Nişaste Granül Boyutu Dağılımlarının Analizi ve Spesifikasyonu

Özet

Burada nişasta granül boyutu dağılımlarının tekrarlanabilir ve istatistiksel olarak geçerli tayinleri ve iki parametreli multiplicative form kullanılarak belirlenen granül lognormal boyut dağılımlarının belirtilmesi için bir prosedür sunulmaktadır. Bitki ve gıda bilimi araştırmaları için gram ölçekli nişasta örneklerinin tüm granül boyutlandırma analizleri için geçerlidir.

Özet

Tüm bitki kaynaklarından nişasta, farklı oluşum frekanslarına sahip, yani bir boyut ve şekil dağılımı sergileyen çeşitli boyut ve şekillerde granüllerdenoluşur. Çeşitli parçacık boyutlandırma teknikleri kullanılarak belirlenen nişasta granül boyutu verileri, granül şekillerine duyarlılık ve granül örnek boyutlarının sınırları da dahil olmak üzere bazı aşılmaz sistematik hatalardan kaynaklanan zayıf tekrarlanabilirlik veya istatistiksel önemin olmaması nedeniyle genellikle sorunludur. Elektrik algılama bölgesi tekniğini kullanarak nişasta granül boyutu dağılımlarının tekrarlanabilir ve istatistiksel olarak geçerli tayinleri ve gelişmiş doğruluk ve karşılaştırılılabilirlik ile benimsenmiş iki parametreli multiplicative form kullanarak belirlenen granül lognormal boyut dağılımlarını belirtmek için bir prosedür özetledik. Gram ölçekli nişasta örneklerinin tüm granül boyutlandırma analizleri için geçerlidir ve bu nedenle nişasta granül boyutlarının nişasta biyosentez aparatı ve mekanizmaları tarafından nasıl kalıplandırıldığı ile ilgili çalışmaları kolaylaştırabilir; ve gıda ve endüstriyel kullanımlar için nişasdaların özelliklerini ve işlevselliğini nasıl etkilediklerini. Temsili sonuçlar, özetlenen prosedür kullanılarak sweetpotato nişaste örneklerinin granül boyutu dağılımlarının çoğaltılması analizlerinden sunulur. Ayrıca, prosedürün birkaç temel teknik yönünü, özellikle granül lognormal boyut dağılımlarının multiplicative spesifikasyonunu ve granül agregaları ile sık diyafram tıkanıklığı aşmak için bazı teknik araçları tartıştık.

Giriş

Nişasta granülleri, bitki fotosentez ve saklama dokularındaki iki ana rezerv homoglucan polimerinin, doğrusal veya seyrek dallı amilozun ve yüksek dallı amilektin, lipitler ve proteinler de dahil olmak üzere bazı küçük bileşenlerle birlikte düzenli olarak paket edildiği fiziksel yapıdır. Çeşitli bitki türlerinden nişasta granülleri küreler, elipsoidler, polihedronlar, trombositler, küpler, küboidler ve düzensiz tübüller dahil olmak üzere birçok üç boyutlu (3D) şekiller(ref.¹,^2'deincelenmiştir) sergiler. Aynı dokudan veya aynı bitki türünün farklı dokularından gelenler bile, değişen oluşum frekanslarına sahip b....

Protokol

1. Nişast örneklerinin hazırlanması

1. Belirlenen prosedürleri izleyerek çeşitli bitki türlerinin nişaste biriktiren dokularından iki (veya üç) gram ölçekli çoğaltılmış nişaste örnekleri hazırlayın (örneğin, patates¹⁵, sweetpotatoes²⁸, buğday taneleri^13,29ve mısır çekirdekleri³⁰, vb.).
2. Nişaste örneklerini aseton veya toluen 3-4x ile iyice yıkayarak granül agregalarını en aza indirin ve tamamen kurulayın.
   NOT: Hazırlık başına 1 g'dan fazla nişasta veren ekstraksiyon prosedürlerini kullanın. Bir nişasta ekstresinin granül....

Sonuçlar

Prosedürü doğrulamak ve belirlenen granül boyutu dağılımının tekrarlanabilirliğini göstermek için sweetpotato nişasta örneklerinin boyutlandırma analizlerini gerçekleştirdik. Daha önce tanımlanmış bir prosedür 28 kullanarak benzer bir gelişim çağında SC1149-19 üreme hattının tarlada yetiştirilen sweetpotatoes'lerinden çoğaltma (S1 ve^S2)nişasta örnekleri hazırladık. Her nişasta özünden, iki adet 0,5 g aliquot (a ve b) örneklendi, 5 mL metanolde askıya alındı ve agregaları parçalamak için birkaç düş.......

Tartışma

Özetlenen prosedür, nişasta granül boyutu analizleri için mevcut birkaç yöntemde bazı kritik sorunları çözmüştür, 3B granüllerin uygunsuz 1D veya 2D boyutlandırılması, tekdüze olmayan granül şekilleri nedeniyle boyutlandırma ölçümlerinin bozulması, sınırlı granül numune boyutları nedeniyle zayıf tekrarlanabilirlik ve şüpheli istatistiksel geçerlilik, hem granül şekli hem de normal olmayan boyut dağılımları varlığında granül boyutlarının yanlış veya yanlış spesifikasyonu (özellikle ortalama boyutun kullanımı) dahil olmak .......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Analitik beher	Beckman Coulter Yaşam Bilimleri	A35595	Akıllı Teknoloji (ST) beher
Diyafram tüpü, 100 ve mikro; m	Beckman Coulter Yaşam Bilimleri	A36394	MS4E
Tek kullanımlık transfer pipetleyicisi için,	Fisher Scientific (Fishersci.com)	13-711-9AM	Benzer deliğe sahip diğer tek kullanımlık transfer pipetleyicileri de kullanılabilir.
Fisherbrand Konik Polipropilen Santrifüj Tüpleri, 50 ml	Fisher Scientific (Fishersci.com)	05-539-13	Diğer benzer tipteki tüpler kullanılabilir.
Cam beherler, 150 ila 250 ml	Fisher Scientific (Fishersci.com)	02-540K	Bu beherler, açıklık tüpünü ve karıştırıcıyı çalışmalar arasında yıkamak için metanol içermek üzere kullanılır.
LiCl	Fisher Chemical	L121-100
Metanol	Fisher Chemical	A412-500	Analiz büyük miktarda metanol kullandığından toplu olarak satın alın.
Mettler Toledo ML-T Hassas Teraziler	Mettler Toledo	30243412	0,01 g ile 1 mg arasında okunabilirliğe sahip diğer tüm hassas teraziler işe yarar.
Multisizer 4e Coulter Sayacı	Beckman Coulter Yaşam Bilimleri	B23005	Eski model olan Multisizer 3, parametrelerin hafif bir şekilde ayarlanmasıyla da kullanılabilir. 4e modeli 100 & mu ile birlikte gelir; M diyafram tüpü. Farklı çaptaki diğer açıklık tüpleri şirketten ayrı olarak satın alınabilir.
Ultrasonik işlemci UP50H	Hielscher Ultrason Teknolojisi	UP50H	Düşük güce sahip diğer laboratuvar sonikatörü (< 50 Watt) çıkış da kullanılabilir. Belirli bir sonikatör için hem MS1 hem de MS2 sonotrodları, nişasta granüllerini 5 ml metanol içinde dağıtmak için kullanılabilir. Her zaman önce en düşük ayarı, %20 genliği ve 0.1 veya 0.2 döngüyü kullanın ve agregalar süspansiyonda devam ederse ayarı yükseltin.