Burada açıklanan çeşitli ev yapımı araçların transferi, Chill, ve yetişkin Drosophilaöldürmek, yanı sıra cam kültür şişeleri temizlemek ve yumurta toplamak için kullanılır. Bu araçların yapmak kolaydır ve Drosophila işleme oldukça etkilidir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Meyve sinekleri Işlemek için basit ev yapımı Araçlar-Drosophila melanogaster
Bu makalede
Özet
Özet
Meyve sinek, Drosophila melanogaster, yaygın biyolojik araştırma ve biyoloji eğitimi hem de kullanılır. Yetişkin sinekler işleme yetişkin sinek olarak, yaygın ama pratikte zordur. Burada gösterilmiştir nasıl bazı basit ve maliyet-etkili araçlar Drosophilaişleme zor sorunları gidermek için yapmak. Köpük tıpalar delikler yapılır ve Pipet uçları veya huniler delikler yerleştirilir. Sinekler sonra sadece bir yönde pipet ucu/huni montaj içine hareket, Yetişkin Drosophila bir şişe içine veya dışına transfer etkili kontrol sağlar. Mevcut protokoller, ezilmiş buzun içinde serinleyerek ve onları soğuk, sert bir IcePack yüzeyine aktararak serin anestezi yapan sinekler için değiştirildi. IcePack bir stereomikoskop altında incelendiğinde yoğunlaştırılmış sudan sinekler immobilize tutar tıbbi gazlı bez bir parçası ile kaplıdır. Sinekler sonunda sayma ve sıralama veya mikrosallama tarafından atılan için ötenize vardır. Bir şişe şeklinde kafes de yumurta toplamak için geliştirilmiştir, yanı sıra bir işgücü tasarrufu cihazı ve cam kültür şişeleri temizlemek için eşlik eden protokol.
Giriş
Meyve sinek, Drosophila melanogaster, yaygın olarak kullanılan bir model organizmadır biyolojik araştırma ve biyoloji eğitimi konular çeşitli çalışma1,2. Drosophila işleme temel sorunları, tüm yetişkinler (bazı mutantlar dışında3,4) uçabilir, böylece işlemek için daha kolay, böylece şişeye şişe ve sineklerin immobilizasyonu için yetişkin transferi vardır.
Geleneksel olarak, bir araştırmacı transferler iki şişe ağız-ağız tutarak bir şişeden diğerine uçar, aşağı uçar ya da başka bir şişeye kadar uçmak için si....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. hazırlama araçları ve aksesuarları
- İpucu/huni tıpalar
- İki sünger fişleri elde (fişler çapı biraz sinek aktarmak için kullanılan şişeleri iç çapı daha büyük olmalıdır). Isıtmalı elektrikli lehimleme demir ile sünger fişleri merkezlerinde bir delik olun.
- İki adet 1 mL pipet uçları alın, keskin bir bıçağla yarı yarıya kesebilir ve sivri ucunu atabilirsiniz. Daha sonra, ikinci pipet ucun sivri ucunu 1,5 cm kes. İki pipet uçları, uzun bir pipet ucu (Şekil 1a) yapmak için bir çok amaçlı yapıştırıcı ile birlikte tutkal kalıntıları.
- Bir uç ve huni stoper (bundan sonra T-ve F-Stoppers o....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
T ve F-Stoppers, herhangi bir sinek aktarımı faaliyetinde adapte edilebilir ve kullanılabilecek basit araçlar kümesi olarak geliştirilmiştir. Eski bir kültürden birkaç taze kültürden uçar transfer taze şişeleri fişleri kaldırma, F-Stoppers ile yerine, sonra eski şişede sinekler aşağı dokunarak, hızlı bir şekilde fiş kaldırarak ve bir T-Stopper ile yerine içerir. Eski gıda kompakt ise, o zaman eski şişe çevirmek ve T-Stopper ucu bir F-Stopper açılışı içine eklemek önemlidir, sonra taze şiş.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu yazıda Drosophila yetiştirme ve deneylerinde yer alan temel faaliyetlerin işlenmesi için bazı ev yapımı araçlar açıklanmıştır. Bu araçlar basit ama oldukça etkilidir. Neredeyse, herhangi bir laboratuar kolaylıkla bu araçları yapabilirsiniz, ve bir araştırma veya bir öğretim Laboratuvarı belki yerel olarak mevcut değildir hazır bir alternatif bulmak gerekmez.
Sinek aktarımı en yaygın uygulamadır ve Drosophila deneylerinde zor bir iştir. Ne yazık ki, bugüne kadar, hiçbir açı.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarın ifşa etmesi gereken bir şey yok.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Bir çift pense | |||
| Akülü matkap sürücüsü | maksimum hız: 500 rpm | ||
| Elektrikli havya | |||
| Dosya | |||
| Hunisi | disk çapı< 60mm | ||
| Buz kutusu | |||
| Böcek pimleri | |||
| Kızılötesi termometre | HCIYET HT-830 | ||
| Uzun manşet lastik eldivenler | |||
| Mekanik kalemler | |||
| Tıbbi gazlı bez | |||
| Mikrosantrifüj tüpü | 100 ul | ||
| Mikrodalga fırın | |||
| Parafilm | |||
| Peri kabı | iç çapı 60 mm | ||
| Pipet uçları | 1 ml | ||
| Plastik film | |||
| Plastik Peri kabı | ve Phi; Boş şişeyi kapatmak için kullanılan 36 mm | ||
| Nokta cımbız | |||
| Koruyucu iş eldivenleri | |||
| Yeniden dondurulabilir sert buz paketleri | 26.5 kez; 14.5 kez; 2,5 cm veya daha büyük | ||
| Kauçuk hava üfleyici | |||
| Çıtçıtlı kesici | |||
| Meşrubat şişesi | 500 ml, iç çap c.a. 65 mm | ||
| Sünger tıpa | |||
| Paslanmaz çelik süngerler | |||
| Tüp fırça | |||
| Flakon | ve Phi; 34 mm ve süreler; 90 Milimetre |
Kaynaklar
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
