Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Sıçan Medial Gastroknemius KasTek Motor Üniteleri Fonksiyonel İzolasyon

5.3K görüntüleme

DOI:

10.3791/61614

26 Aralık 2020

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu yöntem sıçan medial gastroknemius kas motor birimlerinin üç tip seğirme ve tetanik kasılmalar ve eylem potansiyellerinin kuvvet kayıt sağlar. Tek bir motor ünitesinin fonksiyonel izolasyonu aksonun elektriksel uyarılması ile indüklenir.

Özet

Bu çalışma, motor ünitelerin (MUs) deneysel sıçanlarda arka ekstrem kaslarındaki (medial gastroknemius, soleus veya plantaris kas gibi) özelliklerini belirlemek için standart bir elektrofizyolojik yöntem olan fonksiyonel izolasyonunu özetler. Yöntemin önemli bir unsuru ventral kökten izole edilmiş bir motor akson teslim elektrik selülasyonlarının uygulanmasıdır. Uyaranlar sabit veya değişken darbe aralıklarında teslim edilebilir. Bu yöntem, olgunluğun değişen aşamalarında (genç, yetişkin veya yaşlı) hayvanlar üzerinde yapılan deneyler için uygundur. Ayrıca, bu protokol, geniş bir müdahale spektrumu tarafından uyarılmış motor ünitelerinin değişkenliği ve plastisitesini inceleyen deneylerde de kullanılabilir. Bu deneylerin sonuçları hem kas fizyolojisi temel bilgi artırmak ve pratik uygulamalara çevrilebilir. Bu prosedür, hazırlık stabilitesi ve sonuçların tekrarlanabilirliği için gerekli adımların vurgusu yla, Bil'lerin kaydedilmesi ve uyarılması için cerrahi hazırlık üzerine odaklanır.

Giriş

Motor üniteleri (MUs) iskelet kaslarının en küçük fonksiyonel birimleridir. Bu nedenle, onların fonksiyonu, plastisite ve kontraktil özellikleri yanı sıra kuvvet düzenleme mekanizmaları anlamak, kas fizyolojisi ilerleme için çok önemlidir. MUs'un temel kontraktil özellikleri ve fizyolojik türlerinin oranları deneysel hayvanlarda ağırlıklı olarak arka bacak kasları olmak üzere çok sayıda kas için belgelenmiştir. Ancak, HEM MU özelliklerinin plastisite ve MU kuvvet düzenleme mekanizmaları hala tam olarak anlaşılamamıştır.

Açıklanan yöntemin prensibi ince ventral kökleri hazırlamak için lomber vertebra da araştırılmış ve laminektomi dışında ar....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm prosedürlerin yerel etik komitesi tarafından onaylanması ve hayvanların bakımıyla ilgili Avrupa Birliği yönergelerine ve hayvanların korunmasına ilişkin ulusal yasaya uyulması gerekmektedir.

NOT: Bu prosedürde yer alan her deneyci temel cerrahi işlemler konusunda eğitilmeli ve hayvan deneyleri yapmak için geçerli bir lisans almalıdır.

1. Anestezi

  1. Sodyum pentobarbital intraperitoneal enjeksiyon (60 mg·kg-1başlangıç dozu) ile sıçan anestezik.
  2. Yaklaşık 5 dakika sonra, künt forseps ile sıçan kulağı veya ön bacak çimdikleme tarafından anestezi derinliğini kontrol edin. Yalnızca refle....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Motor ünitesi kasılmaları ve eylem potansiyellerinin parametreleri, kayıtların sabit koşulları sağlandığında kayıtlar bazında hesaplanabilir. Şekil 1 hızlı bir MU tek seğirme temsili bir kayıt sunar. Üst izleme motor birimi eylem potansiyelini gösterir. Uyarıcı nın doğumu ile motor ünitesi eylem potansiyelinin başlangıcı arasındaki gecikme ventral kökten kaslara iletim süresinden kaynaklanmaktadır. Şekil 2, hızlı bir MU'nun aşınmamış tetanoz kuvveti ve motor bir.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Deneyimli bilim adamları tarafından doğru yapılırsa, açıklanan protokolün cerrahi bileşeni yaklaşık iki saat içinde tamamlanmalıdır. Ameliyat sırasında hayvanın stabil fizyolojik durumlarını, özellikle vücut ısısını ve anestezi derinliğini korumaya özen denmelidir, pinna ve çekilme refleksleri değerlendirilerek sistematik olarak kontrol edilmelidir. Ameliyattan sonra en az altı saat stabil kayıt koşullarının sürdürülmesi mümkün olmalıdır.

Önemli deneysel prosedür, ventral kökün incelenen kasla.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa etmesi gereken bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma Polonya Ulusal Araştırma Merkezi hibe 2018/31/B/NZ7/01028 tarafından desteklenmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Kuvvet dönüştürücüısmarlama
ForsepsGüzel Bilim AraçlarıNo. 11255-20Dumont #55, ekstra hafif ve ince saplı
ForsepsGüzel Bilim AraçlarıNo. 11150-10Ekstra İnce Greafe Forseps
ForsepsGüzel Bilim AraçlarıNo. 11026-15Üstün tutuş için özel çukurlu desen
ForsepsGüzel Bilim AraçlarNo. 11023-10İnce 1x2 diş
ForsepsGüzel Bilim AraçlarıNo. 11251-20Dumont #5
Kanama DurdurucularGüzel Bilim AraçlarıNo. 13003-10Hartman
İzolasyon ÜnitesiÇim AletleriS1U5A
BioampliferWorld Hassas AletlerSipariş kodu 74030
İğne tutucularİnce Bilim AraçlarıNo. 12503-15Tungsten karbür çeneli
RongeursGüzel Bilim AraçlarıNo. 16021-14Friedman-Pearson
MakasGüzel Bilim AraçlarıNo. 14101-14Büyük parmak halkaları ile düz, keskin/kör
MakasGüzel Bilim AraçlarıNo. 14075-11Kavisli künt/künt
MakasGüzel Bilim AletleriNo. 14084-08Ekstra ince bonn
MakasGüzel Bilim AraçlarıNo. 15000-00Düz, sinirleri kesmek için ideal
StimülatörÇim AletleriS88Çift Çıkışlı Kare Nabız Stimülatörü
Düşük Gürültülü

Kaynaklar

  1. Burke, R. E., Levine, D. N., Tsairis, P., Zajac, F. E. Physiological types and histochemical profiles in motor units of the cat gastrocnemius. Journal of Physiology. 234, 723-748 (1973).
  2. Celichowski, J., Drzymała-Celichowska, H.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Motor nite zolasyonuVentral K k Stim lasyonuKuvvet Transd seri KaydAksiyon Potansiyeli l mOmurilik EkspozuTekli Motor nite AnaliziElektrofizyolojik Y ntemS an Arka Ekstremite PreparasyonuParafin Ya Havuzu