Eleştirel hasta hastalarda tam kan endotoksemi tespiti için endotoksin aktivite assay

Özet

Bu konuda, insan bütün kan örneklerinin endotoksin aktivitesinin başında ölçmek için bir protokol sunuyoruz. Endotoksin aktivite tahlil gerçekleştirmek için basit bir test ve sepsis ile eleştirel hasta hastalarda yararlı bir biyomarker olabilir.

Özet

Endotoksin olarak da bilinen lipopolysaccharide, gram-negatif bakterilerin temel bir bileşenidir ve sepsis ve septik şok gelişiminde önemli bir rol oynamaktadır. Kritik bir hastalığa hızla gelişen bulaşıcı bir sürecin erken tanımlanması, daha hızlı ve daha yoğun bir tedavi isteyebilir, böylece potansiyel olarak daha iyi hasta sonuçlarına yol açın. Endotoksin aktivitesi (EA) assay, sistemik endotoksemi güvenilir bir biyomarker olarak başucunda kullanılabilir. Yüksek endotoksin aktivite düzeylerinin tespiti, sepsis ve septik şok hastalarında artan bir hastalık şiddetiyle ilişkili olarak tekrar tekrar gösterildi. Tahlil hızlı ve kolay gerçekleştirmek için. Kısaca, örnekleme sonra, tam kan bir kısım bir anti-endotoksin antikor ile karıştırılır ve eklenen LPS ile. Endotoksin aktivitesi, kemioluminesans ile algılandığı gibi, astar nötrofiller bağıl oksidatif patlaması olarak ölçülür. Testin çıkışı 0 ' dan (bulunmayan) 1 ' e (maksimal) ve "düşük" (< 0.4 ünite), "Orta" (0.4 – 0.59 birimler) veya "yüksek" (≥ 0,6 birimler) olarak sınıflandırılmış bir ölçekte ifade edilir. Bu yazıda EA testin uygulanması için ayrıntılı metodoloji ve mantık bildirilmektedir.

Giriş

Endotoksin olarak da bilinen Lipopolysaccharide (LPS), gram-negatif (GN) bakterilerin membran yapısının önemli bir bileşenidir. Hücre duvarının yaklaşık% 10 ' unda, dış membran bütünlüğü ve homeostaz için hayati önem taşımaktadır. Dahası, bu ev sahibi doğuştan gelen bağışıklık sistemi güçlü bir aktivatörü^1,2.

LPS için doğuştan gelen bağışıklık sistemi hücrelerinin in vitro pozlama çoklu genler ifadesinde değişikliklere yol açar³. Sağlıklı insan Gönüllüleri çok küçük miktarlarda LPS yönetimi Akut sistemik inflamasyon Cascade tetikler, sepsis ve septik şok yüks....

Protokol

Protokol, insan biyoörneklerinin işlenmesi ile ilgili kurumsal yönergelere göre ve klinik laboratuvarımızın mevcut standart operatif prosedürlerini takiben gerçekleştirilir. Test edilen hastaların EA verilerinin ve klinik bilgilerinin kullanımı, kurumunuzun insan Araştırma Etik Komitesinin yönergelerini takip eder.

1. laboratuar ekipmanları ve tahlil kiti Içeriği

1. EA setini kullanımda değilken 2 – 8 °C ' de saklayın.
2. Her EA testi 5 farklı çeşit tüpten oluşur; her birini testin farklı bir bölümü için kullanın (bkz. Bölüm 2).
   1. Belirli bir antikor yokluğunda hastanın nötrofiller non-spesifik oksida....

Sonuçlar

72 yaşındaki bir adam, akademik bir kentsel hastanenin acil servise (ED) kabul edildi. Birkaç gün önce onun birincil bakım Doktoru idrar üzerine yanma şikayet sundu. Oral fosfomiyisin kısa kurs tedavisi tavsiye edildi. Onun tıbbi geçmişi hipertansiyon, karmaşık olmayan tip-2 diyabet ve benign prostat hiperplazisi dahil. İlaçları enalapril, atorvastatin, tamsulosin ve metformin dahil.

ED 'de, uyanmış olduğunda karıştı. Sıcaklık 3.......

Tartışma

Septik şok halen günümüzde% 40 kadar yüksek bir mortalite ile ilişkilidir, ancak bu oran kabul edilen raporlara göre değişir¹⁶. Yeni ve daha iyi biyomarkerlere olan ihtiyaç, klinisyenler erken teşhis, daha iyi yönetim ve septik şok⁶olan hastaların prognostikasyonunda yardımcı olmak amacıyla alanlarda çoğu uzman tarafından savunulmuş.

Bir EA testi yapmak, önceki teknik bilgi veya sofistike laboratuvar ekipmanlarını gerektirmez ve herhangi bir sağl.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
EAA kiti	Spektral Medikal A.Ş.	EAAST-20	Paketi, 20 test + 1 kalite kontrol
Akıllı Hat TL	Berthold	EAASL	Luminometre
İnkübatör çalkalayıcı	GRANT	ES-20	Mini inkübatör çalkalayıcı
Vortexer	VWR	444-2790	Vorteks aleti