Bu makalede, retinal görüntüler elde ederken vazoaktif uyaranlar sunmak için bir gaz solunum provokasyon tekniği kullanarak insan denekler ile in vivo retinal vaskülatür reaktivitesini ölçmek için bir yöntem açıklanmıştır.
Yöntem makalesi
Bu makalede, retinal görüntüler elde ederken vazoaktif uyaranlar sunmak için bir gaz solunum provokasyon tekniği kullanarak insan denekler ile in vivo retinal vaskülatür reaktivitesini ölçmek için bir yöntem açıklanmıştır.
Retinaya vasküler kaynağın vazokonstriksiyon ve vazodilatasyon yoluyla retinanın metabolik taleplerini karşılamak için dinamik olarak adapte olduğu gösterilmiştir. Retinal vasküler reaktivite (RVR) olarak adlandırılan bu süreç, diyabetik retinopati gibi retinal vasküler hastalıklarda çok erken bozulan nörovasküler kaplin ile aracılık edilir. Bu nedenle, vasküler fonksiyon değerlendirmek klinik olarak uygulanabilir bir yöntem hem araştırma hem de klinik ortamlarda önemli ilgi olabilir. Son zamanlarda kapiller düzeyde retinal vaskülatürin in vivo görüntülemesi, kapiller düzey çözünürlüğü ile noninvaziv, minimal risk ve boyasız anjiyografi yöntemi olan optik koherens tomografi anjiyografisinin (OCTA) FDA onayı ile mümkün olmuştur. Aynı anda, RVR fizyolojik ve patolojik değişiklikler çeşitli araştırmacılar tarafından gösterilmiştir. Bu el yazmasında gösterilen yöntem, klinik görüntüleme prosedürlerinde veya cihazda değişiklik yapmaya gerek kalmadan OCTA kullanılarak RVR'ı araştırmak üzere tasarlanmıştır. Hiperkapnik veya hiperoksik durumlara maruz kalma sırasında retina ve retinal vaskülatürgerçek zamanlı görüntüleme gösterir. Sınav en az konu rahatsızlık veya risk ile 30 dk altında iki personel ile kolayca yapılır. Bu yöntem diğer oftalmik görüntüleme cihazlarına uyarlanabilir ve uygulamalar gaz karışımının bileşimine ve hasta popülasyonuna bağlı olarak değişebilir. Bu yöntemin bir gücü, in vivo insan deneklerde kapiller düzeyde retinal vasküler fonksiyonun araştırılmasıiçin izin olmasıdır. Bu yöntemin sınırlamaları büyük ölçüde OCTA ve görüntüleme yapıları ve sınırlı dinamik aralık da dahil olmak üzere diğer retinagörüntüleme yöntemlerivardır. Yöntemden elde edilen sonuçlar retinanın OCT ve OCTA görüntüleridir. Bu görüntüler, ticari olarak kullanılabilen OCT veya OCTA cihazlarında mümkün olan tüm analizler için uygundur. Genel yöntem, ancak, oftalmik görüntüleme herhangi bir şekilde adapte edilebilir.
Retinanın metabolik talebi, arteriyol, kılcal damarlar ve venüllerden oluşan iyi düzenlenmiş bir sistem tarafından sağlanan yeterli ve sürekli oksijen kaynağına bağlıdır1. Çeşitli çalışmalar, daha büyük kalibreli insan retinal damarların,fonksiyonu çeşitli fizyolojik2,3,4,5 ve farmakolojik6,,7 uyaranile in vivo değerlendirilebilir göstermiştir. Buna ek olarak, bu vasküler sistemin anormal fonksiyonu retinal vasküler reaktivite (RVR) erken aşamalarında bile zayıflatılmış olduğu gösterilmiştir diyabetik retinopati gibi retinal vasküler hastalıklarda yaygındır8,9 hem gaz provokasyon u ğla9 ve titreşen ışık deneyleri ile5,10,11. Sigara gibi retinal vasküler risk faktörleri de bozulmuş RVR12 ve retinal kan akımı ile ilişkili olmuştur13. Retinal vasküler hastalığın klinik semptomları hastalık sürecinde nispeten geç ortaya çıkalı ve hastalığın kanıtlanmış erken klinik belirteçleri14eksik olduğundan bu bulgular önemlidir. Böylece, RVR değerlendirilmesi retinade dejeneratif hastalıkları başlatabilir veya alevlendirebilir anormalliklerin erken değerlendirilmesi için vasküler bütünlük yararlı önlemler sağlayabilir.
Önceki RVR deneyleri genellikle lazer kan akış ölçer9 veya retina görüntü edinimi için özel filtreler15 ile donatılmış fundus kameralar gibi cihazlara dayanıyordu. Ancak, bu teknolojiler arteriyol16 ve venules15gibi büyük çaplı damarlar için optimize edilmistir, hangi gaz, mikrobesin ve moleküler değişim meydana değildir. Daha yeni bir çalışma da uyarlanabilir optik görüntüleme kullanarak kılcal damarların RVR ölçmek başardı17, ama geliştirilmiş mekansal çözünürlüğe rağmen, Bu görüntüler daha küçük bir alan boyutuvar ve klinik kullanım için FDA onaylı değildir18.
Optik koherens tomografi anjiyografi (OCTA) son gelişi, insan hasta ve in vivo deneklerde kapiller seviye değişiklikleri değerlendirmek bir FDA onaylı, noninvaziv ve boyasız anjiyografik yöntemsağlamıştır. OCTA yaygın diyabetik retinopati gibi retinal vasküler hastalıklarda kapiller perfüzyon bozukluğu değerlendirmek için etkili bir araç olarak klinik uygulamada kabul edilir19, retinal venöz oklüzyonlar20, vaskülit21 ve diğerleri22. Bu nedenle OCTA, klinik ortamda önemli uzamsal ve zamansal heterojenlik23'ün yanı sıra patolojik değişikliklere sahip olabilecek kılcal seviye değişikliklerinin değerlendirilmesi için mükemmel bir fırsat sunmaktadır. Grubumuz son zamanlarda OCTA bir retina vazodilatar uyarıcı olan bir retina vazokonstrik uyarıcı16,,24,ve karbondioksit, bir retina vazodilatif uyarıcı olan ilham oksijen fizyolojik değişikliklere kılcal düzeyde2 retinal damarların duyarlılığı ölçmek için kullanılabilir olduğunu gösterdi3,5.
Bu makalenin amacı, okuyucunun OKTA kullanarak küçük arteriollerin retinal vasküler reaktivitesini ve kılcal yatağı değerlendirmesini sağlayacak bir protokolü tanımlamaktır. Yöntemler, manyetik rezonans görüntüleme ile serebrovasküler reaktivite ölçümlerini tanımlayan Lu ve ark.25'te sunulan yöntemlerden uyarlanmıştır. Mevcut yöntemler OCTA görüntüleme2sırasında geliştirilmiş ve kullanılmış olsa da, nispeten basit ve belirgin modifikasyonları ile diğer retinal görüntüleme cihazları için geçerlidir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışma Güney Kaliforniya Üniversitesi Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylanmıştır ve Helsinki Bildirgesi'nin ilkelerine bağlı kalmıştır.
1. Gaz Rebreathing Aparatlarının Kurulumu

Şekil 1: Rebreathing olmayan cihazların diyagramı. Tam kurulum, işlevlerine ve bağımsız olarak ele alınma sıklığına göre üç ayrı birime ayrılmıştır. Bunlar: Hava Kontrol Ünitesi, Yeniden Nefes Alamayan Birim ve Konu/Görüntüleme Cihazı Birimi Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayınız.
2. Konuyu Görüntülemeye Hazırlama
3. Gaz Provokasyon Deneyi ve Görüntü Edinimi

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu deneyden elde edilen çıktı, darbe oksimetresinden alınan manuel okumalar, gaz maruziyeti veya OCTA taraması için belirtilen zamanlama ve ham OCTA görüntüleme verilerinden oluşur. BIR OCTA görüntüsü, OCT B-taramaları ve her B-taraması ile ilişkili dekoreş sinyalinden oluşur. Veri parametreleri cihazın özellikleri ile verilir. Merkezi dalga boyuna sahip 1040-1060 nm'lik bir kaynak lazer platformu OCTA makinesi kullanılmıştır. Görüntüler 20 μm enine çözünürlük ve 6,3 m optik eksenel çözünürlük sağlar. Çoğu zaman, OCTA ve...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Metodoloji sadece açıklanan bir gaz solunum provokasyon deneyi için tam bir protokol olduğunu oktama görüntüleme cihazı ve en az rahatsızlık veya risk konu için hiçbir değişiklik ile belirli zaman noktalarında kontrollü bir ortamda bir denek RVR ölçümü sağlar. Bu kurulum, araştırmacının ihtiyaçlarına uygun kolay değişikliklere olanak sağlayacak şekilde açıklanmıştır. Farklı klinik odalarına uyacak ek borular barındırabilir ve şirket içi tüp veya dirsek eklemi gibi bazı unsurlar atlanabilir veya diğer bileşenlerle değişti...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Carl Zeiss Meditec, bu makalenin konusuyla ilgili olarak AHK'ya hibe fonu, ekipman ve mali destek sağlamıştır.
Bu çalışma NIH K08EY027006, R01EY030564, UH3NS100614, Carl Zeiss Meditec Inc (Dublin, CA) ve Körlüğü Önlemek Için Araştırmadan Sınırsız Bölüm Finansmanı (New York, NY) tarafından desteklenmiştir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| %5 CO2 gazı [%5 CO2, %21 O2, %74 N2] (sıkıştırılmış) | Kuruma Bağımlı (Praxair) | ||
| Bacdown Dezenfektan Deterjan | Decon Labs | 8001 | https://deconlabs.com/products/disinfectant-bdd/ |
| Temiz Borlu Tüpler (35 mm İç Çap) | Vakumlu | 1011-108 | http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&skuid=1197 |
| Douglas torba dolumu için manşet adaptörü | Vacumed | 22254 | http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&prodid=343 |
| Douglas çanta (200 L kapasite) | Harvard Aparatı | 500942 | https://www.harvardapparatus.com/douglas-bag.html |
| Dirsek Eklemi (İç Çap 19 mm/Dış Çap 22 mm), Evde | |||
| Modifiye Edilmiş Parmak Ucu Nabız Oksimetresi (Pro Serisi) | CMS CMS 500DL | https://www.walmart.com/ip/Pro-Series-CMS-500DL-Fingertip-Pulse-Oximeter-Blood-Oxygen-Saturation-Monitor-with-silicon-cover-batteries-and-lanyard/479049154 | |
| Gaz Dağıtım Tüpü (22 mm İç Çap) Evde | |||
| Gaz doldurma tüpü (sıkıştırılmış gaz için 1/8") | |||
| Hidrojen Peroksit Temizleyici Dezenfektan Mendil | Clorox Healthcare | 30824 | https://www.cloroxpro.com/products/clorox-healthcare/hydrogen-peroxide-cleaner-disinfectants/?gclid=EAIaIQobChMIk-KG4vi15QIVcRh9Ch0NNwLPEAAYASAAEgJIa_D_BwE&gclsrc=aw.ds |
| Yağlayıcı Göz Damlası | Refresh | Refresh Plus | https://www.refreshbrand.com/Products/refresh-plus |
| Manuel Yön Kontrol Valfleri: Üç T-Şekilli Musluk Tipi (İç Çap 28,6 mm, Dış Çap 35 mm) | Hans Rudolph | 2100C Serisi | www.rudolphkc.com |
| Medikal O2 (Sıkıştırılmış) | Kuruma Bağlı | ||
| Ağızlık (Silikon, Model #9061) | Hans Rudolph | 602076 | www.rudolphkc.com |
| OCTA Görüntüleme Cihazı (PLEX Elite 9000) | Carl Zeiss Meditec, Dublin, CA, ABD | https://www.zeiss.com/meditec/int/product-portfolio/optical-coherence-tomography-devices/plex-elite-9000-swept-source-oct.html | |
| Fenilefrin Hidroklorür Oftalmik Solüsyon, USP% 2.5 | Paragon Bioteck, Inc | NDC 42702-102-15 | https://paragonbioteck.com/products/diagnostics/phenylephrine-hydrochloride-ophthalmic-solution-usp-2-5/ |
| Plastik Burun Klipsi Steril Köpük CS100 | Sklar Steril | 96-2951 | https://www.sklarcorp.com/disposables/plastic/plastic-nose-clip-sterile-foam-box-of-100.html |
| Proparakain Hidroklorür Oftalmik Solüsyon, USP .5 | Bausch + Lomb | NDC 24208-730-06 | https://www.bausch.com/ecp/our-products/rx-pharmaceuticals/generics |
| Regülatörü (tanka bağlı - %5 CO2: Fisherbrand Çok Aşamalı Gaz Silindir Regülatörleri) | Genstar Technologies Company | 10575150 | https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575150?keyword=true |
| Regülatörü (tanka bağlı- Oksijen: Fisherbrand Çok Kademeli Gaz Tüpü Regülatörleri) | Genstar Technologies Company | 10575145 | https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575145?keyword=true |
| Kauçuk Boru (İç çap 19 mm, Dış çap 27 mm), Made in House | |||
| Sızdırmazlık bandı - Parafilm Sargısı (2 "Genişliğinde) | Cole Parmer | PM992 | https://www.coleparmer.com/i/parafilm-pm992-wrap-2-wide-250-ft-roll/0672050?PubID=VV&persist=True&ip=no&gclid=EAIaIQobChMInY3vqomz5QIVfyCtBh1VSg64EAAYASAAEgJ9n_D_BwE |
| Steril Alkol Hazırlama Pedleri | Medline | MDS090670 | https://www.medline.com/product/Sterile-Alcohol-Prep-Pads/Swab-Pads/Z05-PF03816 |
| Tropicamide Oftalmik Solüsyon, USP %1 | Akorn | NDC 17478-102-12 | http://www.akorn.com/prod_detail.php?ndc=17478-102-12 |
| Boru Adaptörü, Evde | |||
| Üretilmiştir İki Yeniden Solumayan Valf (2600 Serisi - İç Çap 28,6 mm, Dış Çap 35 mm) | Hans Rudolph | 2600 Serisi, UM-112078 | www.rudolphkc.com |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste