin. Ayrıntılı olarak, sıfır noktası ayarlama hazır ayarını scriber mukozal yüzeyin yüksekliğini sabitleme sonra butona basarak gerçekleştirin.
  2. Her çözüm 2.0 mL yatay olarak 2.5 mL şırınga ve 23'lik iğne, bir submucosal yükseltme yordamı (Şekil 5A-C) kullanarak gerçekleştirmeyi numune kenar boşluklarına submukoza içine enjekte.
  3. Ölçü birimi derhal bir dijital yükseklik gage 0, 2.5, 5, 7.5, 10, 12.5, 15, 17,5, 20, 30, 45 ve 60 dk enjeksiyon (Şekil 5 d) sonra kullanarak SEH. Ayrıntılı olarak, ne zaman scriber submucosal yükseklik üst fixing yükseklik ölçerde görüntülenen yükseklik kaydeder.
  4. Üç bağımsız ölçümleri gerçekleştirmek ve elde edilen sonuçlar ortalama ve standart sapma ifade eder.
  5. Uygun istatistiksel yazılım kullanarak elde edilen verileri analiz etmek ve SIMs (performans her SIM arasında karşılaştırılabilir.) performansını değerlendirmek

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

SEH zaman yeni ex vivo modeli veya geleneksel ex vivo modeli içinde ölçüldü. SEH (NS) [NS enjekte içine iğne ile (0.0 N) sabit numune submukoza] geleneksel modeli kullanarak ölçülen değerler 5.7 mm (0 dk), 3.6 mm (5 dk), 3.0 mm (10 dakika), vardı ve 2.2 mm (30 dakika). Bu şekilde, giderek artan bir mesaj enjeksiyon zamanı SEH değerleri azalmıştır. Benzer bir analiz % 0,4 kullanarak gerçekleştirilen NS yerine HA. SEH üzerine yazmalarının kullanılmasını değerleri (% 0,4 HA...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Yeni modeli için kullanılan domuz mide rezeksiyonu hemen sonra bir dondurucuda saklanmalıdır ve domuz mide tazelik SEH ölçüm için gerekli olduğu için buz gibi sonra bir kaç ay içinde kullanılması. (Biz SEH dondurulmuş ve çözülmüş gastrik örnekler kullanarak ölçülen ve SEH ölçüm sonucu hiçbir fark olduğunu doğruladı.)

Gastrik numuneler kalitesini büyük ölçüde domuz mideleri bireysel farklılıklar tarafından etkilenir. Bu nedenle, bu belli ki kalın örnek veya örnekleri ile ölçüm önce birçok çizik...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Bu eser translasyonel araştırma programı ve Kyoto yenilikçi tıbbi teknoloji araştırma ve geliştirme destek sistemi tarafından desteklenen; Tıbbi araştırma ve geliştirme (AMED) Japonya ajansı yenilikçi tıbbi teknoloji (TR-SPRINT) pratik uygulama için stratejik promosyon.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Ağırlık (153.1 g)
sabit tip kasnakH.H.H.VS25
paslanmaz çelik telimalatı Nissa ZincirKesme teli Y-5
147 mm genişliğinde paslanmaz çelik klipsKOKUYO12
çelik anahtar teliNissa ZincirP-702
paslanmaz çelik S şekilli kancaTRUSCO NAKAYAMATCS1.2
kilitlenebilir paslanmaz çelik S-şekilli kancaMizumoto Makinesi MfgB2054
dikdörtgen ahşap taban (45 x 60 cm)yokyok
kauçuk plaka (5 x 5 cm)yok
yok dijital yükseklik ölçerMitutoyoHDS-20C
2.5 mL şırıngaTerumoSS-02SZ
23 gauge iğneTerumoNN-2332R
MucoUpBoston Scientifichiçbiri%0.4 sodyum hyaluronat (HA)
salin (20 mL)Otsuka İlaçyoknormal salin (NS)
GraphPad Prism 7 yazılımıGraphPad Incyok
0,45 mm çapında cm uzunluğunda paslanmaz

Kaynaklar

  1. Ono, H., et al. Endoscopic mucosal resection for treatment of early gastric cancer. Gut. 48 (2), 225-229 (2001).
  2. Conio, M., Ponchon, T., Blanchi, S., Filiberti, R. Endoscopic mucosal resection. The American journal of gastroenterology. 101 (3), 653-663 (2006).
  3. Soetikno, R. M., Gotoda, T., Nakanishi, Y., Soehendra, N. Endoscopic mucosal resection. Gastrointestinal endoscopy. 57 (4), 567-579 (2003).
  4. Iishi, H., et al. Endoscopic resection of large sessile colorectal polyps using a submucosal saline injection technique. Hepato-gastroenterology. 44 (15), 698-702 (1997).
  5. Katsinelos, P., et al. A comparative study of 50% dextrose and normal saline solution on their ability to create submucosal fluid cushions for endoscopic resection of sessile rectosigmoid polyps. Gastrointestinal endoscopy. 68 (4), 692-698 (2008).
  6. Yamamoto, H., et al. A novel method of endoscopic mucosal resection using sodium hyaluronate. Gastrointestinal endoscopy. 50 (2), 251-256 (1999).
  7. Yamamoto, H., et al. A successful single-step endoscopic resection of a 40 millimeter flat-elevated tumor in the rectum: endoscopic mucosal resection using sodium hyaluronate. Gastrointestinal endoscopy. 50 (5), 701-704 (1999).
  8. Yamamoto, H., et al. Usefulness and safety of 0.4% sodium hyaluronate solution as a submucosal fluid "cushion" in endoscopic resection for gastric neoplasms: a prospective multicenter trial. Gastrointestinal endoscopy. 67 (6), 830-839 (2008).
  9. Yamamoto, H., et al. Successful en-bloc resection of large superficial tumors in the stomach and colon using sodium hyaluronate and small-caliber-tip transparent hood. Endoscopy. 35 (8), 690-694 (2003).
  10. Kishihara, T., et al. Usefulness of sodium hyaluronate solution in colorectal endoscopic mucosal resection. Digestive endoscopy. 24 (5), 348-352 (2012).
  11. Yoshida, N., et al. Endoscopic mucosal resection with 0.13% hyaluronic acid solution for colorectal polyps less than 20 mm: a randomized controlled trial. Journal of gastroenterology and hepatology. 27 (8), 1377-1383 (2012).
  12. Uraoka, T., et al. Effectiveness of glycerol as a submucosal injection for EMR. Gastrointestinal endoscopy. 61 (6), 736-740 (2005).
  13. Conio, M., et al. Comparative performance in the porcine esophagus of different solutions used for submucosal injection. Gastrointestinal endoscopy. 56 (4), 513-516 (2002).
  14. Moss, A., Bourke, M. J., Metz, A. J. A randomized, double-blind trial of succinylated gelatin submucosal injection for endoscopic resection of large sessile polyps of the colon. The American journal of gastroenterology. 105 (11), 2375-2382 (2010).
  15. Lee, S. H., et al. A new method of EMR: submucosal injection of a fibrinogen mixture. Gastrointestinal endoscopy. 59 (2), 220-224 (2004).
  16. Hurlstone, D. P., et al. EMR using dextrose solution versus sodium hyaluronate for colorectal Paris type I and 0-II lesions: a randomized endoscopist-blinded study. Endoscopy. 40 (2), 110-114 (2008).
  17. Huai, Z. Y., Feng Xian, W., Chang Jiang, L., Xi Chen, W. Submucosal injection solution for endoscopic resection in gastrointestinal tract: a traditional and network meta-analysis. Gastroenterology research and practice. 2015, 702768(2015).
  18. Yandrapu, H., et al. Normal saline solution versus other viscous solutions for submucosal injection during endoscopic mucosal resection: a systematic review and meta-analysis. Gastrointestinal endoscopy. , (2016).
  19. Fernandez-Esparrach, G., Shaikh, S. N., Cohen, A., Ryan, M. B., Thompson, C. C. Efficacy of a reverse-phase polymer as a submucosal injection solution for EMR: a comparative study (with video). Gastrointestinal endoscopy. 69 (6), 1135-1139 (2009).
  20. Tran, R. T., Palmer, M., Tang, S. J., Abell, T. L., Yang, J. Injectable drug-eluting elastomeric polymer: a novel submucosal injection material. Gastrointestinal endoscopy. 75 (5), 1092-1097 (2012).
  21. Akagi, T., et al. Sodium alginate as an ideal submucosal injection material for endoscopic submucosal resection: preliminary experimental and clinical study. Gastrointestinal endoscopy. 74 (5), 1026-1032 (2011).
  22. Eun, S. H., et al. Effectiveness of sodium alginate as a submucosal injection material for endoscopic mucosal resection in animal. Gut and Liver. 1 (1), 27-32 (2007).
  23. Hirose, R., et al. Development of a new ex vivo model for evaluation of endoscopic submucosal injection materials performance. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 79, 219-225 (2018).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Endoskopik TerapiSabit GerilimSubmukozal Elevasyon Y ksekli iDomuz MidesiTraksiyon CihazDijital KumpasHyaluronat EnjeksiyonuT bbi Cihaz De erlendirmesi

İlgili makaleler