Method Article

Fare Üreme Yolu Spontan Hareketliliği Değerlendirmek için Ex Vivo Yöntemi ve Veri Analizi için MATLAB tabanlı Rahim Hareket Takip Algoritması

DOI:

10.3791/59848

⸱

September 1st, 2019

 ,  ,  ,  , 
1The Department of Anatomy, Cell Biology & Physiology, Indiana University School of Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rahim kasılmaları dişilerin refahı için önemlidir. Ancak, patolojik olarak artan kontraktilite dismenore neden olabilir, özellikle genç kadınlarda. Burada, dismenore tedavisinde kullanılabilecek düz kas gevşeticilerin etkinliğinin hızlı bir şekilde değerlendirilmesini sağlayan basit bir ex vivo hazırlık tarif ediyoruz.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dismenore, ya da ağrılı kramp, kadınlarda adet ile ilişkili en yaygın belirti ve şiddeti kadınların günlük yaşamlarını engelleyebilir. Burada, rahim kontraktilliğini azaltan yeni ilaçların test edilmesinde etkili olacak kolay ve ucuz bir yöntem salıyoruz. Bu yöntem, oksijenli Krebs tampon içeren bir Petri kabında ex vivo muhafaza zaman spontan hareketlilik sergilemek için tüm fare üreme yolu benzersiz yeteneğini kullanır. Bu spontan hareketlilik insan rahminin endometrial dalgalar olarak adlandırılan dalga benzeri miyomsal aktivitesine benzer. Yöntemin etkinliğini göstermek için, biz iyi bilinen bir rahim gevşetici ilaç istihdam, epinefrin. Bu Petri çanak modelinde fare üreme yollarının tamamının spontan hareketliliğinin 1 μM epinefrin tarafından hızlı ve geri döndürülebilir. Rahim motilitesi değişiklikleri belgeleme kolayca sıradan bir akıllı telefon veya sofistike bir dijital kamera kullanılarak yapılabilir. Rahim boynuzu hareketlerinin hızını ölçerek spontan rahim hareketliliği değişikliklerini ölçmek için hareket izlemesağlayan MATLAB tabanlı bir algoritma geliştirdik. Bu ex vivo yaklaşımın önemli bir avantajı, üreme yolu tüm deney boyunca bozulmadan kalır, tüm içsel intrauterin hücresel etkileşimleri koruyarak. Bu yaklaşımın en önemli sınırlaması, uterusun %10-20'sine kadar spontan hareketlilik gösteremeyebileceğidir. Şimdiye kadar, bu petri çanak modelinde spontan rahim motilitesini değerlendirmek için ilk kantitatif ex vivo yöntemidir.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Önemli bir kadın organı olarak, rahim üreme için çok önemlidir vefetusun beslenmesi için gerekli 1. Rahim üç tabakadan oluşur: perimetrium, miyometrium ve endometrium. Miyometrium rahimin en önemli kontraktil tabakasıdır ve fetusun doğumda önemli bir rol oynar. Endometrium rahim boşluğunu kaplayan en içteki tabakadır ve embriyo implantasyonu için gereklidir. Üreme çağındaki gebe olmayan kadınlarda, endometrial tabaka adet döngüsünün başlangıcında aylık olarak dökülür. Nekrotik endometriyal dokuyu rahimden temizlemek için gerekli spontan miyomtriyal kasılmaları koruyarak bu dökülme sürecinde miyometrium yardımcı olur1.

Ne yazık ki, artan miyomtriyal kontrility gibi olumsuz yan etkilere neden olabilir, veya ağrılı adet krampları. Bu özellikle genç kadınlarda ve nulliparous kadınlarda görülür2. Ancak, dismenore her kadın için farklıdır ve miyomtriyal kasılmaları gücüne bağlıdır; güçlü kasılmalar genellikle şiddetli kramp hissi ile ilişkilidir3. Miyomtriyal kontrility rahim ultrasonu ile görselleştirilebilir ve genellikle endometrial dalgalar olarak kabul edilir. Endometriyal sloughing geçiren bir rahim4 adet sırasında prostaglandinlerin geliştirilmiş salınımı artmış miyomtriyal hiperkontilite katkıda, rahim kası iskemi ve hipoksi ile sonuçlanan ve böylece artmış ağrı3.

Şiddetli dismenore bazı kadınların günlük aktivite engelleyebilir ve kadınların% 3-33 çok şiddetli ağrı var, hangi bir kadın için yatalak neden olabilir 1 için 3 gün her adet döngüsü5. Dismenore ne olursa olsun yaş, milliyet ve ekonomik durumu5üreme çağındaki kadınlarda jinekolojik morbidite önde gelen nedenidir. Dismenore tahmini yaygınlığı hem yüksek hem de değişkendir, üreme çağındaki kadınlarda %45 ile %93 arasında değişmektedir5.  Dismenore ilişkili ağrı kadınların günlük yaşam üzerinde bir etkisi vardır ve ergenlerde kötü akademik performans neden olabilir, uyku düşük kalite, günlük aktivite kısıtlaması, ve duygudurum değişiklikleri5.

Şiddetli dismenore deneyimi birçok kadın ağrılarını hafifletmek için over-the-counter ilaçlar başvurmak. Bu tür over-the-counter ilaçlar siklooksijenaz içeren (COX) prostaglandins oluşumunu önlemek inhibitörleri6. Ancak, COX inhibitörleri olumsuz kardiyovasküler olaylar ile ilişkilidir, ve dismenore olan kadınların yaklaşık% 18 bu inhibitörleri yanıt vermiyor7. Bu nedenle, adet krampları azaltmak için yeni ilaçlar için bir ihtiyaç vardır. Rahim kontrility üzerinde dismenore patogenezi katkıda olduğundan, olası bir strateji rahim gevşetici kullanımı olabilir.

Bu doğal olarak meydana gelen spontan miyomtriyal dalga benzeri kasılmalar bir model potansiyel gevşetici ilaçların etkilerini ölçmek için yararlıdır. Ancak, şimdiye kadar, bozulmamış rahim kas rahatlatıcı ilaçlar test etmek için hiçbir etkili ex vivo yöntemi tarif edilmiştir. Şu anda, isometrik gerilim ölçümleri gevşetici ilaç etkilerini değerlendirmek için kullanılır. Bu ölçümler sırasında, rahim kas şeridi bir doku banyosunda ön yük altında sabit bir uzunlukta tutulurken, rahim kas kasılmaları kuvveti gevşetici bir ilacın varlığında veya yokluğunda oksitosin stimülasyonundan önce ve sonra kaydedilir. Bu yaklaşım çok yararlı olmasına rağmen, pahalı ekipman gerektirir. Ayrıca, isometrik kasılmalar doğal olarak bozulmamış rahim meydana spontan miyomtriyal dalga benzeri kasılmalar benzemez. Benzersiz, kemirgenler rahim miyomtrial dalgalar tüm üreme yolu (yumurtalıklar, yumurtalıklar, rahim ve vajina) bir tampon çözeltisi muhafaza edildiğinde rahim boynuzu hareketliliği olarak görselleştirilmiş olabilir. Burada, oksijenli Krebs tamponiçeren bir Petri kabına yerleştirilen sağlam fare rahminin spontan hareketliliğini izlemek için bir ex vivo yöntemi salıyoruz. Ayrıca MATLAB hareket izleyicisini kullanan bir hareketlilik nicelik algoritması tanımlıyoruz. Bu yeni yaklaşım doğal ilaçlar ve sentetik bileşiklerin rahatlatıcı potansiyelini test etmek için kolay ve daha az pahalı bir alternatif sağlar.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvanlarla ilgili tüm prosedürler Indiana Üniversitesi Tıp Fakültesi'ndeki (Indianapolis, IN) Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır. Çalışmada 2-5 aylık F2-129S-C57BL/6 cinsel olgun kadın fareler kullanıldı.

DİkKAT: Hayvanlar ve biyolojik tehlikeli maddelerle çalışırken laboratuvar önlüğü, maske ve eldiven giyerek güvenliği sağlayın.

1. Çözüm Hazırlama

  1. 130 mM NaCl, 5 mM KCl, 2 mM CaCl2, 1.2 mM NaH2PO4, 0.56 mM MgCl2, 25 mM NaHCO3ve 5 mM glikoz, pH 7.4 içeren Krebs Tampon hazırlayın. Krebs tamponuna %5 CO2 ve %95 O2 içeren sıkıştırılmış gazların karışımıyla sürekli oksijen lendirin ve sirkülasyon lu su banyosu kullanarak 37 °C'de tampon sıcaklığını koruyun.
  2. 2.68 mM KCl, 1.47 mM KH2PO4, 136.89 mM NaCl ve 8.1 mM NaCl, ve 8.1 mM Na2HPO4, pH 7.4içeren Dulbecco Fosfat-Tamponlu Salin (DPBS) hazırlayın.

2. Hayvan Hazırlığı

  1. Isofluran inhalasyonu kullanarak fareleranestezi (%3) atık gaz atma ile. Çekilme reflekslerini değerlendirerek yeterli anesteziyi sağlayın. Herhangi bir hareket ortaya olduğunu doğrulamak için arka ayak çim çimdik, refleks yanıtları kaybı gösteren. Derin anestezi sağlandıktan sonra, decapitation tarafından hayvan ötenazi.
    NOT: Isofluran düz kas genişlemesine neden olabilir. Bu nedenle, üreme yolu hazırlığı ex vivo deneylere başlamadan önce krebs tamponunda en az 15-30 dakika boyunca yoğun olarak yıkanmalı ve kuluçkaya yatırılmalıdır. Isoflurane cilt ile temas halinde tahriş ve rahatsızlık neden olabilir, bu yüzden dikkatli devam edin.
  2. Bir kağıt havlu ile kaplı büyük bir tartma tekne üzerinde vücut yerleştirin.
    NOT: Gebe kadın laboratuvar personeli, fetal ağırlığı azaltabildiği, fetal iskelet kemikleşmeyi azaltabileceği ve spontan abortus riskini artırabileceği nden isofluran ile deneylere katılmamalıdır8,9. CO2 inhalasyonu farelerin ötenaziiçin bir yedek olarak kullanılabilir.

3. Estrous Döngüsü Evresinin Belirlenmesi

  1. Küçük forsepslerle, vajinal ostiuma erişmek için klitorisi kaldırın ve vajinaya 10 μL DPBS içeren bir mikropipet ucu yavaşça takın.
    1. Vajinal duvarı delmemek için mikropipet ucunun ostiumdan 10 - 30° bir açıyla yerleştirildiğinden emin olun. Sıvı yerleştirildikten sonra uçta görünmeye devam etmelidir. Sıvı görünmüyorsa, ucu vajinaya çok fazla yerleştirilir ve vajinanın paraservikal alanı delikli olabilir.
    2. Hafifçe vajinadan çıkmak için hava sağlamak için mikropipet ucu ile vajinal ostium kasları aşağı çekin.
  2. 10 μL DPBS ile 2-3 kez yukarı ve aşağı boru lar oluşturarak vajinal boşluğu yavaşça temizler ve çekilen hücre süspansiyonuna cam bir kaydırak yerleştirin.
  3. Sitolojik analiz yoluyla estrous döngüsü aşamasını belirlemek için ters faz kontrast mikroskobu kullanın. Prosedür başka bir yerde açıklandığı gibi yapılır10,11. Sitolojik analiz yapılmadan hücre süspansiyonunun kurumadığından emin olun. Süspansiyon gerekirse taze DPBS ile seyreltilebilir.

4. Fare Üreme Yolu Disseksiyonu

  1. Bir supine pozisyonda fare düzenleyin ve abdominopelvik bölge ortaya çıkarmak için ekstremiteleri yayıldı.
  2. Abdominopelvik bölgeyi nemlendirmek ve dezenfekte etmek için %70 etanol ile püskürtün.
  3. Forseps kullanarak, klitorisüstün bulunan cildi dikkatlice kaldırın. Alt karın bölgesinin lateral yönleri üzerinde küçük enine kesiler yapın, üst ekstremitelere kadar periton ortaya çıkarmak için (Şekil 1A). Bu işlem sırasında harici bir flep oluşur. Küçük kesiler sürekli olarak yapıldıkça flep boyutu artacaktır.
  4. Gastrointestinal sistemi ortaya çıkarmak için peritondan dikkatlice kesilir (Şekil 1B). Bu rahim boynuzları genellikle periton altında doğrudan yer olabilir dikkat etmek önemlidir, bu yüzden dikkatli kesiler yapmak ve bu rahim motilitesi etkileyebilir gibi boynuzları dokunmayın.
  5. Forceps kullanarak, fasya ve gastrointestinal sistemi kapsayan yağ dokusu kaldırın. Aşağıdaki gastrointestinal sistem segmentlerini karın boşluğundan çıkarın: duodenum, jejunum, ileum, çekum, yükselen ve enine kolon (Şekil1C).
  6. Üreme organlarını bulmak için, önce ötanazi sonrası boşluk nedeniyle sönmüş bir görünüme sahip olabilecek idrar kesesini (Şekil1C, "4") tanımlayın. Vajina idrar kesesi altında olacak.
  7. Kasık kemikleri (caudally mesane) kesiştiği de kasık symphysis bulun.
  8. Makas kullanarak, girdap fibrokardik doku yoluyla lateral yanlarında dikkatlice kesiler yaparak kasık symphysis kaldırmak ve vajina ekstraksiyon için bir yol sağlamak (Şekil1D).
  9. Vulvanın anüs ve alt kısmı arasında bulunan perineyi kesin.
  10. Forseps kullanarak, vajina kaldırın ve yavaş yavaş rektum çıkarmak.
  11. Bir çatal içine çatal içine çataliki rahim boynuzları tanımlayın, vajina ya rostrally. Kalan gastrointestinal sistem segmentleri altında gizli olabilir her boynuz sonunda bir kıvrık oviduct ve yumurtalık bulun. Karın boşluğu içinde boynuzları, oviducts ve yumurtalıklar bağlamak ve desteklemek herhangi bir bağ kaldırmak için küçük diseksiyon makas kullanın.
  12. Vajina, rahim, oviducts ve yumurtalıklar içeren üreme yolu, karın boşluğundan çıkarın.
  13. İzole üreme yolunu (Şekil1E) 10 mL DPBS ile doldurulmuş 100 mm Petri kabına aktarın. Miyometriuma zarar vermemek için rahim boynuzlarını sıkıştırmayın.
  14. Tervenat boynuzları ve vajina çevreleyen herhangi bir bağ ve yağ dokusu yanı sıra görüntü kalitesini engelleyebilir kasık bölgesinde herhangi bir kürk kaldırmak için forceps ve cerrahi makas kullanın. Rahim boynuzları hareketlilik sağlamak için geniş bağ kaldırın.
  15. İzole üreme yollarını taze DPBS ile iki kez yıkayın ve 3 mL oksijenli Krebs çözeltisi ile dolu 35 mm Petri kabına aktarın.

5. Doku Görüntüleme

  1. Üreme sistemi içeren Petri kabını oksijenli Krebs tamponuna siyah bir yüzeye yerleştirin. Çanak oda sıcaklığında muhafaza edin.
    NOT: 37 °C'de dokuyu korumak için kızılötesi ısınma yastığı kullanmak mümkündür.
  2. Spontan kasılmalar başlamak için 15-30 dk bekleyin. Herhangi bir dijital video ekipmanı kullanarak eksenel bir uçaktan 10 dakika boyunca spontan rahim hareketliliğini kaydedin.
  3. Bir test bileşiği ile desteklenen oksijenli Krebs tampon içeren bir Petri kabına hazırlık aktarın. Herhangi bir dijital video ekipmanı kullanarak eksenel bir uçaktan yaklaşık 10 dakika boyunca spontan rahim hareketliliğini kaydedin.
  4. Tedavinin geri döndürülebilirliğini değerlendirmek için tüm üreme yollarını 100 mm Petri kabında 10 mL DPBS ile yıkayın.
  5. Taze oksijenli Krebs tamponu ile bir Petri kabına hazırlık aktarın. Herhangi bir dijital video ekipmanı kullanarak eksenel bir uçaktan yaklaşık 10 dakika boyunca spontan rahim hareketliliğini kaydedin.
  6. Spontan rahim motilitesinde mekanik olarak indüklenen değişiklikler olmadığından emin olmak için, preparatı test bileşiği için araçla birlikte oksijenli Krebs tamponuyla dolu başka bir 35 mm Petri kabına aktarın. Bu önemli bir kontrol.
  7. Video görüntülerini bilgisayarın sabit diskine aktarın.

6. Veri Analizi

  1. Orijinal video görüntülerindeki kontrol, tedavi ve yıkama bölümlerini içeren video düzenleme yazılımLarını kullanarak klipler yapın.
  2. Spontan rahim hareketliliğini ölçmek için MATLAB yazılımını ve sağlanan komut dosyasını (çevrimiçi Ek malzemeye bakın) kullanın.
    NOT: Komut dosyasının tam olarak işlevsel olabilmesi için MATLAB için Computer Vision Toolbox eklentisinin yüklenmesi gerekir.
    1. MATLAB komut dosyasını açın, Düzenleyici sekmesine gidin ve Çalıştır'ı tıklatın.
    2. İlk video dosyasını seçin ve Aç'ı tıklatın.
    3. Açılan iletişim kutusuna video dosyası için bir etiket girin ve Tamam'ıtıklatın.
    4. Boynuz hareketinin oranını hesaplamak için gereken zaman aralığını (s) girin (Δ Öklid mesafesi / Δs).
    5. Videonun ilk karesine iki nokta seçmek için fare imlecini kullanın. Açılır pencere, seçili noktaların izleme için kullanılması gerektiğini doğrulamak ister. Açılan pencerede görüntülenecek gerçek zamanlı izleme işlemini başlatmak için Başlat'ı tıklatın. Alternatif olarak, iki noktayı yeniden seçmek için Noktaları Yeniden Seç'i tıklatın.
    6. Açılır pencerede izleme işleminin doğruluğunu izleyin.
    7. Yeni bir açılır pencerede bir oran ve zaman dağılım çizimi ve mesafe vs zaman dağılım çizimi gözlemleyin. Dosya'yı seçerek iki rakamı kaydet | Verileri belgelemek için aynı pencerede Olduğu Gibi'yi kaydedin.
    8. MATLAB komut dosyasının bulunduğu aynı dizinde, MATLAB tarafından otomatik olarak oluşturulan PointTrackerDataadlı klasörü bulun. İki ayrı çalışma sayfası sekmesinde videodan toplanan veri noktalarını içeren label_Data adlı bir Excel dosyasını tanımlayın.
      NOT: Herhangi bir alternatif hareket izleme yazılımı spontan rahim hareketliliğini ölçmek için kullanılabilir.
  3. İstatistiksel analizi gerçekleştirmek için uygun bir yazılım (örn. Excel veya SigmaPlot 13) kullanın.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Şekil 1, bu protokolde açıklanan tüm üreme yolu izolasyon prosedürü sırasında çekilen temsili görüntüleri gösterir. Tamponu kürkle kirletmemek için, video kalitesini düşürecek, fare gövdesini p etanol ile nemlendirdik. Protokolün diseksiyon bölümü için en önemli kriter idrar kesesini bulmaktır. Rahim ve vajina idrar kesesi alt yer olacaktır.

Protokolü test etmek için tüm üreme bölgesini epinefrinle tedavi ettik. Epinefrin iyi rahim düz kas gevşemesine neden olduğu...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, yumurtalıklar, oviducts, rahim boynuzları ve vajina içeren tüm kemirgen üreme sistemi, spontan kontraktür değerlendirmek için bir yöntem açıklanmıştır. Biz spontan rahim motilitesi üzerinde fenilefrin rahatlatıcı etkisini göstermek için benzer bir yöntem kullanılan13, Ancak, geçmişte biz verilerin kantitatif analizi sağlamak mümkün değildi. Bu çalışmada, MATLAB hareket izleme modüllerini kullanarak nicel hareketlilik veri analizi için bir algoritma geliştirdik. Bu ilaçlar dinlenmek veya ra...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma iç IU fonları tarafından desteklenmiştir. AGO çalışma gebe. XC ve AGO açıklanan deneylerin tasarımında yer aldı.  FL ve AGO verileri analiz etti ve yorumladı. KLL, JOB, FL tüm ex vivo deneylerini gerçekleştirdi. FL MATLAB komut dosyası yazdı. KLL, Eyüp ve AGO el yazması yazdı.  Tüm yazarlar makalenin son halini okudu ve onayladı.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Epinefrin hidroklorürSigma-Aldrich  E4642 
Dulbecco'nun PBSFisher Sceintific 17-512Q
Etanol 200 KANITDecon Laboratuvarları2701
NaClSigma-AldrichS7653
GlikozSigma-AldrichG7528
KClSigma-AldrichP9333
CaCl < alt > 2 < / alt > ve orta nokta 2H < alt > 2 < / alt >OSigma-AldrichC5080
NaH2< / sub>PO4< / sub>Sigma-AldrichS0751
MgCl < sub>2< / sub>  & orta nokta; 6H < alt > 2 < / sub>OSigma-AldrichM9272
NaHCO3< / sub>Sigma-AldrichS6297
İzofluran, USPPatterson Veteriner07-893-2374
Diseksiyon Ekstra İnce Sivri Uçlu Hassas Kıymık ForsepsFisher Sceintific13-812-42
Kavisli Sertleştirilmiş İnce İris MakasGüzel Bilim Araçları14091-09
Diseksiyon Yüksek Performanslı Modüler StereomikroskopLeicaMZ6 
Aktif soğutma sistemli Dijital 5 Megapiksel Renkli Mikroskop KameraLeica  DFC425 C
Stereomaster Mikroskop Fiber Optik Işık KaynaklarıFisher Sceintific 12-562-21
Tartı TekneFisher Sceintific 
Konvertörler Astound Standart Cerrahi Önlük Kardinal Sağlık 9515Küçük, Orta veya Büyük
EldivenlerMcKesson Corporation20-1080Küçük, Orta veya Büyük; Pudrasız steril lateks veya nitril cerrahi eldivenler
; Petri KabıCorning Falcon351029100 mm
  Petri KabıCorning Falcon35300135 mm
%95 O2- %5 CO2 gaz karışımıPraxair  MM OXCD5-K
Kulak Halkası MaskeleriValumax International5430E-PP
DSLR 24.2 MP Fotoğraf MakinesiCanonEOS Rebel T6i
MATLABMathWorksN/Asürüm 2019 veya üzeri
WB30304

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kuijsters, N. P. M., et al. Uterine peristalsis and fertility: current knowledge and future perspectives: a review and meta-analysis. Reproductive BioMedicine Online. 35 (1), 50-71 (2017).
  2. Kural, M., Noor, N. N., Pandit, D., Joshi, T., Patil, A. Menstrual characteristics and prevalence of dysmenorrhea in college going girls. Journal of Family Medicine and Primary Care. 4 (3), 426-431 (2015).
  3. Dehnavi, Z. M., Jafarnejad, F., Kamali, Z. The Effect of aerobic exercise on primary dysmenorrhea: A clinical trial study. Journal of education and health promotion. 7, 3(2018).
  4. Lindner, H. R., et al. Significance of prostaglandins in the regulation of cyclic events in the ovary and uterus. Advances in prostaglandin and thromboxane research. 8, 1371-1390 (1980).
  5. Bernardi, M., Lazzeri, L., Perelli, F., Reis, F. M., Petraglia, F. Dysmenorrhea and related disorders. F1000 research. 6, 1645(2017).
  6. Marjoribanks, J., Ayeleke, R. O., Farquhar, C., Proctor, M. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs for dysmenorrhoea. The Cochrane database of systematic reviews. 7, 001751(2015).
  7. Oladosu, F. A., et al. Abdominal skeletal muscle activity precedes spontaneous menstrual cramping pain in primary dysmenorrhea. American journal of obstetrics and gynecology. 219 (1), 91(2018).
  8. Lawson, C. C., et al. Occupational exposures among nurses and risk of spontaneous abortion. American journal of obstetrics and gynecology. 206 (4), 327-328 (2012).
  9. Mazze, R. I., Wilson, A. I., Rice, S. A., Baden, J. M. Fetal development in mice exposed to isoflurane. Teratology. 32 (3), 339-345 (1985).
  10. Byers, S. L., Wiles, M. V., Dunn, S. L., Taft, R. A. Mouse estrous cycle identification tool and images. PLoS One. 7 (4), 35538(2012).
  11. Caligioni, C. S. Assessing reproductive status/stages in mice. Current protocols in neuroscience. , Appendix 4, Appendix (2009).
  12. Segal, S., Csavoy, A. N., Datta, S. The tocolytic effect of catecholamines in the gravid rat uterus. Anesthesia and analgesia. 87 (4), 864-869 (1998).
  13. Chen, X., et al. Phenylephrine, a common cold remedy active ingredient, suppresses uterine contractions through cAMP signalling. Scientific reports. 8 (1), 11666(2018).
  14. Domino, M., Pawlinski, B., Gajewski, Z. Biomathematical pattern of EMG signal propagation in smooth muscle of the non-pregnant porcine uterus. PLoS One. 12 (3), 0173452(2017).
  15. Crane, L. H., Martin, L. Pace-maker activity in the myometrium of the oestrous rat: in vivo studies using video-laparoscopy. Reproduction, fertility, and development. 3 (5), 519-527 (1991).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Ex Vivo MethodMouse Reproductive TractSpontaneous MotilityUterus Motion TrackingMATLAB based AlgorithmOxygenated Krebs BufferEpinephrine TreatmentUterine ContractilityPetri Dish ModelDrug Screening

Related Articles