Bu çalışma, mikroelektrot dizilerinin ortak marmoset'e stereotaksik, nöroşirürjik implantasyonu gerçekleştirmek için bir protokol sunmaktadır. Bu yöntem özellikle serbestçe davranan hayvanlarda elektrofizyolojik kayıtları sağlar, ancak bu türdeki diğer benzer nöroşirürjik müdahalelere (örneğin, ilaç yönetimi için kanül veya beyin stimülasyonu için elektrotlar) kolayca adapte edilebilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Ortak Marmoset Mikroelektrot Dizileri İmplantasyonu için Stereotaksik Cerrahi (Callithrix jacchus)
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Marmosets(Callithrix jacchus)nörolojik bilimler de dahil olmak üzere biyomedikal ve klinik öncesi araştırmalarda popülerlik kazanıyor küçük insan dışı primatlar vardır. Filogenetik olarak, bu hayvanlar insanlara kemirgenlerden çok daha yakındır. Ayrıca, çok çeşitli vokaller ve sosyal etkileşimler de dahil olmak üzere karmaşık davranışlar sergilerler. Burada, ortak marmoset elektrot dizileri kayıt implantasyonu için etkili bir stereotaksik nöroşirürjik prosedür açıklanmıştır. Bu protokol aynı zamanda hayvan bakımının ameliyat öncesi ve sonrası adımlarını da başarıyla gerçekleştirebilmek için gerekli olan ayrıntıları ile tamamlanmaktadır. Son olarak, bu protokol cerrahi işlemden 1 hafta sonra serbestçe davranan bir marmoset yerel alan potansiyeli ve başak aktivite kayıtları bir örnek gösterir. Genel olarak, bu yöntem uyanık ve serbestçe marmosets davranan beyin fonksiyonu çalışma için bir fırsat sağlar. Aynı protokol kolayca diğer küçük primatlar ile çalışan araştırmacılar tarafından kullanılabilir. Buna ek olarak, elektrotlar, mikroenjeksiyonlar, optrodes veya rehber kanüllerin implantasyonu veya ayrık doku bölgelerinin ablasyon gibi implantlar gerektiren diğer çalışmalar, izin vermek için kolayca değiştirilebilir.
Giriş
Ortak marmosets(Callithrix jacchus) araştırma birçok alanda önemli bir model organizma olarak tanıma kazanıyor, nörobilim de dahil olmak üzere. Bu yeni dünya primatları, rhesus makak gibi hem kemirgenler hem de insan olmayan diğer primatlar (NHP) için önemli bir tamamlayıcı hayvan modelini temsil eder. Kemirgenler gibi, bu hayvanlar için bakım ve doğurmak için küçük, işlemek kolay, ve nispeten ekonomik1,2,3,4, büyük NHPs ile karşılaştırıldığında. Ayrıca, bu hayvanların diğer NHPs1göre eşleştirme ve yüksek fec....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan deneyleri, Ulusal Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Sağlık Enstitüleri Rehberi'ne uygun olarak gerçekleştirilmiştir ve Santos Dumont Enstitüsü Etik Komitesi (protokol 02/2015AAS) tarafından onaylanmıştır.
1. Cerrahi hazırlık
- Her elektrot dizisini kullanılacak stereotaksik çerçeveyle uyumlu bir elektrot tutucuya takın.
- Stereotaksik mikromanipülatöre bir elektrot tutucusu bağlayın ve bir mikro kabloyu interaural koordinatlara ayarlayın. Gerekirse ek elektrot dizileri ve tutucular için bunu tekrarlayın.
NOT: Mikro teller arasındaki göreceli uzaklık sabit olduğundan, herhangi bir mikrokablonun interaura....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu çalışmanın amacı, ortak marmoset elektrofizyolojik kayıtlar için mikroelektrot dizilerinin implantasyonu için stereotaksik nöroşirürjik bir prosedürü tanımlamaktır. Tipik bir ameliyat (anestezi indüksiyonundan anestezi iyileşmesine kadar) implante edilen dizi sayısına bağlı olarak yaklaşık 5−7 saat sürer. Burada, simetrik olarak implante edildi, her beyin yarımküresinde bir tane. Her dizi, bazal ganglia-kortikohalamik devrenin çeşitli yapılarını hedefleyen yedi demet halinde düzenlenmiş 32 paslanmaz çelik mikrotel içe.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu çalışma, marmoset beyninde mikroelektrot kayıt dizilerinin implantasyonunda yer alan prosedürlerin ayrıntılı bir açıklamasını sunmaktadır. Aynı protokol, diğer küçük primatlarda ev yapımı veya ticari olarak mevcut olsun, elektrotlar implante ederken kolayca kullanılabilir. Ayrıca, kolayca beyin yapılarının hassas hedefleme gerektiren diğer deneysel biter için adapte edilebilir. Bu nedenle, bu protokol stereotaksik koordinatlar ve kranial sondaj teknikleri ile ilgili kasıtlı olarak belirsizdir, çünkü bunlar en çok fark.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
Yazarlar bernardo Luiz filme ve düzenleme ile teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma Santos Dumont Enstitüsü (ISD), Brezilya Eğitim Bakanlığı (MEC) ve Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) tarafından desteklendi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Ekipmanlar< / güçlü> | |||
| 683 Küçük Hayvan Vantilatörü | Harvard Aparatı, Inc. | 55-0000 | |
| Anestezi Tertibatı | BRASMED | COLIBRI | |
| Berber Makası | Mundial | HC-SERİSİ | |
| Diş Matkabı | Norgen | B07-201-M1KG | |
| Homeotermik Isıtma Yastığı ve Monitör | Harvard Apparatus, Inc. | 50-7212 | |
| Marmoset Stereotaksik Çerçeve | Narishige Bilimsel Enstrüman Laboratuvarı | SR-6C-HT | |
| Hasta Monitörü ve Nabız Oksimetresi | Bionet Co., Ltd | BM3 | |
| Stereotaksik Mikromanipülatör | Narishige Bilimsel Enstrüman Laboratuvarı | SM-15R | |
| Cerrahi Mikroskop | Opto | SM PLUS IBZ | |
| Instruments | |||
| Allis doku forseps | Sklar | 36-2275 | |
| Alm Ekartör, yuvarlak nokta, 4x4 diş | Rhosse | RH11078 | |
| Açılı McPherson Forseps | Oftalmologiabr | 11301A | |
| Kavisli Cerrahi Makas | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8422 | |
| Kavisli Doku Forseps | Sklar | 47-1186 | |
| Hassas Diseksiyon forseps | WPI | WP5015 | |
| Dental Matkap Ucu | Microdont | ISO.806.314.001.524.010 | |
| Essring Doku Forseps | Sklar | 19-2460 | |
| FG 1/4 Dental Matkap Ucu | Microdont | ISO.700.314.001.006.005 | |
| Halsey İğne Tutucu | WPI | 15926-G | |
| Halstead Sivrisinek forseps | WPI | 503724-12 | |
| Hemostatik Forseps, Düz | Sklar | 17-1260 | |
| Jewler Forseps | Sklar | 66-7436 | |
| McPherson-Vannas Oftalmik mikrosist, 3 mm nokta | Argos Enstrümantal | ARGOS-4004 | |
| Pereosteal Raspatory | Golgran | 38-1 | |
| Scalpal Sap | Harvard Aparatı, Inc. | 72-8354 | |
| Tornavidalar | Eurotool | SCR-830.00 | |
| Sodering Demir | Hikari | 21K006 | |
| Cerrahi Makas | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8400 | |
| Dişli forseps | WPI | 501266-G | |
| Tek Kullanımlık/Tek Kullanımlık/güçlü | |||
| 1 ml steril şırınga, 26 G iğneli | Descarpack | 7898283812785 | |
| 130 cm x 140 cm cerrahi alan, önceden sterilize edilmiş | ProtDesc | 7898467276344 | |
| 24G İğne, önceden sterilize edilmiş | Descarpack | 7898283812846 | |
| 50 cm x 50 cm cerrahi alan, önceden sterilize edilmiş | Esterili-med | 110100236 | |
| Pamuk Uçlu Problar, Önceden Sterilize | Edilmiş Jiangsu Suyun Tıbbi Malzemeler Co. LTD | 23007 | |
| Pamuk uçlu Qutips | Higie Topp | 7898095296063 | |
| Elektrot Dizisi | Ev yapımı | ||
| Manşetsiz endotrakeal tüp, iç çap 2.0 mm, dış çap 2.9 mm | Solidor | 7898913077201 | |
| Kalaylı bakır tel, 0,15 mm çap | |||
| M1.4x3 Paslanmaz çelik vidalar | USMICROSCREW | M14-30M-SS-P | |
| Tıbbi Bant | Missner | 7896544910102 | |
| Naylon cerrahi sütürler | Shalon | N540CTI25 | |
| Scalpal Blade, önceden sterilize | edilmiş AdvantiVe | 1037 | |
| lehim | Kester | SN63PB37 | |
| Steril Salin %0,9 | Isofarma | 7898361700041 | |
| Steril Cerrahi Eldivenler | Maxitex | 7898949349051 | |
| Steril Cerrahi Önlük | ProtDesc | 7898467281208 | |
| Cerrahi Gazlı Bez, 15 cm x 26 cm önceden sterilize edilmiş | Hé ika | 7898488470315 | |
| Jel Köpük | Pfizer | ||
| İlaçlar/Kimyasallar | |||
| 0.25mg/ml Atropin | Isofarma | ||
| %10 Lidokain Sprey | Ürünleri; micos Farmaç ve Çevre; uticos Ltda. | ||
| % 2.5 Enrofloxacino veteriner antibiyotik | Chemitec | 0137-02 | |
| Dexametasona Veteriner Anti inflamatuar | MSD | R06177091A-00-15 | |
| Hidrojen Peroksit | Farmax | 7896902211537 | |
| İzofulan | BioChimico | 7897406113068 | |
| Jet Akrilik polimerizasyon çözeltisi | Artigos Odontol&oakut; gicos Clá ssico | ||
| Jet Otomatik Polimerize Akrilik | Artigos Odontol ve akut; gicos Clá ssico | ||
| Ketamin% 10 | Syntec | ||
| Lidokain ve Fenilefrin 1.8 ml lokal anestezik | SS Beyaz | 7892525041049 | |
| Povidon-İyot çözünmesi | Farmax | 7896902234093 | |
| Riohex% 2 cerrahi Sabun | Rioquí mika | 7897780209418 | |
| Gümüş Boya | SPI Malzemeleri | 05002-AB | |
| Tramadol klorür 50 mg / ml | Uniã o Quí mika | 7896006245452 | |
| Tazeleyici jel (poliakrilik asit) | Allergan |
Kaynaklar
- Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Seminars in Fetal and Neonatal Medicine. 17 (6), 336-340 (2012).
- Harris, R. A., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
