Bu çalışmada, bir orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) fare modeli kurarak daha tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için varolan deneysel yöntemini değiştirmek. Glycyrrhizae Radix, sözlü yönetimi et köksap (GR) metanol özü (GRex), kontur indüksiyon, takip toplam infarktüsü cilt tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre önemli ölçüde azalmıştır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
İskemi kalp krizi sonra serebral kan akımı reperfüzyon takip sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Kontur çalışmak için en sık kullanılan hayvan modeli orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modelidir. Hatta aynı deneysel hayvan türleri benzer MCAO koşullar altında kullanıldığında önceki araştırma çalışmaları farklı enfarktüsü boyutları bildirdi. Bu nedenle, bu tutarsızlık yönelik olarak geliştirilmiş bir deneysel yöntem geliştirdik. Fareler bir filament tıkanıklığı malzemesi olarak insan kontur koşulları taklit kullanarak MCAO tabi tutuldu ve filament kalınlığı daha tekrarlanabilir infarktüsü birim kurmak için optimize edildi. Metanol ile tedavi fareler ayıklamak Glycyrrhizae sayı tabanı et kontur indüksiyon takip köksap (GRex) önemli ölçüde azalan toplam infarktüsü birim gösterdi ve hayatta kalma artan sayı hücreleri tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre. Bu Deneysel protokol başarıyla değiştirildi ve tekrarlanarak iskemik inme faydalı GRex etkisini gösterdi.
Giriş
Beyin hasar iskemi ve reperfüzyon serebral kan akımı neden sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Bu tür bir beyin hasarı serebrovasküler hastalıklar obezite, hipertansiyon ve diyabet1,2gibi metabolik hastalıkların yayılması nedeniyle artan yaygınlığı ile artmaya devam ediyor. Yaşlı hastalarda inme ile kesin sayısı dünya çapında önemli ölçüde artmıştır ve uzun vadeli Engelli kez bırakan bu hastalar için tıbbi bakım maliyeti büyük bir toplumsal yüktür. Bu nedenle, ikincil Engelli ekonomik yük1,2azaltmak mümkün olduğu kadar hafifletilmiş....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvanları içeren tüm yordamları Pusan Milli Üniversitesi (onay numarası, PNU-2016-1087) Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Bir grafik genel bakış bu çalışmanın Şekil 1' de gösterilen.
1. hazırlık ve GRex İdaresi
Not: Bu çalışmada kullanılan GR ticari ilaç şirketinden satın alınmıştır.
- 200 gr. GR 2000 mL metanol yerleştirin ve oda sıcaklığında (25 ° C) için 5 gün kuluçkaya.
- 0,26 mm kalınlık ve 5 µm gözenek boyutu ile filtre kağıdı kullanarak karışımı filtre ve süpernatant kaldır. 1000 mL metanol GR kalıntı ekleyin ve tekrar filtre.
- İki supernatants b....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Kontrol grubunda nispeten geniş hasarlı bölgeleri görülmektedir, ancak sahte işletilen normal grubunda hiçbir beyin enfarktüsü görülmektedir. Fareler (Şekil 2) yönetilen 300 mg/kg GRex MCAO model grubunda, hasarlı bölgeyi istatistiksel olarak anlamlı bir azalma görülmektedir.
Histolojik değişiklikler iskemik beyin bölümleri H & E veya kresil mor ile boyama tarafından incelenmiştir. Kresil menekş.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Metabolik hastalıklar gibi kronik hipertansiyon, şeker hastalığı ve hiperlipidemi, kontur için büyük risk faktörleri olan artan yaygınlığı ile inme önleme ve tedavi tıbbi araştırma12, önemli bir alan haline gelmiştir 13. dil ve hareketi kalp krizi sonrası açıkları şiddetle doku14 beyin kalmasına ve yoksul bir yaşam kalitesi hastalar ve onların aileleri15için hasar derecesi ile ilişkili. İlaç tedavileri etkinliğini i.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Geçerli değildir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Kore | Glycyrrhizae Radix et Rhizoma | |
| Kalitatif filtre kağıdı | Advantec | Filtre kağıdı No. 2 | Kalitatif filtre kağıdı |
| Dimetil sülfoksit (DMSO) | Sigma | D8418-250ML | Dimetil sülfoksit (DMSO) |
| Şırınga filtresi (0.45 ve mikro; m) | Sigma | CLS431220 | Şırınga filtresi (0.45 & mikro; m) |
| Stereo Mikroskop | Leica | M50 | Stereo Mikroskop |
| Stereo Mikroskop | Nikon | SMZ745 | Stereo Mikroskop |
| Lazer Doppler | Moor Enstrüman | moorVMS-LDF | Lazer Doppler |
| Anestezi Masa Üstü Braketi, N2O & O2 Akış Ölçer Sistemi | Harvard Appratus | 34-1352 | N2O & ile Anestezi Masa Üstü Braketi O2 Akış Ölçer Sistemi |
| Homeotermik İzleme Sistemi | Harvard Appratus | 55-7020 | Homeotermik İzleme Sistemi |
| Dijital Fotoğraf | Canon | Eos-M2 | Dijital Fotoğraf |
| Makinesi Kriyostat | Leica | CM3050S | Kriyostat |
| Mikroskobu | Carl Zeiss | Zeiss Axio | Mikroskop |
| Veri | Analizi Systat Yazılım A.Ş. | SigmaPlot sürüm 12 | Veri Analizi |
| Veri Analizi | NIH Image | ImageJ | Veri Analizi |
| Fare diyeti | Doo Yeol Biotech | Standart kemirgen yemeği | Fare diyeti |
| İzofluran | JOONGWAE | A02104781 | İzofluran |
| İzofluran | TROIKAA | ISOTROY 100 | İzofluran |
| İpek sütür (4-0 Siyah ipek) | AILEE | SK47510 | İpek sütür (4-0 Siyah ipek) |
| İpek sütür (3-0 Beyaz ipek) | Baekjae | 57 | İpek sütür (3-0 Beyaz ipek) |
| Naylon sütür (8-0 monofilament) | AILEE | NB825 | Naylon sütür (8-0 monofilament) |
| 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür (TTC) | Sigma | T8877-25G | 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür (TTC) |
| Formalin (Formaldehit çözeltisi) | JUNSEI | 69360-1263 20KG | Formalin (Formaldehit çözeltisi) |
| Hematoksilen (Harris Hematoksilen) | YD Teşhis: | EasyStain | Hematoksilen (Harris Hematoksilin) |
| Eozin (%1 Eozin Y Çözeltisi) | MUTO SAF KİMYASALLAR | 3200-2 | Eozin (% 1 Eozin Y Çözeltisi) |
| Kresil menekşe (asetat) | Sigma | C5042-10G | Cresil menekşe (asetat) |
| Paraformaldehit ve nbsp; | Sigma-Aldrich | P6148-1KG | Paraformaldehit |
| Sükroz | JUNSEI | 31365-0350 1KG | Sükroz |
| Optimum kesme sıcaklığı (OCT) bileşiği | Scigen | 4583 | Optimum kesme sıcaklığı (OCT) bileşiği |
| Dağıtma Bıçağı | Güzel Bilim Araçları | 10055-12 | Dağıtma Bıçağı |
| # 4 Forcep | Güzel Bilim Araçları | 11241-30 | # 4 |
| Forcep | Güzel Bilim Araçları | 11254-20 | #5 Forcep |
| #6 Forcep | Güzel Bilim Araçları | 11260-20 | #6 Forcep |
| #7 İnce Forcep | Güzel Bilim Araçları | 11274-20 | #7 İnce Forcep |
| Cerrahi Makas | Güzel Bilim Aletleri | 14001-12 | Cerrahi Makas |
| Ekstra İnce Bonn | Makas Güzel Bilim Aletleri | 14084-08 | Ekstra İnce Bonn Makas |
| Moria Pascheff-Wolff Bahar Makas | Güzel Bilim Araçları | 15371-92 | Moria Pascheff-Wolff Bahar |
| Makas Damar Genişletme Forcep | Güzel Bilim Araçları | 18153-11 | Damar Genişletme Forcep |
Kaynaklar
- Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered. Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).
- Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
