Birden fazla Motor yolları sıçan Spinal Kord Lentiviral bir vektör direkt enjeksiyon vurgulamaktadır

Özet

Bu iletişim kuralı retrogradely taşınabilir bir viral vektör enjeksiyon sıçan spinal kord doku içine gösterir. Vektör sinaps kapladığı ve hedef nöron hücre gövdesi nakletti. Bu model önemli spinal yolları veya gen terapisi uygulamaları için hedefleme hücrelerin retrograd izleme için uygundur.

Özet

Sinir sisteminde hücreye proteinler ilgi tanıtan en molekülleri erişimi sınırlamak doğuştan gelen biyolojik engelleri nedeniyle zordur. Spinal kord doku içine doğrudan enjeksiyon hücre organları erişim sağlayan bu engelleri atlar veya nerede molekülleri dahil olmak synapses. Bu yöntemle viral vektör teknoloji birleştiren gen terapisi veya yolu izleme amacıyla sinir dokusu içine hedef genlerin giriş için izin verir. Burada son derece etkili retrograd taşıma (HiRet) için tasarlanmış bir virüs, propriospinal interneurons (PNs omurilik ve beyin sapı çekirdeği nöronlarda için özel taşıma teşvik etmek) sinapslarda geliştirdiler. PNs hedefleme, rubrospinal ve reticulospinal yolları yanı sıra birbirleri ile onların arabağlantı omurilik segmentler boyunca gibi motor yolları üzerinden aldıkları çok sayıda bağlantıları yararlanır. Temsilcisi izleme hücre gövdeleri, akson ve dendritik arbors Torasik PNs ve reticulospinal nöronlarda pontine ağsı yapısal etkin yeşil flüoresan protein (GFP) gösterir yüksek sadakat ayrıntılarını HiRet vektör kullanarak. HiRet birleştirmek de beyin sapı yolları ve PNs ama yaş bağımlı entegrasyon corticospinal yolu nöronların içine gösterir. Özetle, spinal kord enjeksiyon viral vektörler kullanarak ilgi proteinlerin giriş neurons in hedeflenen arazi içine için uygun bir yöntemdir.

Giriş

Viral vektörler genetik materyal arızalı genler, upregulate önemli büyüme proteinler telafi etmek veya yapısı ve sinaptik bağlantıları vurgulamak marker protein üretimi için hücrelere tanıtabilirsiniz önemli biyolojik araçlardır hedefleri. Bu makale floresan izleme büyük motorlu yolları vurgulamak için yüksek verimli retrogradely taşınabilir lentiviral vektör sıçan spinal kord içine direkt enjeksiyon üzerinde duruluyor.  Bu yöntem da nöronların farklı nüfus proteinler ilgi tanıtmak aksonal rejenerasyon ve büyütme çalışmaları için son derece uygun ve nöronlar fonksiyonel Haritalama çalışmaları^1,2için susturmak için kullandı.

Birçok omurilik motor yolları anatomik ayrıntılarını direkt enjeksiyon çalışmalar ile BDA ve fluoro-altın^3,4,5,6,7 gibi klasik tarayıcıları aracılığıyla aydınlatılmamıştır ^{, 8}. bu tarayıcıları altın standart olarak kabul edilir ancak bazı dezavantajları alımı gibi tarafından hasarlı aksonlar olabilir veya bir enjeksiyon çevreleyen beyaz madde pasajda akson sitesindeki^9,10,11 . Bu yolu bağlantısı yanlış yorumlara neden olabilir ve bir dezavantajı ise yenilenme çalışmaları nerede boya absorpsiyonu ile bozuk veya kesik aksonlar lifleri daha sonra analiz¹²sırasında yeniden oluşturulması için yanlış olabilir olabilir.

Lentiviral vektörel çizimler nöron popülasyonları^{13,14,15,16,17,18 istikrarlı, uzun vadeli ifadede sağladıkları gen terapisi çalışmalarda, popüler şunlardır ,19}. Ancak, geleneksel olarak paketlenmiş lentiviral vektörler retrograd taşıma sınırlı olan ve kullanıldığında bağışıklık sistemi yanıt tetikleyebilir vivo içinde^4,20,21. HiRet olarak adlandırdığı bir yüksek verimli retrograd ulaşım vektör retrograd taşıma^22,23geliştirir bir melez vektör oluşturmak için bir kuduz virüsü glikoprotein olan viral zarf değiştirerek Kato vd tarafından hazırlanmıştır.

Retrograd izleme o hücrenin axon tarafından alınan ve hücre vücut nakli izin bir hedef nöron sinaptik uzaya bir vektör tanıtır. Başarılı taşıma HiRet nöronal sinapslarda fareler ve maymunlar^23,24 beyinlerinin içine ve motor nöronlar²²kasına göstermiştir. Bu iletişim kuralı lomber spinal kord, özellikle propriospinal interneurons ve beyin sapı neurons sinaptik terminallerinin hedef içine enjeksiyon gösterir. PNs bağlantıları birçok farklı spinal yolları almak ve böylece omurilik ve beyin sapı nöronlarda farklı bir nüfusa hedeflemek için yararlı olabilir. Bu çalışmada etiketli nöronlar hindlimb motor işlevleri ile ilgili motor nöron havuzları innerve devreleri temsil eder. Sağlam etiketleme omurilik ve beyin sapı, dendritik arbors ve akson terminalleri yüksek sadakat ayrıntılarını dahil görülür. Biz de bu yöntem servikal spinal kord içinde önceki çalışmalarda propriospinal ve beyin sapı reticulospinal yolları²⁵etiketlemek için kullandık.

Bu iletişim kuralı bir viral vektör enjeksiyon lomber spinal kord sıçan içine gösterir. Film 1 ' de görüldüğü gibi son kaburga bulunan L1 vertebra tanımlayarak belgili tanımlık kesme hedeflenmektedir. Bu kas L1-L4 omurilik üzerinde ortaya çıkaran bir 3-4 cm kesi Kaudal bir dönüm noktası kullanılır. Laminectomies T11-T13 vertebra dorsal yönlerini gerçekleştirilir ve eğimli cam iğne 0.8 mm lateral orta hat ve alçaltılmış 1.5 mm yönlendirilir virüs enjekte etmek için gri madde içine.

Protokol

Aşağıdaki cerrahi ve hayvan bakımı yordamların tümünü hayvan bakım ve kullanım Komitesi Temple Üniversitesi tarafından onaylanmıştır.

1. cerrahi öncesi hazırlıklar

1. Çekti cam iğneler viral enjeksiyon 3,5 nanoliter cam kapiller Pipetler nanoliter enjektörler için tasarlanmış kullanarak ameliyattan önce bir kaç gün için hazır olun. Bir iki adım iğne çektirmenin iki iğne şablonları oluşturmak için üreticinin yönergelerine uygun olarak her pipet çek.
2. Yaklaşık 1-2 mm microscissors ile fazla cam keserek iğne şablonları ucu daraltın. Ölçü yaklaşık diyafram boyutu iğneler 30-40 µm diyafram ile izole etmek mikroskop kalibrasyon kaydıraklı bir mikroskop altında.
3. 30 ° konumlandırılmış iğneyle micropipette beveller 30-40 µm diyafram ve 45 ° eğik açı ile bir ipucu oluşturmak için kullanın. Diyafram genişliği ile kalibrasyon slayt Vernier ölçekte doğrulayın. Su ve etanol enkaz silsin ve iğne düzenli aralıklarla siyah bir marker ile işaretlemek için bir esnek iğne eki ile kullanarak cam iğne geçişi.
4. İğneler daha önce % 70 etanol ile temizlenmiş kapalı Petri kabına yerleştirin ve 30 dk içinde bir biyogüvenlik başlık UV ışık altında için sterilize.
5. HiRet lentivirus hemen önce yordamı dondurucu uygun bir birim kaldırarak hazırlayın.
   Not: Uygun bir birim enjeksiyon için gerekli tutar içerir (enjeksiyon başına 1 µL enjeksiyon sayısı x) pipetting ve kayıp yükleme için hesabınıza ilave birim az miktarda artı. Taşıma ve virüs buz kullanılmadığı zaman saklamak.
6. Enjektör micropump tıkalı ve Vernier ölçekli bir micromanipulator içine yerleştirerek hazırlayın.
7. Cam iğne hazırlamak, dikkatle kırmızı petrol gibi renkli bir boya bir şırınga ile yük için esnek bir iğne ile donatılmış. Hava kabarcığı yok iğnede kalmadığından emin olun. Aseptik teknik iğne işlerken kullanın ve ucu dokunmaktan kaçının.
8. Cam iğne iğne contalar doğru şekilde oturduğundan, enjektör kapağı üzerinde sıkı vidalı ve çelik enjektör iğne genişletilmiş sağlamak enjektör Ekle yaklaşık ¾ cam iğne uzunluğu. Virüs bir sonraki adımda iğne içine yüklenebilir.

2. anestezi ve cerrahi sitesi hazırlama

1. Hayvan dijital bir ölçekte tartın. Kayıt pre-operative kilo ağırlık ameliyat sonrası izlemek için izin veren ve gerekli anestezi seviyesini belirlemek için. Kadın Sprague-Dawley Rat yaklaşık 200-250 g bu protokol için kullanılmıştır.
2. İsoflurane inhalasyon veya enjekte ketamin/xylazine çözümünü kullanarak fare anestezi (k / x). Burada, ketamin intraperitoneally 67 mg/kg ve xylazine, 6,7 mg/kg doz enjekte edilir.
3. Uygun bir anestezik uçak sıkıca ayak pinching tarafından onaylayın. Yansımalı çekilme ortaya çıkarsa, devam etmeden önce birkaç ek dakika bekleyin.
   Not: Ayrıca bıyık, gözleri ve solunum hızı bilinç belirtileri için dikkat. Anestezik uçak protokolü ile devam etmek için daha derin bıyık seğirmesi, hafifçe dokunduğu zaman göz yanıp söner veya hızlı ve sığ nefes alıyor, bekleyin. Ayrıca bu işaretler laminektomi ve enjeksiyon ameliyat boyunca izlemek. Hayvan sığ bir anestezik uçak görüntüleniyorsa, yalnızca ketamin eşit bir booster shot ½ simgesiyle özgün k yönetmek / doz x.
4. Kalça üzerinden dorsal orta hat scapulae aşağı açı boyunca fare tıraş. Hayvan derinin gergin bir daha kolay ve daha hassas tıraş çek.
5. Oftalmik merhem her iki gözde için geçerlidir.
6. Site sterilize etmek için traş bölgeye antiseptik uygulanır. İlk fırçalayın için %5 iyot çözüm ve silme uzakta ile steril gazlı bez bütün kıl ve enkaz emmek. Böylece hiçbir alan iki kez temas bu etanol % 70, sırılsıklam steril gazlı bez ile tek yönlü bir tokatlamak ile izleyin. Bu aynı teknikle iyot ve etanol batırılmış gazlı bez iki kez daha fazla alternatif ile kullanın.

3. cerrahi alan ve enstrüman hazırlık

1. Neşter, rongeurs, sıçan diş forseps, Bahar makas, hemostats, kavisli orta noktası forseps ve traktör veya ağırlıklı kanca steril bir alan oluşturmak için steril şal unwrapping tarafından dahil autoclaved cerrahi araçlar kümesi hazırlayın.
2. Steril cerrahi eldiven paketi açın ve steril eldiven şal masaya koyun. Bu steril Wrap önlemek amacıyla kullanılan araçlar için ek bir steril alanı olarak kullanın.
3. #10 neşter bıçak steril alanı bırakın. Bıçak saplı hemostats ile güvenli. Pozisyon steril serum fizyolojik, 4.0 fotokromik akorduna dikiş ve bir cauterizer, steril gazlı bez, steril pamuklu uçlu uygulayıcıları (için kas taşma payları), veya aspirasyon veya erişilebilir bir yerde (için kemik Taşmalar) bonewax gibi kanama kontrolü için malzemeler.
4. Hayvan almak ve Steril bez üzerinde ayarlayın. Mesane idrar toplamak için altına gazlı bez koyun. Hedef alanı karın altında bir rulo havlu ile desteklemek. Varsa, cerrahi Isıtma yastığını özellikle uzun yordamları için Steril bez altında yerleştirin.
   Not: Kısırlık hayatta kalma ameliyat sırasında önemlidir. Bir yandan kısırlık eldivenli elleri ve enstrüman kısırlık aşılırsa bir kullanım boncuk Sterilizatör veya bireysel ameliyatlar arasında korumak için % 70 etanol sprey şişe tutmak.

4. vertebral sütunun teşhir ve laminektomi siteyi

1. Nerede bir cilt kesi parmakları hafifçe son kaburga basarak L1 vertebra bulmak için yapılacak alanı tanımlayın. Bu bir dönüm noktası kullanarak, bir 3-4 cm cilt kesi biten #10 cerrahi neşter ile sadece L1 kas gücü ortaya çıkarmak için daha aşağı olun. Nazik yayarak cilt sıkı tutun ve sıkıca temiz bir kesi sağlamak için neşter bıçakla basın.
2. Kesmek ve yüzeysel fat forseps ve makas gerekirse ile yayıldı. (Hedef omur üzerinde bağlı olarak orada olup olmadığı bir büyük yağ yastığı kas için yüzeysel değil).
3. Neşter bıçak veya bir parmak düz spinöz işlemlerle için hissediyorum. Genellikle orta hat alan iki tarafında beyaz şerit bir "V" tarafından özetlenen. Sonra güvenli bir şekilde bir üst süreç fare diş Forseps ile yakala gibi işlemleri mümkün olduğunca yakın 2 uzun, derin kesim yapmak izin vermek için küçük bir rostral kesim yapmak. Kesim en derin noktasında vertebra dorsal yüzeyi neşter bıçakla hissedilebilir.
4. Yanal kasları ekartör veya görünürlüğünü artırmak için ağırlıklı kanca ile bir kenara tutun. Bir neşter, Bahar makas ya da başlarını şeklini belirlemek için rongeurs işlemlerle etrafında net kas.
   Not: omurilik vertebral sütunun tam uzunlukta omurilik doku durur daha kemik gelişiminde daha önce büyüyen olarak kapsamaz unutmayın. Bu hedef spinal düzey altında farklı adlandırılmış bir omur olabilir anlamına gelir.
5. T11 ve bitişik T12 ve T13 işlemleri bulun.
   Not: doğru vertebra düzeyi hedefleme yardım-ebilmek bulunmak içinde bir sıçan spinal kord atlas ve önceki çalışmalar çok benzer olan fareyi simge yapılar ortaya koyan vertebra yapısı^6,33. Rostral spinöz proses T9 gibi bir orta hat dönüm noktası vermek için rahatsız bekletin.

5. bir laminektomi gerçekleştirme

1. Bir kez hedef alan doğru olarak tespit edilmiştir, laminectomies T11-T13 dorsal yönlerini gerçekleştirin. Omurga kemik ilk ısırık için rongeurs eklemek iyi sitelerdir, intervertebral kasları ortaya çıkarmak için yavaşça yayıldı. Rongeurs ayrıntılı denetimini artırmak için bir yarı-kapalı konumda tutun.
2. Spinöz süreçleri ve vertebra dorsal yönünü rongeurs ile küçük alıntılar alarak kaldırın. Spinal kord zarar ya da beyin zarı rahatsız değil dikkatli olun. Biraz omurilik omurga uzak Çekme yardımcı olmak için fare diş Forseps ile Asansör ve spinal kord doku vurmak eğilimi azaltmak.
3. Böylece orta hat kan damarı gözlenen kemik uzak orta çizgi temizleyin. Açıkça omurilik doku gösterir ve enkaz serbest olduğundan bir pencere bırakın.
4. Yavaşça omurilik Forseps ile dokunun. Anestezik uçaklarını derin olsa bile bazı hayvanlar refleksle atlamak olabilir. Lidokain gibi uyuşturucu bir aracı birkaç damla doğrudan omurilik enjeksiyon işlemi sırasında atlama önlemek için geçerlidir.
5. Hayvan bir omurilik tutucu spinöz işlemlere rostral ve Kaudal laminektomi penceresine sabitleme forseps bağlama tarafından güvenli. Karın hareketleri nefes etkisini inkâr için spinal tutucu kullanarak hayvan yetiştirmek. Bu iğne kararlılığı artırır ve enjeksiyon uygun derinlik sağlamak.

6. yükleme virüs ve enjektör konumlandırma

1. Virüs Enjektör yaklaşık 5 µL üzerine parafilm bir parça pipetting ve iğne ucu içinde belgili tanımlık damla böylece konumlandırma tarafından yük.
2. Micropump virüs 20 – 100 nL/s hızında en fazla 4 µL çekmek için kullanın.
3. Enjekte etmek ve virüs--dan iğne iğne ucu engellenmiş değil emin olmak için küçük bir miktar yayın denetleyicisi ayarlayın. Aşırı virüs ile bir laboratuvar silin silin.
   Not: Çelik iğne Hamilton şırınga çekti cam Pipetler alternatif olarak kullanılabilir.
4. Vernier ölçektir micromanipulator konumlandırın ve spinal kord orta hat, iğne pozisyon.
   Not: Orta hat bazen büyük bir kan damarı Medulla Spinalis ön yüzeyde çalışan bulunabilir. Ancak, bu bireysel Rat değişebilir ve orta hat hedefleme işlemekte bozulmamış bir spinöz proses onaylanması.
5. İğne yanal 0.8 mm Vernier ölçek üzerinde micromanipulator kullanarak doğrudan.
6. Girintileme, ama değil delinme, beyin zarı dek iğne omurilik için indirin. 1.5 mm derinliğe kadar battı vardır kadar hızlı büküm hareket kullanan, beyin zarı iğneyle delik.

7. omurilik virüs enjekte

1. İğneyi yerinde olduğunda, program 400 nL/dak Onayla o virüs oranında enjekte enjektör boya açık ilerlemesini gözlemleyerek omurilik giriyor. Hiçbir belirgin sızıntı veya spinal kord dokusunun şişkin olmalıdır. Sızıntı gözlem yapılırsa, bu bazen 200 nL/dk enjeksiyon hızını azaltarak hafifletti.
2. Enjeksiyon işlemi bittiğinde, 2-5 dk (Cilt enjekte) bağlı olarak spinal kord dinlenmek iğne izin Difüzyon virüs kolaylaştırmak için.
3. Yavaş yavaş iğne geri çekilin ve sonraki enjeksiyon siteye taşımak. Her biri 6 eşit aralıklı siteleri yaklaşık 1 mm L1-L4 spinal doku uzunluğu boyunca ayrı içine 1 µL virüs enjekte. Düzgün çalışmaya devam eder sürece aynı iğne her enjeksiyon için kullanılabilir.

8. yara kapatma ve post operatif bakım

1. Hayvan spinal sahibinden kaldırmak ve traktör veya lateral kas yaymak için kullanılan kanca götürün. Yara kapanmadan önce tüm enkaz açık olduğundan emin olun.
2. 4.0 fotokromik akorduna dikiş kullanarak kas dikiş. Dikiş konu yakın iç cildi tahriş olasılığını azaltmak için düğüm kesti.
3. 9 mm yara klip kullanarak kapalı cilt zımbala. En iyi şifa için izin vermek için zımbalama önce cilt kenarları hattı.
4. Hayvan ısınma pad ve monitör kadar uykusuz bir su konveksiyon yerleştirin.
5. 5-10 mL subkutan sıvı ve antibiyotik gibi sülfadiyazin enfeksiyonu önlemek için yeniden doldurmak için steril serum enjekte. Hayvan olduğunda ayaktan, ev onun kafesine geri yerleştirin ve ilk analjezikler sağlayın.  Ağrı ve acı bir iz sıçanlara izlemek ve acının azaltılması için onaylı IACUC yordamına uygun davranın.

Sonuçlar

Başarılı enjeksiyon ve viral vektör taşımacılığının iletim tek taraflı nöronların spinal kord ve bazı beyin sapı çekirdek güçlü bir nüfusun sonuçlanmalıdır. Basmakalıp neurons ve akson torasik spinal kord ve beyin sapı, dört hafta sonrası enjeksiyon pontine ağsı etiketlerine göre şekil 1 gösterir. Önemli GFP ifade torasik spinal kord enjeksiyon (şekil 1A, kutulu alan) Ipsilateral tarafında gri madde nöronlarda görülmektedir. Birkaç nöronlar da kontralater...

Tartışma

Beyin ve omurilik nöronlarda genetik manipülasyon vurgulamak duyusal, motor ve otonomik yolları floresan izleme aracılığıyla ve büyütme potansiyeli nöronal yollarini yaralanma^27,28sonra^, keşfetmek için hizmet vermiştir ^{29 , 30 , 31 , 32 , 33}. retrogradely taşınabilir bir viral vektör enjeksi...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
#10 Neşter Bıçakları	Roboz	RS-9801-10	Neşter ile kullanım için.
1 mL Şırıngalar	Becton, Dickinson and Company	309659	Anestezik IP enjeksiyonu, potansiyel anestezik güçlendirici atışlar ve antibiyotik enjeksiyonları için.
10 mL Şırıngalar	Becton, Dickinson ve Company	309604	Ameliyat sonrası hayvana salin enjekte etmek için.
4.0 Kromik Katgüt Sütür	DemeTECH	NN374-16	Kapanış sırasında kasları yeniden bağlamak için.
48000 Mikropipet Beveler	World Hassas Aletler	32416	Fonksiyonel cam iğneler oluşturmak için çekilen cam kılcal boruların uçlarına eğim vermek için kullanılır.
% 5 İyot Çözeltisi	Purdue Ürünleri LP	L01020-08	Cerrahi bölgenin sterilizasyonunda kullanım için.
%70 Etanol	N/A	N/A	Yeni hazırlanan cam iğnelerin, cerrahi hazırlık sırasında hayvan modellerinin ve ameliyat sırasında cerrahın ellerinin sterilizasyonu ve ayrıca diğer tüm küçük sterilite bakımları için.
Anestezik (Ketamin / Ksilazin Çözeltisi)	Zoetis	240048	Ameliyat sırasında hayvanı doğru bilinç düzleminde tutmak için.
Antibiyotik (Sefazolin)	West-Ward İlaç	NPC 0143-9924-90	Ameliyat sonrası enfeksiyonu önlemek için deri altına enjekte edilecek.
Boncuk Sterilizatörü	CellPoint	5-1450	Cerrahi aletleri ısıyla sterilize etmek için.
Bonewax	Güzel Bilim Araçları	19009-00	Kemik kanaması durumunda kemiği kapatmak için.
Koterizatör	Güzel Bilim Araçları	18010-00	Aşırı kan kaybını önlemek için ameliyat sırasında kopan arterleri veya damarları kapatmak için.
Dijital Tartı	Okaus	REV.005	Cerrahi hazırlık sırasında hayvanı tartmak için.
Esnek İğne Eki	Dünyası Hassas Aletler	MF34G-5	Cam iğneleri temizlemek ve cam iğnelere kırmızı yağ yüklemek için.
Jel köpük	Pfizer	H68079	Kemik kanaması durumunda kemiği kapatmak için.
Cam Kılcal Borular	Dünya Hassas Aletler	4878	Çekilmiş cam iğneler için - nanolitre enjektörler için tasarlanmalıdır.
Saç Kesme Makineleri	Oster	111038-060-000	Saçın cerrahi bölgesini temizlemek için.
Kanama durdurucular	Roboz	RS-7231	Cerrahide genel kullanım içindir.
Kimwipes	Kimtech	34155	Cerrahide genel kullanım içindir.
Orta Nokta Kavisli Forseps	Roboz	RS-5136	Cerrahide genel kullanım için.
Vernier Ölçekli Mikromanipülatör	Kanetec	N/A	Ameliyat sırasında hassas hedefleme için.
Mikromakas	Roboz	RS-5621	Yeni çekilmiş cam kılcal borulardan cam fısıltılarını kesmek için.
Işık ve Sürmeli Ölçekli Mikroskop Oküler	Leitz Wetzlar	N/A	Çekilmiş cam kılcal boruların fonksiyonel cam iğnelere eğimini görselleştirmek ve ölçmek için kullanılır.
MicroSyringe Pump Controller	World Precision Instruments	62403	Enjeksiyon hızını kontrol etmek için.
Nanolitre 2000 Pompa Kafası Enjektör	Dünyası Hassas Aletler	500150	Virüsü kontrollü bir şekilde yüklemek ve enjekte etmek.
İğne Çektirme	Narishige	PC-100	Cam iğneler oluşturmak için cam kılcal boruları ısıtmak ve ayırmak için.
Oftalamik Merhem	Dechra Veteriner Ürünleri	RAC 0119	Ameliyat sırasında hayvanın gözlerini korumak için.
Parafilm	Bemis	PM-996	Nanoenjektöre virüs yüklenmesine yardımcı olmak için.
PrecisionGlide İğneleri (25G x 5/8)	Becton, Dickinson and Company	305122	Hayvan modelinin enjeksiyonuna izin vermek için 1 mL ve 10 mL şırıngalarla kullanım içindir.
Sıçan Diş Forseps	Roboz	RS-5152	Dikenli süreçleri kavramak için.
Kırmızı Yağ	N/A	N/A	Enjeksiyon sırasında dokuya giren virüsün görselleştirilmesi için bir cephe sağlamak için.
Ekartörler	Roboz	RS-6510	Cerrahi yarayı açık tutmak için.
Rimadyl Tabletler	Bio Serv	MP275-050	Ameliyat sonrası ağrı yönetimi için.
Rongeurs	Roboz	RS-8300	Ameliyat sırasında omurgadaki kasları çıkarmak için.
Neşter Bıçak Sapı	Roboz	RS-9843	Ameliyat sırasında hayvan modelinin açık derisini ve yağ pedini kesmek için.
Makas	Roboz	RS-5980	Cerrahide genel kullanım için.
Paslanmaz Çelik Yara Klipsleri	CellPoint	201-1000	Kapatma sırasında cerrahi yaranın cildini bağlamak için.
Zımba Çıkarma Forseps	Kent Scientific	INS750347	Zımbaları çıkarmak için, yanlış uygulanmaları gerekir.
Steril Bez	Phoenix Araştırma Ürünleri	BP-989	Operasyon için steril bir yüzey sağlamak.
Steril Pamuk Uçlu Aplikatörler	Puritan	806-WC	Steriliteyi korurken cerrahi yaradaki kanı emmek için.
Steril Gazlı Bez	Covidien	2146	Steriliteyi korurken cerrahi alanı ve cerrahi aletleri temizlemek için.
Steril Salin	Baxter Healthcare Corporation	281324	Kan temizliğinde kullanım ve ameliyat sonrası sıvıların değiştirilmesi için.
Cerrahi Eldivenler	N/A	N/A	Ameliyat sırasında steril alanı korumak için cerrah tarafından kullanılır.
Cerrahi Isıtma Yastığı	N/A	N/A Ameliyat	sırasında hayvan modelinin vücut ısısını korumak için.
Cerrahi Mikroskop	N/A	N/A	Cerrahi yaranın daha iyi görselleştirilmesi için.
Cerrahi Zımba	Kent Scientific	INS750546	Zımbaları uygulamak için.
T / Pompa Isı Terapisi Su	Pompası Gaymar	TP500C	Su konveksiyonlu ısıtma pedine ılık su pompalamak için.
Su Konveksiyonlu Isınma Pedi	Baxter Healthcare Corporation	L1K018	Bilinçsiz hayvanın vücut ısısını korumak için işlem sonrası kurtarma alanında kullanım içindir.
Ağırlıklı Kancalar	N/A	N/A	Cerrahi yarayı açık tutmak için.