Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Sıçanlarda Akut İnme Sonrası Beyin İyileşmesini Değerlendiren Bir Preklinik Model

8.2K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/60166

⸱

6 Kasım 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Beijing Yinfeng Dingcheng Biological Engineering Technology Ltd., 2Hulunbuir People's Hospital, 3Shandong Qilu Stem Cell Engineering Co. Ltd.

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu çalışmanın amacı, 1-90 sonrası orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) sonrası beyin enfarktüsü ve sensorimotor fonksiyonunu test ederek beyin iskemisinin iyileşme ve sekel evrelerinde araştırma için bir hayvan modeli oluşturmak ve doğrulamaktır. farelerde gün.

Özet

Bu çalışmanın amacı, kurtarma ve sekel aşamalarında bir hayvan beyin iskemi modeli kurmak ve doğrulamak oldu. Erkek Sprague-Dawley sıçanlarında orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) modeli seçildi. Farenin ağırlığını (260−330 g) değiştirerek, iplik cıvata tipi (2636/2838/3040/3043) ve beyin enfarktüs süresi (2-3 saat), longa skoru, daha büyük bir enfarkt hacmi ve daha büyük bir model başarı oranı Longa skoru ve TTC boyama kullanılarak tarandı. Optimum model durumu (300 g, 3040 iplik cıvata, 3 saat beyin enfarktüs süresi) duyusal motor fonksiyonları ve enfarktüs hacmi nin değerlendirilmesi ile reperfüzyon sonrası 1-90 günlük bir gözlem döneminde elde edilmiş ve kullanılmıştır. Bu koşullarda, ikili asimetri testi 1 ile 90 gün arasında önemli bir fark vardı ve ızgara yürüyüş testi 1 ila 60 gün arasında önemli bir fark vardı; her iki fark uygun bir sensorimotor fonksiyonel test olabilir. Böylece, beyin iskemi kurtarma ve sekel aşamalarında yeni bir sıçan modelinin en uygun durumu bulundu: 3 h beyin enfarktüs için 3040 iplik cıvata ile MCAO yapıldı 300 g sıçanlar ve daha sonra reperfüzyon. Uygun sensorimotor fonksiyonel testler ikili asimetri testi ve ızgara yürüyüş testi idi.

Giriş

Beyin iskemi farklı inme sonrası göstergeleri ile üç aşamaya ayrılır: akut evre (içinde 1 hafta), iyileşme aşaması (1 hafta-6 ay), ve sekel evresi (6 aydan fazla). Şu anda, çoğu çalışma beyin iskemi akut aşamasında çünkü önemli etkisi ve çok göreceli araştırma modelleri1,2,3odaklanmak . Ancak, beyin iskemisinin iyileşme ve sekel aşamaları uzun süreli sakatlık komplikasyonları nedeniyle göz ardı edilemez. Bu nedenle, bu çalışmanın amacı beyin iskemi kurtarma ve sekel aşamaları araştırmak için istikrarlı, güvenilir ve nispeten basit bir hayvan modeli keşfetmektir.

Birçok deneysel beyin iskemi modelleri arasında, sağ orta serebral arter içine iplik cıvata ekleme yoluyla orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) kullanın (MCA). Bu model insan inme benzer, hangi büyük enfarktk hacimleri üretebilir, inme ile ilgili birçok davranış bozuklukları neden, ve iplik cıvata kaldırarak kan reperfüzyonu izin verebilir (R) iplik cıvatakaldırarak 4,5,6. MCAO / R da beyin iskemi altın standart hayvan modeli olarak kabul edilir7. Ayrıca, beyin hasarının şiddeti çapı ve iplik cıvata ekleme uzunluğuna bağlıdır, beyin iskemi süresi, ve hayvan ağırlığı (büyük sıçanlar daha büyük beyin ve kalın serebral damarlar var)8. Bu nedenle, iplik cıvata tipi değiştirerek, enfarktüs süresi, ve sıçan ağırlığı, uygun bir model kurtarma ve MCAO / R sıçanlarda beyin iskemi sekeli aşamaları için bulunabilir. Sıçan modelini doğrulamak için, TTC boyama ve sensorimotor fonksiyon deneyleri (ikili asimetri testi, ızgara yürüme testi, rotarod testi ve kaldırma ipi testi) kullanarak MCAO/R modelinin 1 günlük, 35 günlük, 60 günlük ve 90 günlük bir çalışmasını gerçekleştirdik.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Hayvan deneklerin prosedürü ve kullanımı, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüsü tarafından onaylanmıştır. Bu protokol özellikle orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) ve sensorimotor fonksiyon testleri için ayarlanmıştır.

1. Deneysel tasarım ve gruplandırma

  1. Longa skoru ve TTC boyama kullanarak daha ciddi beyin hasarı ve daha fazla model başarı oranı ile bir sıçan beyin iskemik model yöntemi ekran için bir sıçan MCAO / R modeli kullanın.
    1. 7−9 haftalık 260−330 g ağırlığındaki erkek Sprague-Dawley sıçanları üzerinde deney yapın. Gerçek sıçan ağırlığı 275 ± 15 g 275 g, 300 g için 300 ± 10 g ve 320 g için 320 ± 10 g'dır.
    2. Aşağıdaki yedi gruplandırmayı (ağırlık, iplik cıvata türü, enfarktüs süresi): grup 1'i 15 sıçanla (275 g, 2636, 2 saat); grup 2 ile 15 sıçan (275 g, 2636, 3 saat); grup 3 ile 15 sıçan (275 g, 2838, 2 saat); grup 4 ile 15 sıçan (275 g, 2838, 3 saat); grup 5 ile 13 sıçan (300 g, 3040, 3 saat); grup 6 ile 10 sıçan (320 g, 3040, 3 saat); grup 7 ile 13 sıçan (300 g, 3043, 3 saat).
  2. Beyin kurtarma durumunu TTC boyama ile incele ve 1, 35, 60, 90 gün SONRA çift taraflı asimetri testi, ızgara yürüyüş testi, rotarod testi ve kaldırma ipi testi ile uzun süreli fonksiyonel açıkları belirtmek için uygun sensorimotor fonksiyon testleri kullanın.
    1. 8−9 haftalık 300 ± 10 g ağırlığında erkek Sprague-Dawley sıçanları kullanın.
    2. Aşağıdaki beş gruplandırmayı kullanın: 20 sıçanlı bir kontrol (normal) grubu; 16 sıçan ile 1 günlük bir grup; 16 sıçanile 35 günlük bir grup; 17 sıçanile 60 günlük bir grup; ve 19 faresi olan 90 günlük bir grup.
  3. Adım 1.1 veya sensorimotor fonksiyonel testlerde Longa skoru sonra adım 1.2, anestezi ve TTC boyama için tüm sıçanların başını kesmek.

2. Sıçanlarda tek taraflı MCAO/R modelinin oluşturulması9

NOT: Operasyon sırasında, kan damarının kırılmasını önlemek için mikroforceps'u nazikçe kullanın. Damar izole edildiğinde sıçan boynunda sinirler ve diğer kan damarlarızarar kaçının. Tüm sağkalım cerrahisi için uygun aseptik tekniğin sunulması için özen sağlanmalıdır. Videoda daha sonra gösterilen teknik tüm yordam boyunca uygulanmalıdır.

  1. Ameliyat boyunca, küçük bir hayvan termostatında sıçanların vücut ısısını 37.0 ± 0.5 °C'de koruyun. Dört 6 cm 5-0 dikiş hazırlayın.
  2. Küçük bir hayvan anestezi makinesinin oksijen akış hızını (atık gaz arıtma cihazı ile) 0,4−0,6 L/dk olarak ayarlayın ve isofluran konsantrasyonu %5 olarak ayarlayın. Fareyi anestezi makinesine yerleştirin.
  3. Hayvan bayıldıktan sonra fareyi cerrahi sabitleme masasına yerleştirin. Sıçanın ağzını anestezi makinesinin maskesine bağlayın (oksijen akış hızı değişmez; isofluran konsantrasyonu %3 olarak ayarlayın. Hayvanın ekstremite gerginliği, kornea refleksleri ve ağrı eksikliğini gözlemleyerek derin anesteziye girdiğini doğrulayın.
  4. Kağıt bandajları (veya diğer araçlar) ile ameliyat masasına uzanacak şekilde uzuvlarını düzeltin.
  5. Bir elektrikli tıraş ile boyun kat çıkarın ve% 75 alkol ile sterilize (iodophor daha iyidir). Farenin ağzını kancayla düzelt.
  6. Oftalmik makas ile boynun merkezi uzunlamasına şekli boyunca 2−3 cm kesin.
  7. Ortak karotis arteri ayırın. Oftalmik forceps ile deri altı kas ayırın. Tamamen görme alanı ortaya çıkarmak için ev yapımı retraktör kullanın. Oftalmik forceps ile trakea ön kas ayırdıktan sonra, ortak karotis arter görünür olana kadar sağ sternokleidomastoid tendon boyunca ayrı.
  8. Yaygın karotis arter izole, dış karotis arter ve oftalmik forceps ile iç karotis arter. Yaygın karotis arter ligate (sert düğüm), kalp ucundan uzak dış karotis arter (sert düğüm), ve internal karotis arter (gevşek düğüm) ile 5-0 sütür. 5-0 dikişleri ile kalp ucuna yakın dış karotis arter Hattı.
  9. Bir iplik cıvatası takın. Oftalmik makas kullanarak dış karotis arter küçük bir açıklık kesin ve yavaşça bir iplik cıvata takın. Gevşek düğüm olmuştur ve dış karotis arter kesilmiş olan dış karotis arter dikiş ligate.
    1. Internal karotis arter gevşek düğüm gevşetin ve orta serebral arter in başına iplik cıvata eklemeye devam (dikiş işaretli). Sonra maruz kalan iplik cıvatasını kesin.
  10. Iskemik zaman açıktıktan sonra (2-3 saat), bir mikroforceps ile dış karotis arter kırığı düzeltmek, ve yavaşça başka bir mikroforceps ile iplik cıvata çekin. İplik cıvatasının ön ucu internal karotis arterden tamamen çekildiğinde, 5-0 dikişle kaplı olan dış karotis arteri inkâr edin ve iplik cıvatasını tamamen çekin.
  11. Yaygın karotis arter gevşetin, ve daub ~ 50,000 U penisilin sodyum tozu yara yüzeyinde enfeksiyonu önlemek için. Dikiş subkutan kaslar ve cilt ile 4 sütür.
  12. Fareyi kafese geri yerleştirdikten sonra ameliyat sonrası su sıkıntısını önlemek için 1 mL şırınga (SQ-PEN enjeksiyonu daha iyidir) kullanarak fareye ~0,2 mL steril salin verin.
  13. Longa puanı10göre reperfüzyon 24 saat sonra hayvanları seçin. Adım 1.1'de bir sonraki TTC boyama için Longa'nın 1−3 puanına sahip hayvanları ve 1.2'de 1, 35, 60, 90 günlük çalışma için 2−3 puan alan hayvanları seçin.
    NOT: Longa'nın skoru10: 0 skor, nörolojik açık yok; 1 puan, sol önpençe uzatmak için başarısızlık; 2 puan, sola doğru daire çizerek; 3 puan, sola düşüyor; 4 puan, kendiliğinden yürüyemez ve depresif bir bilinç vardır.
  14. Longa'nın skorunu tek yönlü ANOVA ile analiz edin. Gösterilen değerler ortalama ± S.D. P < 0.05 farkı gösterir.

3. TTC boyama

NOT: Fare beyin dilimi kalıp ve bıçak büyük bir sıcaklık farkı nedeniyle yapışmasını önlemek için kullanılmadan önce -20 °C buzdolabında önceden soğutulmalıdır. Boyama sırasında, beyin dilimleri ve kültür plakası arasında yapışmayı önlemek, yetersiz boyama neden olabilir.

  1. Adım 1.1 veya sensorimotor fonksiyonel testlerde adım 1.1 veya sensorimotor fonksiyonel testlerde Longa skoru sonra 400 mg / kg kloral hidrat intraperitoneal enjeksiyon ile sıçan anestezi.
  2. Farenin kafasını cerrahi makasla veya fare decapitation cihazıyla deşin. Cerrahi makas ve hemostatik forceps ile beyin çıkarın.
  3. Dilimlemesi kolaylaştırmak için beyni -20 °C'de 30 dk buzdolabında bekletin.
  4. Buzdolabından beyin çıkarın ve önceden soğutulmuş sıçan beyin dilim kalıp yerleştirin. Beyni önceden soğutulmuş bir bıçakla 2 mm kalınlığında altı bölüme kesin.
  5. 6 kuyulu bir kültür plakasında %2 5-triphenyl-2H-tetrazolium klorür (TTC) ile kesitleri lekeleyin.
  6. Kültür 30−60 dk için bölümleri 37 °C sallayarak yatakta. Beyin iskemi alanı ve normal alan açıkça beyaz ve kırmızı olana kadar her 10 dakikada bir bölümleri çevirin.
  7. Arkadan beynin önüne doğru sırayla beyin dilimlerini dikey olarak sırayla sırayla sırayla sırayla sırayla yerleştirin. Her satırın toplam uzunluğunun aynı olduğundan emin olmak için bir cetvel kullanın. Dijital fotoğraf makinesiyle fotoğraf çekin.
  8. Enfarkt hacmini analiz edin.
    1. Photoshop yazılımı ile fotoğraf ön işlem
      1. Photoshop CS6 kullanarak fotoğraf alma. 00:00-00:14
      2. Beyin dilimlerini seçmek için Seç'i tıklatın, Seç'i tıklatın | Ters. 00:15-00:36
      3. Siyahı seçmek için Foreground'u tıklatın ve Tamam'ıtıklatın. 00:37-00:42
      4. Arka plan rengini doldurmak için Alt +Sil'e ve select'i seçmek için CTRL +D tuşuna basın. 00:43-00:46
      5. Dosyayı Tıklatın | Masaüstüne kaydedin. 00:47-01:08
    2. Image Pro Plus yazılımı ile fotoğrafın ön muamelesi.
      1. Image Pro Plus 6.0 yazılımını açın ve fotoğrafı içe aktarın. 01:09-01:24
      2. Hata değişikliği için, arka planın siyah olması için Kontrast Geliştirme aracıyla parlaklığı ayarlayın. 01:25-01:37
      3. Vurguları kaldırmak için Filtre'deki Ortanca aracını kullanın. 01:38-01:46
    3. Image Pro Plus yazılımı ile sol (normal) beyin alanını hesaplayın
      1. Segmentasyon kullanarak renk seçin ve H/S/Ideğerini ayarlayın, böylece beyin dilimleri siyah arka plandan ayrılmıştır. 01:47-02:12
      2. Saymaya Dön | Boyut. 02:13-02:16
      3. Count'a tıklayın | Beyni orta hattan ayırmak için Nesneleri Düzenle'de bölün. Yazılım otomatik olarak sol ve sağ beyin alanları ayırt edecektir. 02:17-02:49
    4. Image Pro Plus yazılımı ile doğru enfarkt beyin alanını hesaplayın
      1. 3.8.1-3.8.2 adımlarını uygulayın. 02:50-03:14
      2. Say'ı Seçin | Boyut. 03:15-03:21
      3. Beraberlik için tıklayınız | Nesneleri Düzenlemearacını birleştir. Iskemik alanı el ile seçin ve iskemik alanı hesaplamak için Say'ı tıklatın. 03:16-05:31
    5. Image Pro Plus yazılımı ile sağlık beyin alanını hesaplayın
      1. 3.8.1-3.8.2 adımlarını uygulayın. 05:32-06:44
      2. Segmentasyon kullanarak renk seçin ve H/S/Ideğerini ayarlayın, böylece beyin dilimlerinin normal kısmı siyah arka plandan ayrılmıştır. 06:45-07:10
      3. Saymaya Dön | Bu alanı hesaplamak için Boyut ve Count'a tıklayın. 07:11-07:21
      4. Beyni orta hattan ayırmak için Düzenle'deki Nesneleri Böl'e tıklayın. Yazılım otomatik olarak sol ve sağ beyin alanları ayırt edecektir. 07:22-08:08
  9. Enfarkt hacmini hesaplama (%) ve enfarkt ve küçültme hacmi (%):

    Enfarkt hacmi (%) = [sağ enfarkt alanı/(2 x sol beyin alanı)] x 100.
    Enfarktok ve küçültme hacmi (%) = [(sol beyin bölgesi - sağ sağlık beyin alanı) / (2 x sol beyin alanı)] x 100.

    NOT: Sağ beyin yaralı kısmıdır. Veriler tek yönlü ANOVA tarafından analiz edildi. Gösterilen değerler ortalama ± S.D. P < 0.05 farkı gösterir.

4. Sensorimotor fonksiyonun değerlendirilmesi

NOT: Longa'nın 2−3 skoru na sahip sıçanlar (300 g, 3040 iplik cıvata, 3 saat beyin enfarktüs süresi) 1-90 gün arasında sensorimotor fonksiyon deneylerini yapmak üzere seçilmiştir. Sessiz olun ve bu çalışma döneminde hayvanları rahatsız etmeyin. Veriler iki yönlü ANOVA tarafından analiz edildi. Gösterilen değerler ortalama ± S.D. P < 0.05 farkı gösterir.

  1. İki taraflı asimetri testi11
    1. Bir sıçanın her bir ön pençesinin safenöz kısmına eşit basınçla üç kez kağıt bant (5 cm uzunluğunda, 0,8 cm genişliğinde) sarın.
    2. Her sıçan için, her bir foreclaw temas ve bant etkilenmemiş pençe süreleri ve etkilenen pençe süreleri de dahil olmak üzere kamera ile 5 dakika içinde kaldırılır sayısını kaydedin.
    3. 30 dakika sonra, 4.1.1 ve 4.1.2 adımlarını tekrarlayın.
    4. Sensorimotor sapmanın ortalama değerini hesaplayın (%):
      Sensorimotor önyargı (%) = (etkilenmemiş pençe süreleri - etkilenen pençe süreleri)/(etkilenmemiş pençe süreleri + etkilenen pençe süreleri) x 100
  2. Izgara yürüyüş testi
    1. Sıçanı 2,5 cm2'likızgara açıklıkları ile yüksek bir ızgara yüzey platformunun (alan: 1 m2; yükseklik: 90 cm) ortasına yerleştirin.
    2. Farenin ızgara yüzeyinden geçmesi için fareyi teşvik etmek için farenin kalçalarını hafifçe itin.
    3. Etkilenmemiş (sağ) ve etkilenen (sol) uzuvlar tarafından yapılan ayak hatalarının sayısını ve 1 dk kamera ile toplam adım numarasını kaydedin.
    4. Hata sürelerini hesaplayın:
      Hata süreleri (%) = [etkilenmemiş (sağ) ekstremite - etkilenen (sol) ekstremite]/toplam adım sayısı x 100.
      NOT: 20 adımlı verilerin altındaki toplam adım sayısı kaldırıldı.
  3. Rotarod testi12,13
    1. Bilgisayarda 5 dakika süre içinde 13 rpm hıza yardımcı yazılım kullanarak sıçan dönen çubuk yorulma cihazı (çapı 90 mm) ayarlayın.
    2. Bilgisayar programlarını başlatın ve fareyi aynı anda rotarod basamaklarına yerleştirin.
    3. Sıçan basamak tan düşerse veya 5 dakika boyunca yürümeye devam ederse denemeyi bitirin ve dönen süreyi kaydedin.
    4. Fare30 dakika dinlendirin.
    5. Adımları 4.3.2−4.3.4'ün iki katı daha tekrarlayın ve son dönen zaman olacak maksimum değeri seçin.
  4. Kaldırma halatı testi14
    1. Kaldırma halat aletini (70 cm yüksekliğinde; halat 0,2 cm çapında ve 40 cm uzunluğunda) masanın üzerine yerleştirin.
    2. Farenin ipi ön ayaklarıyla tutup fareyi assın.
    3. Asılı kalma süresini kaydedin ve puanları hesaplayın.
      NOT: İpüzerinde 3 puan: 0−2 s; 2 puan: 3−4 s ipüzerinde; 1 puan: 5−6 s ipte; 0 puan: ipüzerinde 7'den fazla s.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Longa skoru ve TTC boyama, ortalama ağırlık (275/300/320 g), cıvata tipleri (2636/2838/3040/3043) farklı tedaviler ile bir MCAO / R modeli için yukarıda belirtilen prosedürü kullanarak; Tablo 1) sıçanlarda optimal beyin iskemi modelinin taranması için iskemik (2-3 saat) ve 1 gün reperfüzyon kullanılmıştır. 300 g ağırlık, 3040 iplik cıvata ve 3 saat beyin enfarktüs süresi model parametreleri en büyük serebral enfarktüs, en yüksek Longa skoru ve en büyük model başarı oranı ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Akut serebral iskemide iyi kullanılan yöntem ve davranışsal göstergeleri oluşturan birçok modelde beyin iskemisinin iyileşme ve sekeli evrelerinde önemli değişiklikler olmayabilir16,17. Ancak, iyileşme ve sekel aşamalarında beyin iskemik olan hastaların sayısı en büyüktür. İskemi inmenin iyileşme ve sekel aşamaları için uygun bir hayvan modeli seçmek esastır.

Farelerde MCAO/R modelini farelerin uygun ağırlığını (260−330 g), iplik cıvat...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81603315, 81603316), Çin'deki Jiangxi eyaletinin Önemli Ar-Ge planı (20171ACH80001), Fujian eyaletinin kolej ve üniversitelerinde endüstriyel ve akademik işbirliği projeleri tarafından desteklenmiştir. Çin (2018Y41010011).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Anatomik MikroskopLeica (Almanya)S8Mikroskobik ameliyat aleti
BıçakGellette/Kesme beyin bölümleri
Sabit Sıcaklık Sallama YatağıTaicang Deney Ekipmanları FabrikasıTHZ-CBeyin bölümlerini eşit ve sabit bir sıcaklıkta lekeli tutmak için
Dijital Fotoğraf MakinesiCanon700DÇekmek için TTC boyama
resimleri Elektrikli Tıraş MakinesiShanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.3000 #Sıçanların boynundan kılların alınması
Forseps HamostatikŞangay Tıbbi cihaz Co., Ltd.14 cmBeyin kaldırma için kullanma
Image Pro Plus SoftwareMedia Cybernetics, Inc.6.0Enfarktüs hacmini analiz edin
İzofluranRWD Yaşam Bilimleri217170702Anestezik gaz
MicroforcepsShanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.10 cmVasküler mikromanipülasyon
Mikro kesmeShanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.10 cmVasküler mikromanipülasyon
Oftalmik ForsepsShanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.10 cmYardımcı cilt ve kas anatomisi
Fttalmik MakasShanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.10 cmBoyun derisini kesmek için kullanma
Sıçan Beyin Dilimi Kalıbı ŞangayYuyan Scientific Instruments Co., Ltd.400 gBeyin dokusunun standart, düzgün kesimi için
Sıçan Döner Çubuk Yorulma AparatıAnhui Zhenghua Biyolojik Alet ve Ekipman Co., Ltd.ZH-300BSensorimotor fonksiyonunu test etmek için
Küçük Hayvan Anestezi MakinesiShanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.ABM3000Bir gaz anestezik makinesi
Küçük Hayvan TermostatıPekin Damida Technology Co., Ltd.DM.7-YLS-20AÇalışma sırasında hayvan vücut ısısını sabit tutmak için
Cerrahi MakasShanghai Medical device Co., Ltd.16 cmDekapitate ve beyin çıkarma için kullanma
SütürShanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.4-0 / 5-0Deri ve kas dikişleri için kullanma / Vasküler ligasyonlar için kullanma
Dişli CıvataBeijing Cinontech Co., Ltd.2636/2838/3040/3043-A4Sıçanlarda orta serebral arterin tıkanması
5-trifenil-2H-tetrazolyum klorür (TTC)SigmaLOT # BCBP3272VBeyin bölümü boyama reaktifi

Kaynaklar

  1. Kong, L. L., et al. Neutralization of chemokine-like factor 1, a novel C-C chemokine, protects against focal cerebral ischemia by inhibiting neutrophil infiltration via MAPK pathways in rats. Journal of Neuroinflammation. 11, 112(2014).
  2. Jiang, M., et al. Neuroprotective effects of bilobalide on cerebral ischemia and reperfusion injury are associated with inhibition of pro-inflammatory mediator production and down-regulation of JNK1/2 and p38 MAPK activation. Journal of Neuroinflammation. 11, 167(2014).
  3. Thomas, A., Detilleux, J., Flecknell, P., Sandersen, C. Impact of Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) Guidelines on Peri-Anesthesia Care for Rat Models of Stroke: A Meta-Analysis Comparing the Years 2005 and 2015. PLoS One. 12, e0170243(2017).
  4. Kumar, A., Aakriti,, Gupta, V. A review on animal models of stroke: An update. Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).
  5. Tong, F. C., et al. An enhanced model of middle cerebral artery occlusion in nonhuman primates using an endovascular trapping technique. AJNR Am. Journal of Neuroradiology. 36, 2354-2359 (2015).
  6. Li, F., Omae, T., Fisher, M. Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats. Stroke. 30, 2464-2470 (1999).
  7. Herson, P. S., Traystman, R. J. Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050. Future Neurology. 9, 541-551 (2014).
  8. Abrahám, H., Somogyvári-Vigh, A., Maderdrut, J. L., Vigh, S., Arimura, A. Filament size influences temperature changes and brain damage following middle cerebral artery occlusion in rats. Exp. Brain Res. 142, 131-138 (2002).
  9. Sun, M. N., et al. Coumarin derivatives protect against ischemic brain injury in rats. European Journal of Medicinal Chemistry. 67, 39-53 (2013).
  10. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20, 84-91 (1989).
  11. Smith, E. J., et al. Implantation site and lesion topology determine efficacy of a human neural stem cell line in a rat model of chronic stroke. Stem Cell. 30, 785-796 (2012).
  12. Zhang, S., et al. Protective effects of Forsythia suspense extract with antioxidant and anti-inflammatory properties in a model of rotenone induced neurotoxicity. Neurotoxicology. 52, 72-83 (2016).
  13. Milani, D., et al. Poly-arginine peptides reduce infarct volume in a permanent middle cerebral artery rat stroke model. BMC Neuroscience. 17, 19(2016).
  14. DeGraba, T. J., Ostrow, P., Hanson, S., Grotta, J. C. Motor performance, histologic damage, and calcium influx in rats treated with NBQX after focal ischemia. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14, 262-268 (1994).
  15. Liu, P., et al. Validation of a preclinical animal model to assess brain recovery after acute stroke. European Journal of Pharmacology. 835, 75-81 (2018).
  16. Zuo, W., et al. IMM-H004 prevents toxicity induced by delayed treatment of tPA in a rat model of focal cerebral ischemia involving PKA-and PI3K-dependent Akt activation. European Journal of Neuroscience. 39, 2107-2118 (2014).
  17. Yang, L., et al. L-3-n-butylphthalide Promotes Neurogenesis and Neuroplasticity in Cerebral Ischemic Rats. CNS Neuroscience & Therapeutics. 21, 733-741 (2015).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Orta Serebral Arter OklüzyonuSıçan Beyin İskemi ModeliSensorimotor Fonksiyonel TestlerTTC Boyama AnaliziBilateral Asimetri TestiIzgara Yürüyüş Testiİplik Cıvata YerleştirmeBeyin Enfarkt HacmiPostoperatif Dehidrasyon ÖnlemeCerrahi Aseptik Teknik
Sıçanlarda Akut İnme Sonrası Beyin İyileşmesini Değerlendiren Bir Preklinik Model
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.