Klinik Doğrusal Hızlandırıcılar kanser hücrelerinde doz oranlarının geniş bir yelpazede biyolojik etkilerini belirlemek için kullanılabilir. Biz hücre tabanlı deneyleri için doğrusal bir Hızlandırıcı kurmak için nasıl tartışıyoruz ve kanser kök benzeri hücreler için süspansiyon ve hücre hatları yapışkanlık kültürler olarak yetiştirilen içinde tumorspheres olarak yetiştirilen için deneyleri.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
In vitro Radiobiology denemeleri için Lineer Hızlandırıcı kullanımı
Bu makalede
Özet
Özet
Radyasyon terapisi kanser yönetiminin temel taşlarından biri olarak kalır. Çoğu kanser için, tümör Hayır için en etkili, cerrahi olmayan tedavi olduğunu. Burada, kanser hücrelerini doğrusal bir Hızlandırıcı ile ışınlamakta bir yöntem tarif ediyoruz. Lineer Hızlandırıcı teknolojisinin ilerlemesi radyasyon tedavisinin hassasiyetini ve verimliliğini artırmıştır. Radyasyon dozları ve doz oranlarının geniş bir biyolojik etkileri araştırma yoğun bir alan olmaya devam ediyor. Doğrusal Hızlandırıcıların kullanımı bu çalışmalar klinik olarak ilgili dozlar ve doz oranları kullanarak kolaylaştırabilir.
Giriş
Radyoterapi birçok kanser türü için etkili bir tedavidir1,2,3,4. Ekstra yüksek doz hızı ışınlama radyasyon tedavisinde nispeten yeni ve Doğrusal Hızlandırıcılar son teknolojik gelişmeler tarafından mümkün hale5. Standart doz oranı ışınlama üzerinde ekstra yüksek doz oranının klinik avantajları kısaltılmış tedavi süresi ve gelişmiş hasta deneyimi içerir. Doğrusal Hızlandırıcılar da hücre kültürü bazlı radyasyon biyoloji çalışmaları için bir klinik ayar sağlar. Radyasyon dozu ve doz oranlarının biyolojik ve terapötik et....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. süspansiyon hücresi kültürü için hücre hazırlığı
- Kök hücre kültürü medyasında kültür glioma kök benzeri hücreler, yaklaşık 5 x 106 hücreli/10 cm 'lik bir hücre kültüründe kuluçer hücrelerinde% 5 Co2, 95% 37 °c ' de bağıl nem.
Not: hücre kültürü koşulu tüm yordamları aynıdır. Protokolde kullanılan medya tam ortamıdır. - Planlanan ışınlanmadan iki gün önce, kültür plakasında, bir kültür kaputu içinde 15 mL santrifüj tüpüne steril 5 mL 'Lik pipet içeren glioma kök benzeri hücreler toplayın.
- 200 x g 'de toplanan hücreleri tezgah santrifüj içinde 3 dakika santrifüjler.
- Süpernatant atın ve hücre pele....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Doğrusal bir Hızlandırıcı ile standart doz oranı ve ekstra yüksek doz hızı ışınlama hücre döngüsü etkisini araştırmak için, glioma kök benzeri hücrelerin üç numuneleri bu protokol kullanılarak hazırlanmış ve toplanan 24 saat ışınlama sonra17: bir kontrol örneği ışınlanmış değildi (Şekil 2A), 400 mu/Min ile ışınlanmış bir örnek (monitör ünitesi, 4,2 GY/min standart doz oranı, Şekil 2B) için 4 Gy, ve başka .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Radyoterapi kanser yönetiminin ayrılmaz bir parçasıdır. Devam eden çabaları radyasyon tedavisinin etkinliğini ve verimliliğini artırmak için arama. Doğrusal Hızlandırıcı teknolojisindeki gelişmeler, hastaları görülmemiş doğruluk ve güvenlik ile tedavi etme fırsatı sağlamıştır. Çoğu hastada doğrusal hızlandırıcalardaki yüksek enerji X-ışınları ile tedavi edildiğinden, lineer hızlandırıcılar üzerinde gerçekleştirilen çok çeşitli doz oranlarının biyolojik etkilerini inceleyerek çalışmalar hastalara kolayca uygulanabilir. Ra.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.
Teşekkürler
Biz lineer hızlandırıcılar kullanımı için Cleveland Clinic radyasyon Onkoloji Anabilim Dalı teşekkür ederiz. Dr. Jeremy Rich 'e, zengin glioma hücresi gibi hücre hediyesi olarak teşekkür ediyoruz. Bu araştırma Cleveland Clinic tarafından destekleniyordu.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Malzeme | |||
| glioma kök benzeri hücre 387 | Dr. Jeremy Rich'ten | ||
| hediye 293 hücre | ATCC | CRL-1573 | |
| nöron kök hücre kültürü ortamı | Thermo Fisher Scientific | 21103049 | NeurobazalTM< / sup> medya |
| DMEM | Thermo Fisher Bilimsel | 10569044 | |
| Fetal Sığır Serumu | Thermo Fisher Scientific | 16000044 | |
| Penisilin / Streptomisin | Thermo Fisher Scientific | 15140-122 | |
| Rekombinant İnsan EGF Proteini | R & D Systems | 236-EG-01M | |
| Rekombinant İnsan FGF temel | Ar-Ge D Sistemleri | 4114-TC-01M | |
| B-27 ve ticaret; Takviye | Thermo Fisher Scientific | 17504044 | |
| Sodyum Pirüvat | Thermo Fisher Scientific | 11360070 | |
| L-Glutamin | Thermo Fisher Scientific | 25030164 | |
| Tripsin-EDTA | Thermo Fisher | 25200056 | |
| hücre dışı proten matris | Corning | 354277 | MatrigelTM< / sup> |
| Etanol | Fisher kimyasalı | A4094 | |
| Ekipman< / güçlü> | |||
| 10 cm hücre kültürü kabı | Denville | T1110 | |
| 3,5 cm hücre kültürü kabı | USA Scientific Inc. | CC7682-3340 | |
| 22x22mm cam kapak kaymalı | elektron mikroskobu bilimleri | 72210-10 | |
| 15 ml santrifüj tüpü | Thomas Scientific | 1159M36 | |
| 50 ml santrifüj tüpü | Thomas Scientific | 1158R10 | |
| 5 ml Pipet | Fisher Scientific | 14-955-233 | |
| pipet yardımı | Fisher Scientific | 13-681-06 | |
| Vorteks karıştırıcı | Fisher Scientific | 02-215-414 | |
| Santrifüj | Eppendorf | 5810R | |
| Lineer Hızlandırıcı | Varian | n/a | |
| su eşdeğeri malzeme | Sun Nuclear corporation | 557 | Katı suTM< / sup> |
| < güçlü > Reaktif hazırlama< / güçlü> | |||
| DMEM media | % 10 fetal sığır serumu (FBS), 2 mM L-glutamin, 100 ünite / mL penisilin G, 100 & mikro; 500 ml DMEM ortamında | ||
| kök hücre kültürü ortamında | 10 ml B27 takviyesi, 20 & g hFGF, 20 ve mikro; g hEGF, 2 mM L-glutamin, 100 ünite/mL penisilin G, 100 & mikro; 500 ml Nörobazal ortamda |
Kaynaklar
- Stupp, R., et al. Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma. The New England Journal of Medicine. 352 (10), 987-996 (2005).
- Stupp, R., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
