Biz bir yalın PCOS gibi fare modeli ile PCOS ve belgili tanımlık çoluk çocuk bu PCOS benzeri baraj üzerinden Patofizyoloji çalışmaya dihidrotestosteron Pelet gelişimi tanımlamak.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Polikistik over sendromu çalışmaya Hyperandrogenic fare modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Hyperandrogenemia kadın üreme ve metabolik işlevinde önemli bir rol oynar ve Polikistik over sendromu özelliğidir. PCOS kadınlarla taklit eden bir yalın PCOS gibi fare modeli geliştirmek klinik olarak anlamlı demektir. Bu protokol için böyle bir model açıklar. DHT (dihidrotestosteron) kristal toz Pelet 4 mm uzunluğunda ekleyerek (Pelet toplam uzunluğu ise 8 mm) ve aylık değiştirmek yerine, biz bir PCOS gibi fare modeli ile serum DHT seviyeleri 2 kat DHT (no-DHT) ile implante değil fareler daha yüksek üretmek mümkün. Biz üreme ve metabolik fonksiyon bozukluğu vücut ağırlığı ve vücut kompozisyonu değiştirmeden gözlenen. Süre kısırlık yüksek derecede sergilenmesi, küçük bir alt kümesi bu PCOS benzeri dişi fareler hamile kalabilir ve yavrularını gecikmeli ergenlik ve artan Testosteron yetişkin olarak gösterir. Bu PCOS benzer yalın fare modeli PCOS ve belgili tanımlık çoluk çocuk bu PCOS benzeri baraj üzerinden Patofizyoloji eğitim için yararlı bir araçtır.
Giriş
Hyperandrogenism polikistik over sendromu (PCOS) NIH kriterleri göre ve androjen fazlalığı ve PCOS (AE-PCOS) toplumun özelliğimizdir. PCOS ile kadın hamile zorluk ve gebelik komplikasyonları1riski artmıştır. Onlar hamile bile, dişi yavrularını bir olumsuz sağlık sonuçları2,3var. Hayvan modelleri çeşitli stratejileri4,5,6,7,8,9,10,
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Burada, detaylı protokol DHT Pelet hazırlık ve ekleme ve üreme ve metabolik testleri için mevcut. Bu çalışmada kullanılan fare karışık bir arka plan (C57/B6, CD1, 129Sv) olduğunu ve gıda ile muhafaza ve ad libitum Broadway araştırma bina hayvan tesiste Johns Hopkins Üniversitesi School of 24 ° c 14/10 h açık/koyu döngüsünde su Tıp. Tüm yordamları Johns Hopkins Üniversitesi hayvan bakım ve kullanım Komitesi tarafından kabul edildi.
1. PCOS benzer fare modeli oluşturmak
-
DHT Pelet hazırlık
- Otoklav Silastik tüp sterilize etmek için. Bir tıraş bıçağı ile 15 mm uzunluğu Silastik tüp kesme;
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Serum DHT seviyeleri ve glikoz tolerans testi
DHT seviyeleri toplanan serum her iki ELISA ve LC-MS tarafından ölçüldü protokolü 1,24-1,25 ve 2.9, 3.0 göre. DHT mutlak değerler farklı kütle spektrometresi ve ELISA, ancak, göreli kat no-DHT ekleme her iki deneyleri benzer ve genelinde15,23,24 ( deneyler DHT vs (yaklaşık .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Hyperandrogenism PCOS önemli bir özelliktir. Bu protokol için kullanılan (iki yüksek no-DHT farelerde DHT farelerde kat) serum DHT seviyeleri bu önceki çalışmalarda diğer müfettişler tarafından bildirilen daha düşüktür ve PCOS5,19kadınlarla orantılı olarak taklit etmek için kalibre, 20,21. Diğer modelleri farklı olarak, vücut ağırlığı ve 3.5 ay sonra DHT ekleme23,<.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
İfşa etmek bir şey yok.
Teşekkürler
Bu eser Ulusal Sağlık Enstitüleri (hibe S.W. için R00-HD068130) ve Baltimore diyabet araştırma merkezi tarafından desteklenmiştir: pilotlar ve fizibilite Grant (için S.W.).
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Kristal 5 & alfa ; - DHT tozu | Sigma-Aldrich | A8380-1G | |
| Dow Corning Silastik boru | Fisher Scientific | 11-189-15D | 0,04 inç / 1 mm iç çap x0,085 inç / 2,15 mm dış çap |
| Tıbbi yapıştırıcı silikon | Faktör II, InC. | A-100 | |
| Gözlükler, laboratuvar önlükleri, eldivenler ve maskeler. | |||
| 10 ve mikro; L filtresiz pipet uçları | ABD Bilimsel | 11113700 | |
| Smear için mikroskop slaytı | Fisher Scientific | 12-550-003 | |
| Boyama hücreleri için Diff Quik | Fisher Scientific | NC9979740 | |
| Lancet | Fisher Scientific | NC9416572 | |
| 3 mL Şırınga | Becton, Dickinson and Company (BD), | 30985 | |
| ekli iğne: 20 G | BD | 305176 | |
| Cetvel: milimetre ölçeğinde 10 cm'den daha uzun herhangi bir uzunluk. | |||
| Xylazine | Vet one AnnSeA LA, MWI, Boise | NDC13985-704-10 | 100 mg / mL |
| Ketamin Hidroklorür | Hospira, Inc | NDC 0409-2051-05 | 100 mg / mL |
| Cerrahi zımba | AutoClip & reg; Sistem, Güzel Bilim Aracı | 12020-00 | |
| İnsülin şırıngası | BD | 329461 | 1/2 CC, düşük doz U-100 insülin şırıngası |
| Trokar | Amerika'nın Yenilikçi Araştırması | MP-182 | |
| Mikroskop | Carl Zeiss Primo Star | 415500-0010-001 | Almanya |
| Kulak yumruğu | Fisher Scientific | 13-812-201 | |
| Testosteron sıçan / fare ELISA kit | IBL | B79174 | |
| DHT ELISA kiti | Alpha Diagnostic International | 1940 | |
| Tek dokunuşla ultra glukometre | Life Scan, Inc. | ||
| Tek dokunuşla ultra test şeritleri | Life Scan, Inc. | ||
| Eppendorf tüpü | Fisher Scientific | 05-402-18 | |
| Tıraş bıçağı | Fisher Scientific | 12-640 | |
| Clidox | Fisher Scientific | NC0089321 | |
| cerrahi alt bezi | Fisher Scientific | 50587953 | Üretici: Andwin Scientific 56616018 |
| Betadine Antiseptik Solüsyon | Walgreens | ||
| 3M Vetbond (n-bütil siyanoakrilat) | 3M Bilim. Hayata |
Kaynaklar
- Palomba, S., de Wilde, M. A., Falbo, A., Koster, M. P., La Sala, G. B., Fauser, B. C. Pregnancy complications in women with polycystic ovary syndrome. Hum. Reprod. Update. 21 (5), 575-592 (2015).
- Doherty, D. A., Newnham, J. P., Bower, C., Hart, R. Implicati....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
