Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kronik Stres Shifts Çabalar-İlgili Seçim Davranış Farelerde Bir Y-Labirent Bariyer Görev

11.4K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/61548

⸱

13 Ağustos 2020

 ,  , 
1Department of Psychology, Behavioral and Systems Neuroscience Area, The State University of New Jersey, 2Graduate Program in Neuroscience, Rutgers, The State University of New Jersey

Bu makalede

Özet

Y-labirent bariyer görevi ödül için çaba harcamak için motivasyon inceleyen bir davranış testidir. Burada, kronik kortikosteron ve bu davranış ile sosyal yenilgi stres idestmesi de dahil olmak üzere birden fazla iyi doğrulanmış kronik stres test tartışmak, yanı sıra yeni kronik non-ayrımcı sosyal yenilgi stres (CNSDS), hangi kadınlarda etkilidir.

Özet

Duygudurum bozuklukları, majör depresif bozukluk da dahil olmak üzere, kronik stres tarafından çökelti olabilir. Y-labirent bariyer görevi çaba harcamak ve ödül elde etmek için motivasyon ölçer bir çaba ile ilgili seçim testidir. Farelerde, kronik strese maruz kalma, daha düşük bir değer ödülü stressiz farelere göre serbestçe kullanılabilir olduğunda daha yüksek bir değer ödülü için çalışmak için motivasyonu önemli ölçüde etkiler. Burada kronik kortikosteron uygulama paradigması tarif, hangi Y-labirent bariyer görev de çabalı yanıt bir kayma üretir. Y-labirent görevinde, bir kol 4 gıda peleti, diğer kolise sadece 2 pelet içerir. Fareler yüksek ödül kolunu seçmeyi öğrendikten sonra, giderek artan yüksekliğe sahip bariyerler birden fazla test oturumu boyunca yüksek ödül koluna sokular. Ne yazık ki, en kronik stres paradigmaları (kortikosteron ve sosyal yenilgi dahil) erkek farelerde geliştirilmiştir ve kadın farelerde daha az etkilidir. Bu nedenle, biz de kronik ayrımcı olmayan sosyal yenilgi stres (CNSDS), biz hem erkek hem de kadın farelerde etkili bir stres paradigması geliştirdi tartışmak. Erkek ve dişi farelerde birden fazla farklı kronik stres içeren sonuçları ve çevirisel olarak ilgili davranış görevlerinin artan kullanımı ile birlikte tekrarlanan sonuçlar, kronik stresin duygudurum bozukluklarına nasıl çökebileceğini niçin hızlandırabileceğini niçin daha iyi anlamanızı sağlayacaktır.

Giriş

Depresyon ve anksiyete gibi duygudurum bozuklukları günümüz toplumunda son derece yaygındır. Çalışma onlarca sürekli gelişmiş tedaviler ve ilgili kemirgen modelleri için bu karmaşık bozukluklar1çalışma için aradı. Kronik stres depresyon gibi duygudurum bozuklukları için katkıda bulunan bir faktördür2. Bu nedenle, kronik sosyal yenilgi stresi (SDS) ve kronik kortikosteron uygulaması (CORT) gibi kronik stres paradigmaları erkek farelerde geliştirilmiştir ve günümüzde kronik strese maruz kalmanın nörobiyolojik ve davranışsal etkilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Kronik stres etkilerini değerlendirmek için en yaygın olarak kullanılan davranıştestleri, yüksek artı labirent, açık alan ve yenilik bastırılmış beslenme gibi kaçınma davranışı ile ilişkili görevleri içerir, ya da antidepresan etkinliği ile, zorunlu yüzme testi gibi. Ancak, kemirgenler bu davranışlar tartışmasız yüz eksikliği ve daha da önemlisi, depresyon gibi insan bozuklukları için tahmine dayalı geçerlilik ve çevirisel alaka.

Popüler bir kronik stres paradigması, kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS), sakaroztercihi3 gibi davranışlar kullanılarak kapsamlı olarak doğrulanmıştır. CUMS suya göre % 1 sakaroz çözeltisi tercihini azaltır ve tarihsel olarak anhedoni ile ilgili davranış4,5olarak yorumlanır. Ancak, sakaroz tercihinde bu azalma majör depresif bozukluğu olan insanlarda gözlenmez6,7. Buna ek olarak, sakaroz tercihi çabalı ödül motivasyon uyruk çalışması için izin vermez.

Son zamanlarda, bazı araştırmalar motivasyon ve ödül 88,9ile ilişkili diğer davranışlara odak kaymıştır. Göreceli olarak benzer davranış değerlendirmeleri hem insanlarda hem de kemirgenlerde yapılabildiği için bu görevlerin çeviri değeri umut vericidir. Burada, CORT ve SDS paradigmalarını ve bunların etkilerini ödül için çaba sarf etme motivasyonu ölçen Y-labirent bariyeri davranışsal görevinde tanımlıyoruz. Daha sonra geliştirdiğimiz yeni bir kronik stres paradigması tartışmak, kronik ayrımcı olmayan sosyal yenilgi stres (CNSDS), hem erkek hem de kadın farelerde etkilidir.

Kronik kortikosteron uygulaması (CORT) gerçek stresmaruzkalma olmadan kronik stres taklit etmek için tasarlanmış bir paradigmadır. İnsanlarda adrenal steroid kortizol endojen salınımı stres sonuçları ile hipotalamus-hipofiz-adrenal eksen aktivasyonu10,11,12 ve farelerde kortizosteron13,14. En az 4 hafta boyunca yetişkin erkek farelerin içme suyu ile kortikosteron teslim açık alan gibi kaçınma görevleri uyumsuz davranışsal tepkiler sonuçları, yüksek artı labirent, ve yenilik bastırılmış besleme10,11,12,13,14,15,16. İlginçtir, CORT da enstrümantalgörevlerdeödül işleme etkiler 16,17,18,19. Burada açıklanan CORT paradigması 100 ng/mL CORT'un altında tutarlı bir serum konsantrasyonu üretir, bu da zorunlu yüzme gibi akut bir stres kaynağıtarafından üretilenden beş kat daha azdır15. Bu nedenle, kronik CORT uygulaması hiperkortizomi neden olası değildir. Kronik CORT sadece erkek farelerde etkili iken20,biz son zamanlarda y-labirent bariyer görev21çabalı yanıt sağlam bir değişim üretir gösterdi. Bilgimiz için, bu erkek farelerde bir çaba ile ilgili seçim davranışı üzerinde kronik stresin etkilerini incelemek için ilk çalışmalardan biriydi21. Bir önceki çalışmada ilk sıçanlarda çaba tabanlı karar verme üzerinde akut kısıtlama stresetkisini gösterdi22. Eforla ilgili seçim davranışlarında, bir hayvan ya yüksek değerli bir ödül için çaba sarf etmeyi ya da daha serbestçe kullanılabilen daha düşük değerli bir ödülü kabul etmeyi seçer. İnsanlarda, ödül görevi (EEfRT) için çaba harcaması, farelerde eforla ilgili seçim görevlerine benzetilebilmek için geliştirilmiş bir bilgisayar oyunudur23. Depresyon EEfRT'de uyumsuz tepkilere yol açar (yüksek değerli ödüller için zor görevleri seçme olasılığı azalır). Bu nedenle, kemirgenlerde efor ile ilgili seçim görevleri özellikle çeviri alaka nedeniyle ilginçtir.

Kronik sosyal yenilgi stresi (SDS) erkek farelerde daha yaygın olarak kullanılan preklinik stres modellerinden biridir. Bu 10 günlük bir protokol nerede büyük, agresif emekli yetiştirici CD-1 erkek saldırı deneysel fareler, genellikle C57BL/6J, 5 dakika günlük oturumları24. Bu deneysel farelerin bir alt kümesinde sağlam bir uyumsuz davranışsal fenotip üretir. Bir sosyal etkileşim testi yenilgi strese dirençli veya duyarlı popülasyonlar içine fareler tabakalaşmak için kullanılır, ve çeşitli çalışmalar stres güven ve duyarlılık altında yatan moleküler ve nöral devre mekanizmaları araştırmak için SDS bu benzersiz karakteristik kullandık. Burada CORT paradigmasının ayrıntılarını ve Y-labirent bariyeri davranış görevi için uygulanmasını açıklıyoruz. Ayrıca Y-labirent bariyer görevinde SDS etkilerini tartışıyoruz. Y-labirent bariyer görevi Labirent8,,9,25iki kolda mevcut yüksek veya düşük ödüller için çaba harcamak için motivasyon ölçmek için öncelikle sıçanlarda kullanılan T-labirent bariyergörevi,dayanmaktadır. Bu görev aynı zamanda farelerde kafein veya dopamin antagonistleri uygulanan farelerde çabayla yanıt çalışması için uygulanmıştır26. Kemirgenler ya daha yüksek bir ödül değeri için labirentin bir kolunda giderek artan yükseklik bariyerleri tırmanarak daha fazla çaba harcayabilirsiniz, genellikle 4 ödül pelet, ya da sadece almak için labirentin diğer kolunda önemli ölçüde daha az çaba harcamak9. 10 günlük sosyal yenilgi paradigmaları yaklaşık 30 gün süren duyarlı farelerde sağlam bir uyumsuz fenotip üretmek, bu yüzden daha hızlı tren ve test hayvanları için bu 30 günlük zaman dilimi24tüm deneyleri tamamlamak için Y-labirent bariyer görevi modifiye . Bu nedenle, burada da kronik strese maruz farelerde ödül için çaba harcamak için motivasyon ölçmek için yoğunlaştırılmış eğitim oturumları ve tek bariyer test oturumları içeren bir Y-labirent bariyer davranışsal görev protokolü detay.

Ne yazık ki, hem kronik kortikosteron ve kronik sosyal yenilgi stres erkek farelerde geliştirilmiştir ve kadın farelerde daha az etkilidir. Kadınlar depresyon1gibi duygudurum bozuklukları tanısı için erkeklere göre daha olasıdır gibi bu son derece sorunlu . SDS akıllı adaptasyonlar kadın farelerde kullanım izin var ama zor ameliyatlar veya sıkıcı idrar toplama gerektiren26,,27. Yakın zamanda SDS paradigmasında kronik ayrımcı olmayan sosyal yenilgi stresi (CNSDS) adı verilen basit bir değişiklik tanımladık. CNSDS hem deneysel erkek hem de dişi farelerin duyarlı ve dirençli tabakalaşmasını sağlar28. CNSDS'ye maruz kalan hem dişi hem de erkek duyarlı fareler, yüksek artı labirentte ve açık alanda merkezde açık kollardan kaçınmanın arttığını gösterir ve yenilik bastırılmış beslenmede yemek için gecikme nin arttığını gösterir. CNSDS ayrıca, her iki cins inyenilgi seanslarında birleştiğinden, SDS'deki diğer değişikliklere göre daha etkilidir. Bu, protokolü tamamlamak için gereken zaman ve çabada ilişkili bir artış olmaksızın deneysel farelerin veriminin artmasına neden olabilir. Bu nedenle, bu el yazması son zamanlarda geliştirilen kronik stres paradigmasının derinlemesine bir sunumu ile sonuçlandırır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu deneyler NIH laboratuvar hayvan bakım yönergelerine uygun olarak yürütülmüş ve Rutgers Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.

1. Kronik kortizon (CORT)

  1. Fareleri tedavi gruplarına rastgele atayın. Yetişkin erkek C57BL/6J fareleri rastgele Araç ve Kortizon (CORT) gruplarına ayırın.
    1. Ev araç fareler farklı kafeslerde, ve cort fareler diğerlerinde, onların tedavi kafesin su şişesi ile teslim olarak.
    2. Hayvan bakım personeline su şişelerinin deney için gerekli çözümleri içerdiğini belirten kafese yerleştirmek için özel su kartlarını etiketleyin.
  2. 3.375 g beta-siklodekstrini 750 mL musluk suyuna 1 L vidalı cam kapta eriterek araç çözümü yapın.
    1. Araç kafesi su şişelerini bu çözelti ile doldurun. Şişenin sıvı tüketimini ölçmek için sızdırmaz olduğundan emin olun.
    2. Kabı etiketleyin ve laboratuvardaki rafta oda sıcaklığında saklayın. Yaklaşık 1 hafta boyunca kafes şişeleri doldurmak için araç çözeltisi kullanın.
    3. Hafta boyunca araç şişelerini doldurun. Gerektiğinde kafes şişeleri hafta boyunca 1x-2x doldurun. Hafta başında veya sonunda haftada 1x taze bir şişeye değiştirin.
      NOT: Bir hafta sonra, beta-siklodekstrin su şişesinin içini kaplamaya başlar ve çözeltiyi bulutlu yapar.
    4. Haftada iki kez tüketilen sıvı miktarını izleyin ve kaydedin. Her ilgili şişe ve kayıt tartMak, herhangi bir sıvı dökmek için dikkatli. Her şişeyi doldurun ve iade edin.
      NOT: 5 fareden oluşan bir kafes 3-4 gün içinde 80-120 mL sıvı içer.
  3. İlk olarak 3,375 g beta-siklodekstrini 750 mL musluk suyuna 1 L vidalı cam kapta eriterek CORT çözeltisi yapın. Sonra kortikosteron 26.25 mg ekleyin.
    1. CORT'u suya eritmek için sonicate CORT çözeltisi. Bir ultrasonik temiz su banyosu içinde konteyner yerleştirin. Sonicate 40 kHz yaklaşık 30 dakika veya kortikosteron çözülmüş ve sıvı açık görünene kadar.
      NOT: Ultrasonik homogenizers (uç tarzı) da CORT eritmek için etkilidir.
    2. Tüm CORT kafesleri için su şişelerini çözelti ile doldurun. Etiket konteyner ve laboratuarda rafta oda sıcaklığında saklayın. CORT çözeltisi kafes şişelerini yaklaşık 1 hafta boyunca doldurmak için kullanılabilir.
      NOT: CORT ışığa duyarlı olduğundan kahverengi cam su şişeleri veya plastik opak şişeler kullanın.
    3. Haftada iki kez tüketilen sıvı miktarını izleyin ve kaydedin. Tüketilen sıvıyı her kafesteki farelerin ağırlığıyla karşılaştırmak için tüm araç ve CORT farelerini haftalık olarak tartın.
    4. Tüketilen sıvının hacmini belirlemek için (mL/g/gün), aşağıdaki denklemi kullanın:
      (Hacim kafesi son 3-4 gün içinde içti) / (Kafesteki farelerin ortalama vücut ağırlığı) Araç veya CORT şişesinin yeniden doldurulduğu günden bu yana X gün sayısı)
      NOT: Ortalama bir n=5 yetişkin erkek C57BL/6J fare kafesi ortalama 0,25 – 0,30 mg/g/gün tüketir ve bu kafes genellikle reklam libitum ve gıdadan yoksun zaman dilimleri ile tutarlı kalır. Bu konsantrasyonlar yaklaşık 24 mg/kg/gün beta-siklodekstrin ve 9.5 mg/kg/gün CORT15,16dozile sonuçlanır.
  4. Sosyal Yenilgi Stres (SDS)
    1. Başka bir yerde derinlemesine açıklandığı gibi standart sosyal yenilgi stres protokolleri kullanın24,29.
  5. Y-Labirent bariyer görevi
    1. Y-labirent bariyer görevi için gıda yoksunluğu
      1. Sosyal etkileşim testini tamamladıktan bir gün sonra, tüm Kontrol ve Deneysel fareleri tartın. Bu onların serbest beslenme vücut ağırlığı olacak.
        NOT: Burada, "Control" ve "Experimental" gibi SDS Control ve SDS Deneysel fareleri ve ilgili SDS ve CORT paradigmalarında Araç ve CORT uygulanan fareleri ifade etmek için kullanırız.
      2. Fareleri yemekten mahrum etmek için, her kafesin C57BL/6J tarafındaki laboratuvar chow'u çıkarın.
      3. Test boyunca vücut ağırlığının yaklaşık %90'ını serbest beslenme ağırlığında düzgün bir şekilde korumak için, tüm fareleri ve günlük verilecek laboratuvar kabı miktarını tartın.
        NOT: Her fare veya farenin ev kafesinde teslim edilen yiyecek miktarı, vücut ağırlığının dalgalanmasına ve Y-labirentinde her gün tüketilen ödül peletmiktarına bağlıdır.
      4. Ödül peletleri ile aşinalık kurmak. Ev kafesine 20 mg tahıl bazlı gıda peleti (Bio-Serv) küçük bir kepçe boşaltın. Bu pelet aşina kurmak ve alışkanlıkları ve ilk eğitim oturumları Y-labirent onları tüketmek için fareler motive edecektir.
  6. Y-labirent aparatı
    1. Opak beyaz 3/16" genişlikpleksiglas bir Y-labirent yapısı inşa, üç kol uzunluğu 26 cm, yüksekliği 20 cm ve 7 cm genişliğinde ölçme.
    2. Bir araştırmacının farelerin ilk yerleştirildiği başlangıç kutusunu kapatmasına veya Fareyi Y-labirentin in sol veya sağ kollarına girip girdikten sonra her iki kola da sokmasına olanak sağlamak için Y-labirentindeki yuvalar arasında kaydıran bölücüleri kullanın.
    3. Birden fazla 10, 15 ve 20 cm boyunda Y-labirent bariyerler dikey tarafı için tel örgü dışında oluşturun ve pleksiglas ile yaklaşık 45 ° açıyla arka açılı tarafında. Bu, C57BL/6J farelerin her bariyerin dikey tel örgü tarafını kavramasına ve tırmanmasına ve bariyerin açılı Pleksiglas tarafına geçmesine olanak tanır.
      1. Daha fazla çekiş sağlamak için açılı tarafında ince adımlar ekleyin.
  7. Y-labirent alışkanlığı
    1. Tüm Kontrol ve Deneysel fareleri Y-labirent aparatlarına alışın.
      1. Gıda yoksunluğunun ertesi günü, 50 mL'lik bir santrifüj tüpünün kapağına çok sayıda 20 mg tane bazlı gıda peleti (örneğin Bio-Serv) yerleştirin ve Y-labirentin her kolunun uçlarında yer inizi yerleştirin. Bu kapaklar fareler için küçük gıda kapları olarak hizmet, ve fareler kolayca gıda pelet yemek öğreneceksiniz.
      2. Her fareyi y-labirentin başlangıç kutusuna yerleştirin ve başlangıç kutusu bölücüyü yerleştirin.
      3. Birkaç saniye sonra, her fare 15 dakika boyunca Y-labirent keşfetmek için izin, bölücü kaldırın. Bu süre, farenin labirentin tüm kollarını yeterince keşfetmesini ve aparatlara aşinalık kurmasını sağlar.
        NOT: Bazı fareler bu ilk alışma gününde herhangi bir gıda peleti tüketmeyebilir.
    2. Ertesi gün, aynı prosedürü kullanarak ikinci bir 15 dk Y-labirent alışkanlığı tamamlayın.
      1. Herhangi bir pelet yemiş değil herhangi bir fareler unutmayın. Bu fareler için, ev kafeslerine bir kepçe daha at.
  8. Y-labirent zorunlu seçim eğitimi
    1. Her fare için yüksek ödül (HR) ve düşük ödül (LR) kolunu belirleyin.
      1. Hem Kontrol hem de Deneysel gruplardaki fareleri rastgele yüksek ödül (HR) kolu ve sağ kolu düşük ödül (LR) kol olarak veya tam tersi olarak atayın. Böylece, 4 pelet sol her denemede mevcut olacak, İk kolu, ve 2 pelet sağ kullanılabilir, LR kol, veya tersi.
      2. Bu tanımlanan LR ve İk kollarını hem Kontrol hem de Deney grubunda dengeleyin, böylece her grubun yaklaşık yarısı İk kolu olarak sol kola, yarısı da İk kolu olarak sağ kola sahipti.
    2. Zorunlu seçim denemeleri
      1. Y-labirent alışkanlığı 2 gün sonra, fareler zorla seçim eğitimi 10 denemeler 3 gün başlar.
      2. Her zorunlu seçim denemesi için fareyi başlangıç kutusuna yerleştirin ve ardından farenin 60 s'nin sol veya sağ kola girmesine ve kullanılabilir peletleri tüketmesine izin vererek bölücüyü çıkarın. Her zorla seçim deneme bloğu için bölücü ile karşı kol kapalı, fare diğer kolu seçmek zorunda. İk zorunlu seçim denemesi için LR koluna erişimi engelleyin veya tam tersi.
      3. Denemeden sonra fareyi çıkarın ve yenen ilgili peletleri yenin.
      4. Farelerin 5 HR ve 5 LR zorunlu seçim denemelerini tamamlaması için her fare için her eğitim günü için alternatif zorunlu seçim denemeleri.
        NOT: Zorunlu seçim denemeleri fareleri bir kolunu daha yüksek ödülle, diğerini ise daha düşük ödülle ilişkilendirmek için eğitilir.
      5. Fareyi kendi kafesine geri yerleştirin ve her fare için 5 dk'lık bir deneme arası aralık tutmak için en fazla 3-5 sonraki fareyi çalıştırın.
  9. Y-labirent serbest seçim eğitimi
    1. Ücretsiz seçim denemeleri
      1. Her serbest seçim oturumuna bir İk ve LR kol zorla seçim denemesi ile başlayın. Böylece, fareler 10 serbest seçim denemelerbaşlamadan önce her kol içine zorla deneyimli olacak.
      2. Her fareyi başlangıç kutusuna yerleştirin ve bölücüyü çıkarın. Fare bir kol seçip peletleri içeren bardağın bulunduğu ucuna doğru iletildikten sonra, kol bölücüyü o tarafa yerleştirin ve peletleri tüketene kadar fareyi kilitleyin.
      3. Fareyi ev kafesine geri çıkarın ve bu döngüde kullanılan sonraki 3-5 fareyi çalıştırarak 5 dk deneme arası bir aralık bekleyin.
    2. Aşağıdaki verileri kaydedin: Bir kol seçmek için gecikme, kol seçimi ve pelet fincan ulaşmak için gecikme.
      1. Farenin hangi kola girdiğini ve pelet bardağına tam olarak geçtiği kaydedin. Ayrıca bu kolu seçmek ve pelet fincan ulaşmak için gecikme kaydedin.
      2. Farenin bir kolu seçemediği veya 4 veya 2 peletin tümünü atlanan deneme olarak tüketmediği herhangi bir deneme yi göz önünde bulundurun.
    3. %70 serbest seçim kriteri
      1. Günlük 10 ücretsiz deneme için hangi kolun seçildiğini kaydedin.
      2. Bir fare, ücretsiz bir eğitim gününde 10 denemenin 7'sinde İk kolunu seçtikten sonra (%70 ölçüt), fareyi bariyer test oturumlarına taşıyın.
        NOT: Tüm fareler İk ve LR kollarında yeterli ayrımcılığı sağlamak ve farelerin İk koluiçin eşit tercih göstermesini sağlamak için tüm fareler %70 İk kolu kriterine ulaşana kadar serbest seçim eğitimine devam edin.
  10. Y-labirent bariyer testi
    1. 10 cm bariyer test oturumu
      1. 10 cm bariyeri İk kolunun yarısına kadar Y-labirentine yerleştirin.
      2. Her iki kol için birden fazla zorla seçme denemeleri ile başlayın. Bariyere tırmanmaya dayanıklı fareler uzun, ince pleksiglas parça ile istenebilir.
        NOT: Deneyimlerimize göre, her seansın başlangıcında yeni bir bariyer yüksekliğinde hem İk hem de LR kolları için en az 2 zorunlu seçim denemesi öneririz. Farenin gerekli olduğunda bariyerin üzerine tırmanmasını e-setetik denemelerini kaydetmenizi öneririz. Fareler genellikle 1-2 denemede, ayakta duramayacak kadar yüksek olmayan 10 cm bariyerin üzerine tırmanmayı öğrenirler. Bariyer, belirlenen İk kolu olarak karşı kolu olan fareler için diğer tarafa yerleştirilmelidir.
      3. Her fareyi başlangıç kutusuna yerleştirin, bölücüyü çıkarın ve farenin labirentten geçmesine izin verin ve İk kolundaki 10 cm bariyeri içeren 10 serbest seçim denemesi için bir kol seçin.
      4. Fare İk tarafını seçerse, daha büyük bir ödül, 4 pelet elde etmek için bariyerin üzerinden tırmanacaktır. Aksi takdirde, LR kolu seçecek ve sadece daha az ödül için labirent in zemin çapraz, 2 pelet.
      5. Seçilen kolu ve bir kol seçmek için gecikmeyi kaydedin ve tüm denemeler için pelet bardağına ulaşın. Benzer şekilde, 5 dk deneme arası aralığı korumak için, döngü başına 4-6 toplam fareler döndürün.
        NOT: Y-labirentine %70 etanol püskürtün ve her farenin arasında sürekli ve kuru silin.
    2. 15 cm bariyer test oturumu
      1. Ertesi gün yukarıdaki gibi listelenen tüm adımları tamamlamak (adım 1.10.1), ancak İk kolunda 15 cm boyunda bariyer ile.
    3. 20 cm bariyer test oturumu
      1. Ertesi gün yukarıdaki gibi listelenen tüm adımları tamamlamak (adım 1.10.1), ancak İk kolunda 20 cm yüksekliğinde bariyer ile.
        NOT: Deneyimlerinden, 20 cm bariyer yüksekliği ne kadar sds duyarlı veya CORT Deneysel farelerin çoğunluğu (ve hatta birkaç Kontrol fareleri) uzun 20 cm bariyer üzerinde tırmanmak için yeterince motive değildir gibi, LR koluna yanıtlarını kaydıracaktır. Ayrıca, pleksiglas adaptörleri y-labirent duvarların kenarlarına bu bariyerin üstünden tırmanma farelerönlemek için kullanılması gerekebilir. Deneycinin peletleri her bardakta doldurması ve her denemeden sonra fareleri çıkarması zorlaştığından, daha uzun bir Y-labirent oluşturmanızı önermiyoruz.
    4. Ödül ayrımcılık test oturumu
      1. Hem Kontrol hem de Deneysel farelerin ödül ayrımcılığının yeterli ve benzer kollarını göstermesini sağlamak için bir Ayrımcılık test oturumu gerçekleştirin.
      2. Yukarıdaki tüm adımları izleyin (adım 1.10.1) ancak LR koluna 10 cm bariyer yerleştirin. Şimdi, her iki kol da 10 cm bariyerler içerir ve fareler in üzerine tırmanmak gerekir ya 4 veya 2 pelet ödül elde etmek için.
      3. 10 denemenin tümü için gecikme sonu ve kol seçimini kaydedin.
        NOT: Fareler her iki ödül elde etmek için aynı çabayı harcamak zorunda kalacak gibi, fareler çoğu denemede İk kolunu seçmelidir. İk ve LR kolunu seçmek için gecikmeleri incelemek için, her fare için ortalama bir İk kolu gecikmesi ve ortalama bir LR kol gecikmesi hesaplayın. Daha sonra, iki yönlü karışık ANOVA kullanarak her iki kolu seçmek için gecikme yi karşılaştırın, sds ile (Control, SDS-Duyarlı, SDS-Esnek) arasındaki konular faktörü olarak, ve kol (HR kolu, LR kolu) iç konular faktörü olarak.

2. Kronik Non-Ayrımcı Sosyal Yenilgi Stres (CNSDS)

  1. CD-1 farelerinde saldırgan davranışlar için ekran
    1. 180 s veya CD-1 her iki fare saldırana kadar her CD-1 ev kafesiçine bir erkek ve bir kadın C57BL/6J fare yerleştirin. Bu C57BL6/J farelerin saf olması gerekmez ve başka deneylerde kullanılmayacaktır. Bu saldırgan tarama aşamasında, CD-1 fareler ile C57BL/6J fareler cohouse yok.
      1. Her CD-1 için her iki C57BL/6J fareye saldırmak için gecikme yi kaydedin.
      2. Toplam 3 tarama seansı dışında art arda seanslarda 60 saniye içinde hem erkek hem de dişi C57BL/6J farelere saldıran tüm CD-1 saldırganlarını seçin. Diğerleri ev kafeslerinde co-konut için kullanılabilir.
        NOT: Sosyal yenilginin önemli bir ihtarı, fiziksel saldırganlık sonucu yaralamanın varlığıdır. Tarama ve deneysel evrelerde her fare yaralar için kontrol edilmeli ve küçük deri lezyonları mevcutsa kloro-hekzane dezenfektan ile tedavi edilmelidir. 1 cm'den büyük bir yara olan herhangi bir fare deneyden çıkarılmalıdır.
  2. Fareleri kontrol ve deney gruplarına atayın.
    1. Tüm saf yetişkin erkek ve kadın C57BL/6J farelerin yanı sıra, ortak konutlarda kullanılmak üzere CD-1 erkek cd-1 yetiştiricilerinin yanı sıra ekranlı emekli erkek CD-1 yetiştiricilerini de toplayın.
      1. Yetişkin erkek ve dişi C57BL/6J farelerini kontrol veya deneysel koşullara rastgele atayın. Her erkek ve kadın CNSDS Deneysel grubundaki tüm sosyal yenilgi seansları için eşlenecektir. CNSDS Kontrol grubundaki erkek ve dişiler her gün döner.
      2. Cd-1 erkek sosyal yenilgi seanslarında kullanılmak üzere atamak veya c57BL/6J erkek ve dişi farelerher çifti için her gün alternatif olacak her seanstan sonra deneysel erkek ve kadın ile birlikte ev sahipliği yapacak.
  3. Kronik ayrımcı olmayan sosyal yenilgi stresi (CNSDS)
    1. Tüm CD-1 erkekler, CNSDS Kontrol erkek ve dişi C57BL/6J fareler ve CNSDS Deneysel erkek ve dişi C57BL/6J fareler dahil olmak üzere tüm fareleri özel sosyal yenilgi odasına getirin.
      1. C57BL/6J erkek ve kadın ile CD-1 erkek 4-6 kafesleri önünde CD-1 kafesleri ve arkasında C57BL/6J kafesleri ile hizalamak.
      2. Hangi farenin saldırıya uğradığını kafes kimliği etiketleri ile belirtin ve tüm farelerin organizasyonunu sağlamak için hangi CD-1 ile birlikte barındırılan.
        NOT: İlk gün deneylerin başlatılmasından sonra, fareler her C57BL/6J erkek ve dişi çiftin her seans için bir kafesi sola döndürecek şekilde kalan 9 yenilgi seansı için döndürülebilir. Bu her oturumda yeni CD-1'ler ile yeni bir etkileşim sağlar.
    2. CNSDS Deneysel Grup Prosedürü
      1. 5 dakika sosyal yenilgi oturumu için her CD-1 saldırgan erkek ev kafesi içine bir yetişkin erkek ve bir yetişkin kadın C57BL/6J fare yerleştirin.
      2. Hem erkek hem de kadın deneysel C57BL/6J fareler için atak gecikmesi ve sıklığı kaydı.
      3. 5 dakika sonra, erkek C57BL/6J fare ve co-housed CD-1 erkek kafesiçinde yer, açık, delikli pleksiglas bariyer ile ayrılmış çıkarın. Ayrı saldıran CD-1 ve kadın C57BL/6J fare benzer bir açık, delikli Pleksiglas bariyer ile. Alternatif ister erkek veya kadın C57BL/6J fare saldırgan CD-1 her gün ile barındırılır.
        NOT: Her günlük 5 dk etkileşimi takiben her fare 1cm'den az ise tedavi edilen yaralanmalar ve yaralar için değerlendirilir. 1 cm'den büyük herhangi bir yara farenin çıkarılması ve hemen ötenazi ile sonuçlanır. Böylece, hem erkek hem de kadın deneysel fareler 5 gün boyunca CD-1 saldırganı ile birlikte, geri kalan 5 gün boyunca ise saldırı seansında kullanılmayan yeni CD-1 ile birlikte kullanılırlar. Açık, delikli pleksiglas bariyerler fiziksel etkileşimi önler ancak seanslar arasında 24 saat içinde CD-1 saldırganı ile duyusal temas sağlar. Vajinal lavaj daha önce açıklandığı gibi her gün yenilgiden yaklaşık 30 dakika sonra tüm dişi fareler üzerinde yapılabilir28.
    3. CNSDS Kontrol Grubu Prosedürü
      1. Bir Kontrol erkek C57BL/6J fare ev kafesinde bir Kontrol kadın yerleştirin.
      2. 5 dakika sonra, ayrı fareler ve fareler arasında açık, delikli pleksiglas bölücü yerleştirin.
      3. Fareleri koloni odasına geri döndürün ve CNSDS Deneysel kafesler olarak ayrı bir rafa yerleştirin. Koloni odasında stresli farelerin koloni odasındaki diğer farelerden ayrı olarak barındırıldığı raflar belirledik. Ayrıca, saldırganlığın gerçekleştiğine tanık olan stresli olmayan farelerde de etkileri görülebilir, vekaletsosyal yenilgi paradigmalarında görüldüğü gibi30
      4. Her Denetim etkileşimi sırasında herhangi bir saldırı veya montaj davranışı not edin.
    4. Kontrol erkek ve dişi fareler geleneksel Sosyal Yenilgi Stres Kontrol gruplarında olduğu gibi sonraki günlerde yeni bir konspesifik tanıtılacaktır. CNSDS Kontrol ve Deneysel Seanslar 10 gün üst üste tamamlayın.
      1. 10. ve son Kontrol veya Deneysel CNSDS oturumunu tamamladıktan sonra, tüm fareleri bir arada barındırın ve tüm davranışsal testler boyunca bu birlikte liği koruyun. Her kafes, duyusal maruziyete izin vermek için pleksiglas bölücünün her iki tarafında ayrılan 2 fareden oluşacaktır. Kontrol fareleri diğer zıt cinsiyet kontrol fareleri ile barındırılır, deneysel fareler ise karşı cinsdeneysel fareler ile birlikte barındırılır.
      2. Her Kontrol C57BL/6J dişi,10.
      3. Son yenilgi oturumundan yaklaşık 24 saat sonra CNSDS kontrol göre yeni bir CD-1 fare ile sosyal davranışı azaltır belirlemek için standart bir sosyal etkileşim testi çalıştırın, ve stres "esnek" veya "duyarlı" fareler istratlamak için24,29.
    5. Test CNSDS Kontrol ve Deneysel erkek ve kadın fareler diğer davranışlar, Y-labirent bariyer görevi de dahil olmak üzere, ve CNSDS grubu CNSDS-Esnek ve CNSDS-Duyarlı gruplar halinde tabakalı.
  4. Sosyal etkileşim testi
    1. Sosyal Etkileşim Testi için ilk kurulum
      1. Son CNSDS yenilgi oturumundan 24 saat sonra, bir sosyal etkileşim testi yapın.
      2. CNSDS paradigmasında kullanılmayan yeni bir CD-1 erkeğinin yanı sıra, sosyal etkileşim testi yapmak için ayrı bir davranış odasına tüm eşleştirilmiş Kontrol ve Deneysel fareleri yanı sıra yeni bir CD-1 erkek alın.
      3. Özel bir bilgisayarda çalışan davranışsal izleme yazılımına (örneğin, EthoVision) bağlı bir kayıt kamerasının altına standart bir açık alan odası (75 cm x 75 cm) ayarlayın.
      4. Bir etkileşim konteynerini çevreleyen 24 cm x 24 cm'lik sosyal etkileşim bölgesi (yaklaşık 10 cm x 10 cm x 10 cm ölçülerinde küçük, delikli Pleksiglas konteyner) ile yeni bir deney ayarlayın ve bu deney, arka arkaya 2,5 dakikalık denemelerin ikincisinde, açık alanın bir duvarı boyunca yeni CD-1'i barındırır. Böylece, bir etkileşim bölgesi 7 cm genişliğinde yeni CD-1 fare barındıran konteyner çevreleyen.
    2. Sosyal Etkileşim Testi'nde fare çalıştırma
      1. CD-1 olmadan 2,5 dk deneme için her fareyi açık alanın uzak bir köşesine yerleştirin ve kayıt yazılımı programını başlatın.
        NOT: Etkileşim konteynerinin açık alanın bir duvarının ortasına yerleştirilmesi gerektiğini ve bu ilk deneme için CD-1 faresi içermediğini unutmayın.
      2. 2,5 dakika sonra fareyi ev kafesine geri alın. Açık alanı %70 etanol ile temizleyin.
      3. Yeni CD-1 erkek açık alanın bir duvarın ortasında ikinci bir delikli Pleksiglas küp içine yerleştirin.
      4. Yine, ikinci bir 2,5 dakika deneme için açık alanın köşesinde fare yerleştirin, şimdi CD-1 mevcut ile, ve kayıt yazılımı programı başlatın.
      5. Fareyi çıkarın ve ev kafesine geri yerleştirin. CD-1'i çıkarın ve ev kafesine geri yerleştirin. Açık alanı %70 etanol ile temizleyin.
    3. Kalan CNSDS Kontrol ve Deneysel fareleri çalıştırın ve Etkileşim Oranını hesaplayın.
      1. Her CNSDS Kontrolü ve Deneysel fare için hem deneme 1 hem de deneme 2'de etkileşim bölgesinde harcanan zamanı ölçmek için bu yordamı diğer tüm farelerle tekrarlayın.
      2. Etkileşim oranını hesaplamak için, aşağıdaki denklemi kullanarak, deneme 2 'de (CD-1 mevcut) sosyal etkileşim bölgesinde harcanan zamanı deneme 1 (CD-1 yok) ile karşılaştırın:
        Etkileşim oranı = (denemedeki etkileşim bölgesinde zaman 2)/(deneme1'de etkileşim bölgesinde zaman)
    4. Fareleri "CNSDS-Resilient" veya "CNSDS-Duyarlı" olarak teslif edin. Dirençli farelerin etkileşim oranı > 1.0, duyarlı farelerin ise etkileşim oranı <=1.0'dır.
      1. Y-labirent bariyer görevi veya diğer davranış testleri gibi sonraki davranışsal önlemlerde, CNSDS Deneysel fareleri bu CNSDS dirençli ve CNSDS duyarlı fenotiplerine alt-bölmek.
      2. Böylece, kadınlar için, cnsds kontrolü, CNSDS Deneysel-Dirençli ve CNSDS Deneysel-Duyarlı gruplar arasında tek yönlü ANOVAlar yapılabilir ve uygun olduğu durumlarda gruplar arasındaki farklılıkları belirlemek için post-hoc karşılaştırmaları yapılabilir.
      3. Cinsiyet farkı karşılaştırmaları için, cnsds ile iki yönlü ANOVA yürütmek (Kontrol, Esnek, Duyarlı) ve Cinsiyet (Erkek, Kadın) arasında konular faktörleri olarak. Uygun olduğunda post-hoc karşılaştırmaları kullanın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Kronik CORT 4 hafta boyunca y-labirent bariyer eğitimi ve testi(Şekil 1A)ile uygulandı. Ayrı bir kohortta, 10 günlük SDS paradigması da benzer şekilde, bu kronik stres paradigmalarının erkek farelerde eforla ilgili seçim davranışı üzerindeki etkisini belirlemek için Y-labirent bariyer görevi(Şekil 1C)eğitim ve test ile takip edilmiştir. Kronik CORT ve SDS, t-testlerinde belirlenen araç farelerine ve tSDS Kontrol farelerine göre ortalama vücut ağırlığını...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Kronik CORT paradigması içme suyunda sabit bir CORT dozu sağlarken, deneyimlerden fareler tarafından tüketilen miktarda bazı değişkenlik ler olabilir. Ayrıca, tüketim sadece toplam kafes için değerlendirilebilir, ve ortalama kafesteki fare sayısına göre alınır. Ayrıca, dökülme şişetartım, davranış testi için fareler transfer, ya da taze bir kafes e ken oluşabilir. Ancak, Araç ve CORT tüketimini izlemek, haftalarsüren tedavi ve davranış testleri boyunca hala uygulanabilir ve doğrudur. Haftada bir kez Araç veya CORT içeren...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Yazarlar Y-labirentler, bariyerler ve sosyal yenilgi kafesleri inşa için Thomas Grace teşekkür etmek istiyorum. Yazarlar Jay Lee, Karina Stech ve Prachi Srivastava veri toplama ile yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma NIMH Grant R01 MH112861 (BAS) tarafından finanse edilmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Akrilik LevhaMcMaster Carr8560K215Şeffaf, 3/16" kalınlık, 24" X 36"
Beta-siklodekstrinSigma-AldrichC4767500 mg
C57BL/6J FarelerJackson Labs000664Yetişkinler 7-8 hafta
KortikosteronSigma-AldrichC2505 veya C27840100 veya 500 mg
Erkek CD-1 FarelerCharles Nehri022"Emekli Yetiştiriciler"
PVC Akrilik LevhaMcMaster Carr8560K215Beyaz, 3/16" kalınlık, 48" X 48"
Katı Hal Ultrasonik TemizleyiciFisher ScientificFS-2840 kHz'e ulaşmalıdır
Çelik Tel KumaşMcMaster Carr9219T1431 ft X 2 ft
yaş

Kaynaklar

  1. Kessler, R. C., et al. Lifetime and 12-month prevalence of DSM-III-R psychiatric disorders in the United States. Results from the National Comorbidity Survey. Arch Gen Psychiatry. 51 (1), 8-19 (1994).
  2. Breslau, N., Davis, G. C. Chronic stress and major depression. Archives of General Psychiatry. 43 (4), 309-314 (1986).
  3. Willner, P. Chronic mild stress (CMS) revisited: consistency and behavioural-neurobiological concordance in the effects of CMS. Neuropsychobiology. 52 (2), 90-110 (2005).
  4. Monleon, S., et al. Attenuation of sucrose consumption in mice by chronic mild stress and its restoration by imipramine. Psychopharmacology (Berl). 117 (4), 453-457 (1995).
  5. Willner, P., Towell, A., Sampson, D., Sophokleous, S., Muscat, R. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its restoration by a tricyclic antidepressant. Psychopharmacology (Berl). 93 (3), 358-364 (1987).
  6. Berlin, I., Givry-Steiner, L., Lecrubier, Y., Puech, A. Measures of anhedonia and hedonic responses to sucrose in depressive and schizophrenic patients in comparison with healthy subjects. European psychiatry: the journal of the Association of European Psychiatrists. 13 (6), 303-309 (1998).
  7. Fawcett, J., Clark, D. C., Scheftner, W. A., Gibbons, R. D. Assessing Anhedonia in Psychiatric Patients: The Pleasure Scale. Archives of General Psychiatry. 40 (1), 79-84 (1983).
  8. Pardo, M., et al. Adenosine A2A receptor antagonism and genetic deletion attenuate the effects of dopamine D2 antagonism on effort-based decision making in mice. Neuropharmacology. 62 (5-6), 2068-2077 (2012).
  9. Salamone, J. D., Cousins, M. S., Bucher, S. Anhedonia or anergia? Effects of haloperidol and nucleus accumbens dopamine depletion on instrumental response selection in a T-maze cost/benefit procedure. Behav Brain Res. 65 (2), 221-229 (1994).
  10. Dienes, K. A., Hazel, N. A., Hammen, C. L. Cortisol secretion in depressed, and at-risk adults. Psychoneuroendocrinology. 38 (6), 927-940 (2013).
  11. Gotlib, I. H., Joormann, J., Minor, K. L., Hallmayer, J. HPA axis reactivity: a mechanism underlying the associations among 5-HTTLPR, stress, and depression. Biol Psychiatry. 63 (9), 847-851 (2008).
  12. Knorr, U., Vinberg, M., Kessing, L. V., Wetterslev, J. Salivary cortisol in depressed patients versus control persons: a systematic review and meta-analysis. Psychoneuroendocrinology. 35 (9), 1275-1286 (2010).
  13. Joels, M., Karst, H., Sarabdjitsingh, R. A. The stressed brain of humans and rodents. Acta Physiol (Oxf). 223 (2), 13066(2018).
  14. Samuels, B. A., et al. Modeling treatment-resistant depression. Neuropharmacology. 61 (3), 408-413 (2011).
  15. David, D. J., et al. Neurogenesis-dependent and-independent effects of fluoxetine in an animal model of anxiety/depression. Neuron. 62 (4), 479-493 (2009).
  16. Dieterich, A., et al. Chronic corticosterone administration induces negative valence and impairs positive valence behaviors in mice. Translational psychiatry. 9 (1), 1-13 (2019).
  17. Gourley, S. L., Taylor, J. R. Recapitulation and reversal of a persistent depression-like syndrome in rodents. Current Protocols in Neuroscience. 49 (1), 31-39 (2009).
  18. Gourley, S. L., et al. Regionally specific regulation of ERK MAP kinase in a model of antidepressant-sensitive chronic depression. Biol Psychiatry. 63 (4), 353-359 (2008).
  19. Gourley, S. L., Wu, F. J., Taylor, J. R. Corticosterone regulates pERK1/2 map kinase in a chronic depression model. Annals of the New York Academy of Sciences. 1148 (1), 509-514 (2008).
  20. Mekiri, M., Gardier, A. M., David, D. J., Guilloux, J. P. Chronic corticosterone administration effects on behavioral emotionality in female c57bl6 mice. Experimental and clinical psychopharmacology. 25 (2), 94(2017).
  21. Dieterich, A., et al. Chronic corticosterone shifts effort-related choice behavior in male mice. Psychopharmacology (Berl). , (2020).
  22. Shafiei, N., Gray, M., Viau, V., Floresco, S. B. Acute Stress Induces Selective Alterations in Cost/Benefit Decision-Making. Neuropsychopharmacology. 37 (10), 2194-2209 (2012).
  23. Treadway, M. T., Buckholtz, J. W., Schwartzman, A. N., Lambert, W. E., Zald, D. H. Worth the 'EEfRT'? The effort expenditure for rewards task as an objective measure of motivation and anhedonia. PLoS One. 4 (8), (2009).
  24. Golden, S. A., Covington, H. E., Berton, O., Russo, S. J. p. A standardized protocol for repeated social defeat stress in mice. Nature protocols. 6 (8), 1183(2011).
  25. Yohn, S. E., et al. The VMAT-2 inhibitor tetrabenazine alters effort-related decision making as measured by the T-maze barrier choice task: reversal with the adenosine A2A antagonist MSX-3 and the catecholamine uptake blocker bupropion. Psychopharmacology (Berl). 232 (7), 1313-1323 (2015).
  26. Harris, A. Z., et al. A novel method for chronic social defeat stress in female mice. Neuropsychopharmacology. 43 (6), 1276(2018).
  27. Takahashi, A., et al. Establishment of a repeated social defeat stress model in female mice. Scientific Reports. 7 (1), 1-12 (2017).
  28. Yohn, C. N., et al. Chronic non-discriminatory social defeat is an effective chronic stress paradigm for both male and female mice. Neuropsychopharmacology. 44 (13), 2220-2229 (2019).
  29. Krishnan, V., et al. Molecular adaptations underlying susceptibility and resistance to social defeat in brain reward regions. Cell. 131 (2), 391-404 (2007).
  30. Iñiguez, S. D., et al. Vicarious Social Defeat Stress Induces Depression-Related Outcomes in Female Mice. Biol Psychiatry. 83 (1), 9-17 (2018).
  31. Newman, E. L., Leonard, M. Z., Arena, D. T., de Almeida, R. M., Miczek, K. A. Social defeat stress and escalation of cocaine and alcohol consumption: Focus on CRF. Neurobiology of Stress. 9, 151-165 (2018).
  32. Nilsson, S. R., et al. Simple Behavioral Analysis (SimBA) - an open source toolkit for computer classification of complex social behaviors in experimental animals. bioRxiv. , (2020).
  33. Newman, E. L., Leonard, M. Z., Arena, D. T., de Almeida, R. M. M., Miczek, K. A. Social defeat stress and escalation of cocaine and alcohol consumption: Focus on CRF. Neurobiology of Stress. 9, 151-165 (2018).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Kortikosteron UygulamasıSosyal Yenilgi StresiGıda Ödülü MotivasyonuBariyer Yüksekliği TestiErkek Dişi FarelerKronik KortikosteronKronik Ayrım Gözetmeyen Sosyal Yenilgi Stresi
Kronik Stres Shifts Çabalar-İlgili Seçim Davranış Farelerde Bir Y-Labirent Bariyer Görev
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.