Kritik Ekstre İskemisi Olan Anjiyoplasti Tedavisi Gören Hastalarda Lokal Dolaşımdaki Mononükleer Progenitör Hücreler Kullanılarak Amputasyonun Tahmin Edilmesi

Summary

Kritik Uzuv İskemisinde (CLI) tıkalı damarların anjiyoplastiden sonra bile alt eksüda amputasyonu oluşabilir. Mononükleer Progenitör Hücreler (MPC' ler) vasküler onarımı yansıtır. Mevcut protokol, MPC'lerin anjiyoplastiye yakın dolaşımdan nicelliğini ve endotel disfonksiyonu ile ilişkisini ve alt ektremite amputasyonunu tahmin etmeyi açıklamaktadır.

Abstract

Kritik uzuv iskemisi (CLI), periferik arteriyel hastalığın ileri evresini temsil eder. Anjiyoplasti alt ekstuziteye kan akışını iyileştirir; bununla birlikte, bazı hastalar geri dönüşümsüz olarak uzuv amputasyonuna ilerler. Vasküler hasarın boyutu ve damar onarım mekanizmaları anjiyoplasti sonrası sonucu etkileyen faktörlerdir. Mononükleer Progenitör Hücreler (MPC'ler) damar hasarlarına ve onarımına, damar hastalıklarını yansıtma yeteneğine sahiptir. Mevcut protokol, anjiyoplasti bölgesine yakın damardan kan dolaşımından elde edilen MPC'lerin nicelliğinin yanı sıra endotel disfonksiyonu ile ilişkisini ve CLI'li hastalarda anjiyoplastiden sonraki 30 gün içinde uzuv amputasyonu için tahmin yeteneğini açıklamaktadır.

Introduction

Periferik Arteriyel Hastalık (PAD), kan akışının sınırlandırılması ile kronik ve ilerleyici bir damar tıkanıklığı ile karakterizedir¹. Küresel ölçekte, alt uzuvların PAD'i yaşlı nüfusun yaklaşık% 10'unu etkilerken, bu tür vakaların% 7'sine kadar uzuv amputasyon^2,3.

Kritik Uzuv İskemisi (CLI), PAD^1'inen ciddi sunumunun temsilini temsil eder. Hastalar genellikle tıkalı arterlere atfedilebilecek istirahat, ülser veya kangren ağrısı yaşarlar; klinik prognoz elverişsiz iken ve 1 yıl boyunca% 30 uzuv amputasyon ve mortalite riski ile işaretl....

Protocol

Centro Médico Nacional "20 de Noviembre" ISSSTE'den kurumsal araştırma etik komitesi bu olası protokolü onayladı, tüm kayıtlı hastalar yazılı bilgilendirilmiş onay verdi.

1. Alt ektremite vasküler bloğun değerlendirilmesi, kan örneklemesi ve balon anjiyoplasti

NOT: Bu deney için kullanılan çalışma örneği, 68 yaşında ve 20 hastadan 10'unun erkek olduğu 20 diyabet hastasından oluşmaktadır. Örneğin yarısı sigara içenlerdi ve en yaygın ko-morbiditeler tip 2 diabetes mellitus, sistemik arteriyel hipertansiyon ve/veya dislipidemiydi. Örneklem yaş, cinsiyet ve yandaş hastalık için standart hale getirilmiştir. MPC'ler ve C....

Results

Tıkalı arterlerden alınan kan örnekleri, anjiyoplasti için ele alınan yerde, 68 yaşında ve 20 hastadan 10'unun erkek olduğu 20 diyabet hastasından alındı. Örneklem nüfusunun yarısı sigara içenlerdi. Vasküler lezyonlar esas olarak Rutherford sınıf VI olarak puanlandı; hastalar tip 2 Diabetes Mellitus (0), hipertansiyon (p) prevalansı daha yüksekti. ve dislipidemi (U).

Alt ektremite anjiyoplasti sonrası 30 günlük klinik takip yapıldı. Anjiyoplasti sonrası taban çizgisi veya dinamiklerdeki MPC al.......

Discussion

Damar bloğunun hassas yerinde kan toplanması teknik zorluklar gösterebilir; bu nedenle damar bloğuna yakın bir yerde kan alma işlemi gerçekleştirdik. Aynı şekilde, vasküler plaklara yakın MPC miktarı oldukça dinamik görünmektedir ve anjiyoplasti öncesi ve sonrası varyasyonlara neden olabilir. Gözlemlerimize göre, vasküler hasar ve onarımda meydana gelen çeşitli patofizyolojik süreçleri yansıtabileceğinden, MPC sayısındaki taban çizgisi ve 30 dakika sonrası anjiyoplasti değişikliklerinin değerlendirilmesi önerilir.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
BSA	Roche	,	tamponlama maddesi, stabilizatör, standart ve karıştırma için Sığır Serum Albüminini (BSA) 10735086001.
Kalibrasyon Boncukları	Miltenyi Biotec / MACS	# 130-093-607	MACQuant kalibrasyon boncukları,% 0.05 sodyum azid içeren sulu çözelti içinde sağlanır. 100 teste kadar 3,5 ml
CD133 / 1 (AC133) -PE	Milteny Biotec / MACS	# 130-080-801	içinde R-Fikoeritrin'e konjuge antikor
	Miltenyi Biotec / MACS	# 130-103-798	Monoklonal, İzotip rekombinant insan IgG1, konjuge
CD309 (VEGFR-2 / KDR) -APC	Miltenyi Biotec / MACS	# 130-093-601	PBS / EDTA tamponu CD34-FITC'de R-Fikoeritrin'e konjuge antikor
	Miltenyi Biotec / MACS	# 130-081-001	Monoklonal antikor klonu AC136, CD34
CD45- VioBlue	Miltenyi Biotec / MACS	# 130-092-880'in	sınıf III epitopunu tespit ederMonoklonal CD45 Antikoru, insan konjuge
Konik Tüpler	Thermo SCIENTIFIC	# 339651	15ml konik santrifüj tüpleri
Sitometri Tüpleri	FALCON Corning Marka	# 352052	5 mL Polistiren Yuvarlak Tabanlı Tüp. 12x75 tarzı. Steril.
EDTA	BIO-RAD	#161-0729	Ağır metaller, (Pb olarak) < 10 ppm, Fe< 0.01%, As< 1ppm, çözünmezler< 0.005
% Geliştirilmiş Neubauer	Markasız	Katalog numarası olmadan	Hücre sayımı için hemositometre. (aralık 0.1000mm, 0.0025mm2)
K2 EDTA Kan Alma Tüpleri	BD Vacutainer	# 367863	Leylak plastik vakum tüpü (K2E) 10.8mg, 6 mL.
Lymphoprep	Kök Hücre Teknolojileri	01-63-12-002-A	Steril ve endotoksinlerin varlığı kontrol edilir. Yoğunluk: 1.077 & plusmn; 0.001g/mL
Paraformaldehit	SIGMA-ALDRICH		Biyolojik numunelerin fiksasyonu, (toz, %95)
Pipet Transferi 1,3 mL	CRM Globe	PF1016, PF1015	Transfer pipeti, sıvı transferini daha yüksek doğrulukla kolaylaştıran bir araçtır.
Test Tüpleri	KIMBLE CHASE	45060 13100	Isıya dayanıklı test tüpleri. BOYUT/KAPAK 13 x 100 mm