Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

İndüksiyon ve karınca, Vollenhovia Emeryi kullanarak akraba evliliği haçlar değerlendirilmesi

7.3K görüntülenme

DOI:

10.3791/58521

5 Ekim 2018

Bu makalede

Özet

Bu protokol için ant Vollenhovia emeryiiçin akraba evliliği haçlar iletken ve bu haçlar başarısını değerlendiren yöntemler açıklanmıştır. Bu protokoller seks belirlenmesi sistemlerinde Hymenoptera genetik temeli anlama amaçlayan deneyler için önemlidir.

Özet

Cinsiyet tayini cascade genetik ve moleküler bileşenleri balarısı, Apis mellifera, hymenopteran model organizma kapsamlı bir şekilde inceledik. Ancak, küçük karıncalar gibi diğer sigara modeli hymenopteran takson bulunan seks-belirleme mekanizmaları hakkında bilinir. Hymenopteran türler geliştiğini yaşam döngüleri karmaşık doğası nedeniyle, korumak ve bu organizmaların Laboratuvarı arasında deneysel haçlar yapmak zordur. Burada, akraba evliliği haçlar yürütmek için ve bu haçlar başarısında karınca Vollenhovia emeryideğerlendirmek için yöntemleri açıklanmaktadır. Akraba evliliği emeryi V.kullanarak laboratuvar inducing, bu tür benzersiz biyolojisi nedeniyle oldukça kolaydır. Özellikle, bu tür androgenetik erkek üretir ve kadın reproductives genetik haçlar fenotipleri tanımlaması basitleştirir kanat çok biçimlilik sergilemek. Erkekler sürekli iken normal erkekler yalnızca iyi tanımlanmış bir üreme sezonunda alanında belirir. haçlar, akraba evliliği tarafından üretilmiş olması gibi Ayrıca, akraba evliliği başarısını değerlendirmek basittir. Bizim iletişim kuralı izin karınca türleri seks belirlenmesi sisteminde genetik ve moleküler temeli araştırmak için emeryi bir model olarak kullanmak için.

Giriş

Eusocial Hymenopteran takson, karınca ve arı gibi bir veya daha fazla tamamlayıcı seks belirlenmesi Heterozigoz hangi bireylerde (CSD) loci homo - ya da hemizygous olanları ise kadın olmak bir haplodiploid seks tayin sistemi geliştirmişlerdir olmak erkekler (Şekil 1A)1.

Genetik ve moleküler bileşenleri seks belirlenmesi cascade yer de balarısı, Apis mellifera, hymenopteran model organizma2,3,4inceledik. Son karşılaştırmalı genomik araştırmalar karıncalar ve arıları seks....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. toplama ve laboratuvar kolonilerde V. Emeryi bakımından alanından

Not: V. emeryi yuvalarının günlükleri ve düşmüş çürüyen ağaç Accuwest'in ikincil ormanlar boyunca Japonya çürüyen bulunur. Bu tür koloniler, Yani, (1) koloniler sadece uzun kanatlı kraliçeler ve (2) koloniler esas olarak kısa kanatlı kraliçeler uzun kanatlı kraliçeler8,14az sayıda ek olarak üreten üreten iki tür gösterir. Bu protokol için Ishikawa ili, Japonya kolonilerde bu türdeki toplanan.

  1. Emeryi kolonileri erken yaz aylarında toplamak.
    Not: yeterli sayıda cinsel ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

F0 ile F1 nesiller kullanarak microsatellite incelemenin sonuçlarını gösterdi akraba evliliği haçlar başarıyla üretildi (Şekil 4)6. Sonuç olarak haçlar akraba evliliği, şeklindeki queens deneysel geçiş koloniler kurulması bir ay içinde elde edilmiştir. Kalan erkek (işçi ve bir kraliçe)6iken tüm yavrular (F2) akraba evliliği haçlar üzerinden çeyrek (27.1 ± %8.91 SD) Erkek, oldu. H.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu makalede neden akraba evliliği haçlar ve akraba evliliği karınca emeryi V.oluşumunu değerlendirmek için kullanılan iletişim kurallarını gösterir. Deneylerde, Genotipleme haçlar için kullanılan bireylerin akraba evliliği haçlar başarılı sağlamak gereklidir. Ancak, bu geçiş testleri etkinliğini haploit erkekler sadece sonbaharda alan ve laboratuvar6üretilebilir sırasında tüm yıl boyunca, diploit erkek üretilen gibi açıkça belirgindir. Sib şeklindeki queens geçtikten hemen sonra erkek yav.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Bay Taku Shimada, AntRoom, Tokyo, Japonya, temsilci emeryi V. reproductives onun fotoğrafı ile bize verdiğiniz için teşekkür ederiz. Bu proje Japonya Derneği tarafından bilim promosyon (JSP'ler) araştırma bursu için genç bilim adamları (16J00011) ve Grant genç bilim adamları (B)(16K18626). için yardım için finanse edildi

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Alçı tozuN/AN/AHerhangi bir marka kullanılabilir
Kömür, Aktif, Toz Wako033-02117,037-02115
Sürgülü camN/AN/AHerhangi bir marka kullanılabilir
Kuru Kriket diyetiN/AN/A Herhangibir marka kullanılabilir
Kahverengi shuger N/AN/AHerhangi bir marka kullanılabilir
Stiren Kare Şekilli KasaBİRHerhangi bir boyut Boyutkarınca sayısına göre değişir
IncbatorHerhangi bir marka kullanılabilir
Alüminyum blok banyosu Kuru termo ünite DTU-1BTAITEC0014035-000
1.5mL Hiper Mikrotüp, Şeffaf, Yuvarlak altWATSON131-715CS
Etanol (99.5)Wako054-07225
Stereoskopik mikroskopN/AN/AHerhangi bir marka kullanılabilir
ForsepsDUMONT0108-5-PO
Chelex 100 sodyum formuSIGMA11139-85-8
Fosfat Tampon Salin (PBS) Tabletleri, pH 7.4TaKaRaT9181
ParaformaldehitWako162-16065
-Cellstain- DAPI çözeltisiDojindo Moleküler TeknolojilerD523
ABI 3100xl Genetik Analiz CihazıUygulamalı BiyosistemlerDaha fazla bilgi için doğrudan yapıcı ile iletişime geçin.
Konfokal lazer tarama mikroskobu Leica TCS SP8LeicaDaha fazla bilgi için doğrudan yapıcı ile iletişime geçin.
HC PL APO CS2 20x/0.75 IMMLeicaDaha fazla bilgi için doğrudan yapıcı ile iletişime geçin.
HC PL APO CS2 63x/1.20 SULeicaDaha fazla bilgi için doğrudan yapıcı ile iletişime geçin.
Leica HyDTMLeicaDaha fazla bilgi için doğrudan inşaatçı ile iletişime geçin.
Leica Application Suite X (LAS X)LeicaDaha fazla bilgi için doğrudan yapıcı ile iletişime geçin.
OLARAK

Kaynaklar

  1. Mable, B. K., Otto, S. P. The evolution of life cycles with haploid and diploid phases. BioEssays. 20 (6), 453-462 (1998).
  2. Beye, M., Hasselmann, M., Fondrk, M. K., Page, R. E., Omholt, S. W. The gene csd is the primary signal for sexual development in the honeybee....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Cinsiyet BelirlemeHymenoptera Geneti iAndrogenetik ErkeklerKanat PolimorfizmiDNA EkstraksiyonuKonfokal MikroskopiDAPI Boyamareme Organlar Diseksiyonu