Burada sunulan bir protokol toplamak ve preklinik çalışmalar için kemirgenler dört ayaklı lokomotif üç boyutlu kinematik analiz etmektir.
Yöntem makalesi
Burada sunulan bir protokol toplamak ve preklinik çalışmalar için kemirgenler dört ayaklı lokomotif üç boyutlu kinematik analiz etmektir.
Üç boyutlu (3D) kinematik hareket analiz sistemlerinin yarar kemirgenler sınırlıdır. Bu yetersizlik nedeninin bir parçası, 3D veri toplama ve analiz prosedürlerine eşlik eden karmaşık algoritmalar ve matematiksel modelleme kullanmaktır. Bu çalışma, altı kameralı hareket yakalama sistemi kullanılarak sağlıklı ve nörotraumatik farelerde koşu bandı lokomotif sırasında 3D kinematik yürüyüş analizi için basit, Kullanıcı dostu, adım adım ayrıntılı bir metodoloji sağlar. Ayrıca sağlanan ayrıntılar vardır 1) sistem kalibrasyonu bir deneysel set-up için özelleştirilmiş dört ekstremite, 3) seçenekleri video izleme için mevcut tüm 4 bacak üzerinde konumlandırılmış belirteçleri kullanarak yetişkin fareler koşu bandı lokomotlu için, 2) veri toplama ve işleme, ve 4) temel 3D kinematik veri oluşturma ve görselleştirme ve verilerin ölçülmesi yerleşik veri toplama yazılımı kullanarak. Son olarak, bu hareket yakalama sisteminin yardımcı programı önce ve neurotrauma sonra motor davranışları çeşitli eğitim için Genişletilebilir önerilir.
Sinir hastalıklarından sonra kemirgenler, forelimb ve hindekstremite lokomotor açıkları genellikle subjektif Puanlama sistemleri kullanılarak değerlendirilir1. Otomatik sistemler2,3,4,5 yürüme analizi için kabul edilmiştir ama dezavantajları muzdarip, çünkü birincil sonuçlar ayak izi analizi dayanır ve önemli yakalamak için başarısız ekstremite hareketlerinin gerçek kinematiklerini ortaya çıkaramayan segment ve eklem kinematik değişkenler2. Çoğu yürüyüş parametreleri korelasyon olduğundan, motor açıkları tamamen değerlendirmek için fareler tarafından benimsenen tazminatları anlamak için bir yürüyüş parametreleri koleksiyonu gereklidir.
Son on yıl içinde, insanlarda Biyomedikal araştırma için çeşitli 3D hareket Analizi sistemleri6 geliştirilmiştir. Bu sistemler başarılı ve sağlıklı insan yetişkinlerde lokomotif içinde açıkları yakalama etkili olduğu kanıtlanmış ve yürüyüş6,7kinematik değiştirildi. Kemirgenler, şu anda mevcut 3D kinematik hareket sistemleri karmaşık algoritmaları benimsemeye ve hareket davranışı için modelleme ve sofistike veri analizi teknikleri kullanmak8,9,10,11 , hangi sonunda çok yönlülük sınırlamak. Dahası, çoğu 3B hareket yakalama sistemiyle veri toplamak için kullanılan yöntemler literatürde yeterli şekilde açıklanmaz. Veri toplama ve analiz prosedürleri, sınırlamalar ve etkili sistemi kullanarak katılan teknikleri hakkında ayrıntılar eksik.
Sonuç olarak, araştırmacılar arasında ortak kavramlar biri 3D hareket izleme kinematik değerlendirmeler oldukça zahmetsiz ve teknik uzmanlık ve ayrıntılı veri analizi gerektiren zaman alıcı prosedürleri olduğunu. Bu çalışmanın amacı, veri toplama ve analiz protokollerini kırmak ve metodolojisi adım adım bir süreç aracılığıyla açıklamak, böylece objektif, öğrenmesi kolay ve sistematik bir şekilde yaklaşılabilir. Günümüzde, klinik öncesi çalışmalarda nörolojik yaralanmaların ve müdahalelerin ardından fonksiyonel motor davranışlarını daha kapsamlı ve sistematik bir şekilde değerlendirmede ortaya çıkan bir vurgu vardır.
Dört ayaklı lokomotif alanında, burada sunulan bir 3D hareket izleme sistemi gibi vücut duruş gibi ek bilgi sağlayabilir kullanımı, vücut eksenleri ile ilgili Paw rotasyon, eklem ilişkileri, ve daha doğru bilgi koordinasyon ile ilgili olarak, tüm uçaklardan tüm hayvanı aynı anda görselleştirirken. Bu da, birden fazla sonuç yoluyla sağlıklı ve yaralı fareler içinde ve arasında motor davranışlarında kritik farklılıklar ortaya çıkarabilir. Doğru ve objektif bir daha rafine kinematik analiz ile, bir müdahale yanlış gösterilirken etkileri riski minimize edilir. Bu hareket yakalama yazılımından oluşturulan veriler, hareket kalitesi için çerçeveye göre görselleştirilebilir ve otomatik olarak izlenebilir ve veri toplama veya ölçüme ek algoritmalar veya modelleme gerektirmez. Bu çalışmanın amacı, sağlıklı ve omurilik yaralanan fareler içinde koşu bandı lokomotatiği sırasında 3D yürüyüş kinematiklerin veri toplama ve analizinde metodolojik detaylar ve hususlar sağlamaktır. Bu protokol, deneyler nörolojik sıçan modelleri kullanan preklinik araştırmacılar tarafından kullanılmak üzere tasarlanmıştır.
Bu çalışma, laboratuar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için Ulusal Sağlık Kılavuzu Enstitüleri 'nin tavsiyelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Protokol, Stony Brook Üniversitesi Şansölyesi hayvan Araştırma Komitesi tarafından onaylandı.
1. hareket yakalama sisteminin ayarlanması
2. hareket yakalama sisteminin kalibrasyonu
3. egzersiz ve koşu bandı lokomotl için hayvan hazırlama
4. hareket yakalama
5. hareket izleme
6. kinematik analiz
Bu protokol, basit, yerleşik bir yazılım kullanarak kemirgenlerde koşu bandı lokomotunu için niceliksel 3D kinematik veri toplama ve analizi için bir metodoloji göstermektedir. Sonuçlar, protokol, sağlıklı ve omurilik yaralı fareler içinde dört ayaklı lokomotif kinematik toplama ve analiz etmek için uygulanabilir olduğunu göstermektedir. Sıçan işleme deneyimi olan araştırmacılar, fareler üzerinde işaretçileri yerleştirmeli, ardından herhangi bir kritik sorun olmadan hareket yakalama sistemini kalibre etmeli ve kullanmalıdır. Veri karmaşık algoritmalar kullanmadan kolayca oluşturulur.
Burada, protokol sağlıklı ve omurilik yaralı (C5 sağ hemisection) fareler uygulandı. Bu makalenin amacı için sadece temsili sonuçlar gösterilir. Genel olarak, eklem ve ekstremite segment hareketinin çeşitli kinematikleri her işaretçinin 3B koordinatlarından kolayca elde edilebilir. Anormal yürüyüş ve sağlıklı yürüyüş döngüleri arasındaki kritik farklar, adım yüksekliği önlemleri, eklem hızı, eklem açısı (Şekil 9), dört ekstremiteler için adım döngüsü faz süreleri dahil olmak üzere (ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere) birden fazla sonuç ile kolayca tespit edildi, ve ekstremite koordinasyonu (Şekil 10). Araziler ve sopa diyagramları şeklinde niteliksel verilerin analizi bu analiz yaklaşımı son sonuçları için uygulamak için kullanılan nicel araçların belirlenmesi rehberlik edebilir (Şekil 11).
Temsili sağlıklı bir sıçan olarak, dirsek açı profili tam bir hareket aralığını gösteren tutarlı bitişik yürüme döngüleri ile pürüzsüz, tek doruklarına göstermiştir (Şekil 9). İzleri alternatif duruş faz ve salıncak faz süreleri tutarlı intralimb koordinasyon önerdi. Buna karşılık, bir temsilci omurilik yaralı sıçan dirsek açı profili daha az tutarlı ve hareket küçük aralıkları olan birden fazla bozuk doruklara gösterdi. Uzunlaştırılmış duruş safhasında yapılan değişikliklere ek olarak ve kısaltılmış salıncak faz süreleri, RFL için intralimb koordinasyonunda bir eksikliği vardı.
Koordinasyon için çizilen sunulan temsili veri, bu koordinasyon araziler (Şekil 10) temsili sağlıklı fareler oluşturulan iyi tanımlanmış gösterdi bulundu, yürüyüş sırasında ipsilateral ekstremitelerde ritmik koordinasyon alternatif döngüler (L-şekilli desen) ve kontralateral ekstremite ile faz D şeklinde desen. Karşılaştırmalı olarak, bir temsilci omurilik-yaralı (C5 sağ hemiseksiyon) sıçan kötü olmayan alternatif ve ipsilateral ekstremitelerde ritmik olmayan koordinasyon gösterdi ve olağandışı bir alternatif ritmik koordinasyon (L-şekilli desen) kontralateral birinde ekstremite (Şekil 10). Kaydedilmiş hareket videosu sağ forelimb gözlemlenebilir açığı göz önüne alındığında, bu RFL ve LHL herhangi bir zamanda LFL veya RHL desteği olmadan tam ağırlık ayı mümkün olduğunu göstermektedir. Bu eğilim bir koşu bandı üzerinde zorla yürüyüş hızı ile başa çıkmak için telafi edici bir mekanizma öneriyor.
Ölçülebilir veriler, 3B sistemin kullanımından kolayca üretiliyordu, ancak bu, ayrı sekmelere erişme ve yazılım içinde kullanılabilen çok sayıda seçenekten seçim yapmaya dahil edilmiştir. Düzenli olarak yapılır gibi (tek ayrı farklı sonuçlar oluşturmak için gerek kalmadan) ilgi en bariz sonuçları için tek bir rapora nicel ve niteliksel veri oluşturacak otomatik bir şablon geliştirme üzerinde mevcut iş var klinik çalışmalar için kullanılan kinematik sistem. Bu nedenle, birkaç uç noktaları derlenebilir ve hemen bir deneme sonra kolayca görselleştirilebilir bir rapor biçiminde dışa.

Şekil 1 : Deneysel ayarlama. (A) bir koşu bandı yürüyüş görevi için altı kamera kinematik veri toplama set-up şematik. Üç kamera bir dizi yakalamak için koşu bandı her iki tarafına yerleştirilir (Frame-by-Frame) lokomotif sırasında sol ve sağ Marker hareketleri. (B) dört ayaklı lokomotif kinematik yakalamak için kemirgen 's ön ayakları ve arka ekstremite üzerinde kemikli yerler üzerinde Marker yerleştirme tasvir diyagramı. Sıçan her tarafında 11 işaretler toplam yerleştirilir. Gölgeli bölgeler, sıçan tıraş edildiği alanı gösterir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 2 : Kalibrasyon Için işaretçiler. (A) iki kalibrasyon çerçevesi kullanarak Wand kalibrasyon sistemi için Marker set atamaları: l-Frame ve Wand (B) koordinat sistemi, l-Frame orijini (çerçevenin iki bacağı kesişme noktası) olarak tanımlanan l-Frame tarafından tanımlanır (0,0). L-Frame iki ekstremite, L-Frame Short, ve L-Frame uzun x-ve y-axes, sırasıyla tanımlamak ve z ekseni XY düzlemine dik olarak tanımlanır. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 3 : Marker türleri. (A) kullanılan işaretçilerin iki tür gösteren sıçan alt gövde fotoğrafı. B Fotoğraf, deriye uymak için tasarlanmış çift taraflı bant ile Iliac Crest üzerine yerleştirilen bir reflektörlü Marker gösterir (kırmızı daire). C Fotoğraf, sağ metatarsophalgeal eklem üzerinde bir kalem işaretleyicisinin yerleştirilmesi (kırmızı yuvarlak) gösterir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 4 : Hareket izleme. (A) görüntü, "otomatik olarak izle" ve "desen eşleştirme kullanarak izle" işlevlerini kullanarak birden çok işaretçinin aynı anda izleneceği hareket izleme arabirimini gösterir. (B) bir reflektörlü işaretçinin büyütülmüş görünümü, Marker ataması sırasında "otomatik olarak parça" işlevinde parlak beyaz bir dairesel nokta olarak algılanır. Yazılım parlak mavi dairesel nokta olarak bu noktayı tanır. Kırmızı nokta sonunda öngörülen işaretçinin merkezi olarak tanınır. Dairesel işaretçinin içindeki ortalanmış kırmızı nokta, veri izleme sırasında deneysel hataların olasılığını azaltır. Merkezden sapma, sonraki ölçüm ve analizlerin yanlış olması muhtemeldir. C Desen eşleştirme için seçilen bir reflektörlü işaretçinin büyütülmüş görünümü. Seçilen işaretçinin boyutuna, şekline ve rengine göre, yazılım, sonraki video çerçevelerindeki açıklamla eşleşen işaretçileri otomatik olarak tanımlar. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 5 : Temel ve gelişmiş izleme seçenekleri. (A) videolar, analiz sırasında videoyu sağ tıklayarak yazılım içinde işlenebilir, böylece otomatik izlemeye izin vermek için belirsiz veya bulanık işaretçiler açıkça görselleştirilebilir. Gösterim amacıyla, kolay izleme için veri toplama sırasında farklı ortam aydınlatma koşullarına uyacak şekilde ayarlanan iki tür görüntü işleme ayarı gösterilir. (B) görüntü işlemeden önce temsili bir video çerçevesi. (C) temel görüntü işleme için (işleme tipi ı), parlaklık ve kontrast ayarları daha net bir görünüm için ayarlanır. (D) gelişmiş görüntü işleme ayarlarını (işleme tipi II) kullanarak, sağ metatarsofalangeal eklem işaretleyicisi (siyah Marker) ters çevrilebilir ve daha sonra otomatik olarak izlenebilir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 6 : Faz atamaları. Her ekstremite için yürüyüş döngüsü deneysel tasarıma göre ayrık aşamalara ayrılabilir. Gösterim amacıyla üç yürüyüş döngüsü aşaması gösterilir. (A) duruş aşaması, ekstremite koşu bandı yüzeyine temas ettiği ilk çerçeve olarak tanımlanır. (B) salıncak aşaması, ekstremite koşu bandı yüzeyine (C) orta salıncak aşamasının bıraktığı ilk çerçeve olarak tanımlanır, pençe inmeye başladığı ekstremite boşluklarından sonra ilk çerçeveye döner. (D) içinde, ilk duruş başlangıcından sonraki yürüyüş döngüsünün duruş aşaması atamasına kadar tam bir yürüyüş döngüsü tanımlanır. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 7 : Adım faz Analizi Için Gelişmiş Seçenekler. Bu seçenek, izleme ve faz atamaları, yanı sıra aşama atamaları değiştirme yeteneği derinlemesine bir görünümünü sağlar. (A) Marker seçim kutusunu görüntülemek ve istediğiniz işaretleyiciyi seçin. (B) koordinat seçimi penceresi: ilgi koordinatını vurgulama (Bu durumda, z koordinatları) ana Diyagram penceresinde kırmızı olarak görünecektir. (C) faz seçimi penceresi: bir ekstremite atanan aşamaları (a) ve (B) içinde seçilen işaretçiler ve koordinatlara göre görülebilir. Aşama da bu pencere aracılığıyla düzenlenebilir. (D) diyagram penceresi: belirli bir işaretçinin koordinatları, bireysel yürüyüş döngüsü aşamaları sırasında eşzamanlı olarak karşılaştırılabilir. Yeşil ve sarı, dört ayaklı lokomotif sırasında sağ bacakta için duruş ve salıncak aşamalarını sırasıyla temsil eder. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 8 : 3B kinematik verilerin örneği. (A) her ortak işaretçiden gelen çeşitli sonuçlar, video Izleme (B) temsili verileri, her forelimb ve arka ekstremite için duruş ve salıncak faz döngüleri için oluşturulan sonra 3D koordinat veri kümesinden resimli olarak görselleştirilebilir bir sıçan içinde yürüyüş dört ayaklı. Renkler, ardışık adım döngülerinin duruş ve salıncak aşamalarını temsil eder. Kırmızı ve yeşil sırasıyla sağ forelimb ve hindekstremite duruş aşamalarına karşılık gelir. Mavi ve deniz mavisi, sırasıyla sol forelimb ve dalbacak duruş aşamalarına karşılık gelir. Sarı her ekstremitenin salıncak aşamasına karşılık gelir. (C) birden fazla veri grubu (ayrık işaretçiler veya sonuçlar) aynı anda kolaylıkla karşılaştırılabilir. Sol ve sağ diz eklem işaretçilerinin z-koordinat hız verileri, koşu bandı yüzeyinden diz eklem işaretçisinin dikey hızını göstermek için keyfi olarak seçilir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 9 : Koşu bandı lokomotunu sırasında sağlıklı ve servikal omurilik yaralanan fareler tarafından temsili eklem açısal kinematik veriler. (A) sağlıklı bir temsilci sıçan dirsek eklem açı profili hareket tam aralığı görüntülemek tutarlı bitişik yürüme döngüleri ile eklem açı izleri pürüzsüz, tek doruklarına gösterir. Kırmızı ve sarı çubuklar, forelimb Step döngüsünün sırasıyla duruş ve salıncak aşamalarını gösterir. (B) buna karşılık, temsili bir omurilik yaralı sıçan izleri nispeten daha bozuk ve ortak hareket genel bir küçük aralığı ile tutarsız çoklu doruklarına göstermek. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 10 : Koşu bandı lokomotasyon sırasında sağlıklı ve servikal omurilik yaralı sıçan temsili ekstremite koordinasyon verileri. (A) adım yüksekliği önlemlerini tasvir eden Metakarpofalangeal (MCP) ve metatarsofalangeal (MTP) işaretlerinin z-koordinat değerleri, dört ayaklı yürüyüş sırasında yaklaşık 10 adımda ekstremite arasında altı farklı kombinasyonda çizilir. Gösterilen tüm altı olası ekstremite koordinasyon çiftleri temsili gösterimi vardır. (B) sağlıklı bir sıçan tüm çiftleri (i, ii, iii, iv) için açık alternatif ritmik koordinasyon (L şeklinde desen) gösterir. Ekstremite faz (v, vi) olduğunda, koordinasyon çiftleri D şeklinde bir desen izleyin. (C) bir servikal omurilik yaralı sıçan, Not (i) iki forelimbs arasındaki yoksul koordinasyon, (iii) sağ ipsilateral eşleştirme ve (iv) kontralateral ekstremite çiftleri biri için alışılmadık koordinasyon. Koordinasyon grafiklerini (B, C) aynı ölçekte paylaşmayın unutmayın. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.

Şekil 11 : Animasyonlu 3D sopa rakam. İzlenen verilerden oluşturulan 3B sopa figürü örneği. Bu rakam indirmek Için lütfen buraya tıklayın.
| Kalibrasyon parametresi | Kalibrasyon girişleri |
| Değnek uzunluğu [mm] | 100 |
| L-Frame zemin ofset [mm] | 7 |
| Dış algılama için yineleme | 4 |
| İzin verilen değnek-uzunluk-sapma | 0,3 |
| Wand en az __ kameralar görünür olmalıdır | 4 |
| En boy oranını düzelt | Kontrol |
| Eğriltme parametresini düzelt | Kontrol |
| Asıl noktayı düzelt | Kontrol |
Tablo 1: kalibrasyon Için Gelişmiş ayarlar. Tablo, altı kamera kümesini doğru şekilde kalibre etmek için kullanılan parametreleri özetler. Bu ayarlar deneysel olarak test edildi ve bizim kurma için optimum bulundu.
Bu protokol makalesi, kemirgenlerde dört ayaklı koşu bandı lokomotunda 3D kinematik verilerin toplanması ve analizi için bir hareket izleme sisteminin kullanımını göstermektedir. 3D kinematik hareket analiz sisteminin önemli özellikleri, aynı anda birden fazla eklem ve ekstremitede ortak hareketin kinematiklerinin (adım faz kinematik, eklem açıları, hareket aralığı, adım hızları) ayrıntılı olarak ölçülmesini içerir, motor açıkları çıplak gözle ölçülebilir, veri toplama ve analizinde subjektif önyargı eliminasyonu, ve tüm ekstremite ve postural kinematiklerin kolay görselleştirilmesi, hareket halindeki tüm sıçan eşzamanlı bir şekilde kıyaslanabilir. Ek algoritmalar ve modelleme gerek kalmadan, Yöntemler niceklik büyük ayrıntı, verimlilik, kolaylığı, hassasiyet ve yeniden Üretilebilirlik ile yürüme kinematik analiz etmek için yazılımın yeteneğini gösterir.
Omurilik yaralanması (SCı) sonrası kemirgenler, forelimb ve hindekstremite lokomotor açıkları genellikle BBB Puanlama sistemi1gibi subjektif ve standartlaştırılmış lokomotor Puanlama sistemleri kullanılarak değerlendirilir. Farklı araştırmacılar aynı motor açığı veya farklı motor açıkları için aynı puan için farklı puanlar atayabilir çünkü subjektif Puanlama sistemleri genellikle Tester önyargı tanıtmak, azaltılmış yeniden üretilebilirliği ve test duyarlılığı sonuçlanan13 . Dahası, ince açıkları algılamak için yetersizlik yanlış bir müdahale etkileri üzerine gösterilirken riski giyer.
Bu sorunlarla mücadele etmek için, otomatik sistemler2,3,4,5 ve sistemleri ile veya karmaşık algoritmalar kullanmadan14,15 bazı müfettişlerin tarafından benimsenmiştir. Bu testler bir pist boyunca yürüyen fareler Paw yerleştirme hareketlerinden türetilen ağırlık taşıyan profilleri ve adım sırası desenleri ortaya adım döngüsü analizi gerçekleştirin. Ancak, ventral uçak video yürüyüş analizi büyük bir dezavantajı konu vücudun kendisi doğrudan görünmez olduğunu2,3. Bu veriler, ayak ve pençe hareketlerinin gösterimlerinden elde edilen bilgilerle sınırlı hale gelir, açıkların değerlendirilmesi için yürüyüş parametrelerinin seçilmesi ve yorumlanmasında sorgulama (bkz. Chen ve al.16). Ekstremite hareketi ve konumlandırma dinamik segmental kinematikleri ortaya hareket detayları3,5lokomotif analizi için doğru şekilde elde edilmez. Eklem açı verilerinin kritik sapmaları (örn. hareketler aralığı, hareket hızı, vb.), eklem ile ilgili olarak bir ekstremite içinde ve ekstremite arasındaki ilişki, ve yürüyüş desenlerini değiştiren temel vücut mekaniği elde etmek imkansızdır. Bu nedenle, herhangi bir gözlemlenebilir yürüyüş bozuklukları tek ve/veya çoklu segmental eklem hareketleri (yani, proksimal-distal intralimb koordinasyon, pozisyon ve yürüyüş döngüsü ile ilgili olarak gövdenin postural ilişkileri değişiklikler sonucunda ekstremite, vb.) maskeli kalır.
Birkaç Şu anda mevcut sistemler yürüyüş kinematik yakalamak ve niteliksel ve nicel motor disfonksiyon değerlendirmek ama daha az yaygın olarak kullanılır. Bir tam vücut yüksek hızda video izleme yürüyüş analiz sistemi filmleri spontan yürüyüş döngüleri üç taraftan (bir ventral ve iki lateral düzlemler) ve takip kemik simgesel yapıları bir dizi yürüyüş çıktıları17,18. Sagittal düzlem kinematik yürüme analizi, bazı araştırmacılar tarafından, ilgili hindekstremite19,20' nin 2D hareket verilerini elde etmek için kullanılmaktadır. Ancak, görüntüleme düzlemine (lateral veya sagittal) ortogonal olarak meydana gelen bir hareketin üçüncü boyutu, analizlerde11,18,19' da algılanamaz.
Diğer daha sofistike, 3D, üç vücut-segment kemirgen vücut postural veri toplama sistemleri izlemek ve kemirgen 's vücut-segmentleri 3D hareket ölçmek için veri toplama 3D matematiksel modelleme yanı sıra analiz sistemi kullanmak kafa dahil ederken hareket desenleri8. Madete ve al.9 , yedi kamera sistemi kullanarak yürüyüş kirişler üzerinde üstü lokomomik sırasında 3D vücut postural kinematik ölçmek için bir marker tabanlı Optoelektronik hareket yakalama sistemi geliştirdik. İkinci iki eserinde yapılan ana sonuçlar, öncelikle yürüyüş analizi yerine kemirgenin genel duruş üzerine odaklanmaktadır. 3D hareket yakalama sistemleri, Bhimani ve al.21tarafından gözden geçirilmiş olarak, birden fazla kamera ve ayrıntılı yazılım sistemleri kullanarak yüksek verimlilik 3D kinematik yürüme verileri sağlar. Sunulan 3D hareket Analizi sisteminin eski sürümleri de ve nörotrauma12,22,23olmadan sıçan önceki çalışma kullanılmıştır.
Araştırma için 3D hareket toplama ve analiz sistemlerinin kullanılabilirliği rağmen, kemirgenler bu tekniğin preklinik kullanımı nispeten sınırlı kalır. Bu sorunun nedeninin bir parçası, veri toplama ve analiz protokolleri yoğun kinematik modelleri ve ince, yüksek çözünürlüklü oluşturmak için yürüyüş sırasında sıçan 'ın hindekstremite kinematik modeline uygun karmaşık algoritmalar bina kullanımına güveniyor olmasıdır yürüyüş kinematik8,9,11,22. Burada sunulan ayrıntılı metodoloji, hayvan işleme, eğitim, deneysel ayarlama, veri toplama ve analiz adımları dahil olmak üzere deneysel süreç boyunca yer alan prosedürün ayrıntılarını sağlar.
Ayrıca, protokolün temel parçası olan sistemin kalibrasyonuyla ilgili ayrıntılar vardır, bu da konular arasında ve aralarında bitişik denemeler arasında yeniden üretilebilirliğini temin edecektir. Açıklanan adım adım teknikler, veri toplama yordamına nesnellik sunar ve bunu son derece tekrarlanabilir hale getirmek. Bu hareket yakalama yazılımından oluşturulan veriler, hareket kalitesi için Frame-by-Frame görselleştirilebilir ve otomatik olarak izlenir. Daha fazla açıklanan bu veri toplama veya kantifikasyon herhangi bir ek algoritmalar veya modelleme gerektirmez nasıl. Öğrenciler, personel ve araştırmacılar, belirli teknik uzmanlığa güvenmeksizin temel kinematik çıkış oluşturmak için basit istatistiksel yazılımları kullanabilirler.
Bu sistem aynı zamanda üstü lokomotıon, ulaşan ve açgözlü ve deneysel hedefe uyacak diğer deneysel set-up için kullanılabilir. İşaretçilerin sayısı ve türü de gerektiğinde kuyruk, sırt, gövde veya kulaklara göre ayarlanabilir. Sunulan yazılımların sistemlere kıyasla daha büyük bir avantajı, konunun yüksek çözünürlüklü video verilerini toplama yeteneğidir. Bu gibi, karmaşık hesaplamalar setleri (yani, açısal hareketler, birden fazla eklem bağlayan sopa hatları, vb) kaydedilmiş video üzerine üst üste olabilir. Marker yerleştirme ve oluşturulan 3D veri hareket içinde bir sıçan gerçek hareketleri ile doğrulanabilir. Buna karşılık, diğer 3D hareket yakalama sistemi ile, sadece işaretçileri yakalanan ve herhangi bir yeniden analiz sopa diyagramları (iskelet çerçevesi) yerine gerçek konunun video yapılmalıdır. Sonuç olarak, gerçek konu hareketinde Marker yerleşimi doğrulanması eksiktir.
Bu sistem deneyimlerine dayanarak, kalibrasyon veri toplama başarısını önemli bir rol oynar. Sistemin kalibrasyonu değiştirmek için son derece duyarlıdır. ve herhangi bir kameranın hafif hareket tüm 3D koordinat veri toplama ve analiz sürecini tehlikeye atabilir. Veri toplama için bir görüntüleme düzleminin her tarafında yalnızca iki kamera gereklidir, ancak üçüncü kamera, her işaretleyicinin konumlarını diğer kameralarla çapraz başvurarak daha fazla doğruluk sağlamak için önerilir. İzleme kameralarının sayısı arttıkça, belirli bir marker için 3B koordinatın doğruluğu da artacaktır. Hangi işaretçileri yürüme açıkları nedeniyle görünmez hale gelen durumlarda (gibi ayak Curling ya da neurotrauma sonra yürüyüş durumunda sürükle), bu koşullar geniş manuel izleme talep edebilir. Yine de, sonunda izleme oluşturulan veri miktarını elle işaretçileri takip yatırım zaman layık, ince motor açıkları tespit paha biçilemez bir araç yapma.
Deneyimimizde, sistemin kullanımı ile ilişkili herhangi bir sıkıcılığını ekipman ve teknolojinin kendisi kullanımı ötesinde yatıyor. Motor davranışlarının değerlendirilmesi için diğer protokollere benzer şekilde, fareler tarafından ele alınır ve görev için eğitilen yöntem sonuçları büyük ölçüde etkiler. Örneğin, kohort fareler yalıtmak test sırasında önemlidir; Aksi takdirde, test edilmemiş Ama hala test sırasında mevcut olan fareler görev performansının nihai Bozulması gösterir. Optimum Oda sıcaklıkları, aydınlatma ve gürültü seviyeleri diğer determinantlar. Fouad ve al. fareler24fonksiyonel motor testi eşlik diğer zorluklar yayınladı. Gerçekten de, metodoloji doğru takip bu laboratuvarda kör kullanıcılar veri toplama, hareket izleme ve veri analizi ile herhangi bir büyük engelleri deneyimi yoktu.
Bu yazıda, lokomotor verilerini toplamak ve analiz etmek için bir 3B hareket yakalama sistemi, araştırmacıların birden çok fareler tarafından hızlı bir şekilde büyük miktarlarda derinlemesine lokomotor verisi toplayabilmesi için tarif edilir. Şu anda yazılım içine inşa edilmiş ve kemirgenler koşu bandı lokomotl için birkaç saniye içinde önceden belirlenmiş sonuçlar bir rapor üretme yeteneğine sahip bir otomatik veri analizi şablonu oluşturma üzerinde çalışıyoruz, ne insan yapılır benzer hareket yakalama ve analiz sistemleri6,25kullanarak çalışmalar. Bu şablonun gelişimi, ön klinik araştırmacıların, fare düğmesinin birkaç tıklamayla kolaylık sağlamak için detaylı kemirgen lokomotor verilerini elde etmelerine izin verecektir. Bu çalışmalar sağlanan yöntemlerin daha objektif kemirgen motor davranışını değerlendirmek için preklinik araştırmacılar için yararlı olacağını ummaktadır. Şimdi bu sistemin kullanımı yüksek verim 3D kinematik veri ulaşmak ve açgözlü gibi ortak, yetenekli forelimb davranışlar sırasında toplamak için kurnazlık vardır. Daha da önemlisi, bu yöntemin kullanışlılığı, nörotraumatik ve non-neurotraumatic yaralanmalarla çeşitli fareler için genişletilebilir.
Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.
Bu projeye video ve entelektüel katkı için deneysel ayarlama ile onun yardımı için Pawan Sharma bizim özel teşekkür. Biz de video Protokolü gösteri ile yardım onun katkısı için Christopher Palacio teşekkür ederiz.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 6 kameralı Basler (Scout scA640-120gu) hareket yakalama sistemi. | Simi Reality Motion Systems GmbH Max-Planck-Str. 11 85716 Unterschleibheim, Almanya | N/A | Hareket analitiği için kayıt cihazı. |
| Kalibrasyon Çerçevesi ve Değnek | Simi Reality Motion Systems GmbH Max-Planck-Str. 11 85716 Unterschleibheim, Almanya | N/A | Global koordinat sistemini tanımlayan L şeklinde kalibrasyon ve trident şekli çubuk (100 mm) |
| İşaretleyiciler | Shah Lab | N/A | Hareket analitiği için kayıt cihazı. İşaretleyiciler, laboratuvarımızda yansıtıcı bantla kaplı 0,5 cm'lik googly gözlerden özel olarak üretilmiştir. |
| Matlab | Mathworks, Inc, Natic, Ca | N/A | Veri analiz yazılımı |
| Kemirgen Kafesi | Özel Olarak Stony Brook içinde üretilmiştir. | N/A | Kemirgeni koşu bandında tutmak için kullanılan şeffaf pleksiglas kafes. |
| Simi Reality Hareket Sistemleri | Simi Reality Motion Systems GmbH Max-Planck-Str. 11 85716 Unterschleibheim, Almanya | N/A | 3D izleme yazılımı. |
| Koşu Bandı | Mk Automation Inc., Bloomfield, CT 06002 | N/A | Kemirgen hareketi için kullanılan koşu bandı. |