Hyaluronik asit Hydrogels hasta kaynaklı Glioblastoma hücreleri 3 boyutlu kültür için dayalı.

Weikun Xiao; Arshia Ehsanipour; Alireza Sohrabi; Stephanie K. Seidlits

doi:10.3791/58176

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Hyaluronik asit Hydrogels hasta kaynaklı Glioblastoma hücreleri 3 boyutlu kültür için dayalı.

12.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/58176

⸱

24 Ağustos 2018

Weikun Xiao¹ , Arshia Ehsanipour¹ , Alireza Sohrabi¹ , Stephanie K. Seidlits²

¹Department of Bioengineering, University of California, Los Angeles, ²Department of Bioengineering, Jonsson Comprehensive Cancer Center, Broad Stem Cell Research Center, Brain Research Institute, University of California, Los Angeles

Bu makalede

Özet

Burada, üç boyutlu kültür glioblastoma hasta elde edilen hücre içinde uygun tunable Biyomalzeme beyin matris taklit etmek için tasarlanmış bir protokol mevcut. Bu yaklaşım bir vitro, in vivo glioblastoma hücre kültüründe genellikle kayıp birçok özelliklerini korur deneysel platformu sağlar.

Özet

Glioblastoma (GBM) en yaygın henüz en ölümcül, merkezi sinir sistemi kanseri de öyle. Son yıllarda, birçok çalışma nasıl benzersiz beyin çevre, hyaluronik asit (HA), gibi hücre dışı matriks (ECM) GBM ilerleme ve işgal kolaylaştırır üzerinde odaklanmıştır. Ancak, çoğu vitro kültür modelleri dışında bir ECM kapsamında GBM hücre içerir. GBM hücre fare xenografts de yaygın olarak kullanılır. Ancak, in vivo modelleri karmaşık tümör microenvironment tümör davranış özelliklerini tek tek katkılarıyla ayırmak zor hale. Burada, araştırmacılar bağımsız olarak HA konsantrasyon ve sertliği değiştirmek sağlar bir HA hidrojel tabanlı, üç boyutlu (3D) kültür platformu açıklayın. Yüksek molekül ağırlıklı HA ve Polietilen glikol (PEG) çapraz Michael-türü ek huzurunda canlı hücreleri ile olan hydrogels oluştururlar. Hasta kaynaklı GBM hücreleri sergi canlılığı ve nükleer silahların yayılmasına karşı 3D hidrojel kültürleri oranları kadar iyi, ya da standart olarak gliomaspheres kültürlü zaman daha iyi. Hidrojel sistem ayrıca belirli hücre-ECM etkileşimleri etkileri yalıtmak için ECM mimetic peptidler birleşmesiyle sağlar. Böylece canlı hücreleri 3D kültüründe görüntüsü Hydrogels optik saydamdır. Son olarak, HA hidrojel kültürler moleküler ve hücresel analizleri, PCR, Western blot ve ayirt boyama tarafından takip cryosectioning gibi standart teknikleri ile uyumludur.

Giriş

Üç boyutlu (3D) kültür sistemleri yerli dokularda onların iki boyutlu (2D) karşılıkları¹^,²daha iyi hücreleri ve onların çevreleyen hücre dışı matriks (ECM) arasındaki etkileşimler özetlemek. Doku mühendisliği gelişmeler yeni 1) nasıl kimyasal ve fiziksel bileşenleri kontrollü soruşturmalar matris microenvironment etkileyen hücre davranışları ve 2) etkinliğini sağlayan gelişmiş, 3D kültür platformlar vermiştir terapötik hastalıkları, kanserler²de dahil olmak üzere bir dizi için stratejiler. Vitro modelleri sinyalleri, endokrin ve bağışıklık gibi sistemik faktörler sorumlu olamad....