Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Yanıt Merkezi sinir sistemi manipülasyonlar imzalat Sıçanlarda Böbrek sempatik sinir faaliyette akut değişiklikler miktarının

7.6K görüntülenme

DOI:

10.3791/58205

11 Eylül 2018

Bu makalede

Özet

Sempatik ve kardiyovasküler Yanıt Merkezi sinir sistemi (MSS) manipülasyonlar ölçme yöntemleri ilerleyen nörolojik için önemlidir. Bu iletişim kuralı ile ölçme ve böbrek sempatik sinir etkinliği (RSNA) (hayatta kalma olmayan) imzalat sıçanlarda akut değişiklikler miktarının bilim adamları yardımcı olmak için geliştirilmiştir.

Özet

Böbrek sempatik sinir etkinliği (RSNA) ve ortalama arteriyel basınç kardiyovasküler ve otonomik araştırmada önemli parametreler şunlardır; Ancak, sınırlı kaynakları bilim adamları ölçme ve bu değişkenlerin analiz teknikleri yönetmenlik vardır. Bu iletişim kuralı RSNA ve imzalat sıçanlarda ortalama arter basıncı ölçüm yöntemlerini açıklar. Protokolü de merkezi sinir sistemi (MSS) manipülasyon için RSNA kayıtlar sırasında beyin erişmek için yaklaşımları içerir. RSNA kayıt tekniği ile uyumludur farmakolojik, optogenetic, veya MSS elektrik stimülasyon. Bir dedektif kısa vadeli (min h) otonomik yanıt anatomik olarak CNS çekirdeği ile ilişkilendirmek için hayatta kalma sigara deneylerde ölçtüğünüzde yararlı bir yaklaşımdır. Yaklaşım içinde rats RSNA kronik (hayatta kalma) kayıtları elde etmek için kullanılmak üzere tasarlanmamıştır. RSNA, ortalama deşarj RSNA doğrultucu ve ortalama arteriyel basınç olabilir sayılabilir ve daha fazla parametrik istatistik testleri kullanılarak analiz. Venöz erişim, ortalama arteriyel basınç telemetrically kayıt ve beyin fiksasyon gelecekteki histolojik analizler için edinme yöntemleri de makalesinde açıklanmıştır.

Giriş

Kalp-damar sisteminin otonom kontrolü hakkında önceden klinik keşifler hipertansiyon, kalp yetmezliği ve kronik böbrek hastalığı gibi hastalıkları yönetme stratejileri bilgilendirmek. Sempatik sinir sistemi ve düşük kardiyak vagus aşırı aktivite yüksek kan basıncı (tansiyon)1olarak katkıda bulunur. Kronik olarak yükseltilmiş böbrek sempatik çıkış katekoiamin salgılanmasını artırır ve kalp-damar/böbrek sistemleri2,3zararlı sonuçları ile renal kan akımı azalır. Otonomik disfonksiyon için önde gelen nörobiyolojik yolları tanımlamak için çalışmalar Rodents nasıl düzenleyen merkezi sinir sis....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm yöntemleri açıklanan Chicago Illinois Üniversitesi'nde kurumsal hayvan bakımı Komitesi tarafından kabul edildi.

1. iki kutuplu RSNA elektrotlar oluşturun

  1. Elektrot oluşturmak için yaklaşık 18 mm uzun paslanmaz çelik tel her iki parçalar kesin. Yaklaşık 15 mm uzun Boru polietilen (PE-50) bir parça kesti. Tel tel her iki tarafın çıkıntılı bırakarak borulama, içine iki adet yem.
  2. Yalıtım tellerin uçları kaldır; 2-3 mm maruz tel bırakarak teller kırpın. Bir ucunda, Erkek pim maruz tel üzerinden sarılmış. Tel için güvenli bir şekilde pins lehim, pins bir bağlayıcı şerit içinde güvenli ve epoksi ile bağlantı kapsar.
    Not: ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Şekil 1 bir örnek RSNA ve BP kaydından tedavisiydi anestezi sıçan göstermektedir. Phenylephrine bir İntravenöz enjeksiyon ortalama arteriyel basınç artışı teşvik ve baroreflex ve geçici sympathoinhibition4,6uyandırmak için kullanıldı. RSNA ölçmek için ham RSNA doğrultucu ve üst üste 10 s segmentler için Ortalama olarak; gürültü tahmin her kesiminden düşülen.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

RSNA ölçmek için önemli adımlar şunlardır: (1) kaçınarak renal arter ve sinirler, böbrek paraspinal kas ayıran zaman germe ve sinir segment üzerinde kayıt elektrotları yerleştirirken, böbrek sinir lifleri (2) dikkatle anatomi çevreleyen doku/gemi, doku, kan veya lenf sıvısı ve (4) önlenmesi sinir böbrek sinir ve silika jel sinir-elektrot birimine madeni yağ uygulayarak kurutma üzerinden ücretsiz (3) sağlanması bu elektrot teller var. Sorun giderme için kayıt sistemi yeterince topraklı olduğuna emin olmak önemlidir. Net b.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Anne M. Fink veri Bilimler International için Müşteri Danışma Kurulu üyesidir.

Teşekkürler

Bu çalışmada hemşirelik araştırma (K99/R00NR014369) için Ulusal Enstitüsü tarafından desteklenen bir durumdu.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Paslanmaz çelik telA-M Sistemleri; Sequim, WA791000RSNA elektrot
Polietilen (PE-50) boruVWR; Radnor, PA63019-048RSNA elektrodu; Damar Kanülasyonu
Minyatür pin konnektörüA-M Sistemleri; Sequim, WA520200RSNA elektrot
Sıkma aletiDaniels Manufacturing Corp.; Orlando, FLM22520RSNA elektrot
Bağlantı şeridiAmphenol; Clinton İlçesi, MI221-2653RSNA elektrot
JB Kwik EpoksiJB Kaynak, Kükürt Yayları, TX8270RSNA elektrot
SilikonPermatex; Hartford, CT2222RSNA elektrot
Heparin sodyum; Enjekte edilebilir (10 mL flakon, 1000 U/mL)KV Veteriner Malzemeleri; David Şehri, NEP03466Venöz hat açıklığı
Fenilefrin HCl; Enjekte edilebilir (1 mL şişe; 10 mg / mL)ACE Cerrahi Kaynağı; Brockton, MA950-6312Böbrek sempatoinhibisyonunun test edilmesi
Tek kancalı elastik cerrahi kalışlarHarvard Aparatı; Holliston, MA72-2595İnsizyon
İpek cerrahi bant3M, Minneapolis, MN1538-0Güvenli cerrahi kalışlar
İğneler, 20 GSigma-Aldrich; St. Louis, MOZ192554-100EAGemi kanülasyonu
Dumont # 7 kavisli forsepsGüzel Bilim Araçları; Foster City, CA11274-20Gemi kanülasyonu
5-0 ipek sütür bağlarıBraintree Scientific; Braintree, MASUT-S 106Damar kanülasyonu
Hassas hemostatik forsepsRoboz Cerrahi Alet A.Ş.; Gaithersburg, MDRS-7117Damar kanülasyonu ve RSNA cerrahisi
Crile Hemostatik forsepsGüzel Bilim Araçları; Foster City, CA13004-14İğne bükme
Telemetri vericisiData Sciences International; Minneapolis, MNPA-10Ortalama arteriyel basınç izleme (telemetri)
Yeniden jel şırıngaVeri Bilimleri Uluslararası; Minneapolis, MN276-0038-001Verici yeniden kullanımı (telemetri)
Tek kullanımlık basınç dönüştürücüTranspac; San Clemente, CAMI-1224Ortalama arteriyel basınç izleme
Clear-Cuff basınç demlikMILA International Inc.; Floransa, KY2281339Ortalama arteriyel basınç izleme
Damar kanülasyon forsepsleriGüzel Bilim Araçları; Foster City, CA00574-11Kateter yerleştirme
Siyah monofilament naylon 4-0 sütür, ters kesme iğnesiMcKesson Tıbbi-Cerrahi; San Francisco, CAS661GXGüvenli telemetri vericisi
Telemetri alıcısıVeri Bilimleri Uluslararası; Minneapolis, MNRPC-1Ortalama arteriyel basınç izleme (telemetri)
LabChart Pro (yazılım), PowerLab (edinme donanımı)AD Instruments; Colorado Springs, COML846, MX2 matrix 2.0 (Data Science International telemetrisi ile uyumlu)3 yazılım/edinme donanımı seçenekleri
SciWorks (yazılım), DataWave (edinme donanımı)DataWave Technologies, Loveland, CON/A
Spike 2 (yazılım), Micro1401-3Cambridge Electronic Design Ltd., Londra İngiltere1401-3
Mikro matkapRoboz Cerrahi Alet A.Ş.; Gaithersburg, MDRS-6300CNS cerrahisi
Stereotaksik cerrahi çerçevesiÇalmak; Wood Dale, IL51600CNS cerrahisi
10X ön amplifikatörlü mikroelektrot amplifikatörüA-M Sistemleri; Sequim, WA1800-2RSNA kayıt
EkartörleriGüzel Bilim Araçları; Foster City, CA17009-07RSNA cerrahisi
Mikro diseksiyon cımbızGüzel Bilim Araçları; Foster City, CA11251-10RSNA cerrahisi
Mikro kancaGüzel Bilim Araçları; Foster City, CA10064-14RSNA cerrahisi
Mineral yağFisher Scientific; Waltham, MA8042-47-5RSNA cerrahisi
Ses monitörüA-M Sistemleri; Sequim, WA3300RSNA cerrahisi
Silika jelWacker, München; AlmanyaRT601A-BRSNA ameliyatı
Elektrik klipleriTyco Electronics; Schaffhausen, İsviçreEB0283-000Perfüzyon iğnesinin topraklanması veya sabitlenmesi
Bonn makas, düz/keskin uçlarRoboz Surgical Instrument Co; Gaithersburg, MDRS-5840Perfüzyon
Gavaj iğnesiHarvard Cihazı; Holliston, MA75-0286Perfüzyon
Masterflex perfüzyon pompasıCole-Parmer; Vernon Hills, IL7524-10Perfusion
Masterflex platinle kürlenmiş silikon boruCole-Parmer; Vernon Hills, IL96410-15Perfüzyon
Formalin (% 10 tamponlu çözelti; 4 L)Sigma-Aldrich; St. Louis, MOHT501128Perfüzyon
SükrozSigma-Aldrich; St. Louis, MOS0389Kriyoproteksiyon

Kaynaklar

  1. Mancia, G., Grassi, G. The autonomic nervous system and hypertension. Circulation Research. 114 (11), 1804-1814 (2014).
  2. Kannan, A., Medina, R. I., Nagajothi, N., Balamuthusamy, S. Renal sympathetic nervous system and the effects of denervation on renal arteries. <....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Ortalama Arteriyel BasınçRSNA KaydıStereotaksik CerrahiBarorefleks DeğerlendirmesiTelemetri İmplantasyonuSinir DiseksiyonuOtonom Düzenleme