Yöntem makalesi

İkiz Anemi Polisitemi Dizisi ile Plasentadaki Renk Farklılığının Değerlendirilmesi

DOI:

10.3791/61312

⸱

17 Haziran 2020

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Reproductive Medicine, Affiliated Shenzhen Maternity and Child Healthcare Hospital, Southern Medical University, 2Division of Fetal Medicine, Department of Obstetrics, Leiden University Medical Center, 3Fetal Medicine Unit & Prenatal Diagnosis Center, Department of Obstetrics, Shanghai First Maternity and Infant Hospital, Tongji University School of Medicine, 4Division of Neonatology, Department of Pediatrics, Leiden University Medical Center

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İkiz anemi polisitemi dizisi (TAPS) olan monokoryonik ikizlerde, donör ikiz ve karşılık gelen plasenta payı solukken, alıcı ikiz ve plasental payı çok yönlü bir görünüme sahiptir. Burada doğumdan sonra TAPS plasentasının anne tarafındaki renk farkını ölçmek için bir protokol sunulmuştur.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İkiz anemi polisitemi sekansı (TAPS) monokoryonik ikizlerin %5'inde görülür ve ikizler arası büyük hemoglobin farkları ile karakterizedir. TAPS için postnatal tanı kriterleri hematolojik parametrelere ve plasental özelliklere dayanmaktadır. Doğumdan sonra plasental muayene, anemik ve polisitemik ikizlerin plasental bölgeleri arasındaki maternal tarafın renginin oldukça farklı olduğunu göstermektedir. TAPS plasentalarındaki renk farkı, akut peripartum feto-fetal transfüzyonlu monokoryonik plasentalara göre daha yüksektir; bu nedenle, bu TAPS için ek bir tanı kriteri olarak kullanılır. ImageJ gibi yazılımlar, TAPS plasentalarında renk yoğunluğunun bilgisayar tabanlı olarak ölçülmesini sağlar. Bununla birlikte, TAPS plasentalarının anemik ve polisitemik bileşenleri arasındaki renk farklılıklarının hesaplanması için ayrıntılı bir yöntem henüz tanımlanmamıştır. Burada sunulan protokol, ImageJ yazılımını kullanarak TAPS plasentalarının maternal tarafındaki renk farklılıklarını analiz etmek için adım adım bir yöntem sağlar.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

TAPS, feto-fetal transfüzyon sendromunun kronik bir formudur ve oligo-polihidramnios dizileri1 belirtisi olmaksızın büyük bir ikizler arası hemoglobin (Hb) farkı ile karakterizedir. TAPS'ın ana patogenezi benzersiz plasental anjiyomimari ile ilişkilidir ve sadece birkaç küçük anastomoz, donörden (anemik ikiz) alıcıya (polisitemik ikiz) kronik ve düşük hızlı transfüzyona izin verir2,3,4. TAPS'ın postnatal tanısı, büyük Hb farkı ve büyük retikülosit sayısı farkı gösteren hematolojik testlere ve/veya sadece küçük anastomozları gösteren boya ile plasental enjeksiyona dayanır5. Bununla birlikte, retikülosit sayısı her zaman doğumda ölçülmez ve plasenta enjeksiyonu çoğu fetal tıp merkezinde rutin olarak yapılmaz. Retikülosit sayısı ölçümü yapılmayan ve plasental boya enjeksiyonu yapılmayan olguların tanısına yardımcı olmak için ek bir tanı kriteri yararlı olabilir. Bir donör ikizin soluk cildi ile alıcı ikizin bol cildi arasındaki çarpıcı bir renk farkı, doğumda TAPS ikizlerinde sürekli olarak mevcuttur. Anemik ve polisitemik ikizlerin plasental bölgeleri arasındaki maternal tarafın benzer bir renk farkı da brüt muayenede tespit edilir.

Son zamanlarda, bu plasental renk farkının, doğumdan sonra TAPS tanısını doğrulamak için basit ve doğru bir yöntem olarak kullanılabileceği varsayılmıştır6. TAPS plasentalarındaki renk farkının ölçülmesi, plasental enjeksiyona kıyasla zaman kazandırıcıdır. Ek olarak, TAPS plasentalarındaki renk farkının ölçülmesi, retikülosit sayısına kıyasla daha uygun maliyetlidir. Bu yöntemde kullanılan materyaller klinik ortamlarda kolayca bulunabilir Bu nedenle, bu yöntem TAPS tanısı için basit ve doğru kriterler sağlar. Protokol, monokoryonik plasentaların maternal tarafından renk farklılıklarının TAPS ile ölçülmesi için ayrıntılı bir yöntemi açıklar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol Leiden Üniversitesi Tıp Merkezi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır ve insan monokoryonik ikiz plasentalarının doğum sonrası muayenesi Leiden Üniversitesi Tıp Merkezi'ndeki standart bakımın bir parçasıdır. İnsan monokoryonik ikiz plasentalarının doğum sonrası muayenesi için rıza alınması Leiden Üniversitesi Tıp Merkezi'nde feragat edilmiştir.

1. TAPS plasenta toplanması ve brüt muayene

  1. Herhangi bir gebelik yaşında verilen TAPS ile tüm insan monokoryonik ikiz plasentalarını kullanın. İnsan monokoryonik ikiz plasentasını mümkün olduğunca sağlam tutun. Monokoryonik plasentayı manuel olarak çıkarılması gerekiyorsa mümkün olduğunca nazikçe verin.
    NOT: Doğumdan sonra, ebeler veya neonatologlar TAPS plasentalarını plastik bir kutuya ve daha sonra laboratuvara aktarmalıdır.
  2. İlk bebek doğduğunda, doğum sırasını ilk olarak işaretlemek için göbek kordonunu kelepçelemek için bir kelepçe kullanın. Diğer bebek doğduğunda, doğum sırasını ikinci olarak işaretlemek için göbek kordonunu kelepçelemek için iki kelepçe kullanın.
  3. Plasentanın sağlamlığı, göbek kordonu yerleştirme türleri, göbek damarlarının sayısı ve koryonisiteyi doğrulamak için bölme zarının brüt muayenesi dahil olmak üzere plasentayı makroskopik olarak inceleyin. Monokoryonisitenin patolojik tanısı için ikizler arası zarı toplayın. TAPS plasentalarının çapı gebelik yaşına bağlıdır.
    NOT: Anne tarafında yapışkan kan pıhtılarının oluşmaması için doğumdan sonraki 1 hafta içinde muayene yapılmalıdır.
  4. Plasentayı gerekirse muayeneye kadar kuru, plastik bir kutuda buzdolabında (1-4 °C) saklayın.

2. Plasental maternal tarafın hazırlanması

  1. Amniyotik zarı makas kullanarak plasenta kenarı boyunca kesin. Kanın plasenta kütlesinden dışarı akmasını önlemek için zar üzerindeki damarlara ve velamentöz kordon yerleştirilip yerleştirilmediğine dikkat edin.
    NOT: Velamentöz kordon yerleştirilmesinde, göbek kordonundan gelen damarlar, plasenta kütlesine bağlanmadan önce bir süre amniyotik zarın yüzeyine hareket eder. "Çıplak" damarlar kesilirse, plasental kütleden gelen kan dışarı akabilir ve bir karışıklık yaratabilir.
  2. Plasenta loblarına zarar vermemek için kan pıhtılarını dikkatlice çıkarın.
  3. Loblar arasındaki boşluğu ortadan kaldırmak için plasenta loblarını maternal tarafta düzenleyin. Plasentalar genellikle yaklaşık 15 loba sahiptir ve anne tarafında tanımlanabilir.

3. Dokümantasyon için hazırlık

  1. Plasentayı, anne tarafı yukarı bakacak şekilde plastik bir panel üzerine yerleştirin.
  2. Plasentanın maternal tarafını ışığa maruz bırakın (sol ve sağ taraflarda iki özdeş lamba kullanarak düzgün dağılım). Işık yoğunluğunu ayarlama işlevi olan lambaları kullanın.
  3. Yansımayı azaltmak için, ılıman ışık koşullarında bir kamera (Malzeme Tablosu) ile dijital fotoğraflar çekin ve ışık kaynağına doğrudan maruz kalmaktan kaçının.
  4. Plasentanın anne tarafına dik olarak fotoğraf çekin.

4. ImageJ kullanarak bilgisayarlı ölçüm

  1. Yazılım simgesine tıklayarak bilgisayarda ImageJ'yi açın.
  2. Plasenta resmini açmak için "Dosya"ya ve ardından "Aç"a tıklayın. Gerekli resim açıldıktan sonra "Resim"e tıklayın | "Renk", ardından açılır listeden "Renk" i seçmek için "Kanallar Aracı".
    NOT: Yazılım, ölçülen nesnenin rengini otomatik olarak tanımlayabilir. Plasenta kırmızıdır. Yazılımda, "Renk" e tıkladıktan sonra, plasenta resmi otomatik olarak kırmızı spektrum kanalına dönüştürülecektir.
  3. Plasentanın maternal tarafının farklı renk yoğunluğunun görsel muayenesi yoluyla polisitemik ve anemik ikizlerin pletorik ve soluk plasental payını sırasıyla konturlamak için "Serbest el seçimleri"ne tıklayın.
  4. "Analiz Et"e tıklayın | "Histogram". Sırasıyla bol miktarda alanı veya soluk alanı seçtikten sonra renk yoğunluğu histogramını elde edin. Yoğunluk histogramında görüntülenen mod, seçilen plasental alanda en çok bulunan rengi temsil eder.
  5. Anemik ikizin renk yoğunluğu modunu polisitemik ikizin renk yoğunluğu moduna bölerek renk farkı oranını hesaplayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Plasenta muayenesi TAPS tanısı için değerli bilgiler sağlar. TAPS plasentaları az sayıda küçük vasküler anastomoz1 varlığı ile karakterizedir (Şekil 1, Şekil 2). TAPS plasentaların bu özelliği TAPS'ın patogenezi ile ilişkilidir ve postnatal bir tanı kriteridir. Doğumdaki yenidoğanların rengine benzer şekilde, TAPS'taki alıcı ikizin plasenta payı tipik olarak koyu ve pletoriktir ve donör ikizin plasenta payı soluk ve anemiktir (

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deneyimlerimize dayanarak optimal bir muayeneye ulaşmanın kilit noktaları şunları içerir: 1) özellikle elle çıkarma endike olduğunda, hasarı önlemek için plasentanın mümkün olduğunca nazikçe verilmesi; 2) yapışkan pıhtı oluşumunu önlemek için doğumdan hemen sonra MC plasentalarının incelenmesi (tercihen birkaç gün içinde); 3) plasenta loblarına zarar vermekten kaçınarak tüm kan pıhtılarının nazikçe çıkarılması; 4) MC plasentalarının maternal tarafının tek tip ışık koşullarına maruz kalma...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe numarası: 81801465), Shenzhen'deki Sanming Tıp Projesi (Hibe numarası: SZSM201512012) ve Çin Ulusal Anahtar Araştırma ve Geliştirme Programı (Hibe numarası: 2018YFC1002900) tarafından finanse edilmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler





Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
20 ml şırıngaBD Plastipak300613
Renk boyasıRoyal Talens Schoolverf36716010 (mavi); 36715010 (yeşil); 36712350 (sarı); 36713570 (pembe)
Dijital fotoğraf makinesiCanon Inc.64
ImageJSağlık Enstitüsü
bit Java 1.8.0_112 Umbilikal kateterlerle birlikte gelen Windows ImageJ için ixus 125 hs Ulusal Vygon 1270.08 (8 F) 1270.08 (5 F) 1270.04 (4 F) 1270.03 (3.5 F) 1270.02 (2.5 F)

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lopriore, E., et al. Twin anemia-polycythemia sequence in two monochorionic twin pairs without oligo-polyhydramnios sequence. Placenta. 28 (1), 47-51 (2007).
  2. Zhao, D., et al. Placental share and hemoglobin level in relation to birth weight in twin anemia-polycythemia sequence. Placenta. 35 (12), 1070-1074 (2014).
  3. Lopriore, E., et al. Assessment of feto-fetal transfusion flow through placental arterio-venous anastomoses in a unique case of twin-to-twin transfusion syndrome. Placenta. 28 (2-3), 209-211 (2007).
  4. Lopriore, E., et al. Quantification of feto-fetal transfusion rate through a single placental arterio-venous anastomosis in a monochorionic twin pregnancy. Placenta. 30 (3), 223-225 (2009).
  5. Tollenaar, L. S. A., et al. Improved prediction of twin anemia-polycythemia sequence by delta middle cerebral artery peak systolic velocity: new antenatal classification system. Ultrasound in Obstetrics and Gynecology. 53 (6), 788-793 (2019).
  6. Tollenaar, L. S., et al. Color Difference in Placentas with Twin Anemia-Polycythemia Sequence: An Additional Diagnostic Criterion. Fetal Diagnosis and Therapy. 40 (2), 123-127 (2016).
  7. Zhao, D. P., et al. Prevalence, size, number and localization of vascular anastomoses in monochorionic placentas. Placenta. 34 (7), 589-593 (2013).
  8. De Paepe, M. E., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations. Pediatric and Developmental Pathology. 5 (1), 37-44 (2002).
  9. Lewi, L., et al. Placental sharing, birthweight discordance, and vascular anastomoses in monochorionic diamniotic twin placentas. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 197 (6), 581-588 (2007).
  10. Robertson, E. G., Neer, K. J. Placental injection studies in twin gestation. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 147 (2), 170-174 (1983).
  11. Lewi, L., et al. The outcome of monochorionic diamniotic twin gestations in the era of invasive fetal therapy: a prospective cohort study. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 199 (5), (2008).
  12. Slaghekke, F., et al. Fetoscopic laser coagulation of the vascular equator versus selective coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: an open-label randomised controlled trial. Lancet. 383 (9935), 2144-2151 (2014).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Plasental Renk AnaliziImageJ Yaz l mRenk Fark l mPlasentan n Maternal TarafTAPS Tan sPlasental ncelemeBilgisayar Tabanl l mRenk Yo unlu u AnaliziPlasental B lgeler
Video yakında

İlgili makaleler