$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Rotylenchulus reniformis (Linford ve Oliveira), genellikle reniform nematod olarak anılacaktır, Güneydoğu Amerika Birleşik Devletleri 'nin topraklarda mevcut büyük parazitik nematod türlerinden biridir1,2,3. Nematod bir obligate, sedanter yarı endoparazit yaşam döngüsü tamamlamak için bir ev sahibi bitki gerektiren2,4. Vermiform preadult kadın nematodlar stel2,3bir beslenme sitesi kurmak için ana kök sistemi nüfuz. Nematod beslemeleri ve olgunlaşır gibi, ana kök dışında kalan posterior kısmı yumurta üretimi üzerine şişecek, karakteristik bir böbrek şekli oluşturan (Şekil 1). Rotylenchulus reniformis pamuk4dahil olmak üzere 300 ' den fazla bitki türlerinin kök sisteminde beslenme yeteneğine sahiptir. Upland pamuk (Gossypium hirsutum L.) yaygın Güneydoğu Amerika Birleşik Devletleri 'nde yetiştirilir, ancak Reksikliği. reniformis dirençli çeşitleri nematod Management2,3' ü engelliyor. Nematisit tedavisi ve ev sahibi olmayan kırpma türleri ile rotasyon gibi yönetim stratejileri toprak Razaltmak için kullanılmıştır. reniformis nüfus yoğunlukları5,6, ancak tohum pamuk verim kayıpları genellikle 1 ila 5%2arasında değişir. Rbelirtileri. reniformis enfeksiyonu, bitki afet, bastırılmış kök büyüme, beslenme eksiklikleri, meyve kürtaj ve Gecikmeli olgunlaşma2içerebilir. Ancak, belirtiler alan genelinde semptomların tekdüzelik nedeniyle belirgin olmayabilir; Bu nedenle, Rdeğerlendirmek için yaklaşımlar. reniformis enfeksiyonu tespit ve dirençli Upland pamuk çeşitleri geliştirmek için gereklidir. Değerlendirme R. Pamuk reniformis direnci zor kabul edilir7, enfekte kök sistemi olsa bile bitki enfeksiyon belirtileri gösterebilir normal görünebilir8.
R'nin tanımlanması için etkili bir nematod tarama protokolü gereklidir. Pamuk Germplazm koleksiyonundan reniformis dirençli Erişmeler ve bu katılımların direnç genetik belirlenmesi için. Böyle bir protokol, direnç genlerinin Upland pamuğa aktarılması konusunda yardımcı olacaktır. Çeşitli Biyotahlil yöntemleri Rdeğerlendirmek için kullanılmıştır. pamuktan reniformis enfeksiyonu8,9,10,11,12,13,14,15. Genel olarak, R'nin tanımlanması için iki büyük yaklaşım kullanılmıştır. reniformis dayanıklı pamuk genotypes. En sık kullanılan yaklaşım enfekte bitkiler veya toprak8,11,12,14,15yumurta ve/veya vermiform nematdes ayıklamak içerir. Bu yaklaşım için genel metodoloji ayrı tencerelerde bireysel pamuk genotip için tohum Ekim içerir, fide 7 ila 14 gün geliştirmek için izin, Rvermiform aşamalarında bir karışımı ekleyerek fide Birmanya. toprak reniformis ve nematlerin 30 ila 60 gün kök sistemi bulaştırmak için izin. Sonra, vermiform nematdes ve/veya yumurta her bitkinin virüslü kök sisteminden veya Çömlekçilik topraktan ayıklanır. Ayıklanan nematdes veya yumurta sayısı, daha sonra dirençli genotiplerin belirlenmesi için kontrol genotipleri ile karşılaştırıldığında nüfus yoğunluğu ve üreme hızını tahmin etmek için belirlenir.
Alternatif bir yaklaşım, burada açıklandığı gibi, mikroskobik olarak nematdes ile enfekte olan pamuk kökü sistemi inceleyerek içerir kökleri parazitize kadın nematid sayısını belirlemek için10,16. Diğer yaklaşımlara benzer şekilde, pamuk genotipler ayrı tencere içinde dikilir ve Ekim sonrası yaklaşık 7 gün boyunca vermiform nematid ile aşı edilir. İnoculation sonra 30 gün içinde, kök sistemi bireysel bitkilerin kaldırılır ve toprak kökleri durulanır. Sonra, kök sisteme bağlı nematdes kırmızı gıda17boyama ile lekelenmiş ve kökleri mikroskopik olarak dirençli pamuk genotip ile enfeksiyon sitelerin sayısını belirlemek için incelenmiştir (gram başına nematid sayısına göre tespit duyarlı kontrol16ile karşılaştırıldığında). Bu ikinci yaklaşım, değerlendirme için gereken gün sayısını azaltarak ve tek bir denemede değerlendirilen bireysel genotiplerin sayısını artırarak artan verimlilik avantajına sahiptir. Nüfus yoğunluğunu veya üreme oranını değerlendirecek tarama metodolojileri genellikle enfeksiyon belirtileri7' nin görsel gözlemlerine dayalı olandan daha zaman alıcı bir işlemdir. Bununla birlikte, bu yaklaşımın bir sınırlama, yumurta üretimi ile belirlenen nematod üreme engelleyen konak-bitki direnci değerlendirilmemiştir13.
R. için tarama protokolleri reniformis direnci genellikle değerlendirme7 sırasında kök sistemi yok ve atılan vejetatif ateş içerir. Bu sınırlamanın üstesinden gelmek için, tohum üretimi için bitkilerin kurtarılmasına izin vermek üzere bir vejetatif yayılma yöntemi geliştirilmiştir18. Nematod değerlendirme için kök sisteminin kaldırılmasından sonra, vejetatif ateş kök sistemi regrow izin vermek için toprak Çömlekçilik dikilir. Bu yöntem çoğu Riçin geniş uygulamalara sahiptir. reniformis tarama protokolleri. Vejetatif yayılma basit ve hızlı bir yöntem Rüreme için kritik öneme sahiptir. reniformis dirençli Upland pamuk çeşitleri, nerede Döl kurtarma yeni nesil dirençli genotip ilerlemek için gereklidir.
Reniform nematod direnci için pamuk genotiplerinin büyük ölçekli taraması için bir protokol sunulmuştur. Amaç, dayanıklı Upland pamuk çeşitlerinin üreme yardımcı olmak için nematod direnci için pamuk üreme nüfus değerlendirmek için basit ve hızlı yıkıcı olmayan tarama yöntemi geliştirmektir. Bu protokol kullanılarak, veriler genellikle 35 gün içinde elde edilir ve tek bir denemede 300 ' den fazla genotip değerlendirilir. Veriler, bu yöntemler kullanılarak sıklıkla gözlenen varyasyonu göstermek için dayanıklı ve duyarlı genotiplerde sunulur.