Yöntem makalesi

Retinogeniculate ve Kortikogeniculate SYNAPSE fonksiyonunun elektrofizyolojik Incelemeleri

5.9K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/59680

⸱

7 Ağustos 2019

 ,  ,  , 
1Institute of Pathophysiology, University Medical Center of the Johannes Gutenberg University Mainz

Bu makalede

Özet

Burada, lateral genikulat çekirdeğini içeren akut beyin dilimleri ve retinogeniculate ve kortikogeniculate sinenler fonksiyonunun elektrofizyolojik incelenmesi için protokoller sunuyoruz. Bu protokol, aynı akut beyin dilimleri içinde yüksek salınımı ve düşük salınımı olasılığı ile sinaps incelemek için etkili bir yol sağlar.

Özet

Lateral genikulat Kernel görsel bilgi için ilk röle istasyonludur. Bu talamik çekirdeğin röle nöronlar Retina ganglion hücrelerinden giriş entegre ve görsel korteks için proje. Buna ek olarak, röle nöronlar korteks üst-aşağı uyarma almak. Röle nöronların iki ana uyarıcı girişleri çeşitli yönleri farklıdır. Her röle nöron sadece birkaç retinogeniculate sinaps giriş alır, birçok sürüm siteleri ile büyük terminalleri olan. Bu nispeten güçlü uyarılma tarafından yansıtılır, röle nöronlar almak, Retina ganglion hücrelerinden. Kortikogeniculate sinaps, aksine, birkaç sürüm siteleri ve zayıf sinaptik mukavemeti ile basittir. İki sinaps da sinaptik kısa süreli plastisite farklıdır. Retinogeniculate sinaps yüksek bir sürüm olasılığı var ve dolayısıyla kısa süreli depresyon görüntüler. Buna karşılık, kortiojenik sinaps düşük serbest bırakma olasılığı vardır. Kortikogeniculate lifler lateral genikulat Kernel girmeden önce retiküler talamik çekirdekleri çapraz. Retiküler talamik çekirdeğin farklı konumları (lateral genikulat çekirdeğinden rostrally) ve optik sistem (lateral genikulat çekirdeğinden Ventro-lateralde) kortiküjenik veya retinogeniculate sinüslerin ayrı olarak uyarılması sağlar hücre içi stimülasyon elektrotları ile Bu lateral genikulat çekirdeğini ideal bir beyin alanı yapar, aynı hücre tipine bağlanarak çok farklı özelliklere sahip iki uyarıcı sinaps, aynı anda incelenebilir. Burada, geçiş nöronlarından kaydı araştırmak ve akut beyin dilimleri içinde retinogeniculate ve kortikogeniculate sinaps fonksiyonunun ayrıntılı analizini yapmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu makalede, lateral genikulat çekirdeğin akut beyin dilimleri ve optik yolu uyararak röle nöronların etkinliğini kaydetmek için adımlar ve ayrı olarak kortisijenik lifleri oluşturmak için bir adım adım protokol içerir.

Giriş

Lateral genikulat Kernel röle nöronlar entegre ve görsel korteks görsel bilgi röle. Bu nöronlar röle nöronlar için ana uyarıcı sürücü sağlayan retinogeniculate sinaps ile ganglion hücrelerinden uyarıcı giriş almak. Buna ek olarak, röle nöronlar kortikal nöronlardan uyarıcı girişler alçojenik sinaps yoluyla alırsınız. Dahası, röle nöronlar yerel interneurons inhibitör girişleri almak ve çekirdeği Reticularis talami1gabaeritik nöronlar. Çekirdeği Reticularis talami talamus ve korteks arasında bir kalkan gibi lifleri talamus ve ters yönde korteks gelen çekirdeği Reticularis talami2geçmesi gerekir gibi mevcut.

Retinogeniculate girişler ve kortikogeniculate girişleri farklı sinaptik özellikleri görüntüler3,4,5,6,7,8. Retinogeniculate girişler birden fazla sürüm siteleri ile büyük terminalleri formu9,10. Buna karşılık, kortiojenik girişler tek sürüm siteleri7ile küçük terminalleri görüntüler. Buna ek olarak, retinogeniculate sinaps verimli röle nöronların sadece 5 − 10% geçiş nöronlar3,8,11üzerinde tüm sinezlerin oluşturulması rağmen hareket potansiyelleri sürücü. Kortikogeniculate sinaps, öte yandan, röle nöronların membran potansiyelini kontrol ederek retinogeniculate şanzımanların bir modülatör olarak hizmet12,13.

Bu iki ana uyarıcı girişleri geçiş nöronları da işlevsel olarak farklıdır. Bir belirgin fark retinogeniculate sinüslerin kısa vadeli depresyon ve kortikogeniculate sinaps kısa vadeli kolaylaştırma3,5,8. Kısa süreli plastisite, sinaps birkaç milisaniyede birkaç saniyeye kadar bir süre içinde sürekli olarak aktif olduğunda siçtik mukavemeti değiştiren bir fenomen anlamına gelir. Sinaptik sürüm olasılık kısa vadeli plastisite temel önemli bir faktördür. Synapses, düşük bir ilk sürüm olasılığı ile, kısa vadeli kolaylaştırma CA birikmesi nedeniyle görüntüleme2 + presynapse ve sonuç olarak serbest bırakma olasılığı bir artış tekrarlanan aktivite üzerine gözlenmiştir. Buna karşılık, yüksek serbest bırakma olasılığı ile sinaps genellikle kısa süreli depresyon hazır serbest veziküller14tükenmesi nedeniyle görüntüler. Buna ek olarak, postsinaptik reseptörlerin duyarsızlaştırma bazı yüksek serbest olasılık sinaps kısa vadeli plastisite katkıda8,15. Yüksek serbest olasılık ve α-amino-3-hidroksi-5-metil-4-isoxazolepropionik asit (AMPA) reseptörlerinin duyarsızlaştırma retinogeniculate sinaps belirgin kısa vadeli depresyon katkıda bulunur. Bunun aksine, düşük serbest bırakma olasılığı, kortikogeniculate sinüslerin kısa süreli kolaylaştırılması ile ilgili.

Farelerde, optik sistem caudolateral sitesinden dorsal lateral genikulat Nucleus (dlgn) girer, kortikogeniculate lifler dlgn rostroventrally girmek ise. İki giriş arasındaki uzaklık, aynı hücreye çarpan iki çok farklı uyarıcı girişin bireysel özelliklerinin araştırılması için izin verir. Burada, retinogeniculate ve kortikogeniculate liflerin akut beyin dilimleri3' te korunduğu daha önce tarif edilen bir diseksiyon yöntemini inşa ediyoruz ve geliştiriyoruz. Biz, daha sonra, röle nöronların elektrofizyolojik soruşturmasını ve retinogeniculate ve kortikogeniculate liflerin ekstraküler stimülasyon elektrotları ile uyarılmasını tarif ediyoruz. Son olarak, biz biocytin ve sonraki anatomik analiz ile röle nöronların doldurulması için bir protokol sunuyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm deneyler Rhineland-Palatinate hayvan deneyleri devlet denetim paneli tarafından onaylandı.

1. çözümler

  1. Diseksiyon çözümü
    1. Azımotoxicity azaltmak için, burada sunulan diseksiyon sırasında kullanılmak üzere bir Kolin tabanlı çözüm hazırlamak (mM): 87 NaCl, 2,5 KCl, 37,5 Kolin klorür, 25 NaHCO3, 1,25 Nah2Po4, 0,5 CAcl2, 7 MgCl2, ve 25 glikoz. Diseksiyon çözümünü denemenin 1 haftadan kısa bir süredir hazırlayın.
  2. Kayıt çözümü
    1. Hazırlamak bir yapay serebral omurilik sıvısı (ACSF) çözeltisi içeren (mM): 125 NaCl, 25 NaHCO3, 1,25 Nah2PO4, 2,5 KCl, 2 CAcl2, 1 MgCl2, ve 25 glikoz. Eklemek 50 μM D-APV ve 10 μM SR 95531 hydrobromür engellemek için N-metil-D-aspartat (NMDA) ve GABAA reseptörleri, sırasıyla.
  3. Hücre içi çözelti
    1. (MM) içeren bir hücre içi çözelti hazırlayın: 35 CS-gluconate, 100 CsCl, 10 HEPES, 10 EGTA ve 0,1 D-600 (methoxyverapamil hidroklorür). CsOH ile 7,3 için pH ayarlayın. Stok çözümünü kullanıma kadar-20 °C ' de filtreleyin ve depolar.

2. diseksiyon

  1. Hangi biri 100 mL diseksiyon solüsyonu ve diğer 100 mL kayıt çözeltisi ile doldurulur iki dilim odaları hazırlayın. Iki kadehler bir su banyosu (37 °c) içine yerleştirin ve kesme için en az 15 dakika önce kargen ile çözümler kabarcık.
  2. Bir plastik kabı ile doldurun 250 ml yakın buz-soğuk (ama dondurulmuş değil) diseksiyon çözüm. Kullanmadan önce en az 15 dakika kargeni ile kabarcık.
  3. Soğuk diseksiyon çözeltisi ile beyin diseksiyonu gerçekleştirileceği bir plastik Petri tabağı (100 mm x 20 mm) doldurun. Petri tabağı kapağını içine filtre kağıdı bir parça yerleştirin.
  4. Vibratomun diseksiyon odasını soğumaya bekleyin.
  5. Bir fare ile anestezize 2,5% İsoflurane, örneğin, fare kafesi içinde. En kısa sürede fare bir kuyruk tutam yanıt vermez, servikal medulla yakın fare deküle ve Petri tabak tabanında buz soğuk diseksiyon çözeltisi içine başını daldırın.
  6. Burun için kaudal baş cilt kes ve kafatası açığa parmaklar ile yanal tutmak. Önsümü çıkarmak için, ilk önce arka-anterior orta çizgi ile birlikte kafatası kesip, sonra koronal dikiş ve lambdoid sütür üzerinden iki kez daha kesmek (Şekil 1a).
  7. Koronal sütür ve lambdoid sütür arasındaki kafatası çıkarmak gibi beyin maruz. Koku ampul kes ve ince bir bıçak ile orta beyninden ön beyin ayırın (Şekil 1B). İnce bir spatula ile kafatasından beyin çıkarın ve Petri tabağı kapağında filtre kağıdı üzerine yerleştirin.
    Not: adımlar 2,6 ve 2,7 hücre ölümü azaltmak için mümkün olduğunca hızlı gerçekleştirilmelidir.
  8. Beyin dilimindeki dLGN 'ye duyusal ve kortikal girişlerin bütünlüğünü korumak için, iki yarımküreler 3 − 5 ° (Şekil 1C,D) bir açıyla bir parasagittel kesim ile ayırın. İki yarımkürenin mediolateral düzlemlerini filtre kağıdına yerleştirerek kurutun ve ardından Yatay düzlemden 10 − 25 ° ' lik bir açı ile kesme aşamasına yapıştırın (Şekil 1E).
  9. Sahne alanı metal tampon tepsisinin ortasına yerleştirin ve buz-soğuk diseksiyon çözeltisinin geri kalanını tampon tepsisine hafifçe dökün. Güçlü bir pour yapıştırılan beyin (Şekil 1F) kaldırabilir beri bu adımı dikkatle gerçekleştirin.
  10. Tampon tepsisini, diseksiyon sırasında düşük sıcaklığı korumaya yardımcı olan buz dolu tepsiye yerleştirin. 0,1 mm/s hızda bir jilet ile 250 μm dilim kesme ve 1 mm amplitüd.
  11. Yaklaşık 30 dakika boyunca 34 °c ' de oksijenli diseksiyon çözeltisi ile doldurulmuş tutma odasında dilimleri tutun ve sonra dilimlerin 34 °c ' de kayıt çözümünde 30 dakika daha iyileşmesine izin verin.
  12. Kurtarma işleminden sonra, dilim tutma odasını su banyosundan çıkarın ve deneylerde kullanılıncaya kadar dilimleri oda sıcaklığında (RT) tutun.

3. Elektrofizyoloji

  1. Borosilikat cam kılcal ve bir filament çektirme kullanarak pipetler çekin. 3 − 4 MΩ ' da pipetlerin kayıt direncini koruyun. Aynı protokolü kullanarak uyarıcı pipetleri çekin ancak çapı artırmak için çektikten sonra ucu biraz kırın. Kayıt pipetlerini hücre içi çözelti ve biocytin ile doldurun, kayıt çözeltisi ile uyarıcı pipetleri doldurun.
  2. Dilimleri kayıt odasına yerleştirin ve RT 'de oksijenli kayıt çözümüyle dilimleri sürekli olarak mükemmel şekilde kullanın. tüm dilimleri kontrol edin ve bozulmamış bir optik yolu görüntüleyen olanları seçin.
  3. Dilim ve hücreleri kızılötesi diferansiyel parazit kontrastı (IR-DıC) video mikroskobu ile donatılmış bir dik mikroskop ile görselleştirin.
    Not: röle nöronlar daha büyük Soma boyutu ve daha primer dendritler (Soma gelen dalları) tarafından interneurons ayırt edilir. İnterneurons Bipolar morfoloji daha küçük bir Soma ile görüntüler.
  4. Hücre kayıt pipeti ile yama yapmadan önce uyarıcı pipet dilim üzerine yerleştirin. Retinogeniculate sinaps araştırmak için, uyarıcı pipet doğrudan optik yolu üzerine yerleştirin, Retina ganglion hücrelerinden Axon lifleri paketlenmiş nerede (Şekil 2a). Kortikogeniculate sinüsleri analiz etmek için, uyarıcı elektrot atomunun Reticularis talami üzerine yerleştirin, hangi rostroventrally dLGN bitişik (Şekil 2B).
  5. Kayıt pipet kayıt çözeltisi içine daldıktan sonra, pipet direncini izlemek için 5 mV voltaj adımını uygulayın. Tutma potansiyelini 0 mV olarak ayarlayın ve tutma akımı 0 pA olması için uzaklık potansiyelini iptal edin.
  6. Pozitif basınç uygularken hücreye kayıt pipet ile yaklaşın. Pipet Hücre zarına doğrudan temas ettiğinde, pozitif basıncı bırakın ve tutma potansiyelini-70 mV olarak ayarlayın. Hücre zarının Cam Pipet içine takmasına izin vermek için hafif bir negatif basınç uygulayın, böylece bir gigaohm mühür formları (direnç > 1 GΩ). Pipet kapasitini telafi eder ve negatif basınç darbeleri uygulaması ile hücreyi açın.
  7. Sinaptik fonksiyonu araştırmak için, stimulasyon pipeti aracılığıyla 0,1 MS akım darbeleri (30 μA) uygulayın. Sinaptik tepkiler görülmez, uyarıcı pipetlerin değiştirilmesi gerekebilir. Uyarıcı pipetleri, kaydedilmiş hücrenin kaybolmadı gibi farklı bir konuma yerleştirirken dikkatli olun.
    Not: Şekil 2' de gösterilen örnek kayıtlarda, 30 MS inter-Stimulus aralıkları ile optik yolu veya kortikogeniculate lifleri uyararak sinaptik kısa süreli plastisite incelenmiştir. Eşleştirilmiş Pulse oranı (PPR), ikinci uyarıcı postsinaptik akının genliğini (EPSC) ilk EPSC (EPSC2/EPSC1) ile bölerek hesaplanmıştır. Her stimülasyon Protokolü 20 kez tekrarlanmıştı. EPSC amplitül 20 süpürme ortalama akımları ile ölçülmüştür. Her tekrarlama arasındaki zaman aralığı, tekrarlar tarafından indüklenen kısa vadeli plastisite önlemek için en az 5 s oldu.
  8. 5 mV voltaj adımını uygulayarak seri direncini sürekli olarak izleyin. Yalnızca analiz için 20 MΩ ' dan küçük seri direnci olan hücreleri kullanın.

4. biocytin etiketleme

  1. Distal dendritler içine biocytin difüzyon izin vermek için en az 5 dakika boyunca tüm hücre yapılandırmasını koruyun.
  2. Kaydedildikten sonra, pipeti, Soma yok edilmez şekilde hücreden yavaşça çıkarın.
    Not: bir dilim üzerinde birden fazla hücre kaydedildiyse, onların cihan komşu hücrelerinden yeterince uzakta olmalıdır. Farklı hücrelerden dendritler görüntüleme sırasında birbirlerine müdahale olmadığını emin olun.
  3. 24-iyi hücre kültürü tabağı hazırlayın. 300 μL (% 4) paraformaldehit (PFA) ile her bir kuyusu doldurun. Kaydedilecek dilimlerle temas halinde olacak PFA ile hiçbir şeyi kirletmek için özen gösterin.
  4. Dilimleri kayıt odasından PFA içeren plakaya kauçuk pipet ile aktarın ve dilimleri bir gecede düzeltin. Pipetin her zaman PFA kontaminasyondan önlendiğinden emin olun.
    DIKKAT: PFA 'yı manipüle ederken her zaman eldiven giyin ve kimyasal bir başlık kullanın.
  5. PFA 'da gece dilimlerini tespit ettikten sonra, PFA 'yı fosfat-tamponlu tuz (PBS) ile değiştirin. Dilimleri, gelecekteki işlemler için 4 °C ' de PBS 'de saklayın (2 haftadan az).
  6. Dilimleri taze PBS 3 kez (her yıkama 10 dk) ile yıkayın.
  7. Engelleme çözümünde dilimleri inkükleyen nonspesifik bağlama sitelerini engelleyin (0,2% iyonik olmayan yüzey bilgileri ve PBS 'de% 5 Sığır serum albümin) bir orbital Shaker üzerinde RT 'de 2 saat.
  8. Engelleme çözümünü atın. Streptavidin-Alexa 568 ile dilimleri inkükleme engelleme çözeltisi içine seyreltilmiş (1:1000) bir orbital Shaker üzerinde 4 °C gecede.
  9. Antikor çözeltisi atın ve dilimleri 3 kez PBS ile 10 dakika RT bir orbital Shaker üzerinde yıkayın. Montajdan önce dilimleri musluk suyuyla yıkayın.
  10. Bir camdan slaytta bir fareyle dilimleri koyun. Lekeli hücrelerin dilimlerin üst yüzeyinde bulunduğundan emin olun. Dokuları ile dilimleri etrafında su absorbe ve sonra yaklaşık 15 dakika kurumaya dilimleri bırakın.
  11. Her dilimde iki damla montaj ortamı uygulayın. Hava kabarcıkları üretmeden slayt üzerinde bir lamel magazini monte edin.
  12. Etiketlenmiş dilimleri bir Konfokal mikroskop ile görselleştirdikten sonra 4 °C ' de saklayın.

5. hücresel görüntüleme ve yeniden yapılanma

  1. Dilimleri Konfokal mikroskop ile tarayın ve ilişkili yazılımı analiz etmek için kullanın.
  2. 561 nm 'de floresans Excite.
  3. 0,7 sayısal diyafram (NA), yağ daldırma amacı ile dilim görüntü.
  4. Görünümün ortasında hedeflenen hücreyi ayarlayın ve 2,5-kez büyütme uygulayın.
  5. Aşağıdaki parametrelerle tüm nöron taramak için Z-Stack veri kümeleri Render: Format = 2.550 x 2.550 piksel, tarama frekansı = 400 Hz, Z numarası = 40. Voxel boyutu yaklaşık olduğunu 0,1211 x 0,1211 x 1,8463 μm3.
  6. Yarı otomatik olarak nöron bir yeniden yapılanma yazılımı (örneğin, NeuronStudio) kullanarak nöronlar iz. Şekil 3B'de 3B izlenen röle nöron örneği gösterilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Retinogeniculate ve kortikogeniculate yolları içeren dLGN dilim hazırlanması 4X objektif (Şekil 2) altında gösterilir. Retina ganglion hücrelerinin akons optik yolu birlikte bohça (Şekil 2). Uyarıcı pipet retinogeniculate SYNAPSE-aracılı akım (Şekil 2a) ve çekirdek Reticularis talami üzerinde kortikogeniculate sinaps-aracılı akım (Şekil 2B), sırasıyla teşvik etmek için o...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Biz daha önce yayımlanan bir yöntem3, hangi serbest retinogeniculate sinaps ve düşük olasılık serbest kortikogeniculate sinaps aynı dilimden yüksek olasılık soruşturma için izin dayalı geliştirilmiş bir protokol açıklanmaktadır. Bu iki girdinin görsel sinyal iletimini modüle etmek için birbirleri ile etkileşime girdiği için bu büyük önem taşımaktadır: retinogeniculate girişler, röle nöronların ana uyarıcı tahrik, kortiotalamik girişler bir modülatör olarak işlev, hangi Röle nöronların durumunu etk...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.

Teşekkürler

Bu iş ortak araştırma merkezi (SFB) 1134 "fonksiyonel topluluklar" (J.v.E. ve X.C.) ve araştırma Grant EN948/1-2 (J.v.E.) içinde Alman Araştırma Vakfı (DFG) tarafından finanse edilmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Amplifikatör HEKA ElektronikEPC 10 USB Çift yama kelepçe amplifikatör
BiocytinSigma-AldrichB4261-250MG
CaCl2< / sub>EMSURE1.02382.1000
kolin klorürSigma-AldrichC1879-1KG
Konfokal Lazer Tarama MikroskobuLeica MicrosystemsTCS SP5
CsClEMSURE1.02038.0100
Cs-glukonatKendi kendine hazırlananTicari bir Cs-glukonat olmadığı için kendimiz hazırladık 
D-600 ve nbsp;Sigma-AldrichM5644-50MGmetoksiverapamil hidroklorür
D-APV Biyotrend BN0085-100NMDA-reseptör antagonisti
Mikroskop için dijital kameraOlympusXM10
EGTASERVA11290.02
ForeneAbbvie2594.00.00izofluran
GlikozSigma-Aldrich49159-1KG
HEPESROTH9105.2
Yüksek Akım Uyaran İzolatörüDünya Hassas AletlerA385
KClEMSURE1.04936.1000
MgCl2EMSURE1.05833.0250
MikromanipülatörlerLuigs & NeumannSM7
MiroscopeOlympusBX51
montaj ortamı ThermoFisher ScientificP36930Uzatma Altın Invitrogen
NaClROTH3957.1
NaH2PO4EMSURE1.06346.1000
NaHCO3EMSURE1.06329.1000
PipetHilgenberg1807502
ÇektirmeSutter P-1000
tıraş bıçağı Personna 60-0138
Yarı Otomatik VibratomLeica  BiyosistemlerVT1200S
SR 95531 hidrobromür Biyotrend AOB5680-10GABAA reseptör antagonisti & nbsp;

Kaynaklar

  1. Guido, W. Development, form, and function of the mouse visual thalamus. Journal of Neurophysiology. 120, 211-225 (2018).
  2. Guillery, R. W., Feig, S. L., Lozsadi, D. A. Paying attention to the thalamic reticular nucleus. Trends in Neurosciences. 21, 28-32 (1998).
  3. Turner, J. P., Salt, T. E. Characterization of sensory and corticothalamic excitatory inputs to rat thalamocortical neurones in vitro. The Journal of Physiology. 510 (3), 829-843 (1998).
  4. Lindstrom, S., Wrobel, A. Frequency dependent corticofugal excitation of principal cells in the cat's dorsal lateral geniculate nucleus. Experimental Brain Research. 79, 313-318 (1990).
  5. Granseth, B., Ahlstrand, E., Lindstrom, S. Paired pulse facilitation of corticogeniculate EPSCs in the dorsal lateral geniculate nucleus of the rat investigated in vitro. The Journal of Physiology. 544, 477-486 (2002).
  6. Hamos, J. E., Van Horn, S. C., Raczkowski, D., Uhlrich, D. J., Sherman, S. M. Synaptic connectivity of a local circuit neurone in lateral geniculate nucleus of the cat. Nature. 317, 618-621 (1985).
  7. Kielland, A., et al. Activity patterns govern synapse-specific AMPA receptor trafficking between deliverable and synaptic pools. Neuron. 62, 84-101 (2009).
  8. Chen, C., Regehr, W. G. Developmental remodeling of the retinogeniculate synapse. Neuron. 28, 955-966 (2000).
  9. Budisantoso, T., Matsui, K., Kamasawa, N., Fukazawa, Y., Shigemoto, R. Mechanisms underlying signal filtering at a multisynapse contact. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 32, 2357-2376 (2012).
  10. Morgan, J. L., Berger, D. R., Wetzel, A. W., Lichtman, J. W. The Fuzzy Logic of Network Connectivity in Mouse Visual Thalamus. Cell. 165, 192-206 (2016).
  11. Usrey, W. M., Reppas, J. B., Reid, R. C. Paired-spike interactions and synaptic efficacy of retinal inputs to the thalamus. Nature. 395, 384-387 (1998).
  12. Steriade, M., Jones, E. G., McCormick, D. A. Thalamus. , (1997).
  13. Wang, W., Jones, H. E., Andolina, I. M., Salt, T. E., Sillito, A. M. Functional alignment of feedback effects from visual cortex to thalamus. Nature Neuroscience. 9, 1330-1336 (2006).
  14. Zucker, R. S., Regehr, W. G. Short-term synaptic plasticity. Annual Review of Physiology. 64, 355-405 (2002).
  15. Chen, C., Blitz, D. M., Regehr, W. G. Contributions of receptor desensitization and saturation to plasticity at the retinogeniculate synapse. Neuron. 33, 779-788 (2002).
  16. Chen, X., Aslam, M., Gollisch, T., Allen, K., von Engelhardt, J. CKAMP44 modulates integration of visual inputs in the lateral geniculate nucleus. Nature Communications. 9, 261(2018).
  17. Krahe, T. E., El-Danaf, R. N., Dilger, E. K., Henderson, S. C., Guido, W. Morphologically distinct classes of relay cells exhibit regional preferences in the dorsal lateral geniculate nucleus of the mouse. The Journal of Neuroscience : The Official Journal of the Society for Neuroscience. 31, 17437-17448 (2011).
  18. von Engelhardt, J., et al. CKAMP44: a brain-specific protein attenuating short-term synaptic plasticity in the dentate gyrus. Science. 327, 1518-1522 (2010).
  19. Khodosevich, K., et al. Coexpressed auxiliary subunits exhibit distinct modulatory profiles on AMPA receptor function. Neuron. 83, 601-615 (2014).
  20. Farrow, P., et al. Auxiliary subunits of the CKAMP family differentially modulate AMPA receptor properties. eLife. 4, e09693(2015).
  21. Rafols, J. A., Valverde, F. The structure of the dorsal lateral geniculate nucleus in the mouse. A Golgi and electron microscopic study. The Journal of Comparative Neurology. 150, 303-332 (1973).
  22. Hauser, J. L., Liu, X., Litvina, E. Y., Chen, C. Prolonged synaptic currents increase relay neuron firing at the developing retinogeniculate synapse. Journal of Neurophysiology. 112, 1714-1728 (2014).
  23. Hooks, B. M., Chen, C. Distinct roles for spontaneous and visual activity in remodeling of the retinogeniculate synapse. Neuron. 52, 281-291 (2006).
  24. Liu, X., Chen, C. Different roles for AMPA and NMDA receptors in transmission at the immature retinogeniculate synapse. Journal of Neurophysiology. 99, 629-643 (2008).
  25. Govindaiah, G., Cox, C. L. Metabotropic glutamate receptors differentially regulate GABAergic inhibition in thalamus. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 26, 13443-13453 (2006).
  26. Fogerson, P. M., Huguenard, J. R. Tapping the Brakes: Cellular and Synaptic Mechanisms that Regulate Thalamic Oscillations. Neuron. 92, 687-704 (2016).
  27. Jacobsen, R. B., Ulrich, D., Huguenard, J. R. GABA(B) and NMDA receptors contribute to spindle-like oscillations in rat thalamus in vitro. Journal of Neurophysiology. 86, 1365-1375 (2001).
  28. Kulik, A., et al. Distinct localization of GABA(B) receptors relative to synaptic sites in the rat cerebellum and ventrobasal thalamus. The European Journal of Neuroscience. 15, 291-307 (2002).
  29. Gutierrez, C., Cox, C. L., Rinzel, J., Sherman, S. M. Dynamics of low-threshold spike activation in relay neurons of the cat lateral geniculate nucleus. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 21, 1022-1032 (2001).
  30. Armstrong, C. M., Gilly, W. F. Access resistance and space clamp problems associated with whole-cell patch clamping. Methods in Enzymology. 207, 100-122 (1992).
  31. White, J. A., Sekar, N. S., Kay, A. R. Errors in persistent inward currents generated by space-clamp errors: a modeling study. Journal of Neurophysiology. 73, 2369-2377 (1995).
  32. Clay, J. R., Shlesinger, M. F. Analysis of the effects of cesium ions on potassium channel currents in biological membranes. Journal of Theoretical Biology. 107, 189-201 (1984).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Lateral Genikulat ekirdekRetinogenikulat SinapslarKortikogenikulat SinapslarAkut Beyin KesitleriElektrofizyolojik Kay tOptik Traktus Stim lasyonuNucleus Reticularis ThalamiPatch Clamp Tekni iBiyositin aretlemeKonfokal Mikroskopi

İlgili makaleler