Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Bir do-it-yourself Bioprinter ile tasarlanan Biyosilmların üç boyutlu deseni

9.6K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/59477

⸱

16 Mayıs 2019

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Bionanoscience & Kavli Institute of Nanoscience, Delft University of Technology, 2Department of Biology, University of Rochester

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu makalede, düşük maliyetli bir ticari 3D yazıcıyı, desenli biyosilmların yazdırmayı kolaylaştıracak bir bakteriyel 3D yazıcıya dönüştürme yöntemi açıklanır. Bioprinter ve biyo-mürekkep hazırlama tüm gerekli yönleri, hem de biyolojiler oluşumunu değerlendirmek için doğrulama yöntemleri açıklanmıştır.

Özet

Biyosilmler, kendi kendine üretilen bir uzamsal desenli ekstrellüler matriks içinde gömülü bakteri toplamları vardır. Bir biyofilm içindeki bakteriler, potansiyel sağlık tehlikeleri gösteren gelişmiş antibiyotik direnci geliştirir, ama aynı zamanda içme suyu arıtma gibi çevresel uygulamalar için yararlı olabilir. Anti-bakteriyel terapötik ve biyofilm esinlenerek uygulamaların daha da geliştirilmesi, biyofilm oluşturma için yeniden üretilebilen, mühendislere yönelik yöntemlerin geliştirilmesine ihtiyaç duyacaktır. Son zamanlarda, bir bakteriyel mürekkep ile değiştirilmiş bir üç boyutlu (3D) yazıcı kullanarak biyofilm hazırlama yeni bir yöntem geliştirilmiştir. Bu makalede, bakteriye bağlı malzeme işleme birden fazla uygulama sunan bu verimli, düşük maliyetli 3D bioprinter oluşturmak için gerekli adımları açıklar. Protokol, Ekstruder 'in, kontrol edilebilir ve sürekli biyo-mürekkep akışını sağlayan bir şırınga pompası sistemine bağlı bir biyo-mürekkep dispenseri ile değiştirildiği uyarlanmış bir ticari 3D yazıcıyla başlar. Biyofilm baskı için uygun bir biyo-mürekkep geliştirmek için, tasarlanan Escherichia coli bakteri alginat bir çözelti içinde askıya alındı, böylece kalsiyum içeren bir yüzey ile temas içinde katılaşma. Baskı substrat içinde bir indükleştirici kimyasal dahil edilen biyo-mürekkep içinde biyofilm proteinleri ifade sürücüler. Bu yöntem, yazdırılan biyosillerin ayrık katmanlarından oluşan çeşitli uzamsal desenler 3D baskı sağlar. Bu tür uzamsal kontrollü biyosiller model sistemleri olarak hizmet verebilir ve diğerleri arasında, antibiyotik direnci önleme veya içme suyu arıtma dahil olmak üzere toplum üzerinde geniş kapsamlı bir etkiye sahip birden fazla alanda uygulamaları bulabilirsiniz.

Giriş

Şu anda, bu tür malzemeler için pazarlar genişleyen sayısı nedeniyle, dağınık desenli malzemelerin üretimi için çevre dostu, sürdürülebilir çözümler geliştirmek için artan bir ihtiyaç vardır1. Bu makalede, bu tür malzemelerin üretimi için basit, ekonomik bir yöntem sunuyor ve bu nedenle gelecekteki uygulamaların büyük bir spektrum sunuyor. Burada sunulan yöntem üç boyutlu (3D) bir biyo-mürekkep yaşayan bakteri içeren kullanarak dağınık desenli yapıların baskı sağlar. Bakteriler, bir haftadan fazla bir süre için baskılı yapıların içinde uygun kalır, bakteri doğal veya mühendislik metabolik faaliyetleri gerçekleştirmek için olanaklı kılmak. Baskılı bakteri böylece üretmek ve basılı yapısı içinde istenilen bileşenleri yatırmak, örneğin işlevsel bir çapraz bağlantılı biyofilm oluşturma2.

Gelişmiş malzemelerin üretimi için geleneksel yöntemler yüksek enerji harcamalarını (örn. yüksek sıcaklıklar ve/veya baskılar) içerir ve büyük miktarlarda kimyasal atık üretebilir, genellikle maliyet kapsamlı kullanım gerektiren toksik maddeler3 ,4. Buna karşılık, birden fazla bakteriyel türler kolayca çeşitli sektörlerde uygulanabilir malzemeler üretebilir. Bu malzemeler arasında polyhydroxyalkanoates (PHA)5 veya Poly (glycolide-Co-lactide) (PGLA)6, bakteriyel selüloz7, bakteriyel beton malzemeleri8, biyomimetik kompozitler9, amiloid bazlı yapıştırıcılar10veya Bio tabanlı elektrik şalterleri11, diğerleri arasında. Dahası, değerli malzemelerin bakteriyel üretimi genellikle yakın ortam sıcaklıklarında ve basınçlarda ve sulu ortamlarda, toksik bileşikler gerektirmeden veya üreterek gerçekleşir. Literatürde bakterilere sahip malzemeler üretilirken, bazı endüstriyel uygulamalar zaten12,13, bu tür malzemelerin uzamsal deseni için güvenilir bir yöntem ortaya çıkmıştır.

Bu makalede, düşük maliyetli bir ticari 3B yazıcıyı 3B bakteriyel yazıcıya dönüştürmenin düz ileriye dönük bir yöntemi gösterilmektedir. Protokol, yaşam bakterilerini içeren ve sürdürmeye yarayan bir biyo-mürekkebin nasıl hazırlanacağı, hem de 3D baskının gerçekleştirilebilecek alt yüzeylerini nasıl hazırlamaktır. Bu yöntem, malzeme üretebilen çeşitli doğal ve mühendislik bakteriyel suşları ile kullanmak için uygundur. Bu bakteriler, bir 3D baskılı yapı içinde dağınık bir şekilde dağıtılır ve hala bakteri tarafından üretilen istenilen malzemelerin bir uzamsal dağılımı neden olacak metabolik aktivite, devam edebilir.

Bu baskı yöntemi biyosilme katkı üretimi sağlar, kendi kendine üretilen bir ekstrellüler matris ile çevrili bakteri toplamları. Biofilms hangi proteinler, polimerler, bakteriyel hücreler, oksijen ve besin tüm uzamsal yapılandırılmış olan heterojen 3D ağlar14. Bir biyofilm şeklinde iken, bakterilerin artan bir antibiyotik direnci ve yapısal sağlamlık sergiler, onları zor tıbbi kateter ve implantlar dahil yüzeylerden ortadan kaldırmak için yapmak. Biyofilm özellikleri için anahtar ve aynı zamanda en büyük zorluk biyofilm araştırma, biyofilm heterojenliği gibi görünüyor15,16,17. Dağınık kontrollü model biyofilmlerinin üretimi, biyofilm bileşenlerinin uzamsal desenlerini yeniden üretmeye veya ayarlamaya izin verecek şekilde özel bir ilgidir, neredeyse her yüzeyde biofillerin istikrarlı bir şekilde birikmesini anlamakta Doğa.

Bu makalede, bir indükör varlığında biyofilm proteinleri üreten mühendislik E. coli bakterileri içeren 3D baskılı Hidrojeller kullanarak biyofilm üretimi için bir yöntem sunar, hem de biyolojik madde oluşumu doğrulama yöntemleri2 . Bu biyosillerin ana ekstrelüler matris bileşenleri, kendinden birleştirilmiş csga proteinlerini içeren18 ' lik kaydırma amiloid lifleridir. E. coli bakterileri csga proteinlerini ifade etmeye indüklenmiş olduğunda, hücreleri baskı yüzeyinin yıkanması karşı koruyan istikrarlı bir model biyofilm oluşturur. Böyle bir 3D baskılı biyofilm, uzamsal olarak kontrol edilebilir ve çok ölçekli biyofilm yapısı-fonksiyon mekaniği veya materomics19soruşturma için yararlı bir araştırma aracı olarak hizmet verebilir. Bu ısmarlama biyofilm diğer uygulamalar arasında antibiyotik direnci mekanizmaları içine daha fazla araştırma sağlayan, biyofilm oluşumu ve mekanik özellikleri ilkelerini anlayış yardımcı olacaktır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. ticari 3B yazıcının 3D bioprinter içine dönüştürülmesi

  1. Ekstruder ve ticari 3B yazıcının (malzeme tablosu) ısıtıcısını yazıcı çerçevesinden çıkarın ve bu elemanları ana devre kartından kontrol eden kablolamayı çıkarın (Şekil 1a). Yazıcının operasyonel sıcaklığını denetleyen sensör, yazıcı yazılımıyla iletişim kurmak için işlevsel olması gerektiğinden, yazdırma yazılımından çalışma sıcaklığına ulaşılana kadar yazdırmayı geciktiren algoritmayı kaldırın.
  2. Silikon boruları (1 mm iç çapı) ile bir şırınga pompasına yüklenen 5 mL şırıngaya Pipet ucunu (200 μL ucu) bağlayın. Pipet ucunu, orijinal ekstruder için (Şekil 1B) yerine 3D yazıcı ekstrüder kafası üzerine takın.
  3. Birden fazla biyo-mürekkep türü kullanılırsa, yazıcıya ek boru sistemi (ler) ve Pipet Ucu (ler) bağlayın.

2.3D baskı için substrat hazırlama

  1. 4 ml 5 M CAcl2 çözeltisi ekleyin 400 ml 1% w/v agar içinde çözülmüş Luria-Bertani suyu (lb) orta, uygun antibiyotik ve indükleyiciler ile tamamlayıcı (burada 34 μg/ml kloramfenikol ve 0,5% rhamnose).
  2. Her 150 mm x 15 mm Petri tabağı içine LB-agar çözeltisi 20 mL dispense. Yarım açık kapak ile Oda sıcaklığında 30 dakika kuru.
    Not: protokol, bu baskı yüzeylerini birkaç güne kadar 4 °C ' de depolayarak burada duraklatılabilir.

3. biyo-mürekkep hazırlama

  1. Solüsyonu sterilize etmek için bir Sodyum Aljinat çözeltisi (% 3 w/v) ve kaynama noktasına üç defa ısı hazırlayın. 4 °C ' de kullanılıncaya kadar saklayın.
  2. Grow e. COLI MG1655 Pro Δcsga ompR234 (e. coli δcsga) bakteri taşıyan plazmids pSB1C3-yeşil floresan protein (Gfp) (kurucu Gfp Ifadesi)2 veya PSB1C3-Gfp-csga (kurucu Gfp ifadesi, Rhamnose-indüklenebilir csga ifade) bir gecede 37 °c ' de 250 rpm 'de, 34 μg/ml kloramfenikol ve 0,5% rhamnose içeren lb orta 50 ml 'de sallayarak.
  3. 3.220 x g 'de 5 dakika boyunca hücre kültürünü santrifüjle bakteriye bırakın. Süpernatant çıkarın.
  4. 10 mL LB orta bakteri peleti yeniden askıya alın ve 10 mL Sodyum Aljinat (3% w/v) ekleyin.

4.3D baskı süreci

  1. Bir bilgisayarda 3B Yazdırma yazılımını (malzeme tablosu) yükleyin ve açın. 3B yazıcıyı bilgisayara bağlayın. X, Y ve Z eksenleri için ana sayfa düğmesini tıklatarak Baskı kafasını ev konumuna taşıyın.
  2. Her baskı için, baskı yatağında belirli bir yere hazırlanmış bir baskı substrat yerleştirin.
  3. Yazıcı kafasının yüksekliğini Z ekseninde kalibre edin.
    1. Manuel kontrol altında 22 mm yüksekliğine Baskı kafasını kaldırın, böylece istenilen pozisyona hareket ederken Petri tabağı kenarı ile çarpışmak olmayacaktır. Plakanın Baskı kafasını üst kısmına yerleştirin ve Pipet Ucu baskı yüzeyine temas edene kadar aşağı doğru taşıyın. Bu Z ekseni konumunu Z1 (baskı yüzeyinin yüksekliği) olarak atayın.
    2. Baskı kafasını kaldırın ve X, Y ve Z eksenlerinde manuel kontrol ile plaka alanının dışına taşıyın. Yazıcı kafası ile plaka yüzeyi arasındaki çalışma mesafesi Z2 olarak tanımlanmışsa, yazdırma sırasında, yazdırma programına Z1 + Z2 girin ve baskı sırasında Z değeri olarak yazın.
  4. İstenilen yörüngeye göre otomatik olarak geliştirilen bir nokta-by-noktası koordinat yöntemi ile baskı şeklini programlamak.
    1. İstenilen yörünge düz bir çizgi ise, yalnızca başlangıç ve bitiş noktalarını tanımlayın. Eğri çizgilere ek noktalar dahil olmak üzere daha pürüzsüz eğrileri neden olur. Yazdırma kafasını her noktaya sırayla el ile taşıyın ve bu noktaların koordinatlarını sırayla kaydedin. Tüm bu koordinatlarının yanı sıra her yazdırılan segment için baskı kafası hareketli hızını G kodu düzenleyicisine girin.
  5. Baskıdan önce ve sonra, Baskı kafasını plaka kenarından (20 mm) daha yüksek bir mesafeye kaldırın ve doğrudan plaka bölgesinin dışına taşıyın. Bu programı bir G-Code dosyası olarak kaydedin ve sonraki baskılarda kullanmak için doğrudan yükleyin, her yeni baskı substrat için Z ekseni yüksekliğini yeniden ölçün.
    Not: bir kare yazdırmak için örnek G-kodu için Tablo 1 ' e bakın.
  6. Önceden programlanmış G-Code dosyasını yükleyin. Yazılımdaki G-Code düzenleyicisini açın ve istenen şekli yazdırmak için komutlarda program yapın. Her komut satırında, baskı kafasının konumu X, Y ve/veya Z ekseninde değişebilir. Tüm yazdırma adımları sırasında Z değerini Z1 + Z2 (baskı yüzeyi + çalışma mesafesi yüksekliği) olarak girin.
    Not: hareketli hız da ayarlanabilir; 9.000 mm/dak, tipik baskı hızları için uygun bir değerdir.
  7. Sıvı biyo-mürekkebi şırınga (ler) içine yükleyin ve 3D bioprinter şırınga pompası (lar) içine takın.
  8. Yazdır düğmesine tıklayarak biyo-mürekkebi baskı substratın üzerine yazdırın.
  9. Baskı sırasında, yazıcı kafası hareketini tamamen yazılım tarafından kontrol et. Yazıcı kafası baskı yüzeyi ile temas etmeden önce şırınga pompasını el ile başlatın.
    Not: şırınga pompası ve yazıcı koordinasyonu ampirik ekstrüzyon hızına bağlı olarak belirlenir, hangi baskı kafası ilk baskı noktasına hareket hızı, ve baskı kafası başlangıç konumu. İlk baskı kafası konumu 20 mm, 9.000 mm/dak baskı kafası hızı ve 0,1 mL/h ekstrüzyon hızı ile, baskı başladıktan hemen sonra şırınga pompası başlatın. Ekstrüzyon hızı 0,1 mL/h 'den 0,3 mL/h 'ye değiştirilirse, baskı başladıktan sonra şırınga pompasını başlatmak için 2 − 3 s bekleyin.
  10. Baskı kafası baskının son noktasına geldiğinde şırınga pompasını durdurun. Yazıcı kafası baskı sürecinin sonunda yukarı kaldırmadan önce şırınga pompası durdurun, aksi takdirde aşırı biyo-mürekkep baskı substrat üzerine düşecek ve baskı çözünürlüğü azaltmak.
  11. 3D yapıların inşası için, G-Code düzenleyicisinde baskı kafasının tüm hareketlerini kontrol et. İlk katmanın yazdırma yüksekliğini yazın. G-kodunun Z değerini, ikinci katman için 0,2 milimetre tarafından baskı yüksekliğini artırmak üzere artırın. Daha sonra, daha yüksek bir katmana taşındıktan sonra 0,1 milimetre ile Z değerini artırın. Baskı işlemi sırasında plakası hareket ettirmeyin.
  12. Yazdırılan hidrojelin genişliğini ve yüksekliğini ölçmek için, numunenin altına veya yanında yerleştirilen bir çelik cetvel kullanın.

5. E. coli tarafından biyofilm üretiminin etkinliğini yetiştirmek ve test etmek

  1. Biyofilm bileşenlerinin (curli liflerin) üretimine izin vermek için basılı numuneleri 3 − 6 gün boyunca oda sıcaklığında inküle etmek. Fotoğraf makinesi veya floresan tarayıcı kullanarak plakaları görüntü.
  2. Alginat matrisini çözmek için, 20 mL 0,5 M sodyum sitrat çözeltisi ekleyin (pH = 7 NaOH ile ayarlanır) baskı yüzeylerde, ve 2 h için inkük 30 RPM oda sıcaklığında sallayarak. Sitrat tedavisinde önce plakaların görüntüleri ile karşılaştırmak için tekrar sıvı ve görüntü plakaları atın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Biyosilmların başarılı 3D baskı için ilk adım bir bioprinter içine ticari bir 3D yazıcı dönüştürüyor. Bu dönüşüm, yazıcının ekstruder ve ısıtıcısını kaldırarak, polimerik mürekkeple yazdırmak için tasarlanmış ve bunları yaşayan bakterileri içeren biyo-mürekkep yazdırmak için uygun bileşenlerle değiştirerek elde edilir (Şekil 1a). Bir şırınga pompasına bağlı bir boru sistemine bağlı olan ekstruder, bir pipet ucu (veya baskı sürecinde birden fazla biyo mürekkeb...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Mühendislik biyosilmlarının 3D baskı için burada sunulan protokol iki kritik adımlara sahiptir. Öncelikle, özel bir baskı çözünürlüğü üreten en kritik faktör olan agar baskı yüzeyinin hazırlanması. Baskı yüzeyinin düz olduğundan ve yazıcı kafasının üzerindeki pipet ucunun yüzeyden doğru yükseklikte konumlandırıldığından emin olmak önemlidir. Yüzey düz değilse, çalışma mesafesi yazdırma işlemi sırasında değişecek. Çalışma mesafesi 0,1 mm 'den az ise, CaCl2 çözeltisi pipet ucunun içine girebilir ve hidrojel oluş...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.

Teşekkürler

Bu çalışma bir AOARD Grant tarafından destekleniyordu (No. FA2386-18-1-4059), Hollanda bilimsel araştırma organizasyonu (NWO/OCW) nanoscience programının Frontiers ve gelişmiş malzemeler NWO-NSFC programı (No. 729.001.016) bir parçası olarak. Yazarlar, Ramon Van der Valk ve Roland Kieffer 'in laboratuar yardımını kabul ediyor.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
3D yazıcıCoLiDo3D-P Kiti
3D baskı yazılımıCoLiDoPrint-Rite ColiDo Repetier-Host v2.0.1
AgarSigma-Aldrich05040
CaCl2 dihidratSigma-AldrichC7902
SantrifüjEppendorf5810 R
KloramfenikolSigma-Aldrich3886.1
LB et suyu tozuSigma-AldrichL3022
Orbital çalkalayıcıVWR89032-092Model 3500
Petri kabıVWR25384-326150 x 15 mm
RhamnoseSigma-Aldrich83650
Silikon boruVWR DENE 3100103/25
Şırınga pompasıProSense B.V. NE-300
Sodyum aljinatSigma-AldrichW201502
Sodyum sitrat monobazikSigma-Aldrich71498
Sodyum hidrooksitVWR28244.295

Kaynaklar

  1. Tibbitt, M. W., Rodell, C. B., Burdick, J. A., Anseth, K. S. Progress in material design for biomedical applications. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (47), 14444-14451 (2015).
  2. Schmieden, D. T., et al. Printing of Patterned, Engineered E. coli Biofilms with a Low-Cost 3D Printer. ACS Synthetic Biology. 7 (5), 1328-1337 (2018).
  3. Mao, L. B., et al. Synthetic nacre by predesigned matrix-directed mineralization. Science. 354 (6308), 107-110 (2016).
  4. Gao, H. L., et al. Mass production of bulk artificial nacre with excellent mechanical properties. Nature Communications. 8 (1), 287(2017).
  5. Poirier, Y., Nawrath, C., Somerville, C. Production of Polyhydroxyalkanoates, a Family of Biodegradable Plastics and Elastomers, in Bacteria and Plants. Nature Biotechnology. 13, 142-150 (1995).
  6. Choi, S. Y., et al. One-step fermentative production of poly(lactate-co-glycolate) from carbohydrates in Escherichia coli. Nature Biotechnology. 34 (4), 435-440 (2016).
  7. Mohammadi, P., Toivonen, M. S., Ikkala, O., Wagermaier, W., Linder, M. B. Aligning cellulose nanofibril dispersions for tougher fibers. Scientific Reports. 7 (1), 11860(2017).
  8. Jonkers, H. M. Bacteria-based self-healing concrete. Heron. 56 (1/2), (2011).
  9. Schmieden, D. T., Meyer, A. S., Aubin-Tam, M. E. Using bacteria to make improved, nacre-inspired materials. MRS Advances. 1 (8), 559-564 (2016).
  10. Zhong, C., et al. Strong underwater adhesives made by self-assembling multi-protein nanofibres. Nature Nanotechnology. 9 (10), 858-866 (2014).
  11. Chen, A. Y., et al. Synthesis and patterning of tunable multiscale materials with engineered cells. Nature Materials. 13 (5), 515-523 (2014).
  12. Gatenholm, P., Klemm, D. Bacterial Nanocellulose as a Renewable Material for Biomedical Applications. MRS Bulletin. 35, 208-213 (2010).
  13. Rodriguez-Carmona, E., Villaverde, A. Nanostructured bacterial materials for innovative medicines. Trends in Microbiology. 18 (9), 423-430 (2010).
  14. Hung, C., et al. Escherichia coli biofilms have an organized and complex extracellular matrix structure. MBio. 4 (5), (2013).
  15. Donlan, R. M., Costerton, J. W. Biofilms: Survival Mechanisms of Clinically Relevant Microorganisms. Clinical Microbiology Reviews. 15 (2), 167-193 (2002).
  16. Wu, H., Moser, C., Wang, H. Z., Hoiby, N., Song, Z. J. Strategies for combating bacterial biofilm infections. International Journal of Oral Science. 7 (1), 1-7 (2015).
  17. Stewart, P. S., Franklin, M. J. Physiological heterogeneity in biofilms. Nature Reviews Microbiology. 6 (3), 199-210 (2008).
  18. Kikuchi, T., Mizunoe, Y., Takade, A., Naito, S., Yoshida, S. Curli Fibers Are Required for Development of Biofilm Architecture in Escherichia coli K-12 and Enhance Bacterial Adherence to Human Uroepithelial Cells. Microbiology and Immunology. 49 (9), 875-884 (2005).
  19. Cranford, S., Buehler, M. J. Materiomics: biological protein materials, from nano to macro. Nanotechnology, Science and Applications. 3, 127-148 (2010).
  20. Lehner, B. A. E., Schmieden, D. T., Meyer, A. S. A Straightforward Approach for 3D Bacterial Printing. ACS Synthetic Biology. 6 (7), 1124-1130 (2017).
  21. Wang, X., Smith, D. R., Jones, J. W., Chapman, M. R. In vitro polymerization of a functional Escherichia coli amyloid protein. Journal of Biological Chemistry. 282 (6), 3713-3719 (2007).
  22. Hammar, M., Bian, Z., Normark, S. Nucleator-dependent intercellular assembly of adhesive curli organelles in Escherichia coli. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (13), 6562-6566 (1996).
  23. Huang, Y. J., Xia, A. G., Yang, G., Jin, F. Bioprinting Living Biofilms through Optogenetic Manipulation. ACS Synthetic Biology. 7 (5), 1195-1200 (2018).
  24. Jin, X. F., Riedel-Kruse, I. H. Biofilm Lithography enables high-resolution cell patterning via optogenetic adhesin expression. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (14), 3698-3703 (2018).
  25. Stewart, P. S., Franklin, M. J. Physiological heterogeneity in biofilms. Nature Reviews Microbiology. 6 (3), 199-210 (2008).
  26. Percival, S. L., Suleman, L., Vuotto, C., Donelli, G. Healthcare-associated infections, medical devices and biofilms: risk, tolerance and control. Journal of Medical Microbiology. 64, 323-334 (2015).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

3B Biyoyaz cBiyofilm Yazd rmaAljinat Biyo m rekkepEscherichia coliZ ekseni Kalibrasyonur nga PompasCurli EkspresyonuSodyum SitratPetri KabG kodu D zenleyici
Bir do-it-yourself Bioprinter ile tasarlanan Biyosilmların üç boyutlu deseni
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.